LC-MS/MS法測定大鼠血漿中雷公藤甲素濃度及其藥代動力學研究

王靜,王彤,劉航,蘇天宏,崔瑞琴

雷公藤最早記載于《神農本草經》,味苦辛,性寒,入肝、脾二經,有大毒,可祛風濕、活血通絡、清熱解毒、消腫止痛[1]。雷公藤多苷是從植物雷公藤根心部提取的一種混合物,被廣泛應用于炎性反應性疾病、自身免疫性疾病、器官移植及腫瘤的治療。雷公藤甲素(TP)是目前公認的雷公藤多苷的主要藥效成分,具有抗炎、免疫抑制、抗增殖、促凋亡等多種藥理作用[2-3];但是,因其具有較強的藥物毒性,包括引發器質性損害和嚴重的功能障礙,甚至死亡,導致其在臨床應用中嚴重受限[4]。因此,如何才能在保持TP生物活性且不影響療效的基礎上來降低或者消除TP的毒性作用是該領域亟待解決的關鍵性科學問題。監測TP的體內代謝是提高臨床用藥安全性的重要手段之一。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 8周齡SPF級SD雄性大鼠24只(寧夏醫科大學實驗動物中心提供),體質量200～220 g[許可證號:SCXK(寧)2020-0001]。所有大鼠均在溫度(22±2)℃、相對濕度50%～60%、12 h明暗交替的環境下飼養,自由進食、飲水。

1.2 藥品與試劑 TP標準品(貨號B20709,HPLC≥98%)購自上海源葉生物科技有限公司;內標潑尼松龍標準品(貨號P829930,純度:98%)購自上海麥克林生化科技有限公司;利福平膠囊(國藥準字H51020786)購自成都錦華藥業有限責任公司;琥乙紅霉素片(國藥準字H61022359)購自西安利君制藥有限責任公司;雷公藤多苷片(國藥準字Z32021007)購自江蘇美通制藥有限公司。羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)購自天津凱通化學試劑有限公司;乙酸乙酯購自德國Eppendorf公司;乙腈、甲醇(色譜醇)、甲酸購自美國millipore公司;乙酸銨購自美國Sigma公司。……