淺析紅細(xì)胞冷凝集對(duì)血細(xì)胞分析檢驗(yàn)的影響

張春輝

【摘 要】 目的：研究分析紅細(xì)胞冷凝集對(duì)血液分析儀檢測(cè)的影響和處理方法。方法：對(duì)20例紅細(xì)胞冷凝集標(biāo)本在3種不同條件下使用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀XE-5000進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：20 ℃條件下，20例標(biāo)本紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板均有異常報(bào)警;37 ℃水浴30 min后，其中15例標(biāo)本無異常報(bào)警，5例標(biāo)本紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板均有異常報(bào)警;25 ℃條件下37 ℃水浴30 min，20例標(biāo)本均無異常報(bào)警。結(jié)論：紅細(xì)胞冷凝集對(duì)WBC、HGB和PLT檢測(cè)結(jié)果基本無影響。對(duì)RBC、HCT、MCV、MCH和MCHC檢測(cè)結(jié)果有影響，在日常工作中，應(yīng)引起重視，并對(duì)紅細(xì)胞冷凝集標(biāo)本進(jìn)行科學(xué)處理。

【關(guān)鍵詞】 冷凝集;血細(xì)胞分析儀;冷凝集素

【中圖分類號(hào)】R249【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A【文章編號(hào)】1005-0019（2019）12-256-01

血細(xì)胞分析儀是臨床實(shí)驗(yàn)室檢查常用的檢驗(yàn)儀器之一，血細(xì)胞分析結(jié)果的質(zhì)量直接關(guān)系到對(duì)病人的診斷和分析，但在血常規(guī)的日常檢測(cè)中經(jīng)常會(huì)遇到很多影響因素，例如：血小板假性減少癥，紅細(xì)胞凝集（冷凝集），脂血/溶血，有核紅細(xì)胞，白細(xì)胞增多，瘧疾，采樣、抗凝不當(dāng)?shù)取Ｒ虼耍谘Ｒ?guī)的檢測(cè)過程中做好質(zhì)量控制是至關(guān)重要的。為了及時(shí)發(fā)現(xiàn)和準(zhǔn)確排除紅細(xì)胞冷凝集對(duì)血細(xì)胞分析儀的影響，該實(shí)驗(yàn)選擇了從2015年1月—2017年5月共20例紅細(xì)胞冷凝集的標(biāo)本在3種不同條件下檢測(cè)：①普通室溫（20 ℃）;②37 ℃水浴30 min后立即檢測(cè);③25 ℃條件下37 ℃水浴30 min后立即檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 儀器與試劑 日本Sysmex公司生產(chǎn)的XE-5000全自動(dòng)血液分析儀及配套原裝試劑、日本奧林巴斯光學(xué)株式會(huì)社生產(chǎn)的雙筒顯微鏡。原廠配套正常濃度和高濃度質(zhì)控品。

1.1.2 標(biāo)本 從2015年1月—2017年5月?lián)犴樀V務(wù)局醫(yī)院住院患者血常規(guī)標(biāo)本中，通過鏡檢篩選出20例紅細(xì)胞冷凝集標(biāo)本。所有標(biāo)本均按常規(guī)全血細(xì)胞檢測(cè)，血細(xì)胞分析儀每半年校準(zhǔn)一次。每日測(cè)定正常濃度和高濃度2個(gè)濃度的質(zhì)控品，結(jié)果均在控。標(biāo)本通過靜脈采血2 mL，加入EDTA-K2抗凝的真空管內(nèi)，輕輕地顛倒混勻。于采集后4 h內(nèi)，在XE-5000全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)完畢。其中男性12人，女性8人。其中包括肺炎支原體10例，傳染性單核細(xì)胞增多癥3例，多發(fā)性骨髓瘤2例，肺癌1例，白血病 2例，惡性淋巴瘤2例。

1.2 方法 將20例紅細(xì)胞冷凝集的標(biāo)本采用不同的方法處理后，在日本Sysmex公司生產(chǎn)的XE-5000全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)。血液分析儀所使用的試劑為原廠配套。顯微鏡為日本奧林巴斯光學(xué)株式會(huì)社生產(chǎn)。瑞士吉姆薩染液由貝索生物技術(shù)公司提供。①普通室溫（20 ℃）; ②37 ℃水浴30 min;③25 ℃條件下，37 ℃水浴30 min。記錄3種不同條件下紅細(xì)胞﹑紅細(xì)胞壓積、血紅蛋白﹑紅細(xì)胞各項(xiàng)參數(shù)﹑白細(xì)胞﹑血小板的值。該儀器以半導(dǎo)體激光器流式細(xì)胞技術(shù)結(jié)合熒光染色技術(shù)檢測(cè)白細(xì)胞，電阻抗法測(cè)定紅細(xì)胞和血小板，比色法測(cè)定血紅蛋白。以上3種方法檢測(cè)的同時(shí)觀察管壁紅細(xì)胞聚集的情況，檢測(cè)各推兩張血涂片，瑞士吉姆薩染色，雙筒顯微鏡鏡檢。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 使用SPSS17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

紅細(xì)胞冷凝集的標(biāo)本在3種不同的環(huán)境下檢測(cè)時(shí)可發(fā)現(xiàn)：普通室溫時(shí)，紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板均有異常報(bào)警（Agglut和Turb/Hb）。紅細(xì)胞直方圖可見異常的大紅細(xì)胞峰。管壁上有細(xì)砂粒樣凝集顆粒;血涂片發(fā)現(xiàn)血膜上有許多細(xì)小顆粒，顯微鏡下可見紅細(xì)胞大量聚集在一起。

37 ℃水浴30 min后， 15例標(biāo)本未發(fā)現(xiàn)抗凝管管壁有凝集顆粒，試管壁上的小片狀凝塊消失，紅細(xì)胞分布圖形正常，無報(bào)警信息。鏡檢血涂片，可見紅細(xì)胞均勻分布。其余5例標(biāo)本仍然提示紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板有異常報(bào)警（Agglut和Turb/Hb），紅細(xì)胞直方圖異常。

室溫25 ℃時(shí)，標(biāo)本37 ℃水浴30 min后，20例標(biāo)本均未出現(xiàn)報(bào)警信息。管壁無凝集顆粒，鏡檢血涂片，可見紅細(xì)胞均勻分布。

①普通室溫（20 ℃）和37 ℃水浴30 min 的結(jié)果比較，WBC、HGB、PLT差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。而紅細(xì)胞、紅細(xì)胞壓積（HCT）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;②37℃水浴30 min和25 ℃條件下37 ℃水浴30 min的結(jié)果比較，WBC、HGB、PLT差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。而紅細(xì)胞、紅細(xì)胞壓積（HCT）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

3 討論

冷凝集素是冷反應(yīng)型抗紅細(xì)胞抗體，在受冷后可使紅細(xì)胞出現(xiàn)聚集[1]。在0～4 ℃時(shí)最易和紅細(xì)胞膜抗原結(jié)合，是較強(qiáng)的使紅細(xì)胞凝集的一種自身免疫性抗體，可存在于正常人的血清中，抗體多數(shù)是IgM型。低效價(jià)的冷凝集素一般無臨床意義，通常16 ℃以下可使紅細(xì)胞發(fā)生凝集，30 ℃以上不發(fā)生凝集[2]。這種自身凝集反應(yīng)是可逆的，當(dāng)環(huán)境溫度升高后，凝集的紅細(xì)胞可自行解聚[3]。正常人血液中都有一定量的冷凝素抗體，但滴度較低，在1∶16以下。正常情況下，不會(huì)導(dǎo)致不良反應(yīng)。但當(dāng)機(jī)體處于感染等病理情況時(shí)，機(jī)體的冷凝素的含量增加，可以引起凝集反應(yīng)。很多疾病如多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、淋巴系統(tǒng)增殖性疾病、自身免疫性疾病、某些病毒和支原體感染、癌癥、白血病、妊娠等都可以出現(xiàn)冷凝集反應(yīng)。

綜上所述當(dāng)遇到疑似冷凝集標(biāo)本，如RBC，HGB比例嚴(yán)重不符時(shí)（正常人HGB和RBC的比例為30∶1），首先觀察試管內(nèi)標(biāo)本狀態(tài)，仔細(xì)觀察紅細(xì)胞分布的直方圖和出現(xiàn)的報(bào)警信息，同時(shí)檢測(cè)冷凝素的效價(jià)。當(dāng)標(biāo)本確定為冷凝集后，37 ℃水浴30 min后，可以利用空調(diào)提高室內(nèi)的溫度到25 ℃以上，此方法可以消除冷凝集素的影響。在日常工作中，尤其是冬天溫度較低的時(shí)候，經(jīng)常會(huì)遇到標(biāo)本發(fā)生冷凝集情況。正確識(shí)別和處理冷凝集標(biāo)本的異常檢測(cè)結(jié)果，對(duì)臨床準(zhǔn)確評(píng)估患者的病情非常重要。

參考文獻(xiàn)

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