AIDS患者感染侵襲性真菌的臨床特征和危險因素研究*

張雅婷,張媛媛,何 柳,項 杰

武漢市金銀潭醫(yī)院檢驗科,湖北武漢 430023

獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)是由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染所導(dǎo)致的疾病[1]。HIV可攻擊人體免疫細胞,特別是CD4+T淋巴細胞,導(dǎo)致該細胞數(shù)量進行性減少,使機體的免疫功能嚴重受損,從而極易并發(fā)各種機會性感染[2]。致病性真菌和某些條件致病性真菌引起的侵襲性真菌感染(IFI)在AIDS患者中十分常見。有研究報道,47%的AIDS患者的死因與IFI有關(guān)[3]。由于IFI起病隱匿,臨床特征不典型,單靠實驗室檢測技術(shù)常常導(dǎo)致漏診[4]。本研究通過探討AIDS患者合并IFI的危險因素以及各項指標對于AIDS患者IFI的預(yù)測價值,為臨床診斷、治療提供新思路。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2021年1月至2023年4月本院收治的194例AIDS患者為研究對象,所有患者均由本院和武漢市疾病預(yù)防控制中心艾滋病確證實驗室采用蛋白印跡法(WB)確診,檢測結(jié)果均為HIV陽性。通過查閱電子病歷檔案,將194例AIDS患者分為IFI組(107例)和非IFI組(87例)。IFI診斷標準[5]:(1)結(jié)合患者臨床特征,有IFI病史;(2)影像學(xué)檢查顯示肺部有炎癥征兆;(3)微生物檢查,感染部位包括呼吸道、消化道、泌尿道、血液等,所有納入研究者同時進行相應(yīng)的真菌培養(yǎng)和細菌培養(yǎng)。排除標準:(1)合并巨細胞病毒、EB病毒感染者;(2)合并乙、丙型肝炎病毒或梅毒螺旋體感染者;(3)合并結(jié)核分枝桿菌感染者;(4)惡性腫瘤患者;(5)合并其他細菌、支原體、衣原體感染者。本回顧性研究已通過本院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批(倫理編號:KY-2023-17)。

1.2方法

1.2.1血常規(guī)及生化指標等檢測 全血淋巴細胞計數(shù)(LYM)、全血中性粒細胞計數(shù)(NEU)、血紅蛋白(Hb)采用全自動血細胞分析儀(邁瑞6900)及其配套試劑進行檢測。清蛋白(ALB,溴甲酚綠法,中生北控生物科技股份有限公司)、C反應(yīng)蛋白(CRP,乳膠免疫比濁法,善迪諾股份有限公司)、血清葡萄糖(GLU,己糖激酶法,中生北控生物科技股份有限公司)采用全自動生化分析儀(雅培C16000)進行檢測。CD4+T淋巴細胞計數(shù)采用BD流式細胞儀(FACSCanto Ⅱ)及其配套試劑進行檢測。1,3-β-D-葡聚糖(BG)檢測采用BG檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫比色法,丹娜生物有限公司)進行檢測。所有檢測嚴格按照試劑說明書進行。

1.2.2真菌培養(yǎng)及鑒定 (1)非血液標本真菌培養(yǎng):取適量標本接種于兩管沙保羅氏瓊脂培養(yǎng)基(江門市凱林貿(mào)易有限公司),分別于25 ℃和37 ℃條件下培養(yǎng)7 d。(2)血液及骨髓液真菌培養(yǎng):抽取患者15 mL血液注入真菌/分枝桿菌復(fù)合瓶(美國BD醫(yī)療器械有限公司),置于全自動血培養(yǎng)儀(美國 BD BACTECTMFX)培養(yǎng)14 d,若培養(yǎng)過程中報陽,抽取復(fù)合瓶中適量血液,處理方法同非血液標本真菌培養(yǎng)。(3)真菌鑒定:依據(jù)菌落特點和顯微鏡下形態(tài),念珠菌采用鄭州安圖生物質(zhì)譜儀鑒定,絲狀真菌根據(jù)菌落形態(tài)和經(jīng)乳酸酚棉蘭染色后的顯微鏡鏡下形態(tài)來確定。所有檢測過程按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第4版)[6]和《醫(yī)學(xué)真菌學(xué):實驗室檢驗指南》[7]標準執(zhí)行。

2 結(jié) 果

2.1IFI組病原菌分布 107例IFI組患者共分離出114株病原菌,分離菌株以白念珠菌、新型隱球菌和馬爾尼菲籃狀菌為主。見表1。

表1 IFI組病原菌分布特征

2.2兩組相關(guān)資料比較 與非IFI組相比,IFI組血清ALB、Hb、LYM、CD4+T淋巴細胞計數(shù)明顯降低(P<0.05),而CRP、NEU、BG水平明顯升高(P<0.05)。兩組性別、年齡、吸煙、喝酒和合并高血壓情況等比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 兩組相關(guān)資料比較[n或或n(%)或M(P25,P75)]

2.3AIDS患者合并IFI的多因素Logistic回歸分析 以AIDS患者是否合并IFI作為因變量(未合并IFI=0,合并IFI=1),將表2中差異有統(tǒng)計學(xué)意義的變量(CRP、ALB、Hb、NEU、LYM、CD4+T淋巴細胞計數(shù)和BG)作為連續(xù)性自變量以實測數(shù)賦值,進行多因素Logistic回歸分析。分析結(jié)果顯示,CD4+T淋巴細胞計數(shù)降低、血清ALB水平降低為AIDS患者合并IFI的獨立危險因素(P<0.001)。見表3。

表3 AIDS患者合并IFI的多因素Logistic回歸分析

2.4血清ALB聯(lián)合CD4+T淋巴細胞計數(shù)對AIDS患者合并IFI的預(yù)測價值 ROC曲線分析結(jié)果顯示,血清ALB和CD4+T淋巴細胞計數(shù)單獨和二者聯(lián)合預(yù)測AIDS患者合并IFI的曲線下面積(AUC)分別為0.890、0.954和0.960。血清ALB和CD4+T淋巴細胞計數(shù)的截斷值分別為32.4 g/L和117個/μL。見表4、圖1。

圖1 CD4+ T淋巴細胞計數(shù)、血清ALB單獨和二者聯(lián)合預(yù)測AIDS患者合并IFI的ROC曲線

表4 血清ALB、CD4+ T淋巴細胞計數(shù)對AIDS患者合并IFI的預(yù)測價值

3 討 論

AIDS是HIV感染所導(dǎo)致的以機體免疫功能受損為主要特點的傳染病。HIV可進行性攻擊機體免疫細胞,導(dǎo)致多種機會性感染和腫瘤[8]。IFI是AIDS患者合并感染的最常見形式[9]。在我國,AIDS患者發(fā)生機會性感染的主要病原性真菌為念珠菌屬、肺孢子菌、隱球菌、馬爾尼菲籃狀菌和曲霉菌。AIDS患者一旦發(fā)生IFI,病原菌可侵犯患者心、腦、肝、腎、肺、脾、血管等,給機體造成極大的傷害[10]。在臨床上,由于AIDS患者免疫功能受到不同程度的損傷,免疫反應(yīng)導(dǎo)致的典型臨床表現(xiàn)常在AIDS合并IFI患者中缺失,從而容易發(fā)生漏診。因此,臨床需要提高對AIDS患者合并IFI的診斷能力,以利于該類患者的治療和預(yù)后[11]。

本研究共有194例AIDS患者,IFI患者為107例。這107例感染者中共分離出114株致病性真菌,其中最多的是白念珠菌,占71.05%。新型隱球菌和馬爾尼菲籃狀菌也比較常見,分別占11.41%和7.01%。這與班立芳等[12]的結(jié)論是一致的,說明念珠菌屬仍然是AIDS患者合并IFI的主要病原體。

本研究Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn),CD4+T淋巴細胞計數(shù)和血清ALB水平降低是AIDS患者合并IFI的獨立危險因素。CD4+T淋巴細胞是人體免疫系統(tǒng)中重要的輔助細胞,參與機體體液免疫和細胞免疫。當機體被HIV感染時,病毒能夠識別CD4+T淋巴細胞表面的特異蛋白質(zhì)分子,并在細胞內(nèi)復(fù)制和繁殖,導(dǎo)致外周血CD4+T淋巴細胞數(shù)量下降,使機體免疫功能降低,從而增加感染的發(fā)生概率[13-14]。因此,CD4+T淋巴細胞計數(shù)是評價AIDS患者免疫狀況的重要指標。《艾滋病合并侵襲性真菌病診治專家共識》中指出,建議以CD4+T淋巴細胞計數(shù)<200個/μL作為IFI篩查閾值[15]。本研究中,107例IFI組患者有101例CD4+T淋巴細胞<200個/μL,這與上述共識是一致的。ROC曲線分析結(jié)果顯示,CD4+T淋巴細胞計數(shù)的AUC為0.954,當該指標截斷值為117個/μL時,預(yù)測的靈敏度和特異度分別為88.0%和97.0%,預(yù)測效能較高,在臨床上具有很好的參考價值。

血清ALB是機體血漿蛋白中最主要的成分[16]。有資料顯示,它不僅維持著人體正常的營養(yǎng)狀態(tài),起到平衡血漿膠體滲透壓的作用,還參與機體多種炎癥反應(yīng)并影響疾病預(yù)后[17]。AIDS患者由于處于免疫抑制階段,肝臟合成功能受損,并伴有長期炎癥反應(yīng),故血清ALB低于正常水平[18]。在本研究中,IFI組血清ALB水平為(28.64±6.15)g/L,非IFI組血清ALB水平為(38.52±4.89)g/L,AIDS合并IFI的患者血清ALB水平明顯降低(P<0.001)。這與李嬌[19]的研究結(jié)果一致。ROC曲線分析結(jié)果顯示,血清ALB預(yù)測IFI的AUC為0.890。當截斷值為32.4 g/L時,靈敏度和特異度分別為76.6 %和87.0%。因此,當AIDS患者血清ALB水平低于32.4 g/L,臨床應(yīng)該警惕真菌感染,并及時進行適量ALB補充,改善患者的其他伴隨癥狀,提高生存質(zhì)量。此外,ROC曲線分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),CD4+T淋巴細胞計數(shù)和血清ALB聯(lián)合預(yù)測AIDS合并IFI的AUC為0.960,靈敏度和特異度分別為89.6%和89.5%,高于2項指標單獨預(yù)測的效能。

綜上所述,CD4+T淋巴細胞計數(shù)和血清ALB對AIDS患者合并IFI均有良好的預(yù)測價值。二者聯(lián)合應(yīng)用可以獲得更好的預(yù)測效能,可以在臨床中加以推廣。本研究不足之處在于數(shù)據(jù)僅來源于單一機構(gòu),樣本數(shù)量有限,有待大樣本數(shù)據(jù)進行論證。