MMSA-8、MMSA-1在急性髓系白血病患者骨髓單個核細胞中的水平及臨床意義

袁 靖

(蘇州大學附屬第一醫院血栓室,江蘇 蘇州 215000)

急性髓系白血病是一種高度異質性的造血干、祖細胞腫瘤,其占白血病病例的58.7%,存活期較短,5年存活率僅為24%[1]。急性髓細胞性白血病對健康構成嚴重威脅[2]。免疫療法已被證明可治療多種癌癥,但多發性骨髓瘤的免疫抑制微環境現象阻礙了免疫療法的療效,導致治療進展緩慢。多發性骨髓瘤細胞與骨髓微環境之間的相互作用在多發性骨髓瘤的發病機制中起著關鍵作用,逃避免疫防御和耐藥性,增加Treg細胞數量,抑制效應T細胞的殺傷作用。針對特定腫瘤抗原或逆轉免疫抑制性骨髓微環境的免疫療法可能有助于了解疾病的發展并改善預后[3]。多發性骨髓瘤相關抗原(MMSA)-8與該病的病理特征和急性髓系白血病療效密切相關,臨床可將目光轉移在MMSA-8診斷急性髓系白血病[4]。MMSA-1也是一種細胞膜基因,其可監測腫瘤細胞的增殖情況[5]。但我國關于MMSA-8、MMSA-1在急性髓系白血病患者中表達的意義研究過少,無法為臨床提供依據,本研究分析MMSA-8、MMSA-1在急性髓系白血病患者骨髓單個核細胞中的水平及臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取2021年1月～2022年12月蘇州大學附屬第一醫院收治的急性髓系白血病30例患者為觀察組,其中男20例,女10例;年齡56～75歲,平均(68.46±3.15)歲。再選擇同期被診斷為單純缺鐵性貧血的患者25例為對照組,其中男15例,女10例;年齡57～75歲,平均(68.66±3.25)歲。對比兩組患者一般資料,差異無統計學意義(P>0.05),組間可進行比較。對觀察組患者進行隨訪1年,根據隨訪預后療效(預后良好標準為:癥狀和體征完全消失,原始、幼稚細胞比例<5%,紅系和巨核細胞系外觀正常,染色體和免疫學的檢查基本正常)將其分為良好組(n=25)和不良組(n=5)。納入標準:①觀察組患者符合《中國慢性髓系白血病診斷與治療指南(2011年版)》[6]中的診斷標準;②患者之前未進行過藥物、放射治療;③患者無自身感染性疾病。排除標準:①凝血功能障礙;②合并肝、腎功能障礙;③為淋巴細胞白血病。本研究在實施前已經醫院倫理委員會批準,患者及家屬均知情同意。

1.2方法:患者入院后,采集10 ml骨髓進行活檢,使用2%乙二胺四乙酸(湖北鑫宇宏生物提供)進行抗凝,使用淋巴細胞分離液(湖北鑫宇宏生物提供)分離單個核細胞,使用紅細胞裂解液(長沙艾貝生物提供)去除紅細胞,然后用磷酸鹽緩沖液(PBS)清洗樣品,再將加入TRIzol的樣品置于-80 ℃冰箱中保存備用。用TRIzol法提取總RNA,用cDNA第一鏈合成試劑盒(TIANGEN北京提供)合成cDNA,用RT-qPCR儀(賽默飛世爾)檢測骨髓單個核細胞中MMSA-8和MMSA-1 mRNA的水平。

1.3觀察指標:①比較兩組MMSA-8和MMSA-1 mRNA的水平差異。②急性髓系白血病患者1年生存情況。③急性髓系白血病患者預后與MMSA-8和MMSA-1 mRNA水平相關性。④運用受試者工作特征(ROC)曲線分析MMSA-8和MMSA-1 mRNA水平預測急性髓系白血病的效能。

1.4統計學分析:應用SPSS26.0軟件進行t檢驗、χ2檢驗或Fisher精確概率計算。運用ROC曲線MMSA-8和MMSA-1 mRNA水平預測急性髓系白血病的效能。

2 結果

2.1MMSA-8、MMSA-1 mRNA 檢測:觀察組MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平明顯高于對照組,差異有統計學意義(P<0.05),見表1。

表1 兩組MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平比較

2.2生存情況:30例急性髓系白血病患者術后均隨訪1年,預后良好25例,預后不良5例,良好率為83.33%(25/30)。

2.3不同預后急性髓系白血病患者MMSA-8、MMSA-1 mRNA檢測:不良組的MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平明顯高于良好組,差異有統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 不同預后急性髓系白血病患者MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平比較

2.4預測效能:ROC曲線分析結果顯示,MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平預測急性髓系白血病的曲線下面積為0.880、0.840,95%CI為0.709～0.969、0.661～0.948,預測效能較好,見表3。

表3 MMSA-8、MMSA-1 mRNA 水平預測急性髓系白血病的效能

3 討論

急性髓系白血病是一種由原始髓細胞克隆性增殖引起的疾病,可發生于任何年齡,患者通常在數周或數月內發病[7]。此外,急性髓系白血病患者會因腫瘤細胞浸潤而出現輕度淋巴結腫大、肝腫大和脾腫大,骨痛也是白血病患者的常見表現。晚期白血病患者會出現惡性病變,死亡主要由多器官衰竭和繼發感染引起,尤其是機會性致病菌感染,嚴重影響患者的預后[8]。由于急性髓系白血病和骨髓微環境的改變息息相關,盡管患者會產生許多適應性免疫反應來排斥疾病,患者的預后還是會受到多種因素的影響。研究表明,骨髓瘤細胞不僅可通過瘤內和瘤外機制破壞宿主免疫監視,抵制當前的治療策略[9];還會下調細胞免疫識別的抗原,并調節骨髓微環境,促進腫瘤介導的增殖和凋亡抵抗,進而阻礙抗腫瘤免疫,因此,腫瘤微環境和骨髓細胞表面抗原是當前臨床研究的熱點。

趙慧芳等[10]的研究表明,80%及以上的急性髓系白血病患者存在異常染色體核型結構異常。MMSA-8和MMSA-1在惡性髓系相關疾病患者中具有高表達水平和相對特異性,與惡性腫瘤細胞表達密切相關。此外,周萌等[11]的研究還發現MMSA-1的表達水平與另一個急性髓系白血病相關基因DKK1的表達水平呈正相關。DKK1是一種用于晚期惡性實體瘤的重組人源化單克隆抗DKK1抗體,與急性髓系白血病的病情發展息息相關。因此,我們推測MMSA-1可能在急性髓系白血病的發病機制和骨質流失中發揮重要作用,并且是多發性骨髓瘤的新型腫瘤標志物和免疫治療靶抗原[12]。本研究結果顯示,觀察組的MMSA-8、MMSA-1 mRNA 水平明顯高于對照組,和趙蓮等[13]的研究結果一致。

本研究中預后不良組MMSA-8、MMSA-1 mRNA 水平明顯高于預后良好組,分析其原因在于,MMSA-1廣泛參與免疫反應、癌癥、新陳代謝、轉錄、神經生物學和信號轉導,特別是突觸傳遞、先天性免疫反應、GPCR和酪氨酸激酶信號轉導以及轉錄因子功能等。此外,張亞朋等[14]還發現,ZDHHC9在腫瘤細胞中呈高水平表達,可在一定程度上促進腫瘤細胞生長。ROC曲線分析結果顯示,MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平預測急性髓系白血病的預測效能較好,且與臨床療效和預后密切相關。分析MMSA-1的功能可能與ZDHHC9相似,其活性異常增高被認為是腫瘤發生的重要機制。還有研究表明,MMSA-8和MMSA-1與白細胞密切相關[15],而急性白血病的病因是細胞分化停滯在原始細胞和幼稚細胞階段,導致這類細胞不斷增殖,從而在骨髓中積累大量原始細胞和幼稚細胞,并像血液循環一樣不斷釋放到外周血中,使外周血中白血病細胞的生成速度超過其破壞速度,導致外周血中白血病細胞數量增加。

綜上所述,MMSA-8和MMSA-1 mRNA在急性髓系白血病中呈高水平表達,預測急性髓系白血病的效能較好。