規模牛場牛病毒性腹瀉-黏膜病流行病學調查

鄧毅民，藺文龍，林為民*，黃新，史文軍

1.新疆生產建設兵團第八師143團農業發展服務中心，新疆石河子 832000；

2.新疆生產建設兵團第八師畜牧獸醫工作站，新疆石河子 832000；

3.新疆農墾科學院，新疆石河子 832000

新疆師市養殖奶牛的歷史可追溯至上世紀60年代，直至2009年未見關于牛病毒性腹瀉（BVD）的相關報道；2002 年，師市分6 個批次從澳大利亞進口16 673 頭荷斯坦黑白花奶牛，均由北京市進出口檢疫檢驗局檢疫合格（牛病毒性腹瀉病毒等7 種病毒檢測均為陰性），指定隔離場隔離45 d 后運回師市。截至目前，師市發展到1 700 頭以上的奶牛場19 個；2016 年之后，有1 個牛場使用挪威紅牛凍精×荷斯坦奶牛，培育出挪荷牛1 273 頭；有2 個牛場使用弗萊維赫乳肉兼用牛凍精×荷斯坦奶牛，培育出弗荷牛1 452 頭；分別與本場荷斯坦奶牛分群飼養。目前，師市飼養有荷斯坦奶牛、挪荷乳肉兼用牛和弗荷乳肉兼用牛等3個品系的產奶牛。

李佑民等[1]于1983 年首次在我國吉林省發現了輸入性牛病毒性腹瀉病例，并成功分離鑒定牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）毒株；2009 年，李娜等[2]首次在師市分離到BVDV。近幾年，筆者在工作中也經常接到部分規模牛場3個品系的牛均發現“早產、流產、死胎和犢牛腹瀉”等臨床癥狀的報告，嚴重腹瀉還能引起犢牛死亡[3-5]，給師市奶牛養殖造成重大危害。為掌握牛病毒性腹瀉/黏膜病在師市的感染狀況，以及不同品系間BVDV 感染是否存在差異，筆者所在課題組對師市范圍的19 個未免疫BVDV 疫苗的牛場，采集不同生長階段牛的血樣，進行牛病毒性腹瀉/黏膜病毒（BVD-MD）病原和抗體的檢測，以期掌握BVDV 在師市牛場中的感染狀況，為師市防控BVD提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

以預期流行率抽樣原則，3 個品系的犢牛、青年牛、后備牛和成母牛分別采用分階段抽樣原則。第一階段，采取普查的方法，19 個規模牛場全部作為抽樣單元；第二階段，抽樣場內按照95%置信水平(CI)、10%可接受誤差、50%預期流行率進行抽樣。共采集血清樣品7 965 份，其中：荷牛血清5 952 份，弗荷牛1 037 份，挪荷牛976 份，血清－20 ℃保存備用，詳見表1。樣品的免疫情況：17 個牛場免疫疫苗，2個牛場未免疫疫苗。

表1 3個品系牛血清樣品采集情況 份

1.2 檢測試劑

牛病毒性腹瀉（BVD）實時熒光RT-PCR 檢測試劑盒（批號：BVDV20220802P），購于哈爾濱元亨生物藥業有限公司；牛病毒性腹瀉ELISA 檢測試劑盒（批號：2109001），購于青島瑞爾生物技術有限公司。

1.3 檢測方法

試驗由新疆農墾科學院獸醫研究所進行BVDV 抗原、抗體的檢測，BVDV 抗原、抗體檢測均按照檢測試劑盒說明書的操作方法和判斷標準執行。

1.4 數據處理

對試驗數據采用Excel 軟件進行整理和制圖，并將其按照不同年齡段、不同品系等進行統計，利用χ2檢驗法進行差異性比較。

2 結果與分析

2.1 BVDV抗原檢測情況

由表2 可知：共檢測血清樣品7 965 頭份，陽性樣品檢出137 頭份，BVDV 陽性總檢出率為1.72%。其中：荷成母牛血清樣品檢出率最高，為3.70%，弗荷犢牛血清樣品檢出率最低，為0.49%；3 個品系間牛血清樣品總檢出率差異不顯著，說明不同品系牛之間不影響BVDV 的流行；3個品系青年牛、后備牛和成母牛BVDV 陽性率顯著高于犢牛，這可能由于犢牛單獨飼喂、與其他牛只接觸機會少和生長時間短的原因，或者是成年牛在懷孕期間感染BVDV,導致該病毒在幼牛體內建立免疫耐受或者持續感染有關。

2.2 BVDV抗體檢測情況

由表3 可知：共檢測血清樣品7 965 頭份，抗體陽性樣品檢出5 272 頭份，抗體陽性總檢出率為66.19%。其中：荷成母牛血清樣品抗體檢出率最高，為89.66%，挪荷犢牛血清樣品抗體檢出率最低，為39.37%；3 個品系牛間血清樣品抗體平均檢出率差異不顯著，也表明抗體陽性率高低不因品系不同而存在差異；3 個品系青年牛、后備牛和成母牛BVDV 抗體陽性率顯著高于犢牛，這可能與犢牛單獨飼喂、與其他牛只接觸機會少和生活時間短有關。

表3 3個品系牛血清樣品BVDV抗體檢測結果統計

2.3 BVDV抗原/抗體場群陽性統計情況

檢測19 個牛場的血清樣品，13 個牛場BVDV抗原顯示陽性，場群抗原陽性率為68.42%；BVDV抗原陽性最高的牛場檢出率為2.44%，BVDV 抗原陽性最低的牛場檢出率為0.37%。19個牛場BVDV抗體顯示陽性，場群抗體陽性率為100%；BVDV 抗體陽性最高的牛場檢出率為53.73%，BVDV 抗體陽性最低的牛場檢出率為23.29%。

3 討 論

Ran 等[6]調查發現，全世界牛血清流行率為11.1%～100%；李娜等[2]對新疆石河子地區BVDV 的分子流行病學調查結果顯示，BVDV 抗原陽性率為39.06%；王晨豫等[7]調查結果顯示，BVDV 抗原陽性率為1.63%；王龍等[8]調查結果顯示，BVDV 抗原陽性率為3.71%；張宇名等[9]調查結果顯示，BVDV 抗原陽性率為1.94%。本試驗數據結果顯示，師市BVDV 的血清抗原陽性率為1.72%，其中：荷牛抗原陽性率為1.73%，弗荷牛抗原陽性率為1.35%，挪荷牛抗原陽性率為2.05%；相較于新疆境內其他地區和山東部分地區，師市BVDV 的抗原陽性率暫處于較低水平，這與近3 年師市加強BVD“檢疫–清除–檢疫–清除”等凈化措施的落實密切相關，需要在后面的工作中繼續強化。