迷迭香酸抑制荷瘤小鼠H22肝癌移植瘤生長的作用機制

曹雯,莫凱,潘金鳳,韋斯軍,王振寧,尹園

肝癌是世界上癌癥相關發病率和病死率最高的惡性腫瘤之一,盡管目前有許多化療方法可用于肝癌的治療,但其在發揮抗腫瘤作用同時會對機體產生一定的毒性作用[1]。迷迭香酸是一種天然多酚類化合物,是迷迭香、腫節風等中藥的有效活性成分,具有抗炎、抗氧化、調節免疫等多種藥理學活性[2]。近年研究表明,迷迭香酸在乳腺癌、結直腸癌、肝癌等疾病中能發揮良好抗腫瘤作用[3-5]。本研究通過建立H22肝癌荷瘤小鼠模型,觀察迷迭香酸對荷瘤小鼠腫瘤的抑制作用及其對腫瘤免疫微環境的影響。

1 實驗對象、試藥與儀器

1.1 實驗動物及細胞 昆明小鼠,雄性,6～8周齡,體質量(20±2)g,購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司(動物許可證號:SCXK-2019-0004)。動物飼養環境溫度(25±2)℃,濕度40%～70%,在12 h黑暗/12 h光照同期動物設施中適應性喂養1周后開始實驗。動物實驗經廣西中醫藥大學實驗動物福利倫理委員會批準(批準號SYXK-2019-0001)。小鼠H22肝癌腹水細胞購自上海吉凱基因醫學科技股份有限公司。

1.2 藥物與試劑 迷迭香酸(純度>97%,上海麥克林生化科技有限公司,批號C11552095);注射用環磷酰胺(江蘇恒瑞醫藥股份有限公司,批號21102825);流式凋亡試劑盒(碧云天生物技術有限公司,批號C1062);小鼠CD3e APC-Cy7抗體(批號557596)、CD4 APC抗體(批號553051)、CD8a PerCP-Cy5.5抗體(批號551162)均購自BD Pharmingen公司;小鼠干擾素-γ(IFN-γ)(批號20220910)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)(批號20220910)、白介素-10(IL-10)(批號20221010)ELISA試劑盒均購自Bioswamp公司。

1.3 主要儀器 本研究所用主要儀器包括CytoFLEX型流式細胞儀(BECKMAN COULTER公司),AMR-100型酶標分析儀(杭州奧盛儀器有限公司),TD4離心機(上海盧湘儀離心機儀器有限公司),BX-53光學顯微鏡(日本奧林巴斯)等。