電針對(duì)慢傳輸型便秘大鼠腸道運(yùn)動(dòng)及促炎性因子表達(dá)影響

劉跟莉，李曉寧*，師 帥，李 艷，管淑敏，付 瑤

（1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院針灸科，哈爾濱 150001）

慢傳輸型便秘（slow transit constipation，STC）臨床特點(diǎn)是排便困難、次數(shù)減少，伴有大便干硬，其有別于其他類型便秘主要的特點(diǎn)為結(jié)腸傳輸能力減弱以及速度減緩等[1-2]。作為臨床常見的功能性便秘類型，STC 在功能性便秘中占比約為45.5%[3]。本病主要的發(fā)病原因是結(jié)腸動(dòng)力減弱，從而導(dǎo)致胃腸內(nèi)容物推進(jìn)緩慢、排空延遲。長(zhǎng)期的腸道傳輸功能下降會(huì)導(dǎo)致腸梗阻、內(nèi)痔、肛裂等發(fā)生，甚至?xí)T發(fā)腦血管病及心血管病，嚴(yán)重者可危及生命。因此，積極尋找STC 有效的治療手段具有重要的臨床意義。

近年來，針灸療法廣泛應(yīng)用于STC 及各種原因引起的便秘治療，取得了滿意的療效[4-6]。針灸治療能夠改善STC 患者每周自發(fā)排便次數(shù)、首次排便時(shí)間、糞便性狀等，然而其作用機(jī)制仍不明確。巨噬細(xì)胞在胃腸動(dòng)力紊亂性疾病中發(fā)揮了重要作用。胃腸道中成熟巨噬細(xì)胞在一定條件下活化成：經(jīng)典活化型巨噬細(xì)胞（M1 型）和選擇活化型巨噬細(xì)胞（M2型），2 種形態(tài)可以相互轉(zhuǎn)變[7-8]。研究[9]證明，STC 大鼠巨噬細(xì)胞發(fā)生活化，相關(guān)因子如腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、CD68 表達(dá)明顯上調(diào)，提示STC 大鼠結(jié)腸組織中巨噬細(xì)胞活化。然而其是否為針灸治療STC 的內(nèi)在機(jī)制有待進(jìn)一步闡明。因此，本研究擬建立STC 大鼠模型，給予電針及藥物治療，觀察治療后各組大鼠腸道推進(jìn)率、結(jié)腸組織病理形態(tài)學(xué)變化及CD68、TNF-α、IL-1β促炎性因子蛋白表達(dá)，以期為闡明電針治療STC 作用機(jī)制提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

清潔級(jí)Sprague-Dawley（SD）雌性大鼠24 只，體質(zhì)量（220±10）g，購(gòu)自遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（遼）2015-0001。飼養(yǎng)條件：大鼠分籠飼養(yǎng)于清潔級(jí)動(dòng)物房，自由進(jìn)食水，室溫（25±1.0）℃，空氣濕度50%左右，光照12 h 晝夜循環(huán)。所有大鼠自進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室起適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周，隨機(jī)分為空白組與造模組，其中空白組6 只，造模組18 只，造模組在模型制備成功后隨機(jī)分為模型組、電針組與藥物組，每組各6 只。實(shí)驗(yàn)過程中對(duì)大鼠的處置均按照國(guó)際最新的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用和關(guān)懷指南進(jìn)行。本研究已通過黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院倫理委員會(huì)審批（審批號(hào)：2021-K-181）。

1.2 主要試劑及儀器

微量移液器（Proline，BIOHIT，蘇州），酶標(biāo)儀（ELX-800，BIOTEK，美國(guó)），電熱恒溫培養(yǎng)箱（DH36001B，天津泰斯特，天津），轉(zhuǎn)移槽（DYCZ-40D，北京六一，北京），雙垂直蛋白電泳儀（DYCZ-24DN，北京六一，北京），超速冷凍離心機(jī)（H-2050R，湖南湘儀，長(zhǎng)沙），顯微鏡（BX53，OLUMPUS，日本），顯微鏡拍照系統(tǒng)（DP73，OLUMPUS，日本），電針治療儀（KWD-808-Ⅱ型，常州英迪電子醫(yī)療器械有限公司，常州），針灸針（0.35 mm ×13 mm ，蘇州醫(yī)療用品廠有限公司，蘇州）。

蘇木素-伊紅試劑盒、全蛋白提取試劑盒、BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒、SDS-PAGE 凝膠快速制備試劑盒、SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液、ECL 發(fā)光液、IL-1β antibody、CD68 antibody、TNF-α antibody、羊抗兔IgG-HRP、內(nèi)參抗體β-actin（沈陽(yáng)萬類生物科技有限公司，批號(hào)分別為 WLA051a、WLA019、WLA004、WLA013、WLA005、WLA003、WL00891、WL04839、WL01581、WLA023、WL0137200，沈陽(yáng)），PVDF 膜（批號(hào)：IPVH00010, Millipore 公司,美國(guó)）。復(fù)方地芬諾酯片（常州康普藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H32022716，批號(hào)：2004017，規(guī)格：鹽酸地芬諾酯25 mg，硫酸阿托品25 μg），枸櫞酸莫沙必利分散片（魯南制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H19990317，批號(hào)：14202018283，規(guī)格：5mg）。

1.3 造模方法

按照前期研究方法[10]，將復(fù)方地芬諾酯片用研缽研至極細(xì)的粉末，然后配置成混懸液。用蒸餾水將上述藥粉按照10 mg·kg-1·d-1配置混懸液，隨用隨配。使用時(shí)將混懸液用水浴箱加熱至25℃，按照上述劑量灌胃，每天1 次，連續(xù)14 d，以建立STC大鼠模型。

灌胃結(jié)束后，以首粒黑便排出時(shí)間延長(zhǎng)作為模型制備成功標(biāo)準(zhǔn)。復(fù)方地芬諾酯混懸液連續(xù)灌胃14 d結(jié)束后，大鼠禁食不禁水24 h，將活性炭混懸液提前加熱至25℃，按照每只3 mL劑量灌胃后單籠飼養(yǎng)。記錄灌胃結(jié)束的時(shí)間T1 及大鼠排出首粒黑便的時(shí)間T2，首粒黑便排出時(shí)間= T2 - T1，以其較空白組大鼠平均值延長(zhǎng)為成功標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 干預(yù)分組

1.4.1 空白組 給予與模型組相同劑量、相同溫度的生理鹽水灌胃，連續(xù)給予14 d。大鼠正常捆綁。

1.4.2 模型組 給予上述造模方法，模型制備成功后均單獨(dú)飼養(yǎng)。大鼠正常捆綁。

1.4.3 電針組 按照上述造模方法成功后，正常捆綁并給予電針治療。取穴：足三里（雙側(cè)）、上巨虛（雙側(cè)）。穴位定位參照《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》（新世紀(jì)第4 版，全國(guó)中醫(yī)藥行業(yè)高等教育十三五規(guī)劃教材），足三里位于大鼠后肢膝關(guān)節(jié)外下方當(dāng)腓骨小頭下約5 mm 處；上巨虛位于大鼠后肢膝關(guān)節(jié)外下方當(dāng)腓骨小頭下約10 mm 處。操作方法：選擇0.35 mm×13 mm 無菌針灸針，穴位局部消毒后將針刺入相應(yīng)深度，同側(cè)足三里、上巨虛分別接1 組電針，選擇疏密波，頻率2/50 Hz，電流大小以局部肌肉輕微抖動(dòng)為度。時(shí)間20 min，每天1 次，連續(xù)治療14 d[11]。

1.4.4 藥物組 參照前期研究及《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》[12-13]，大鼠麻醉后，將枸櫞酸莫沙必利片溶解后，按照1.37 mg·kg-1，1 mL·100 g-1灌胃治療，每天1次，連續(xù)治療14 d。

1.5 觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法

1.5.1 首粒黑便排出時(shí)間 參照何昭璇等[14]研究方法，14 d 治療結(jié)束后，大鼠禁食不禁水24 h，將活性炭混懸液提前加熱至25℃，按照1 mL·100 g-1劑量灌胃后單籠飼養(yǎng)。記錄灌胃結(jié)束的時(shí)間T1 及大鼠排出首粒黑便的時(shí)間T2，首粒黑便排出時(shí)間= T2-T1。

1.5.2 小腸推進(jìn)率 大鼠麻醉后脫頸椎處死，快速分離小腸，以幽門為L(zhǎng)0，活性炭推進(jìn)的最終點(diǎn)為L(zhǎng)1，小腸回盲部為L(zhǎng)2。小腸總長(zhǎng)度= L2 - L0，小腸推進(jìn)率=（L1 - L0）/（L2 - L0）×100%[15]。

1.5.3 HE 染色觀察結(jié)腸組織形態(tài) 大鼠麻醉后脫頸椎處死，快速取出直徑約5 cm 結(jié)腸組織，將所取結(jié)腸組織分成2 段，生理鹽水清洗去除殘留物后，分別置于液氮快速凍存，置-80℃冰箱保存；另一段置于4%多聚甲醛溶液固定備用[16]。

取多聚甲醛固定的結(jié)腸組織進(jìn)行石蠟包埋、切片，后經(jīng)脫蠟、梯度乙醇水化、蘇木精染色、1%鹽酸酒精分化、弱堿性水溶液返藍(lán)、伊紅染色、二甲苯透明、中性樹膠封片等步驟，在顯微鏡下觀察結(jié)腸組織形態(tài)學(xué)變化。

1.5.4Western-blot法檢測(cè)腸道 TNF-α、IL-1β、CD68 蛋白表達(dá) 取置于-80℃保存?zhèn)溆玫慕Y(jié)腸組織。提取總蛋白，BCA 法測(cè)定蛋白濃度，經(jīng)相應(yīng)濃度SDS-PAGE 分離后，轉(zhuǎn)膜，相繼加入相應(yīng)的一抗和二抗進(jìn)行免疫反應(yīng)，加入 ECL 發(fā)光液曝光。采用quantityone分析軟件以檢測(cè)條帶灰度值（OD），最后計(jì)算目的蛋白/β-actin 的相對(duì)表達(dá)量[17-18]。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)采用 SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。若數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布，組間比較采用onewayANOVA，方差齊時(shí)選用LSD，方差不齊時(shí)采用Tamhane'sT2進(jìn)行多重比較；若數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布，采用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，以P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠首粒黑便排出時(shí)間比較

各組大鼠首粒黑便排出時(shí)間比較，模型組排出時(shí)間顯著加長(zhǎng)，與空白組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；藥物組和電針組大鼠經(jīng)治療后，首粒黑便排出時(shí)間顯著減少，與模型組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 各組大鼠首粒黑便排出時(shí)間比較（±s ，n = 6）min

表1 各組大鼠首粒黑便排出時(shí)間比較（±s ，n = 6）min

注：與空白組比較，# P ＜0.05；與模型組比較，△P ＜0.05

組別 首粒黑便排出時(shí)間空白組 403.86±40.66模型組 566.21±34.50#藥物組 377.05±42.50△電針組 367.93±20.31△

2.2 各組大鼠小腸推進(jìn)率比較

各組大鼠小腸推進(jìn)率比較，模型組大鼠顯著降低，與空白組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；藥物組和電針組大鼠經(jīng)治療后，小腸推進(jìn)率顯著提高，與模型組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 各組大鼠小腸推進(jìn)率比較（±s ，n = 6） %

表2 各組大鼠小腸推進(jìn)率比較（±s ，n = 6） %

注：與空白組比較，# P ＜0.05；與模型組比較，△P ＜0.05

組別 小腸推進(jìn)率空白組 76.10±2.71模型組 54.62±1.99#藥物組 73.94±3.09△電針組 73.68±3.64△

2.3 各組大鼠結(jié)腸組織病理形態(tài)學(xué)檢測(cè)

采用HE 染色檢測(cè)各組大鼠結(jié)腸組織病理形態(tài)學(xué)變化，空白組大鼠未見組織形態(tài)學(xué)變化，結(jié)腸黏膜組織黏膜層結(jié)構(gòu)完整，細(xì)胞排列整齊，無出血及過度炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；模型組大鼠結(jié)腸黏膜組織出血，組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)破壞，可見上皮細(xì)胞變性壞死，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；藥物組和電針組大鼠結(jié)腸黏膜組織出血明顯改善，組織形態(tài)學(xué)破壞較模型組改善，可見少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。見圖1。

圖1 各組大鼠結(jié)腸組織病理形態(tài)學(xué)變化（HE，×200）

2.4 各組大鼠結(jié)腸組織TNF-α、IL-1β、CD68 蛋白表達(dá)

各組大鼠結(jié)腸組織TNF-α、IL-1β、CD68 蛋白表達(dá)比較，模型組大鼠TNF-α、IL-1β、CD68 蛋白表達(dá)顯著升高，與空白組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；藥物組和電針組大鼠經(jīng)治療后，結(jié)腸組織TNF-α、IL-1β、CD68 蛋白表達(dá)顯著降低，與模型組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3，圖2。

圖2 各組大鼠結(jié)腸組織TNF-α、IL-1β、CD68 蛋白表達(dá)情況（n= 6）

表3 結(jié)腸組織TNF-α、IL-1β、CD68 蛋白表達(dá)（±s ，n= 6）

表3 結(jié)腸組織TNF-α、IL-1β、CD68 蛋白表達(dá)（±s ，n= 6）

注：與空白組比較，# P ＜0.05；與模型組比較，△P ＜0.05

組別 TNF-α IL-1β CD68空白組 25.93±3.13 22.00±2.95 637.48±79.11模型組 63.22±9.96# 51.54±8.72# 1 208.50±194.77#藥物組 35.13±6.36△ 28.48±3.93△ 775.73±104.38△電針組 40.28±6.52△ 30.99±5.92△ 836.99±118.53△

3 討論

STC 屬于中醫(yī)學(xué)“便秘”范疇[19-20]，早在《黃帝內(nèi)經(jīng)》中就有“大便干燥”“大腸結(jié)”等記載，《傷寒雜病論》也有“大便堅(jiān)”等文字記載，與現(xiàn)代的便秘癥狀類似。隋代《諸病源候論》總結(jié)了便秘的病因病機(jī)，為后世醫(yī)家論治本病提供了依據(jù)。宋元時(shí)期亦有“大便燥結(jié)”“大便滯澀”“燥結(jié)”等諸多記載，但其內(nèi)容也與既往記載類似，都描述了本病的癥狀。民國(guó)時(shí)期才有“便秘”的病名。針灸治療便秘積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，也取得較好的臨床療效，但多數(shù)研究所選穴位組成不一，較少有研究者對(duì)其進(jìn)行系統(tǒng)的歸納整理及深度分析。本研究選擇足三里、上巨虛并配合電針治療。電針通過在毫針刺激的基礎(chǔ)上配合電流刺激，已經(jīng)被證實(shí)能夠加強(qiáng)療效[21-23]。“合治內(nèi)府”理論是中醫(yī)針灸重要的配穴方法之一，《靈樞·邪氣臟腑病形》曰：“滎俞治外經(jīng)，合治內(nèi)府……治內(nèi)府奈何? 岐伯曰：取之于合。”這里的“合”指的是下合穴，“合治內(nèi)府”意即運(yùn)用下合穴來治療六腑病癥。足三里和上巨虛分別是胃和大腸的下合穴，是胃和大腸腑之氣向下輸注的部位。研究[24]證實(shí)，對(duì)于針刺刺激誘導(dǎo)迷走神經(jīng)-腎上腺抗炎通路，存在軀體部位的選擇性（如下合穴足三里優(yōu)于腹部天樞）、穴位特異性（如足三里優(yōu)于其旁邊的非穴點(diǎn)）。這些發(fā)現(xiàn)充實(shí)了針灸等體表刺激療法的現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵，同時(shí)揭示了“合治內(nèi)府”理論指導(dǎo)下的下合穴治療腹部病證的科學(xué)依據(jù)。臨床實(shí)踐中，電針足三里也可縮短腸道手術(shù)病人的腸動(dòng)力恢復(fù)時(shí)間[25-27]。上巨虛也被廣泛應(yīng)用于調(diào)理腸腑、理氣和胃，用于治療便秘、腹瀉及痢疾等[28-29]。

STC 的發(fā)病機(jī)制目前尚不明確，部分學(xué)者認(rèn)為可能與腸神經(jīng)系統(tǒng)變化、腸道肌病、Cajal 間質(zhì)細(xì)胞（ICC）減少相關(guān)，腸道菌群變化、內(nèi)分泌因素、自身免疫性疾病、長(zhǎng)期使用瀉劑、精神心理因素、飲食結(jié)構(gòu)因素和運(yùn)動(dòng)缺乏是引起慢性傳輸型便秘的發(fā)生或加重的原因。腸道動(dòng)力紊亂引起的胃腸蠕動(dòng)減弱是導(dǎo)致 STC 發(fā)生發(fā)展的主要因素，而腸道動(dòng)力的大小主要受腸神經(jīng)系統(tǒng)（enteric nervous system，ENS）的調(diào)控。ENS 廣泛分布于食管至肛門的整個(gè)消化道，現(xiàn)代有研究將ENS 稱為“腸腦”，因?yàn)槠浔话l(fā)現(xiàn)是獨(dú)立于中樞神經(jīng)系統(tǒng)而存在的神經(jīng)系統(tǒng)，能夠獨(dú)立調(diào)節(jié)胃腸道的運(yùn)動(dòng)、分泌、新陳代謝等功能，在腸道的正常蠕動(dòng)過程中發(fā)揮了重要的作用[30]。

目前，首粒糞便排出時(shí)間、胃排空率、小腸推進(jìn)率等是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中評(píng)價(jià)胃腸傳輸功能常用的幾種方法，通過規(guī)范操作、嚴(yán)格測(cè)量，能夠從客觀量化且全方位的角度判斷胃腸動(dòng)力功能。本研究采用首粒糞便排出時(shí)間及小腸推進(jìn)率來觀察STC 大鼠腸道運(yùn)動(dòng)情況，以及藥物和電針的干預(yù)作用。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，造模后大鼠首粒黑便排出時(shí)間顯著加長(zhǎng)，而小腸推進(jìn)率顯著降低，說明STC 大鼠存在明顯的胃腸道動(dòng)力異常。針灸治療能夠改善STC 大鼠的胃腸道動(dòng)力，縮短STC 大鼠首粒糞便排出時(shí)間、提高小腸推進(jìn)率，與模型組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。鐘峰等[31]采用電針“天樞”“大腸俞”治療STC，結(jié)果顯示與空白組比較，模型組大鼠胃排空率、小腸推進(jìn)率顯著降低（P＜0.01）；給予電針治療后，電針組大鼠胃排空率、小腸推進(jìn)率較模型組顯著升高（P＜0.01），說明電針“天樞”“大腸俞”能改善STC 大鼠胃腸道傳輸功能。曹洋等[32]采用大腸俞募穴“天樞”“大腸俞”，給予電針治療觀察其對(duì)STC 大鼠腸道傳輸功能的改善情況，結(jié)果顯示，與正常組、鹽水組比較，模型組大鼠24 h排便量和小腸推進(jìn)率下降（P＜0.01）。與模型組比較，電針組大鼠24 h 排便量增多（P＜0.01），小腸推進(jìn)率明顯升高（P＜0.01）。上述結(jié)果與本研究結(jié)果基本一致。

研究[9]證實(shí)STC 大鼠巨噬細(xì)胞發(fā)生活化，并且發(fā)現(xiàn)STC 大鼠腸道動(dòng)力減弱，而其機(jī)制可能與M1巨噬細(xì)胞源性外顯體miR-34c-5p 降低ICC 細(xì)胞活力有關(guān)。ICC 是胃腸道內(nèi)部一種具有獨(dú)立功能且極其特殊的間質(zhì)細(xì)胞，是胃腸道的起搏細(xì)胞，對(duì)維持胃腸道動(dòng)力至關(guān)重要[33-34]。本研究通過HE 染色可見，造模后大鼠結(jié)腸黏膜組織出血，組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)破壞，伴上皮細(xì)胞變性壞死及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；可見腸道組織炎癥反應(yīng)可能在STC 發(fā)病機(jī)制中占據(jù)了重要的地位，而胃腸道動(dòng)力減弱伴隨著炎性反應(yīng)。給予電針治療后，大鼠結(jié)腸黏膜組織出血明顯減少，組織形態(tài)學(xué)破壞較模型組改善，可見少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。崔長(zhǎng)升等[35]觀察到小鼠STC 便秘模型伴隨著結(jié)腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變，給予藥物治療改善其結(jié)腸形態(tài)能夠提高小鼠小腸的炭末推進(jìn)率。

上述研究證實(shí)，STC 大鼠腸道炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯增加，伴隨著腸道動(dòng)力減弱，給予藥物及電針治療能夠逆轉(zhuǎn)上述改變，但其具體的作用機(jī)制尚不明確。正如前文所述，巨噬細(xì)胞活化介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)可能在其過程中發(fā)揮重要作用。巨噬細(xì)胞分布廣泛，在疏松結(jié)締組織內(nèi)數(shù)量較多。巨噬細(xì)胞形態(tài)多樣，因其功能狀態(tài)不同而變化，一般為圓形或橢圓形，并有短小突起，功能活躍者常伸出較長(zhǎng)偽足而呈不規(guī)則形，胞核較小，呈圓形或橢圓形，著色較深。CD68 是巨噬細(xì)胞的特異性標(biāo)志分子，而TNF-α、IL-1β 是由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的炎性細(xì)胞因子，因此可以通過檢測(cè)CD68 表達(dá)情況來觀察STC 大鼠腸道巨噬細(xì)胞活化。本研究通過檢測(cè)促炎性因子TNF-α、IL-1β 以及巨噬細(xì)胞的標(biāo)記物CD68 蛋白表達(dá)發(fā)現(xiàn)，造模后大鼠結(jié)腸組織TNF-α、IL-1β、CD68蛋白表達(dá)顯著升高，說明發(fā)生巨噬細(xì)胞活化及炎性反應(yīng)，這與HE 染色的結(jié)果一致。電針治療能夠降低結(jié)腸組織TNF-α、IL-1β、CD68 蛋白表達(dá)。郭振科等[36]研究益氣健脾通便方對(duì)慢傳輸型便秘患者體內(nèi)胃饑餓素（ghrelin）、TNF-α 的影響，2 組治療前TNF-α 比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。給予中藥治療2 周后，益氣健脾通便組患者體內(nèi)TNF-α水平低于對(duì)照組（P＜0.05），提示隨著STC 癥狀改善伴隨著TNF-α 等炎性細(xì)胞因子表達(dá)的變化，而通過藥物治療降低其表達(dá)能夠改善結(jié)腸傳輸功能。研究[37]也證實(shí)，通過降低促炎因子IL-1β 的表達(dá)能夠修復(fù)STC 腸道炎癥和腸道屏障損傷，與本研究結(jié)果相似。

綜上所述，本研究結(jié)果證實(shí)電針治療能夠改善STC 大鼠腸道運(yùn)動(dòng)功能，修復(fù)結(jié)腸組織病理形態(tài)學(xué)改變，其機(jī)制可能與下調(diào)TNF-α、IL-1β、CD68 蛋白表達(dá)，抑制炎性反應(yīng)有關(guān)。但其具體的作用機(jī)制及對(duì)巨噬細(xì)胞活化的調(diào)節(jié)有待進(jìn)一步深入揭示，后續(xù)研究可以通過觀察M1 和M2 型巨噬細(xì)胞在STC不同階段活化情況，揭示巨噬細(xì)胞活化及炎癥反應(yīng)在其發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮的作用以及電針干預(yù)的效果。