白術水提物對肥胖小鼠血管穩態失衡的影響

陳鈺嵐，魏柯健，劉 靜，郭靜妍，呂圭源，蘇 潔

浙江中醫藥大學 藥學院，浙江 杭州 310053

據國家衛生健康委員會發布的《中國居民營養與慢性病狀況報告（2020 年）》顯示，我國超重肥胖的成年居民超過50%[1]。肥胖導致血管阻力增加，導致血管穩態失衡[2]。血管穩態的失衡與重構機制涉及代謝、氧化應激、炎癥等，其中能量代謝是血管重構的關鍵機制之一[3]。腺苷酸激活蛋白激酶（adenylate-activated protein kinase，AMPK）信號通路與線粒體功能關系密切，為改善線粒體功能的關鍵途徑[4]。

中醫學認為血脈穩態失衡是多種病機作用下的慢性、長程的病理改變，其中血管穩態失衡以氣虛和火熱為本[5]。氣虛見于多臟功能不足，而脾胃為氣血生化之源，是氣機升降的樞紐，主運化與統血[6]，故推測血管穩態失衡與脾胃氣虛有關。脾胃氣虛的首要原因為過食肥甘[7]，過食肥甘者常見倦怠乏力、口渴少飲、五心煩熱等臨床表現[8]，與“陰火”患者的臨床表現相似，陰火證是以脾胃氣虛為主和火熱亢盛為次的證候群[9]，故認為肥胖與陰火證密切相關。李東垣治療陰火證以“甘溫除熱”“益氣升陽”為主，補中益氣，健運中焦[10]。白術為菊科植物白術AtractylodesmacrocephalaKoidz.的干燥根莖，味甘，性溫，歸脾、胃經，具有健脾益氣、燥濕利水的功效[11]。同時現代臨床發現，白術能影響機體內脂質代謝轉運，調節血脂紊亂[12]，因此，白術或可治療肥胖所致的血管穩態失衡。本研究通過高糖高脂飼料的肥胖小鼠，結合各藥效指標綜合評價白術水提物對肥胖相關中醫證候表現影響，并探討其對肥胖小鼠主動脈血管穩態的作用機制。

1 材料

1.1 動物

SPF 級雄性ICR 小鼠40 只，6～8 周齡，購自上海市計劃生育科學研究所實驗動物經營部，許可證號 SCXK （ 滬） 2018-0006，合格證號20180006023028。飼養環境溫度20～25 ℃，相對濕度40%～65%，光照時間12 h/d，循環通風換氣。動物實驗經浙江中醫藥大學實驗動物管理與倫理委員會批準（批準號ZSLL-2016-118）。

1.2 藥材

麩炒白術飲片（批號202007069）購自浙江錢王中藥有限公司，經浙江中醫藥大學朱波副教授鑒定為菊科植物白術A.macrocephalaKoidz.的干燥根莖。

1.3 藥品與試劑

依折麥布片（批號W018665）購自杭州默沙東制藥有限公司；高糖高脂飼料（由20.0%蔗糖、15%豬油、0.8%膽固醇、0.2%膽酸鈉及適量的酪蛋白、磷酸氫鈣、石粉等組成，批號20220923、20221126）購自南通特洛菲飼料科技有限公司；對照品白術內酯III（批號22010404，質量分數為99.98%）、白術內酯IV（批號20091003，質量分數為99.56%）購自成都普菲德生物技術有限公司；低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）試劑盒（批號220811301）購自美康生物科技股份有限公司；總膽固醇（total cholesterol，TC）試劑盒、一氧化氮（nitric oxide，NO）試劑盒（批號分別為20230104、20230424）均購自南京建成生物工程研究所；腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）試劑盒、內皮素1（endothelin-1，ET-1）試劑盒（批號分別為202301、23021460）均購自江蘇酶免實業有限公司；Toll 樣受體4（Toll-like receptor 4，TLR4）抗體、沉默信息調節因子2 相關酶1（silent mating type information regulation 2 homolog 1，SIRT1）抗體（批號分別為00105090、00130130）均購自武漢三鷹生物技術有限公司；TNF-α 抗體（批號B8905）購自蘇州睿瀛生物技術有限公司；白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）抗體（批號HH0827）購自杭州華安生物技術有限公司；磷酸化AMPK（p-AMPK）抗體（批號16）購自美國CST 公司；過氧化物酶體增殖物激活受體γ 輔激活因子-1α（peroxisome proliferator activated receptor γ coactivator-1α，PGC-1α）抗體、AMPK 抗體（批號分別為M27MA02、L220C04）購自成都正能生物技術有限責任公司。

1.4 儀器

SENCO R-501 型旋轉蒸發器（上海申順生物科技有限公司）；FA2204B 型電子天平（上海精科天美科學儀器有限公司）；1200 型高效液相色譜儀（美國Agilent 公司）；TBA40-FR 型全自動生化分析儀（東芝三廣醫療株式會社）；EC360 型全自動包埋機（美康儀器設備制造高淳縣有限公司）；Tissue-Tek VIPTM 5Jr 型全封閉組織脫水機（日本櫻花檢驗儀器株式會社）；RM2245 型半自動切片機（德國Leica公司）；HS-KP-G 型烤片機（沈陽恒松科技有限公司）；Power wave 340 型酶標儀（美國Bio-Tek 公司）；SCIENTZ-48 型高通量組織研磨器（寧波新芝生物科技股份有限公司）；FLIR ONE Pro 型紅外熱像儀（美國FLIR 公司）。

2 方法

2.1 白術水提物中有效成分含量測定

2.1.1 白術水提物的制備 取麩炒白術粗粉500 g，加入20 倍量水，提取3 次，每次2 h，濾過，合并濾液，60 ℃減壓濃縮至1 g/mL，4 ℃備用。臨用前使用蒸餾水將其分別配制成質量濃度為0.2、0.4 g/mL 的溶液。

2.1.2 色譜條件 Ultimate XB-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動相為0.1%磷酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脫：0～20 min，50%～60% B；20～30 min，60%～70% B；30～35 min，70%～100%B；35～40 min，100% B；40～45 min，100%～50%B。體積流量1.0 mL/min；檢測波長222 nm；柱溫25 ℃；進樣量10 μL。

2.1.3 混合對照品溶液的制備 精密稱取白術內酯III、白術內酯II 對照品1.48、0.71 mg，置10 mL 棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，密塞，搖勻，得白術內酯III、白術內酯II 質量濃度分別為148、71 μg/mL 的混合對照品溶液。

2.1.4 供試品溶液的制備 取1 g/mL 白術水提物，離心，過0.22 μm 濾膜，即得。

2.1.5 線性關系的考察 精密稱取白術內酯III、白術內酯II 混合對照品，加甲醇制成系列梯度質量濃度的對照品溶液，以白術內酯III、白術內酯II 的質量濃度為橫坐標（X），峰面積為縱坐標（Y）得到標準曲線，白術內酯III：Y＝24.613 0X，r＝0.999 8；白術內酯II：Y＝30.902 0X＋3.154 7，r＝0.999 9。結果表明白術內酯III 在質量濃度2.312 5～74.000 0 μg/mL、白術內酯II 在質量濃度1.109 4～35.500 0 μg/mL 線性關系良好。

2.2 分組、造模與給藥

40 只ICR 小鼠適應性喂養1 周后，按體質量隨機分為正常組、模型組、依折麥布片（1 mg/kg，依折麥布片用蒸餾水配制成0.1 mg/mL 的溶液）組和白術水提物高、低劑量（4、2 g/kg）組。除正常組給予普通飼料外，其余各組每天給予高糖高脂飼料喂養，造模的同時分別ig 相應藥物（10 mL/kg），正常組及模型組ig 等體積的蒸餾水，1 次/d，連續11 周。

2.3 體質量測定

于給藥第0、3、6、9 周，稱定小鼠體質量。

2.4 中醫證候指標檢測

2.4.1 排尿量 于給藥11 周后，采用代謝籠下放置15 mL 離心管收集各組小鼠24 h 的新鮮尿液，計量尿液量。

2.4.2 尿液吸光度（A） 于給藥11 周后，采用代謝籠收集小鼠新鮮尿液200 μL，用移液槍準確吸取“2.4.1”項下所得各組小鼠尿液200 μL，加于96 孔板上，并使用酶標儀在450 nm 下測定A值。

2.4.3 排便量 于給藥11 周后，記錄小鼠24 h 內排出的糞便粒數。

2.4.4 面溫 于給藥11 周后，安靜環境下，用非接觸式紅外測溫儀對準小鼠面部，當測溫儀穩定后記錄所測數據，測定3 次，取平均值。

2.4.5 足溫 于給藥9 周后，安靜環境下，輕抓小鼠，采用熱成像儀拍攝每組小鼠的熱成像，通過FLIRTools 軟件分析各組小鼠足溫，并統計其平均值。

2.4.6 曠場實驗 于給藥10 周后，進行曠場實驗。握住小鼠尾根部處，輕輕將小鼠放入藍色立方形曠場箱的正中，開始同步錄像、計時。曠場箱正上方安置攝像頭，在安靜無干擾并杜絕參照物的環境條件下進行，觀察5 min 內小鼠活動情況。取出小鼠后，用毛巾蘸清水及低質量分數乙醇徹底擦拭箱底，并等待其揮發擴散，避免留有氣味而干擾下只小鼠的觀察結果。運用動物行為活動標記分析系統，對各組小鼠的行為進行分析評價。

2.4.7 舌象 于給藥9 周后，將小鼠進行麻醉，使用單反相機拍攝小鼠舌頭表面，并統計舌表的R 值、RGB 值。

2.5 尾部微循環檢測

于給藥11 周后，用異氟烷呼吸麻醉機對小鼠進行呼吸麻醉，使用Moor FLPI 掃描成像系統測定小鼠尾部微循環血流量。測量面積為尾部約1 cm2處的相同面積大小，檢測時間30 s，掃描速度25 Hz/s。使用Moor FLPI Review 3.0 軟件對所記錄的數據進行處理。

2.6 血清TC、LDL-C 水平檢測

末次給藥后，各組小鼠眼眥取血，4 ℃凝血2 h，3 500 r/min 離心15 min，取上層血清，采用全自動生化分析儀檢測TC、LDL-C 水平。

2.7 血清NO、TNF-α 和ET-1 水平檢測

末次給藥后，取各組小鼠血清，按照試劑盒說明書檢測血清中NO、ET-1 和TNF-α 水平。

2.8 主動脈組織病理學觀察

末次給藥后，眼眥取血致死，取小鼠主動脈，放入盛有10%中性福爾馬林緩沖液的瓶中。經固定、取材、脫水、包埋、切片，制得4 μm 石蠟切片，采用蘇木素-伊紅（HE）、Masson、Gomori 醛品紅彈力纖維染色，中性樹脂封片，干燥后于顯微鏡下觀察主動脈組織病理變化。

2.9 免疫組化法檢測主動脈中TLR4、IL-6、TNFα 的蛋白表達

取各組小鼠主動脈石蠟切片（4 μm），經過消除內源性過氧化氫酶活性、抗原修復、牛血清白蛋白封閉后，滴加TLR4、IL-6、TNF-α 抗體，4 ℃孵育過夜；滴加二抗，37 ℃孵育30 min；經DAB 顯色、蘇木素染色、乙醇脫水及中性樹脂封片干燥后，于顯微鏡下觀察TLR4、IL-6、TNF-α 蛋白的表達情況，并用Image J 軟件進行分析。

2.10 免疫熒光檢測主動脈p-AMPK、SIRT1 和PGC-1α 的蛋白表達

取各組小鼠主動脈石蠟切片（4 μm），經抗原修復、封閉、4 ℃孵育一抗過夜、孵育二抗、DAPI 核染，蔡司熒光正置顯微鏡下觀察主動脈中p-AMPK、SIRT1、PGC-1α 的表達情況。

2.11 Western blotting 檢測主動脈 p-AMPK、SIRT1 和PGC-1α 的蛋白表達

取各組小鼠主動脈組織，液氮充分研磨后，加入適量RIPA 裂解液，冰上靜置10 min，離心取上清，提取組織蛋白。BCA 法測定蛋白濃度，蛋白樣品經十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳，轉至PVDF 膜，5%脫脂牛奶封閉2 h，分別加入p-AMPK、SIRT1、PGC-1α 抗體，4 ℃孵育過夜；PBST 洗膜3 次，每次15 min；加入二抗，室溫孵育2 h；PBST洗膜3 次，每次15 min；加入ECL 化學發光液后，采用Modena 凝膠成像儀檢測蛋白條帶，并用Image J 軟件進行分析。

2.12 統計學分析

3 結果

3.1 白術水提物中有效成分的測定

分別取混合對照品溶液和供試品溶液，分別按“2.1.2”項下色譜條件進樣分析，記錄色譜圖（圖1）。測得1 g/mL 白術水提物中白術內酯III、白術內酯II 的質量濃度分別為11.97、2.56 μg/mL。

圖1 混合對照品 (A) 和白術水提物 (B) 的HPLC 圖Fig.1 HPLC chromatograms of mixed reference substance (A) and A.macrocephala water extract (B)

3.2 白術水提物對肥胖小鼠體質量的影響

如圖2 所示，給藥3、6、9 周后，與正常組比較，模型組小鼠的體質量顯著升高（P＜0.05、0.01）；與模型組比較，各給藥組小鼠的體質量均顯著降低（P＜0.01）。

圖2 白術水提物對肥胖小鼠體質量的影響 (±s, n = 8)Fig.2 Effect of A.macrocephala water extract on body weight of obese mice (±s, n = 8)

3.3 白術水提物對肥胖小鼠中醫證候指標的影響

3.3.1 對排尿量的影響 如圖3-A 所示，與正常組比較，模型組小鼠的排尿量顯著降低（P＜0.01）；給藥11 周后，與模型組比較，各劑量白術水提物均能顯著提高小鼠的排尿量（P＜0.01）。

圖3 白術水提物對肥胖小鼠中醫證候指標的影響 (±s, n = 8)Fig.3 Effect of A.macrocephala water extract on TCM syndromes of obese mice (±s, n = 8)

3.3.2 對尿液A值的影響 如圖3-B 所示，與正常組比較，模型組小鼠的尿液A值顯著提高（P＜0.01）；給藥11 周后，與模型組比較，各劑量白術水提物均能顯著降低小鼠的尿液A值（P＜0.01）。

3.3.3 對排便量的影響 如圖3-C 所示，與正常組比較，模型組小鼠的排便量顯著降低（P＜0.01）；給藥11 周后，與模型組比較，白術水提物各劑量均能顯著提高模型小鼠的排便量（P＜0.01）。

3.3.4 對面溫的影響 如圖3-D 所示，與正常組比較，模型組小鼠的面溫顯著降低（P＜0.01）；給藥11 周后，與模型組比較，各給藥組均能顯著升高小鼠的面溫（P＜0.01）。

3.3.5 對足溫的影響 如圖3-G、H 所示，與正常組比較，模型組小鼠的足溫顯著升高（P＜0.01）；給藥9 周后，與模型組比較，各給藥組均能顯著降低小鼠的足溫（P＜0.01）。

3.3.6 對曠場的影響 如圖3-E、F 所示，與正常組比較，模型組小鼠水平運動總距離顯著減少（P＜0.01），水平運動速度顯著降低（P＜0.01）；給藥10周后，與模型組比較，各給藥組均能顯著增加小鼠水平運動總距離和提高水平運動速度（P＜0.01）。

3.3.7 對舌象的影響 如圖4 所示，與正常組比較，模型組小鼠的舌色R 值、RGB 值均顯著降低（P＜0.01）；給藥9 周后，與模型組比較，各給藥組均能顯著提高小鼠的舌色R 值（P＜0.01），各劑量白術水提物能顯著升高小鼠的舌色RGB 值（P＜0.01）。

圖4 白術水提物對肥胖小鼠舌象的影響 (±s , n = 8)Fig.4 Effect of A.macrocephala water extract on tongue manifestation of obese mice (±s , n = 8)

3.4 白術水提物對肥胖小鼠尾部微循環的影響

如圖5 和表1 所示，與正常組比較，模型組小鼠尾部微循環血流量顯著降低（P＜0.01）；給藥11周后，與模型組比較，各給藥組均能顯著增加小鼠尾部微循環血流量（P＜0.05、0.01）。

表1 白術水提物對肥胖小鼠尾部微循環的影響(±s , n = 8)Table 1 Effect of A.macrocephala water extract on tail microcirculation of obese mice (±s , n = 8)

表1 白術水提物對肥胖小鼠尾部微循環的影響(±s , n = 8)Table 1 Effect of A.macrocephala water extract on tail microcirculation of obese mice (±s , n = 8)

組別 劑量/(g·kg?1) 尾部微循環血流量/PU正常 — 97.28±21.96模型 — 62.50±22.83##依折麥布片 0.001 84.82±29.10*白術水提物 4 94.64±19.15**2 88.04±8.25*

圖5 白術水提物對肥胖小鼠尾部微循環的影響 (±s , n = 8)Fig.5 Effect of A.macrocephala water extract on tail microcirculation of obese mice (±s , n = 8)

3.5 白術水提物對肥胖小鼠血清LDL-C 和TC 水平的影響

如圖6 所示，與正常組比較，模型組小鼠血清中LDL-C 和TC 水平均顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，依折麥布片組和白術水提物（2 g/kg）組LDL-C 水平顯著降低（P＜0.01），各給藥組小鼠血清中TC 水平均顯著降低（P＜0.01）。

圖6 白術水提物對肥胖小鼠血清LDL-C 和TC 水平的影響 (±s , n = 8)Fig.6 Effect of A.macrocephala water extract on LDL-C and TC levels in serum of obese mice (±s , n = 8)

3.6 白術水提物對肥胖小鼠血清TNF-α水平的影響

如圖7 所示，與正常組比較，模型組小鼠血清中TNF-α 水平顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組均能顯著降低小鼠血清中TNF-α 水平（P＜0.01）。

圖7 白術水提物對模型小鼠血清TNF-α 水平的影響(±s , n = 8)Fig.7 Effect of A.macrocephala water extract on TNF-α level in serum of obese mice (±s , n = 8)

3.7 白術水提物對肥胖小鼠血清NO 和ET-1 水平的影響

如圖8 所示，與正常組比較，模型組小鼠血清NO 水平顯著降低（P＜0.01），ET-1 水平顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組均能顯著升高小鼠血清NO 水平（P＜0.05、0.01），顯著降低小鼠血清ET-1 水平（P＜0.01）。

圖8 白術水提物對肥胖小鼠血清NO 和ET-1 水平的影響 (±s , n = 8)Fig.8 Effect of A.macrocephala water extract on NO and ET-1 levels in serum of obese mice (±s , n = 8)

3.8 白術水提物對肥胖小鼠主動脈組織形態學的影響

如圖9 所示，HE 染色結果顯示，與正常組比較，模型組小鼠中層平滑肌細胞增生且排列紊亂，存在內皮破裂；各劑量白術水提物均可緩解主動脈中膜增厚、血管平滑肌細胞排列紊亂狀況。Masson染色結果顯示，與正常組比較，模型組小鼠可見血管內膠原纖維沉積明顯增多，膠原纖維面積顯著增大；各劑量白術水提物均可使主動脈膠原沉積顯著減小。Gomori 醛品紅彈力纖維染色結果顯示，與正常組比較，模型組小鼠彈力纖維斷裂和增生，血管壁重構；與模型組比較，各劑量白術水提物均可緩解主動脈中彈力纖維斷裂和增生狀況。

圖9 白術水提物對肥胖小鼠主動脈組織形態學的影響Fig.9 Effect of A.macrocephala water extract on aorta histomorphology of obese mice

3.9 白術水提物對肥胖小鼠主動脈TLR4、IL-6、TNF-α 蛋白表達的影響

如圖10 所示，主動脈中TLR4、IL-6、TNF-α染色陽性產物表達在內皮細胞表面，呈棕黃色。與正常組比較，模型組小鼠主動脈中TLR4、IL-6、TNF-α 蛋白表達顯著增加（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組主動脈TLR4、IL-6、TNF-α 蛋白表達顯著減少（P＜0.01）。

圖10 白術水提物對肥胖小鼠主動脈TLR4、IL-6 和TNF-α 表達的影響 (±s , n = 3)Fig.10 Effect of A.macrocephala water extract on TLR4, TNF-α and IL-6 expression in aorta of obese mice (±s , n = 3)

3.10 白術水提物對肥胖小鼠主動脈AMPK、p-AMPK、SIRT1、PGC-1α 蛋白表達的影響

免疫熒光結果（圖11）顯示，主動脈中p-AMPK、SIRT1、PGC-1α 表達在內皮細胞表面。與正常組比較，模型組小鼠主動脈中p-AMPK、SIRT1、PGC-1α 綠色熒光表達減少；與模型組比較，白術水提物各劑量組主動脈p-AMPK、SIRT1、PGC-1α 綠色熒光表達增加。

圖11 白術水提物對肥胖小鼠主動脈p-AMPK、SIRT1 和PGC-1α 蛋白表達的影響Fig.11 Effect of A.macrocephala water extract on p-AMPK, SIRT1 and PGC-1α protein expressions in aorta of obese mice

Western blotting 結果（圖12）顯示，與正常組比較，模型組小鼠主動脈中p-AMPK、SIRT1、PGC-1α 蛋白表達水平顯著降低（P＜0.05、0.01）；與模型組比較，白術水提物（2 g/kg）組p-AMPK 蛋白表達水平顯著升高（P＜0.01），白術水提物各劑量組SIRT1 蛋白表達水平顯著升高（P＜0.05、0.01），白術水提物（4 g/kg）組PGC-1α 蛋白表達水平顯著升高（P＜0.01）。

圖12 白術水提物對肥胖小鼠主動脈AMPK、p-AMPK、SIRT1 和PGC-1α 蛋白表達的影響 (±s , n = 4)Fig.12 Effect of A.macrocephala water extract on AMPK, p-AMPK, SIRT1 and PGC-1α protein expressions in aorta of obese mice (±s , n = 4)

4 討論

中醫學者認為，肥則礙胃、甘則滯脾。脾胃功能受損，可致氣郁下焦或濕隨氣險郁于下焦，化火而上炎，火熱伏于血脈，煎熬陰血，灼津為痰，血稠成瘀，瘀阻絡脈，使脈道失于溫養，經脈痙攣而病，加重瘀滯，進一步阻礙氣血津液的代謝，同時體內痰瘀過久，加重脾胃虧虛的程度，最終導致血管穩態失衡的發生[13]。李東垣在《脾胃論·飲食勞倦所傷始為熱中論》中指出：“脾胃氣衰，元氣不足，而心火獨盛。心火者，陰火也”，故而脾胃失調，可致元氣衰弱，營血不足，氣火失調，君相不安，血中伏火，導致陰火的產生[9]，此病機與肥胖引起的脾胃虧虛致血管穩態失衡的病機具有同一性。故而推測肥胖可致脾胃虛弱，而使機體產生陰火，損傷血管，并表現出相關證候，影響健康。

陰火證以脾胃氣虛為主和火熱亢盛為次，脾胃氣虛常見口淡不渴、倦怠乏力、排便無力，其舌脈為舌淡或伴齒痕、苔薄白，脈弱無力[14]。火熱亢盛以發熱、口渴飲冷、胸腹灼熱、面紅目赤、大便秘結、小便短黃為常見癥[15]。本研究以排尿量量化“口淡不渴”，尿液A值量化“小便短黃”，排便量量化“排便無力”，面部溫度和足部溫度量化“發熱”，曠場實驗量化“倦怠乏力”，舌象量化“舌淡”。李東垣主張補脾胃、升陽氣、祛濕熱、暢氣機以散陰火，白術為菊科多年生草本植物白術的干燥根莖，具有健脾益氣、燥濕利水、止汗的功效，臨床多用于脾氣虛弱、運化失常所致的脘腹脹滿、倦怠乏力等證，為“健脾補氣第一要藥”[16]，歷代古籍中均有記載。《本草經疏》記載：“術，其氣芳烈，其味甘濃，其性純陽，為除風痹之上藥，安脾胃之神品”；《本草通玄》記載：“白術，補脾胃之藥，更無出其右者。土旺則能健運，故不能食者，食停滯者，有痞積者，皆用之也”。白術健脾胃、祛濕熱，或可緩解過食肥甘所導致的氣虛和火熱。本研究發現白術水提物可顯著提高肥胖小鼠曠場水平移動總距離和水平移動速度，顯著提高排便量和排尿量，降低尿液A值，升高面溫，降低足溫，改善舌象變化，證明白術水提物能夠有效改善肥胖小鼠倦怠乏力、排便無力、四肢煩熱等證候，并推測此功效可能由改善陰火的途徑而發揮。

研究表明，脂代謝紊亂和肥胖是血管穩態失衡的常見病因，脂質氧化功能降低，導致脂肪酸代謝物的累積，使體內TC、LDL-C 水平升高，出現血脂代謝異常[17]，繼而引發血管內皮細胞損傷以及彈力纖維的異常生長、增殖等血管穩態失衡[18]。同時脂代謝紊亂可激活TLR4 信號通路，TLR4 信號被激活后，向下游發出信號，下游因子通過經典途徑轉移到細胞核中激活一系列炎癥基因如IL-6、TNFα，并促進其含量增加和釋放[19]。TNF-α 表達增加，促進巨噬細胞浸潤，誘導ET-1 生成[20]，同時IL-6表達增加，減弱內皮細胞中NO 信號通路，抑制NO生成，導致ET-1/NO 系統失衡[21-22]，NO 利用率減少，舒張血管作用減弱，平滑肌收縮，血管內皮功能受損，加重血管穩態失衡。

能量代謝作為血管重構的關鍵機制之一，在維持血管穩態的過程中起到重要作用。PGC-1α 為調節線粒體功能的關鍵因子[23]，研究發現，AMPK 可以激活SIRT1 乙酰化，增加PGC-1α 的活性，緩解線粒體損傷，提高線粒體生物合成水平[24-25]。線粒體合成水平提高可以改善脂質代謝，生成啟動抗炎信號，從而緩解血管內皮功能損傷，改善血管穩態失衡[26-27]。現已有研究發現白術內酯Ⅲ通過激活AMPK/SIRT1 信號通路，減少炎癥反應[28]；參苓白術散可激活AMPK 信號通路從而降糖控脂[29]。本研究發現白術水提物能明顯上調血管 p-AMPK、SIRT1、PGC-1α 的蛋白表達，下調主動脈TLR4、IL-6、TNF-α 的蛋白表達，降低血清中TC、LDL-C、TNF-α 水平，調節血清NO/ET-1 的失衡，并減輕主動脈損傷。表明白術水提物可能是通過激活AMPK/SIRT1/PGC-1α信號通路來調節線粒體功能，調節代謝，實現血管動態平衡。

綜上，白術水提物能夠有效改善緩解倦怠乏力、排便無力、四肢煩熱等證候，減輕主動脈的損傷，并通過激活AMPK/SIRT1/PGC-1α 通道，起到調節能量代謝的作用，最終改善線粒體功能障礙引起的血管穩態失衡。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突