堿水解法測定乳粉中脂肪能力驗證的分析與研究

孫路明，邢雪巖，劉君，王璐，楊濱銀

阿克蘇地區疾病預防控制中心（阿克蘇 843000）

能力驗證是每個有資質實驗室都必須面對的，能力驗證考核的通過，即代表著實驗室擁有出具合法有效檢驗檢測報告的能力，又是對實驗室運行質量控制體系建設和檢測機構的一種認可。因此，能力驗證對于每個檢測機構都有著十分重要的意義。文章以順利通過食品檢測能力驗證乳粉中的脂肪檢測項目為基礎，總結了以下實踐經驗。

1 考核前的準備工作

1.1 檢測方法的確定

依據能力驗證作業指導書，一般使用推薦方法開展實驗，如果實驗室條件不滿足推薦方法，也可結合本實驗室的條件選擇適用的方法同時向考核單位報備。此次試驗選用推薦方法GB 5009.6—2016第三法堿水解法測定乳及乳制品、嬰幼兒配方食品中脂肪。

1.2 人員的準備

參加能力驗證對人員有一定的要求，應該選擇熟識該項目且經驗豐富、具有上崗證的在編人員；實驗人員的技術水平直接影響到檢測結果的準確度。做能力驗證實驗應該至少有2人協同完成，了解實驗操作的原理和注意事項；了解試劑的化學性質；實驗人員要調整好心態，既不能敷衍了事，也不能過度緊張，認真、客觀對待實驗。實驗的主要和關鍵步驟應由同一人操作，尤其是樣品檢測過程中的稱量，加樣、抽提等過程一定要同一個人操作，不要中途換人操作。

1.3 儀器和設備的準備

堿水解法測定乳粉中脂肪需要用到的儀器和設備必須經過嚴格的驗證和校準且在檢定效期內，確保實驗數據的準確性和可靠性，為保證實驗的順利開展，前期一定做好儀器的維護和保養，確保儀器正常使用。在實驗開始前可以提前做個預實驗，提前了解實驗過程的關鍵步驟，熟悉儀器的性能。此次實驗需要準備萬分之一分析天平、離心機、電熱鼓風干燥箱、恒溫水浴鍋、干燥器、抽脂瓶等。實驗中用到的各種容器需確保干凈無污染，以免影響實驗結果。

1.4 質控樣品和試劑的準備

質控樣品是一種已經確定了具有一個或多個足夠均勻的特性值的物質，是開展分析實驗的量具，它在整個實驗過程的質量控制中起著不可或缺的作用。開展實驗前需提前購買與考核樣品品種一致、附有證書的質控——乳粉中的脂肪的標準樣品，最好選擇國家計量院生產的。此次實驗選用LGC質量控制樣品，批號202211-02，有效期到2023年12月31日，指示值18.5 g/100 g，質量控制范圍17.4～19.6 g/100 g。其他試劑乙醚、石油醚、剛果紅盡量使用高純度的，降低對實驗影響。

2 試驗過程中的關鍵點

試驗關鍵步驟要做到每一步有記錄，每一個操作要有一致性。堿溶解過程：樣品稱取前要混合均勻，稱好的奶粉轉移時，盡量不要散落在抽脂瓶瓶壁上，如若有少量散落，可以少量多次用40～60 ℃的溫水沖洗，總量不超過10 mL，加2 mL氨水充分混合后立即將抽脂瓶放入可以蓋過樣本混合液的水浴中，不時取出水平振蕩抽脂瓶，豎直靜置。抽提過程：乙醇應在堿溶解過程后加入，不可顛倒順序，加入剛果紅溶液，形成明顯界限（如圖1所示），水平振搖，避免液體太接近瓶頸發生溢撒。冷卻后小心打開瓶塞，用少量的混合溶劑沖洗塞子和瓶頸，萃取靜置至少30 min，直到上層液澄清，并明顯與水相分離。按標準要求再進行兩次抽提，同時做空白實驗。每次抽提嚴格按照標準上操作示意圖位置進行（如圖2所示）。堿水解法提取脂肪時如果出現乳化現象（如圖3左圖所示），一般發生在第二遍或第三遍，靜置一段時間，先把沒有乳化部分的有機溶劑提取至脂肪接收瓶中，然后在乳化層加入乙醇溶劑，乳化層會很快能夠分離出水層和有機層。稱量：提前恒重吸收瓶，并在吸收瓶中放入沸石防止爆沸，水浴上蒸發至干。

圖1 加入剛果紅溶液抽提后示意圖

圖2 抽提操作示意圖

圖3 未加剛果紅抽提后示意圖

3 結果提交前的注意事項

1) 利用好作業指導書。作業指導書中有詳細的步驟和要求，越是關鍵時候越是需要細心、耐心，忙而不亂，規劃好實驗過程中各部分所需的時間。

2) 結合質控，對上報數據進行驗證，好的質控結果可以讓自己的檢測結果有著明確的對照，根據質控更加準確地推導出考核樣的準確值，選擇最靠近的檢測結果上報。

3) 根據上報截止日期，做好時間規劃。實驗時間和上報數據的時間要預留充分，必要時可加班完成，第一時間開展實驗，同時建議至少做雙平行以上的實驗，有需要可重復進行。對紙質材料進行整理歸檔。規定時間內上報最準確的結果，寄出紙質材料。

4 結果與分析

文章采用堿水解法對能力驗證樣品中脂肪進行檢測，檢測能力評價結果見表1和表2。|Z|＜2.0能力驗證試驗取得了滿意的結果，其中低值樣品偏離度僅為0.21，說明采用以上實驗方法概括的關鍵點對于整個實驗起到了推動作用，本法有著較好的適用性、準確性；對于人員的控制見表1，人員A、B分別為參加培訓且有上崗證和沒經驗的新進人員，數據顯示人員A無論是精密度還是準確度都明顯高于人員B，實驗人員的技術水平直接影響實驗結果的準確性，在整個實驗過程中發揮著舉足輕重的作用。參加考核能力驗證的檢測機構想要取得優秀的考核成績不僅需要物資等各方面的準備，更需要積極培養專業技術人員。唯有重視實驗工作，加強日常大練兵多動手，嚴格按照標準操作，做好質控等各項關鍵要素質量控制，才能在遇到實驗室能力驗證等各項考核的時候更加得心應手。

表1 考核樣的結果

表2 考核樣的檢測能力評價結果

5 結論

文章總結概括了用堿水解法測定乳粉中脂肪，順利通過食品檢測能力驗證所需要注意的考核前準備和實驗操作中的關鍵步驟，為堿水解法測定乳粉中脂肪能力驗證工作提供參考。