miRNA 在糖尿病周?chē)窠?jīng)病變中的調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展

王曉月，李捷，張璐璐，徐云生

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東濟(jì)南 250355；2.山東中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，山東濟(jì)南 250001）

糖尿病周?chē)窠?jīng)病變（diabetic peripheral neuropathy，DPN）是糖尿?。╠iabetes mellitus，DM）常見(jiàn)的微血管并發(fā)癥，以對(duì)稱(chēng)分布的感覺(jué)異常為主要臨床表現(xiàn)，DPN從遠(yuǎn)端開(kāi)始逐漸向近端擴(kuò)散，呈手套和襪子樣分布，約50%的DM 患者會(huì)發(fā)生本癥［1］。DPN可進(jìn)一步發(fā)展為糖尿病足，難以愈合的糖尿病足會(huì)引發(fā)壞疽，進(jìn)而造成截趾或截肢，截趾或截肢后創(chuàng)面常難以愈合，從而引發(fā)各種感染等。因此，闡明DPN致病機(jī)制，早期對(duì)其進(jìn)行干預(yù)，預(yù)防其進(jìn)展有重要意義。近年研究發(fā)現(xiàn)，微小RNA（microRNA，miRNA）的差異性表達(dá)與DPN的發(fā)病關(guān)系緊密［2-3］。因此，本文綜述miRNA 調(diào)控DPN的機(jī)制研究進(jìn)展，闡述如下。

1 miRNA概述

miRNA是一類(lèi)高度保守的內(nèi)源性、非編碼單鏈小分子RNA，長(zhǎng)度為18～25個(gè)核苷酸，通過(guò)調(diào)控特定m RNA靶標(biāo)的轉(zhuǎn)錄、翻譯和／或降解影響細(xì)胞功能［4］。一個(gè)miRNA可以同時(shí)靶向位于同一細(xì)胞信號(hào)通路的多個(gè)基因，miRNA 表達(dá)的任何變化都可能影響靶標(biāo)調(diào)節(jié)的程度，從而影響細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。因此，miRNA 的相對(duì)水平及其靶標(biāo)m RNA 在各種疾病中起重要作用。miRNA已被證實(shí)可以影響許多重要的生物過(guò)程，如細(xì)胞生長(zhǎng)、組織分化、細(xì)胞增殖、胚胎發(fā)育和細(xì)胞凋亡，失調(diào)的miRNA在衰老、心血管疾病和癌癥等各種疾病的進(jìn)展中起關(guān)鍵作用，如影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展［5-6］。miRNA也可作為各種疾病和綜合征診斷和預(yù)后的潛在生物標(biāo)志物。

2 miRNA在DPN中的作用機(jī)制

研究表明，miRNA 可能通過(guò)調(diào)節(jié)神經(jīng)炎癥、疼痛刺激機(jī)制和細(xì)胞損傷與修復(fù)過(guò)程參與DPN 的發(fā)?。?-8］。

2.1 調(diào)節(jié)神經(jīng)炎癥 CHANDRAMOORTHY H C等［9］在DPN患者和相關(guān)動(dòng)物模型中發(fā)現(xiàn)，周?chē)窠?jīng)周?chē)奈⒀苤写嬖谘装Y細(xì)胞因子［如腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素（IL）-1β、IL-6和IL-8等］的異常表達(dá)。TNF-α作為細(xì)胞信號(hào)蛋白參與全身炎性反應(yīng)，也是急性期炎性反應(yīng)的關(guān)鍵細(xì)胞因子。TNF-α與DPN炎性反應(yīng)密不可分，在DPN 患者血清中明顯升高［10］。TNF-α的激活可引起一系列下游炎性反應(yīng)的發(fā)生，引起神經(jīng)細(xì)胞破壞和脫髓鞘，最終損害周?chē)窠?jīng)功能。研究發(fā)現(xiàn)，miRNA 與炎性反應(yīng)密切相關(guān)［11-13］。

（1）抗炎作用 miR-146a在DM 及DPN患者外周血中的表達(dá)均較低，且DPN患者miR-146a表達(dá)水平較單純DM 患者更低，可見(jiàn)，miR-146a表達(dá)水平與DPN病情嚴(yán)重程度有關(guān)［14-15］。FENG Y H 等［16］研究發(fā)現(xiàn)，DPN模型大鼠IL-1β、TNF-α及核因子κB（NF-κB）等細(xì)胞因子呈高表達(dá)，而miR-146a表達(dá)降低。NF-κB是一種促炎轉(zhuǎn)錄因子，在miR-146a轉(zhuǎn)錄中發(fā)揮重要作用。該研究將miR-146a與細(xì)胞因子進(jìn)行Pearson相關(guān)分析，結(jié)果顯示，miR-146a與NF-κB、TNF-α和IL-1β的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)［16］。IL-1受體相關(guān)激酶（IRAK1）和TNF受體關(guān)聯(lián)因子6（TRAF6）是Toll樣受體（TLR）啟動(dòng)炎癥和免疫反應(yīng)下游途徑的重要分子，miR-146a可通過(guò)抑制IRAK1和TRAF6的表達(dá)，使細(xì)胞因子的產(chǎn)生減少。由此認(rèn)為，在長(zhǎng)期高血糖條件下，miR-146a的表達(dá)降低，導(dǎo)致其對(duì)IRAK1、TRAF6及NF-κB的抑制作用減弱，并使IL-1β和TNF-α表達(dá)水平升高，引發(fā)DPN炎性反應(yīng)。LIU X S等［17］使用miR-146a模擬物升高DPN模型小鼠血漿和坐骨神經(jīng)組織中的miR-146a水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，miR-146a治療可顯著提高感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度，降低熱刺激閾值，增加周?chē)窠?jīng)血流灌注、神經(jīng)纖維數(shù)量，促進(jìn)軸突髓鞘形成，且在DPN 早期階段就開(kāi)始采用miR-146a模擬治療，效果更佳。miR-146a模擬物可能通過(guò)其靶基因抑制NF-κB信號(hào)激活的炎性反應(yīng)，從而發(fā)揮抗炎作用。

ZHANG Y Z等［18］在DPN模型小鼠中發(fā)現(xiàn)miR-25的表達(dá)水平降低，TNF-α和IL-1β表達(dá)水平升高，而miR-25過(guò)表達(dá)能顯著降低TNF-α和IL-1β的表達(dá)，表明miR-25是一種抗炎保護(hù)因子。另外，miR-25還可下調(diào)Nox4（一種炎癥促進(jìn)因子）和活性氧（ROS）的表達(dá)，從而減輕氧化應(yīng)激引發(fā)的細(xì)胞損傷，并通過(guò)下調(diào)晚期糖基化終產(chǎn)物（AGEs）、晚期糖基化終產(chǎn)物受體（RAGE）水平，減少蛋白激酶C-α磷酸化，進(jìn)而抑制NF-κB的激活，發(fā)揮抗炎作用，這表明miR-25可能是DPN的潛在診斷和治療靶點(diǎn)［18］。

以上研究表明，miRNA 可通過(guò)下調(diào)炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)而抑制炎性反應(yīng)，外源性miRNA 干預(yù)可防止血管神經(jīng)功能的進(jìn)一步損害，減輕炎性反應(yīng)，改善DPN癥狀，為通過(guò)miRNA 臨床診斷及治療DPN 提供了指導(dǎo)。

（2）促炎作用 CHEN J等［19］研究發(fā)現(xiàn)，miR-155拮抗劑可減輕周?chē)窠?jīng)的炎性反應(yīng)，該結(jié)果與此前其他研究一致。miR-155 拮抗劑可降低促炎細(xì)胞因子（如TNF-α和IL-6）水平［20］。研究發(fā)現(xiàn)，在外周血巨噬細(xì)胞中，抑制miR-155可下調(diào)TNF-α和IL-1的表達(dá)水平［21］。此外，miR-155 抑制劑有助于降低IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白質(zhì)水平，從而減輕炎性反應(yīng)［22］。CHEN J等［19］研究發(fā)現(xiàn)，miR-155靶向并抑制核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）的表達(dá)。Nrf2 的缺失會(huì)導(dǎo)致NF-κB活性增加，從而產(chǎn)生過(guò)多的細(xì)胞因子，引發(fā)炎性反應(yīng)［23］。抑制miR-155或恢復(fù)Nrf2可促進(jìn)大鼠雪旺細(xì)胞增殖并抑制體外細(xì)胞凋亡，減少ROS的產(chǎn)生和減輕炎性反應(yīng)［19］。由此認(rèn)為，靶向抑制miR-155-Nrf2治療可能有助于減少高血糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和凋亡?？梢?jiàn)，miRNA抑制劑能有效逆轉(zhuǎn)miRNA 引發(fā)的炎癥刺激，防治DPN。

2.2 疼痛刺激機(jī)制 YANG D等［24］通過(guò)建立糖尿病神經(jīng)性疼痛小鼠模型，證實(shí)miR-190a-5p 通過(guò)靶向SLC17A6導(dǎo)致糖尿病神經(jīng)性疼痛，SLC17A6也被稱(chēng)為囊泡谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2 基因（VGLUT2）。VGLUT2可誘導(dǎo)谷氨酸釋放增加，從而導(dǎo)致神經(jīng)損傷后神經(jīng)性疼痛的發(fā)生［25］。YANG D等［24］研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)，用SLC17A6抑制劑治療后，糖尿病神經(jīng)性疼痛模型小鼠腰椎背角IL-1β和IL-6水平下調(diào)，小鼠疼痛行為改善。該研究發(fā)現(xiàn)，miR-190a-5p 的下調(diào)會(huì)導(dǎo)致SLC17A6水平升高，增強(qiáng)炎性反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致疼痛的發(fā)生［24］。

LIU W 等［26］研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病神經(jīng)性疼痛模型大鼠脊髓背角神經(jīng)元中miR-9水平上調(diào)，且與鈣穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)劑1（CALHM1）的表達(dá)呈正相關(guān)。CALHM1是一種新的鈣通道，位于神經(jīng)元膜或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。LIU W等［26］發(fā)現(xiàn)CALHM1可通過(guò)增加神經(jīng)元中Ca2＋流入和促進(jìn)ATP的產(chǎn)生誘導(dǎo)嘌呤能P2X7受體（P2X7R）在脊髓背角膠質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)，而P2X7可調(diào)控神經(jīng)性疼痛中的ATP 釋放和Ca2＋濃度，miR-9 在激活A(yù)TP-P2X7R信號(hào)通路中的作用與CALHM1相同。另外，miR-9 可下調(diào)單核細(xì)胞趨化蛋白誘導(dǎo)蛋白1（MCPIP1），介導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞活化，導(dǎo)致促炎細(xì)胞因子（IL-1β、TNF-α、IL-6）上調(diào)，引發(fā)神經(jīng)炎癥［27］。

WU B等［28］研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病神經(jīng)性疼痛模型小鼠miR-193a水平下調(diào)，高遷移率族蛋白1（HMGB1）表達(dá)上調(diào)，且熒光酶測(cè)定結(jié)果證實(shí)miR-193a直接靶向HMGB1。研究證實(shí)，HMGB1在周?chē)窠?jīng)炎癥中發(fā)揮炎癥介質(zhì)作用，并參與神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)病機(jī)制［29］。WU B等［28］給糖尿病神經(jīng)性疼痛模型小鼠注射miR-193a 模擬物后，逆轉(zhuǎn)了原本過(guò)表達(dá)的HMGB1水平，表明HMGB1在糖尿病神經(jīng)性疼痛中的過(guò)表達(dá)是由miR-193a水平下調(diào)引起的。另外，該研究證實(shí)HMGB1的過(guò)表達(dá)能顯著上調(diào)糖尿病神經(jīng)性疼痛模型小鼠腰椎背角中炎癥細(xì)胞因子（如IL-6、IL-1β和TNF-α）水平［28］，這與REN P C等［30］的研究結(jié)果吻合；而注射miR-193a模擬物后，炎癥細(xì)胞因子水平顯著降低，說(shuō)明miR-193a能抑制由HMGB1過(guò)表達(dá)引起的增強(qiáng)的周?chē)窠?jīng)炎癥。因此，miR-193a可通過(guò)抑制HMGB1表達(dá)，減輕糖尿病神經(jīng)性疼痛。

不同miRNA分別通過(guò)不同的作用靶點(diǎn)引發(fā)或減輕下游炎性反應(yīng)，引起或拮抗DPN 神經(jīng)性疼痛，干預(yù)miRNA 或其作用靶點(diǎn)，可有效減輕炎性反應(yīng)，緩解疼痛。

2.3 影響軸突生長(zhǎng) ZHANG X N 等［31］研究發(fā)現(xiàn)，DM 晚期模型大鼠的原代分離背根神經(jīng)節(jié)（DRG）神經(jīng)元中miR-29b表達(dá)下調(diào)，DRG 神經(jīng)元細(xì)胞凋亡增加，軸突腫脹嚴(yán)重，同時(shí)，軸突生成基因被抑制，而神經(jīng)退行性基因被激活，進(jìn)行模擬實(shí)驗(yàn)恢復(fù)miR-29b的表達(dá)，結(jié)果顯示，miR-29b的恢復(fù)能促進(jìn)軸突生成，抑制神經(jīng)變性，表明miR-29b可保護(hù)DRG 神經(jīng)元免受高血糖的損害。miR-29家族的另一個(gè)成員miR-29c也在軸突生長(zhǎng)中起重要作用，miR-29c在DPN 模型小鼠DRG 神經(jīng)元、坐骨神經(jīng)和足墊組織中表達(dá)上調(diào)，而PRKCI蛋白呈現(xiàn)與之相反的變化，生物信息學(xué)分析、雙熒光素酶測(cè)定結(jié)果顯示PRKCI蛋白是miR-29的靶標(biāo)，體外研究顯示，高葡萄糖可分別上調(diào)和降低DRG神經(jīng)元中的miR-29c和PRKCI蛋白水平，這與軸突生長(zhǎng)的顯著抑制有關(guān)，該結(jié)果表明在高血糖下miR-29c可通過(guò)靶向PRKCI阻斷軸突生長(zhǎng)［32］。

CHENG C等［33］研究發(fā)現(xiàn)，DM 模型小鼠感覺(jué)神經(jīng)元中mmu-let-7i水平下調(diào)，mmu-miR-341水平上調(diào)，分別使用mmu-let-7i模擬物進(jìn)行外源性補(bǔ)充和用抗miR 拮抗mmu-miR-341的上調(diào)，結(jié)果顯示，補(bǔ)充mmu-let-7i和敲除mmu-miR-341小鼠的電生理學(xué)、結(jié)構(gòu)和行為異常均得到改善，但不改變高血糖狀態(tài)；另外，暴露于外源性mmu-let-7i模擬物的解離成人感覺(jué)神經(jīng)元生長(zhǎng)增強(qiáng)，分支增多，證實(shí)mmu-let-7i具有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)活性。

DPN的主要病理改變?yōu)橹車(chē)窠?jīng)脫髓鞘、腫脹，軸突變性，伴有髓鞘再生，雪旺細(xì)胞去分化，以上研究表明，miRNA可通過(guò)不同靶點(diǎn)促進(jìn)或抑制軸突生長(zhǎng)，改變神經(jīng)功能，使用保護(hù)性miRNA 模擬物或拮抗抑制性miRNA可以促進(jìn)神經(jīng)元生長(zhǎng)，改善神經(jīng)功能。

3 miRNA在DPN治療中的潛在靶點(diǎn)

3.1 外泌體 外泌體是由細(xì)胞分泌的直徑為50～100 nm 的膜狀納米囊泡，通過(guò)轉(zhuǎn)運(yùn)其內(nèi)包含的功能性m RNA、miRNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)參與細(xì)胞通訊。

間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞（MSCs）目前被發(fā)現(xiàn)可應(yīng)用于細(xì)胞療法。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）主要通過(guò)旁分泌效應(yīng)及分泌血管生成因子、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、抗炎分子促進(jìn)周?chē)窠?jīng)病變的修復(fù)，MSC 來(lái)源的外泌體（MSC 外泌體）的治療效果已在癌癥、心腦血管疾病的臨床前研究中得到證實(shí)，可恢復(fù)外周組織的血流。FAN B Y等［34］將MSC外泌體作用于DPN 小鼠，發(fā)現(xiàn)MSC外泌體可降低促炎細(xì)胞因子水平，并通過(guò)將DM 小鼠坐骨神經(jīng)中的炎性巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化為M2表型以抑制炎性反應(yīng)；研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)，MSC外泌體包含let-7a、miR-23a和miR-125b等miRNA，并協(xié)同靶向TLR4／NF-κB信號(hào)通路；此外，MSC外泌體可下調(diào)TLR4、IRAK1和磷酸化NF-κB p65的表達(dá)。另外有研究證實(shí)，MSC外泌體通過(guò)抑制TLR信號(hào)傳導(dǎo)，抑制巨噬細(xì)胞活化［35］。FAN B Y 等［34］研究證實(shí)，MSC外泌體含有多種miRNA，這些內(nèi)含的miRNA 可進(jìn)一步影響炎癥通路的激活，減輕DM 小鼠的炎性反應(yīng)，并促進(jìn)DPN 小鼠的神經(jīng)血管重塑和功能恢復(fù)?？梢?jiàn)，使用MSC 外泌體作為DPN患者的潛在治療方法具有廣泛前景。

雪旺細(xì)胞是包裹在周?chē)窠?jīng)纖維上的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，能通過(guò)分泌神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子促使受損的神經(jīng)元存活，以及促進(jìn)軸突的再生以調(diào)節(jié)周?chē)窠?jīng)功能。已有研究證實(shí)，來(lái)自健康雪旺細(xì)胞（SC-Exos）的外泌體可顯著增強(qiáng)坐骨神經(jīng)損傷模型大鼠受傷外周軸突的再生［36］。WANG L等［37］對(duì)采用SC-Exos治療的db／db小鼠進(jìn)行足底試驗(yàn)（熱潛伏期）和von Frey試驗(yàn)（機(jī)械潛伏期），結(jié)果發(fā)現(xiàn)db／db小鼠的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度和感覺(jué)神經(jīng)傳導(dǎo)速度顯著改善；同時(shí)發(fā)現(xiàn)，采用SC-Exos治療可使db／db小鼠脫髓鞘和軸突損傷顯著減少，髓鞘再生增加。DPN小鼠坐骨神經(jīng)組織中的許多miRNA（包括miR-21、27a、146a）水平顯著降低，而采用SC-Exo治療后，坐骨神經(jīng)組織中的miR-21、27a、146a水平顯著上升，說(shuō)明SC-Exo可能通過(guò)提高miRNA水平改善周?chē)窠?jīng)功能［37］。為研究SC-Exos對(duì)DRG神經(jīng)元軸突生長(zhǎng)的直接影響，WANG L等［37］進(jìn)行了體外實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)SC-Exos被DRG 軸突內(nèi)化，并促進(jìn)糖尿病DRG神經(jīng)元的神經(jīng)突生長(zhǎng)和雪旺細(xì)胞的遷移，說(shuō)明SC-Exo內(nèi)含有的miRNA 有助于SC-Exos促進(jìn)糖尿病DRG神經(jīng)元中的神經(jīng)突生長(zhǎng)和雪旺細(xì)胞遷移。通過(guò)該研究推測(cè)，SC-Exos可能通過(guò)升高保護(hù)性miRNA水平，發(fā)揮保護(hù)和／或逆轉(zhuǎn)受損的周?chē)窠?jīng)纖維作用。有必要開(kāi)展更多研究評(píng)估SC-Exo治療能否逆轉(zhuǎn)周?chē)窠?jīng)纖維損傷，并探索SC-Exo 治療DPN 的時(shí)間窗口。

以上研究證實(shí)，多種細(xì)胞來(lái)源的外泌體可通過(guò)抗炎、分泌神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子等途徑，使脫髓鞘、軸突損傷減少，軸突再生增加，進(jìn)而改善周?chē)窠?jīng)功能，而該作用可能是通過(guò)外泌體內(nèi)含有的多種miRNA 實(shí)現(xiàn)的。使用外泌體治療DPN 可能是有效的，以上研究為臨床治療提供了新思路，但需要更多研究評(píng)估其可行性。

3.2 中藥復(fù)方與單體

（1）糖絡(luò)寧 LI Y X 等［38］研究糖絡(luò)寧（黃芪、地黃、當(dāng)歸、狗脊、牛膝、木瓜、續(xù)斷、丹參）治療DPN大鼠的miRNA表達(dá)譜，分別比較DPN 大鼠和正常大鼠坐骨神經(jīng)miRNA表達(dá)譜，以及接受糖絡(luò)寧治療的DPN大鼠和未接受糖絡(luò)寧治療的DPN 大鼠的坐骨神經(jīng)miRNA表達(dá)譜，結(jié)果發(fā)現(xiàn)多個(gè)miRNA 水平顯著改變（上調(diào)或下調(diào)），對(duì)兩個(gè)結(jié)果分別進(jìn)行聚類(lèi)分析，發(fā)現(xiàn)基因均可清楚地聚為兩類(lèi)，并在2次分析的差異表達(dá)基因中觀察到19 個(gè)重疊基因，將接受糖絡(luò)寧治療的DPN大鼠和正常大鼠的這19個(gè)基因進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)糖絡(luò)寧可逆轉(zhuǎn)DPN 誘導(dǎo)的這19種miRNA 的變化，表明糖絡(luò)寧對(duì)DPN 的治療作用可能與miRNA 表達(dá)譜的改變有關(guān)。該研究通過(guò)進(jìn)一步的通路和基因分析，認(rèn)為糖絡(luò)寧可能通過(guò)作用于蓬亂蛋白1（DVL1）和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3（NTF3）基因影響Wnt和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子途徑［38］。此外，糖絡(luò)寧可通過(guò)影響定位、細(xì)胞質(zhì)和蛋白質(zhì)結(jié)合過(guò)程，改善DPN癥狀［38］。

張晨等［39］將糖絡(luò)寧（川牛膝、黃芪、狗脊、全蝎、丹參）作用于大鼠背根神經(jīng)元，以探究糖絡(luò)寧是否通過(guò)影響miR-211下調(diào)凋亡通路以保護(hù)背根神經(jīng)元細(xì)胞。該研究以新生大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞作為研究對(duì)象，將其分為正常組、高糖組、糖絡(luò)寧組、miR-211抑制劑陰性組和miR-211抑制劑組，結(jié)果顯示，與正常組比較，高糖組細(xì)胞凋亡率、miR-211 基因表達(dá)及蛋白激酶RNA樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶（PERK）、真核翻譯起始因子2α（eIF2α）、激活轉(zhuǎn)錄因子4（ATF4）、C／EBP環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子同源蛋白（CHOP）蛋白表達(dá)水平均較高，而與高糖組比較，糖絡(luò)寧組和miR-211抑制劑組細(xì)胞凋亡率、miR-211 基因表達(dá)及PERK、eIF2α、ATF4、CHOP蛋白表達(dá)水平均較低，由此認(rèn)為糖絡(luò)寧可能通過(guò)作用于miR-211下調(diào)凋亡通路，保護(hù)背根神經(jīng)元細(xì)胞，發(fā)揮治療DPN的作用［39］。

以上兩個(gè)研究中的糖絡(luò)寧藥物組成不同，但均證實(shí)糖絡(luò)寧可通過(guò)作用于miRNA 發(fā)揮治療DPN 的作用，且均從miRNA層面分析中藥復(fù)方治療DPN 的機(jī)制，為中藥復(fù)方治療DPN的有效性提供了依據(jù)。

（2）三七 三七皂苷R1是三七的主要生物活性成分之一，現(xiàn)代藥理學(xué)研究提示，其具有抗炎、抗氧化、抗凋亡作用和神經(jīng)保護(hù)特性［40］。WANG W W 等［41］研究三七皂苷R1 對(duì)DPN 的作用，通過(guò)高糖刺激RSC96細(xì)胞建立DPN的細(xì)胞模型，在DPN 細(xì)胞模型中發(fā)現(xiàn)細(xì)胞活力受到抑制，高糖可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，當(dāng)用三七皂苷R1預(yù)處理時(shí)，發(fā)現(xiàn)ROS減少，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抑制減弱。另外研究發(fā)現(xiàn)，高糖處理上調(diào)了miR-503的表達(dá)，而三七皂苷R1則顯著抑制miR-503的表達(dá)［41］。為探究三七皂苷R1細(xì)胞保護(hù)的機(jī)制，WANG W W等［41］重點(diǎn)研究了與DPN發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)的兩種信號(hào)通路（PI3K／AKT 和β-連環(huán)蛋白），結(jié)果顯示，高糖抑制PI3K和AKT磷酸化，并下調(diào)β-連環(huán)蛋白表達(dá)，然而三七皂苷R1預(yù)處理可改善高糖誘導(dǎo)的上述蛋白質(zhì)的改變。當(dāng)使用miR-503模擬物使miR-503過(guò)表達(dá)時(shí)，三七皂苷R1并沒(méi)有逆轉(zhuǎn)相應(yīng)改變［41］。因此該研究證明，三七皂苷R1能通過(guò)下調(diào)miR-503水平，在高糖水平下激活PI3K／AKT和β-連環(huán)蛋白信號(hào)傳導(dǎo)通路。三七皂苷R1在RSC96細(xì)胞中的神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)功能可能是通過(guò)其對(duì)miR-503表達(dá)的調(diào)節(jié)和激活下游信號(hào)傳導(dǎo)通路如PI3K／AKT和β-連環(huán)蛋白實(shí)現(xiàn)的。該研究為DPN的新治療策略提供了新思路。

中藥治療DPN效如桴鼓，具有對(duì)癥治療不可比擬的優(yōu)越性，越來(lái)越多的研究證實(shí)中藥治療的有效性。以上研究說(shuō)明部分中藥可能具有調(diào)節(jié)相關(guān)miRNA 水平的作用，通過(guò)miRNA 影響下游信號(hào)可營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)周?chē)窠?jīng)。

4 小結(jié)

現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)，多種miRNA 參與DPN 的發(fā)生發(fā)展，部分研究使用模擬物補(bǔ)充保護(hù)性miRNA 或抑制有害性miRNA，調(diào)節(jié)靶基因，改善DPN 癥狀，為DPN的預(yù)防和治療提供了潛在治療靶點(diǎn)和治療途徑，也豐富了治療思路，但miRNA 作為治療DPN 的方法的可能用途還需進(jìn)一步研究，藥物研發(fā)及臨床療效驗(yàn)證也需要時(shí)間。miRNA參與DPN 發(fā)病的機(jī)制復(fù)雜，且部分miRNA具有多個(gè)靶向位點(diǎn)，是否通過(guò)調(diào)節(jié)多種通路參與DPN的發(fā)病尚不明確，同時(shí)許多miRNA 參與DPN的機(jī)制尚未得到闡述，因此仍需要更多的研究進(jìn)行闡述和證實(shí)，為DPN 的預(yù)防、診斷、治療提供新思路。