不同認知障礙程度和療效青少年抑郁癥患者miR-381-3p、miR-124檢測的臨床意義

楊振國 陳秀芳 曹世林 汪斌 褚睿 鄭春美

抑郁癥是一種以情緒低落、思維遲緩、意志活動減退為主的心境障礙，而青少年抑郁癥是慢性的、消長變化的過程，持續到成年的風險是正常人的2～4倍[1]。青少年抑郁癥患者不僅可出現情緒障礙，也可發生認知障礙，以腦功能全面受損為主，是患者在緩解期仍不能恢復正常社會功能的主要原因[2]。及時評估患者認知障礙嚴重程度和治療效果，對患者治療方案的調整以及后期生活質量的改善均有積極作用。近年來研究發現，miRNA 在抑郁癥的發生、發展過程中發揮著重要作用[3]。miR-381-3p、miR-124 是miRNA 家族成員之一，其中miR-381-3p 沉默可保護神經元，對減輕抑郁癥患者神經元損傷具有積極作用，或可成為治療抑郁癥的潛在靶點[4]；而miR-124 表達可影響神經元細胞DNA 轉錄，導致神經元氧化應激反應增加，促進腦功能損傷，在抑郁癥患者中的表達明顯上調[5]。本研究就miR-381-3p、miR-124 檢測對青少年抑郁癥患者認知障礙嚴重程度評估和臨床療效的預測價值作一探討，以期為臨床診治提供參考，現將結果報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2020 年1 月至2022 年4 月紹興市第七人民醫院收治的86 例青少年抑郁癥患者為研究對象，男49 例，女37 例；年齡12～18（15.49±1.36）歲；病程（6.39±2.13）個月；入院時簡易精神狀態檢查量表評分＜27 分[6]（認知障礙組）31 例，包括輕度14 例、中度12 例和重度5 例；≥27 分（無認知障礙組）55 例。認知障礙組與無認知障礙組患者性別、年齡、病程等一般資料比較，差異均無統計學意義（均P＞0.05），見表1。納入標準：（1）抑郁癥的診斷符合《精神病診斷與統計手冊（第5 版）》相關標準[7]，并結合臨床癥狀、病史等確診；（2）年齡12～18 歲；（3）入院時漢密爾頓焦慮量表（Hamilton anxiety scale，HAMA）評分≥14 分，漢密爾頓抑郁量表（Hamilton depression scale，HAMD）評分＞17 分[8]；（4）入院前未接受過相關治療，均為首次發病。排除標準：（1）臨床資料不完整；（2）患有其他嚴重的精神疾病或器質性疾病；（3）因藥物、酒精等物質濫用導致的精神障礙；（4）因外傷導致的精神障礙或認知障礙。本研究經紹興市第七人民醫院醫學倫理委員會審查通過（批準文號：2019-003-01），所有患者或家屬知情同意。

表1 認知障礙組與無認知障礙組患者一般資料比較

1.2 治療方法 根據患者抑郁程度給予針對性的心理干預、認知療法、重復經顱磁刺激療法等，其中心理干預包括鼓勵支持、興趣培養、精神放松、心理想象、冥想等，在此治療基礎上，均予草酸艾司西酞普蘭（規格：10 mg/片，國藥準字：H20213259，廣東東陽光藥業有限公司）口服治療，初始劑量10 mg/d，1周后改為20 mg/d；同時予奧氮平（規格：5 mg/片，國藥準字：H20213319，成都苑東生物制藥股份有限公司）口服治療，初始劑量2.5 mg/d，1 周后改為5 mg/d。治療3 個月為1 個療程。

1.3 miR-381-3p、miR-124 相對表達量檢測 采用RT-PCR法。治療前抽取患者空腹靜脈血3 mL，使用低速離心機進行離心，獲得血清后待檢。取300 μL血清標本，使用Trizol 總RNA 試劑盒（美國Thermo Scientific 公司）提取樣本總RNA，并將總RNA 反轉錄為cDNA。然后使用RT-PCR 儀（山東博科科學儀器有限公司）進行反應，以甘油醛-3-磷酸脫氫酶為內參基因，采用2-ΔΔCt法計算miR-381-3p、miR-124相對表達量。

1.4 療效評估 治療3 個月后評估療效，HAMA 評分≥7 分或HAMD 評分≥8 分認定為療效不佳，HAMA 評分＜7分或HAMD評分＜8分認定為療效良好[9]。HAMA共包含14 個項目，評分越高提示焦慮程度越嚴重；HAMD共包含17個條目，評分越高提示抑郁程度越嚴重。

1.5 統計學處理 采用SPSS 20.0 統計軟件。計量資料以表示，兩組間比較采用兩獨立樣本t檢驗；多組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用SNK-q檢驗。miR-381-3p、miR-124 單獨或聯合檢測對臨床療效的預測效能采用ROC 曲線分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 認知障礙組與無認知障礙組患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較 認知障礙組患者miR-381-3p 相對表達量明顯低于無認知障礙組，miR-124相對表達量則明顯高于無認知障礙組，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表2。

表2 認知障礙組與無認知障礙組患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較

2.2 不同程度認知障礙患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較 不同程度認知障礙患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較，差異均有統計學意義（均P＜0.05），其中miR-381-3p 相對表達量為輕度＞中度＞重度（均P＜0.05），miR-124 相對表達量為重度＞中度＞輕度（均P＜0.05），見表3。

表3 不同程度認知障礙患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較

2.3 不同療效患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較 治療3 個月后評估療效，結果顯示療效良好66例，療效不佳20 例。療效不佳組miR-381-3p 相對表達量明顯低于療效良好組，miR-124 相對表達量則明顯高于療效良好組，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表4。

表4 不同療效患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較

2.4 miR-381-3p、miR-124 單獨或聯合檢測對臨床療效的預測效能 miR-381-3p、miR-124 單獨預測患者臨床療效的AUC 分別為0.719、0.695，兩者聯合預測的AUC 為0.782，兩者聯合檢測的效能明顯高于單獨檢測（均P＜0.05），見表5 和圖1。

圖1 miR-381-3p、miR-124 單獨或聯合預測臨床療效的ROC曲線

表5 miR-381-3p、miR-124 單獨或聯合檢測對臨床療效的預測效能

3 討論

臨床上認為抑郁癥的發生與生物、環境等因素有關，抑郁癥早期患者可表現出思維遲緩、心境低落等癥狀，但隨著疾病的進展，患者自傷和自殺發生率明顯升高[10]。吳祖勤等[11]研究發現，青少年的認知功能仍處于發育階段，當發生抑郁癥時可對患者認知功能產生不良影響，若合并認知障礙有可能影響患者后期恢復。因此，尋找一種評估患者認知障礙嚴重程度及預測臨床療效的有效指標，對于臨床早期干預與指導治療具有重要意義。

miRNA 在人體內具有基因調控的作用，在腦組織中表達豐富，可維持神經元功能，同時調節神經的可塑性，促進神經再生。臨床研究發現，miRNA 與神經元細胞生長發育、中樞神經炎癥反應、突觸可塑性等一系列病理及生理過程密切相關。張振華等[12]研究表明，miRNA 與認知障礙的發生密切相關。許鑫等[13]通過建立術后認知障礙小鼠模型，以分析小鼠海馬miRNA 表達變化及生物信息，結果顯示小鼠海馬22 個miRNA 存在差異表達，這些miRNA 可能與術后認知障礙的發病機制有關。本研究結果顯示，認知障礙組miR-381-3p 相對表達量明顯低于無認知障礙組，而miR-124 相對表達量則高于無認知障礙組，且miR-381-3p 相對表達量隨著認知障礙嚴重程度的增加而降低，而miR-124 相對表達量隨著認知障礙嚴重程度的增加而升高。可見，miR-381-3p、miR-124 相對表達量異常與患者認知障礙密切相關，或可成為評估患者認知功能損傷的參考指標[14-15]。李世利等[16]研究發現，認知障礙的發生與神經膠質細胞激活、海馬區促炎細胞表達有關，而miR-381-3p 可靶向調控腦源性神經營養因子，過表達miR-381-3p 可促進腦源性神經營養因子相對表達，從而保護神經元，減輕皮質酮對神經元的損傷。miR-124 的表達上調后可激活NF-KB 信號通路，參與神經元細胞代謝微環境的損害過程，影響其修復能力。

有研究指出，miRNA 可調節蛋白質合成、細胞分化，并重塑神經元結構，從而參與抑郁癥的發生、發展過程中[17]。miR-124 在腦組織中表達豐富，可通過降低糖皮質激素受體活性，抑制腦圓形生長因子生長，同時可重塑海馬神經結構，影響機體5-羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）釋放，繼而引發抑郁癥[18]。臨床發現首發抑郁癥患者miR-124 相對表達量明顯增加，且與治療效果關系密切，對患者診療具有重要參考價值[19]。miR-381-3p 可保護神經元，對減輕抑郁癥患者神經元損傷具有積極作用[20]。黃文武等[21]研究顯示，特異性沉默miR-381-3p 可能通過調節腦源性神經營養因子/磷酸化細胞外信號調節激酶信號通路和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B 信號通路的蛋白而調控神經細胞凋亡、增殖、遷移、侵襲，進而改善抑郁癥大鼠海馬神經細胞生物學的異常行為。張茹等[22]評估烏靈膠囊干預抑郁癥效果的研究顯示，抑郁癥患者使用烏靈膠囊治療有效者miR-381-3p 表達高于無效者，提示miR-381-3p 高表達在保護海馬神經元、減輕抑郁癥認知損傷中發揮關鍵作用。本研究結果顯示，療效不佳組miR-381-3p 相對表達量低于療效良好組，miR-124相對表達量則高于療效良好組；分析原因可能與miR-381-3p 降低、miR-124 升高促進5-HT 轉運體產生，從而抑制5-HT產生，進而加重患者焦慮、抑郁情況，影響抗抑郁效果，導致臨床療效差有關[23]。本研究進一步繪制ROC曲線發現，miR-381-3p、miR-124檢測對患者臨床療效均有一定的預測價值，提示在臨床治療中對于miR-381-3p 相對表達量降低、miR-124 相對表達量升高的患者需考慮改變治療方式。相對于單獨預測，miR-381-3p、miR-124聯合檢測的預測效能更高。

綜上所述，miR-381-3p 與miR-124 聯合檢測有助于青少年抑郁癥患者認知障礙嚴重程度的評估和療效預測。