AIDS患者感染侵襲性真菌的臨床特征和危險因素研究*

張雅婷,張媛媛,何 柳,項 杰

武漢市金銀潭醫院檢驗科,湖北武漢 430023

獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)是由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染所導致的疾病[1]。HIV可攻擊人體免疫細胞,特別是CD4+T淋巴細胞,導致該細胞數量進行性減少,使機體的免疫功能嚴重受損,從而極易并發各種機會性感染[2]。致病性真菌和某些條件致病性真菌引起的侵襲性真菌感染(IFI)在AIDS患者中十分常見。有研究報道,47%的AIDS患者的死因與IFI有關[3]。由于IFI起病隱匿,臨床特征不典型,單靠實驗室檢測技術常常導致漏診[4]。本研究通過探討AIDS患者合并IFI的危險因素以及各項指標對于AIDS患者IFI的預測價值,為臨床診斷、治療提供新思路。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2021年1月至2023年4月本院收治的194例AIDS患者為研究對象,所有患者均由本院和武漢市疾病預防控制中心艾滋病確證實驗室采用蛋白印跡法(WB)確診,檢測結果均為HIV陽性。通過查閱電子病歷檔案,將194例AIDS患者分為IFI組(107例)和非IFI組(87例)。IFI診斷標準[5]:(1)結合患者臨床特征,有IFI病史;(2)影像學檢查顯示肺部有炎癥征兆;(3)微生物檢查,感染部位包括呼吸道、消化道、泌尿道、血液等,所有納入研究者同時進行相應的真菌培養和細菌培養。排除標準:(1)合并巨細胞病毒、EB病毒感染者;(2)合并乙、丙型肝炎病毒或梅毒螺旋體感染者;(3)合并結核分枝桿菌感染者;(4)惡性腫瘤患者;(5)合并其他細菌、支原體、衣原體感染者。本回顧性研究已通過本院醫學倫理委員會審批(倫理編號:KY-2023-17)。

1.2方法

1.2.1血常規及生化指標等檢測 全血淋巴細胞計數(LYM)、全血中性粒細胞計數(NEU)、血紅蛋白(Hb)采用全自動血細胞分析儀(邁瑞6900)及其配套試劑進行檢測。清蛋白(ALB,溴甲酚綠法,中生北控生物科技股份有限公司)、C反應蛋白(CRP,乳膠免疫比濁法,善迪諾股份有限公司)、血清葡萄糖(GLU,己糖激酶法,中生北控生物科技股份有限公司)采用全自動生化分析儀(雅培C16000)進行檢測。CD4+T淋巴細胞計數采用BD流式細胞儀(FACSCanto Ⅱ)及其配套試劑進行檢測。1,3-β-D-葡聚糖(BG)檢測采用BG檢測試劑盒(酶聯免疫比色法,丹娜生物有限公司)進行檢測。所有檢測嚴格按照試劑說明書進行。

1.2.2真菌培養及鑒定 (1)非血液標本真菌培養:取適量標本接種于兩管沙保羅氏瓊脂培養基(江門市凱林貿易有限公司),分別于25 ℃和37 ℃條件下培養7 d。(2)血液及骨髓液真菌培養:抽取患者15 mL血液注入真菌/分枝桿菌復合瓶(美國BD醫療器械有限公司),置于全自動血培養儀(美國 BD BACTECTMFX)培養14 d,若培養過程中報陽,抽取復合瓶中適量血液,處理方法同非血液標本真菌培養。(3)真菌鑒定:依據菌落特點和顯微鏡下形態,念珠菌采用鄭州安圖生物質譜儀鑒定,絲狀真菌根據菌落形態和經乳酸酚棉蘭染色后的顯微鏡鏡下形態來確定。所有檢測過程按照《全國臨床檢驗操作規程》(第4版)[6]和《醫學真菌學:實驗室檢驗指南》[7]標準執行。

2 結 果

2.1IFI組病原菌分布 107例IFI組患者共分離出114株病原菌,分離菌株以白念珠菌、新型隱球菌和馬爾尼菲籃狀菌為主。見表1。

表1 IFI組病原菌分布特征

2.2兩組相關資料比較 與非IFI組相比,IFI組血清ALB、Hb、LYM、CD4+T淋巴細胞計數明顯降低(P<0.05),而CRP、NEU、BG水平明顯升高(P<0.05)。兩組性別、年齡、吸煙、喝酒和合并高血壓情況等比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 兩組相關資料比較[n或或n(%)或M(P25,P75)]

2.3AIDS患者合并IFI的多因素Logistic回歸分析 以AIDS患者是否合并IFI作為因變量(未合并IFI=0,合并IFI=1),將表2中差異有統計學意義的變量(CRP、ALB、Hb、NEU、LYM、CD4+T淋巴細胞計數和BG)作為連續性自變量以實測數賦值,進行多因素Logistic回歸分析。分析結果顯示,CD4+T淋巴細胞計數降低、血清ALB水平降低為AIDS患者合并IFI的獨立危險因素(P<0.001)。見表3。

表3 AIDS患者合并IFI的多因素Logistic回歸分析

2.4血清ALB聯合CD4+T淋巴細胞計數對AIDS患者合并IFI的預測價值 ROC曲線分析結果顯示,血清ALB和CD4+T淋巴細胞計數單獨和二者聯合預測AIDS患者合并IFI的曲線下面積(AUC)分別為0.890、0.954和0.960。血清ALB和CD4+T淋巴細胞計數的截斷值分別為32.4 g/L和117個/μL。見表4、圖1。

圖1 CD4+ T淋巴細胞計數、血清ALB單獨和二者聯合預測AIDS患者合并IFI的ROC曲線

表4 血清ALB、CD4+ T淋巴細胞計數對AIDS患者合并IFI的預測價值

3 討 論

AIDS是HIV感染所導致的以機體免疫功能受損為主要特點的傳染病。HIV可進行性攻擊機體免疫細胞,導致多種機會性感染和腫瘤[8]。IFI是AIDS患者合并感染的最常見形式[9]。在我國,AIDS患者發生機會性感染的主要病原性真菌為念珠菌屬、肺孢子菌、隱球菌、馬爾尼菲籃狀菌和曲霉菌。AIDS患者一旦發生IFI,病原菌可侵犯患者心、腦、肝、腎、肺、脾、血管等,給機體造成極大的傷害[10]。在臨床上,由于AIDS患者免疫功能受到不同程度的損傷,免疫反應導致的典型臨床表現常在AIDS合并IFI患者中缺失,從而容易發生漏診。因此,臨床需要提高對AIDS患者合并IFI的診斷能力,以利于該類患者的治療和預后[11]。

本研究共有194例AIDS患者,IFI患者為107例。這107例感染者中共分離出114株致病性真菌,其中最多的是白念珠菌,占71.05%。新型隱球菌和馬爾尼菲籃狀菌也比較常見,分別占11.41%和7.01%。這與班立芳等[12]的結論是一致的,說明念珠菌屬仍然是AIDS患者合并IFI的主要病原體。

本研究Logistic回歸分析發現,CD4+T淋巴細胞計數和血清ALB水平降低是AIDS患者合并IFI的獨立危險因素。CD4+T淋巴細胞是人體免疫系統中重要的輔助細胞,參與機體體液免疫和細胞免疫。當機體被HIV感染時,病毒能夠識別CD4+T淋巴細胞表面的特異蛋白質分子,并在細胞內復制和繁殖,導致外周血CD4+T淋巴細胞數量下降,使機體免疫功能降低,從而增加感染的發生概率[13-14]。因此,CD4+T淋巴細胞計數是評價AIDS患者免疫狀況的重要指標。《艾滋病合并侵襲性真菌病診治專家共識》中指出,建議以CD4+T淋巴細胞計數<200個/μL作為IFI篩查閾值[15]。本研究中,107例IFI組患者有101例CD4+T淋巴細胞<200個/μL,這與上述共識是一致的。ROC曲線分析結果顯示,CD4+T淋巴細胞計數的AUC為0.954,當該指標截斷值為117個/μL時,預測的靈敏度和特異度分別為88.0%和97.0%,預測效能較高,在臨床上具有很好的參考價值。

血清ALB是機體血漿蛋白中最主要的成分[16]。有資料顯示,它不僅維持著人體正常的營養狀態,起到平衡血漿膠體滲透壓的作用,還參與機體多種炎癥反應并影響疾病預后[17]。AIDS患者由于處于免疫抑制階段,肝臟合成功能受損,并伴有長期炎癥反應,故血清ALB低于正常水平[18]。在本研究中,IFI組血清ALB水平為(28.64±6.15)g/L,非IFI組血清ALB水平為(38.52±4.89)g/L,AIDS合并IFI的患者血清ALB水平明顯降低(P<0.001)。這與李嬌[19]的研究結果一致。ROC曲線分析結果顯示,血清ALB預測IFI的AUC為0.890。當截斷值為32.4 g/L時,靈敏度和特異度分別為76.6 %和87.0%。因此,當AIDS患者血清ALB水平低于32.4 g/L,臨床應該警惕真菌感染,并及時進行適量ALB補充,改善患者的其他伴隨癥狀,提高生存質量。此外,ROC曲線分析結果發現,CD4+T淋巴細胞計數和血清ALB聯合預測AIDS合并IFI的AUC為0.960,靈敏度和特異度分別為89.6%和89.5%,高于2項指標單獨預測的效能。

綜上所述,CD4+T淋巴細胞計數和血清ALB對AIDS患者合并IFI均有良好的預測價值。二者聯合應用可以獲得更好的預測效能,可以在臨床中加以推廣。本研究不足之處在于數據僅來源于單一機構,樣本數量有限,有待大樣本數據進行論證。