布魯氏菌病患者外周血白細胞及血小板參數的變化及臨床意義

摘要：目的 研究布魯氏菌病患者外周血白細胞及血小板參數的變化及其特點，探討其臨床應用價值。方法 納入確診布魯氏菌病的患者90例，其中急性期59例，慢性期31例，另外選取同期40例健康人群為健康對照組。收集患者的臨床癥狀等基本資料；采用全自動血液分析儀檢測各組外周血白細胞計數、淋巴細胞計數、中性粒細胞計數、單核細胞計數、血小板計數、平均血小板體積（MPV）、血小板分布寬度（PDW）；采用流式細胞儀檢測外周血CD3+T、CD4+T及CD8+T細胞計數，計算患者的中性粒細胞/淋巴細胞比值（NLR）及血小板/淋巴細胞比值（PLR），分析各細胞參數的變化特點并分析各參數對布魯氏菌病的臨床診斷價值。結果 慢性期組的關節痛和脊柱炎占比高于急性期組（P＜0.05）；與健康對照組相比，急性期組的白細胞計數、中性粒細胞計數、血小板計數及NLR均降低，慢性期組MPV和PDW降低，而CD3+T細胞計數和單核細胞計數升高（P＜0.05）。有關節炎癥狀的急性期布病患者白細胞計數、淋巴細胞計數、CD3+T細胞計數和CD8+T細胞計數低于無關節炎的急性期布病患者，而PLR則升高（P＜0.05）。受試者工作特征（ROC）曲線分析結果顯示中性粒細胞計數和NLR水平對于急性期布魯氏菌病的ROC曲線下面積（AUC）分別為0.780和0.717，而CD3+T細胞計數對于診斷慢性期布魯氏菌病的AUC為0.748。在急性期患者中，CD3+T、CD8+T細胞計數及PLR水平對診斷關節炎的AUC分別為0.779、0.768、0.722。結論 急性期和慢性期布魯氏菌病患者外周血白細胞和血小板參數均有不同程度的改變，對于布魯氏菌病的診斷以及急性期布病患者關節炎的診斷有一定的臨床應用價值。

關鍵詞：布魯桿菌病；白細胞計數；血小板計數；關節炎；曲線下面積

中圖分類號：R516.7 文獻標志碼：A DOI：10.11958/20230779

Changes and clinical significance of white blood cell and platelet parameters of peripheral blood in Brucellosis patients

QIAO Kunyan1， LIU Weina1， ZHENG Xiaoya1， SU Rui1， YANG Yuejie2△

1 Tianjin Institute of Hepatology， Tianjin Second People's Hospital， Tianjin 300192， China;"2 Department of Infectious Disease， Tianjin Second People's Hospital

Corresponding Author E-mail： 765833720@qq.com

Abstract： Objective To study changes of white blood cell （WBC） and platelet parameters in peripheral blood of Brucellosis patients so as to explore the clinical significance. Methods A total of 90 patients with confirmed Brucellosis were included， including 59 in the acute stage and 31 in the chronic stage. In addition， 40 healthy people during the same period were selected as the healthy control group. Basic data such as clinical symptoms were collected. Total WBC count， lymphocyte count， neutrophil count， monocyte count， platelet count， mean platelet volume （MPV） and platelet distribution width （PDW） in peripheral blood were detected by automatic blood analyzer. The counts of CD3+T， CD4+T and CD8+T cells in peripheral blood were detected by flow cytometry. Neutrophil-lymphocyte ratio （NLR） and platelet/lymphocyte ratio （PLR） of patients were calculated. Changes of each cell parameter were analyzed and the clinical diagnostic value of each parameter for Brucellosis were analyzed. Results The proportion of arthralgia and spondylitis were higher in the chronic stage group than those in the acute stage group （P＜0.05）. Compared with the healthy control group， the total number of WBC， neutrophil count， platelet count and NLR were decreased in the acute stage group， and MPV and PDW were decreased in the chronic stage group， and CD3+T cell count and monocyte count were increased （P＜0.05）. White blood count， lymphocyte count， CD3+T cell count， and CD8+T cell count were lower in patients with acute Brucellosis with arthritic symptoms than those of patients without arthritis， while PLR was increased （P＜0.05）. Receiver operating characteristic （ROC） curve analysis showed that the area under the curve of neutrophil count and NLR level for acute Brucellosis was 0.780 and 0.717， respectively， while the area under the ROC curve of CD3+T cell count for chronic Brucellosis was 0.748. In acute stage patients， the area under ROC curve of CD3+T， CD8+T cell count and PLR level for the diagnosis of arthritis was 0.779， 0.768 and 0.722， respectively. Conclusion The indexes of WBC and platelet of peripheral blood in patients with acute and chronic human Brucellosis are changed abnormally， which has a certain reference value in diagnosis of human Brucellosis and arthritis in acute Brucellosis patients.

Key words： Brucellosis; leukocyte count; platelet count; arthritis; area under curve

布魯氏菌病（簡稱布病）是由布魯氏菌感染引起的流行范圍廣、嚴重危害人畜健康的傳染性疾病，其主要通過接觸感染的牛羊或其分泌物，食用生牛羊肉、奶制品等感染，臨床多以長期發熱、多汗、乏力、關節疼痛、肝脾腫大、淋巴結腫大等為特點，其癥狀繁多且無特異性，易延誤診斷及治療，可進入慢性感染期，亦可引起全身多個臟器損傷［1］。目前，外周血白細胞參數、血小板參數、血小板/淋巴細胞比值（platelet-lymphocyte ratio，PLR）、中性粒細胞/淋巴細胞比值（neutrophil-lymphocyte ratio，NLR）等在炎癥性疾病中的研究較多［2-4］。研究表明，NK細胞、T細胞的數量在布病中存在不同程度的變化［5］，但對于布病患者外周血白細胞及血小板參數變化的研究較少，而且由于布病癥狀無特異性，診斷依據較少，因此外周血各指標在布病輔助診斷中的應用價值有待進一步研究。本研究通過分析急性期及慢性期布病患者外周血白細胞參數、血小板參數及淋巴細胞亞群計數，探究其在布病中的應用價值，為布病的臨床診療提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2021年9月—2022年8月就診于天津市第二人民醫院的布病患者90例為研究對象，診斷標準均為2012版《布魯氏菌病診療指南》。包括急性期59例，男43例，女16例，年齡23～69歲，平均（51.34±11.84）歲；慢性期31例，男21例，女10例，年齡35～77歲，平均（55.35±9.79）歲。排除標準：（1）合并其他病原微生物感染。（2）腫瘤患者。（3）患有免疫系統相關疾病，包括糖尿病、白血病等。（4）患有慢性肝、腎疾病等影響免疫系統的疾病。所有患者在就診前均未使用過免疫調節劑、血細胞生長調節劑等影響外周血細胞比例及功能的藥物。另外納入同期40例健康人群作為健康對照組，男20例，女20例，年齡45～58歲，平均（51.80±4.47）歲。3組間年齡（χ2=3.522）及性別（χ2=5.633）差異無統計學意義。本研究經我院醫學倫理委員會審查通過（審批號：［2021］43號），所有入組患者均知情同意。

1.2 基本資料收集及外周血指標檢測 記錄患者性別、就診時年齡、臨床癥狀等基本資料。采集患者入組時的EDTA抗凝全血，采用全自動血液分析儀檢測外周血白細胞計數（WBC）、淋巴細胞計數（LYM）、中性粒細胞計數（NEU）、單核細胞計數（MONO）、血小板計數（PLT）、平均血小板體積（mean platelet volume，MPV）、血小板分布寬度（platelet distribution width，PDW）；采用流式細胞儀檢測外周血CD3+T、CD4+T及CD8+T細胞計數，計算患者的NLR及PLR。

1.3 統計學方法 采用SPSS 17.0軟件進行數據分析。正態分布計量資料以[[x] ±s

]表示，2組間比較采用獨立樣本t檢驗，3組間比較采用方差分析，組間多重比較采用Bonferroni法；非正態分布計量資料用M（P25，P75）表示，2組間比較采用Mann-Whitney U檢驗，3組間比較采用Kruskal-Wallis H檢驗，組間多重比較采用Bonferroni法；計數資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。采用受試者工作特征（ROC）曲線分析評價各檢測指標對于布病的診斷價值。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2組布病患者基本資料及臨床特征分析 2組布病患者主要表現包括發熱、乏力、關節痛、腰痛、肌肉酸痛、大汗、厭食、肝腫大、脾腫大、脊柱炎和關節炎等。其中發熱、乏力、肌肉酸痛癥狀所占比例較高，慢性期組的關節痛和脊柱炎占比高于急性期組（P＜0.05），見表1。

2.2 布魯氏菌病患者與健康對照外周血各指標比較 與健康對照組相比，急性期組白細胞計數、中性粒細胞計數、血小板計數及NLR均降低，慢性期組MPV和PDW降低，而CD3+T細胞和單核細胞計數升高（P＜0.05）。外周血各指標在2組布病患者之間差異無統計學意義，見表2。

2.3 有無關節炎布病患者外周血各指標比較 據有無關節炎癥狀將急性期組和慢性期組分別分為有關節炎組和無關節炎組。在急性期患者中，與無關節炎組比，有關節炎組白細胞計數、淋巴細胞計數、CD3+T和CD8+T細胞計數均降低，而PLR升高（P＜0.05），見表3。在慢性期患者中有關節炎及無關節炎組間外周血各指標差異均無統計學意義，見表4。

2.4 外周血各指標對布病的診斷價值 ROC曲線顯示，白細胞計數、中性粒細胞計數、血小板計數、PDW、CD3+T細胞計數及NLR對診斷急性期布病的曲線下面積（AUC）分別為0.707、0.780、0.640、0.622、0.635、0.717，見表5、圖1。中性粒細胞計數、單核細胞計數、MPV、PDW、CD3+T細胞計數、CD8+T細胞計數及NLR診斷慢性期布魯氏菌病的AUC分別為0.659、0.703、0.681、0.693、0.748、0.654、0.669，見表6、圖2。對于急性期布魯氏菌病患者而言，白細胞計數、淋巴細胞計數、CD3+T細胞計數、CD8+T細胞計數和PLR診斷關節炎的AUC分別為0.672、0.794、0.779、0.768、0.722，見表7、圖3。

3 討論

據中國疾病預防控制中心報道，2021年全國共報道人布病69 767例，較2020年增長47.7%［6］。布魯氏菌可通過呼吸道、胃腸道及破損皮膚黏膜等途徑感染人體，造成人體發熱，同時可侵犯全身各器官及系統［1］。布病臨床表現復雜多樣，個體之間差異性較大且病情嚴重程度不一。急性期病例臨床特征主要表現為發熱、乏力、肝脾腫大等，而慢性期病例多表現骨、關節等的損害［7］。本研究收集的病例中，臨床特征也以發熱、乏力、肌肉酸痛、肝脾腫大、關節炎等為主，其中慢性期患者的關節痛和脊柱炎的比例顯著高于急性期患者，表明了隨著病程的延長，布魯氏菌對于人體關節系統的損害較重。因此，針對布魯氏菌病具有診療價值指標的研究十分必要。

外周血細胞參數在炎癥反應中的指示作用受到越來越多研究者的關注［3，8-9］。有研究報道了MPV及PLR在兒童布病中的診斷價值［10］，以及T淋巴細胞亞群、各細胞因子在其診斷中的應用價值等［11-12］。本研究主要分析了急性期及慢性期布病患者外周血白細胞及血小板各指標參數變化特點，以探究其臨床意義。白細胞是機體抵抗病原體入侵的重要防線，本研究結果發現急性期組白細胞計數及中性粒細胞計數均低于健康對照組，與以往研究結果一致［13］，也進一步表明白細胞計數作為炎性指標在布病中的應用價值。同時，由于中性粒細胞計數降低，其與淋巴細胞計數的比值在急性期布病患者中也降低。在慢性期布病患者中，其結果與急性期患者有所不同。血小板相關參數包括MPV、PDW在慢性期組患者中變化顯著，表明隨著布魯氏菌感染病程的延長及病情的加劇，布魯氏菌進一步侵襲肝、脾、骨髓等造成血小板參數的異常［14］。同時單核細胞計數及CD3+T淋巴細胞亞群在慢性組患者中升高。T淋巴細胞及單核細胞在殺傷靶細胞及抗感染中發揮重要作用，在布病患者中CD3+T細胞及單核細胞計數的升高也表明了機體對布魯氏菌感染的免疫應答反應，其增強了機體的抗感染水平。但是本研究中所涉及的外周血白細胞及血小板相關參數在急性期及慢性期布病患者之間差異無統計學意義。上述結果表明外周血白細胞參數包括白細胞計數、中性粒細胞及單核細胞計數，血小板參數包括MPV、PDW以及CD3+T淋巴細胞在布魯氏菌病的輔助診斷中有一定的臨床價值，但是其在急性期和慢性期布病的鑒別診斷中臨床意義不大。

關節炎是布魯氏菌感染常見的臨床癥狀之一，本研究對布病患者按照有無關節炎癥狀進行分組，分析外周血各指標的變化趨勢。淋巴細胞作為重要的免疫細胞，在布魯氏菌感染后的細胞免疫應答中發揮重要作用。本研究結果顯示，有關節炎癥狀的急性期布病患者CD3+T細胞和CD8+T細胞顯著低于無關節炎癥狀的患者，這可能由于機體免疫功能紊亂，T細胞亞群失衡，無法有效抵御病原體侵襲導致病情的進展，而病情進展又進一步導致免疫功能紊亂［15］。關于機體感染布魯氏菌后免疫系統變化及各免疫細胞在其中發揮的作用也將在以后的研究中進一步探索。同時，PLR作為炎性指標，其水平在有關節炎的患者中顯著升高，NLR水平在2組間則無顯著差異，這與以往在兒童布魯氏菌病患者中的結果不完全一致［10］，可能由于年齡、研究對象、病程等的差異導致，因此對于布病患者外周血各參數變化的充分研究是十分必要的。

此外，本研究通過ROC曲線分析了各指標對于布魯氏菌病臨床診斷的應用價值。外周血各細胞參數對布魯氏菌病的診斷雖無特異性，但其價值對于臨床診療仍有參考意義。中性粒細胞計數和NLR的AUC均大于0.7，對于急性期布病的診斷價值高于其他參數。而對于慢性期布病而言，CD3+T細胞計數的診斷價值高于其他參數。在急性期患者中，淋巴細胞和PLR水平對關節炎的診斷價值較高。

綜上，本研究結果表明外周血白細胞和血小板各參數在急性期和慢性期布病患者中可發生不同程度的異常改變，其中中性粒細胞計數、NLR、PLR、CD3+T細胞計數、CD8+T細胞計數對于布魯氏菌病的輔助診斷具有較高的臨床參考價值。

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基金項目：天津市醫學重點學科（專科）建設資助項目（TJYXZDXK-059B）

作者單位：1天津市第二人民醫院，天津市肝病醫學研究所（郵編300192）；2天津市第二人民醫院感染科

作者簡介：喬坤艷（1987），女，助理研究員，主要從事感染病分子及免疫相關研究。E-mail：qiaokunyan@163.com

通信作者 E-mail：765833720@qq.com

（本文編輯 李志蕓）