武漢地區(qū)草地貪夜蛾對常用殺蟲劑的敏感性

摘要：為明確入侵武漢地區(qū)草地貪夜蛾對農(nóng)業(yè)農(nóng)村部推薦使用的6種主打防控藥劑的敏感性，采用浸葉法測定草地貪夜蛾田間種群和室內對照種群3齡幼蟲對甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（甲維鹽）、乙基多殺菌素、氯蟲苯甲酰胺、4氯蟲酰胺、蟲螨腈、茚蟲威等6種殺蟲劑的敏感性差異。結果表明，草地貪夜蛾田間種群對6種殺蟲劑的敏感性依次為甲維鹽＞乙基多殺菌素＞氯蟲苯甲酰胺＞4氯蟲酰胺＞蟲螨腈＞茚蟲威。其中對甲維鹽和乙基多殺菌素的敏感性較高，藥劑處理48 h后LC50值分別為0.035、0.118 mg/L；其次為氯蟲苯甲酰胺和4氯蟲酰胺，LC50值分別為4.006、5.015 mg/L；對蟲螨腈和茚蟲威的敏感性較低，LC50值分別為10.434、71.403 mg/L。6種藥劑對田間種群3齡幼蟲的LC50值分別是室內對照種群的1.40、1.55、3.88、3.51、4.94、1.50倍。說明武漢地區(qū)草地貪夜蛾種群對甲維鹽和2基多殺菌素較敏感，對蟲螨腈、氯蟲苯甲酰胺和4氯酰胺的抗性水平有上升趨勢。研究結果對于在湖北武漢地區(qū)針對草地貪夜蛾制定合理的藥劑輪換和藥劑復配策略，以延長農(nóng)藥的田間使用壽命，并指導科學防控具有實踐意義。

關鍵詞：草地貪夜蛾；殺蟲劑；敏感性；抗藥性；武漢地區(qū)

中圖分類號：S433.4；S482.3" 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2024）05-0146-05

草地貪夜蛾又稱秋黏蟲，是聯(lián)合國糧農(nóng)組織全球預警的跨國界遷飛性重大農(nóng)業(yè)害蟲［1］。草地貪夜蛾具有適生區(qū)域廣、遷飛速度快、繁殖能力強和防控難度大等特點，可危害玉米、水稻、小麥、甘蔗、大豆等350種農(nóng)作物。該蟲原分布于美洲熱帶和亞熱帶地區(qū)，自2019年1月從緬甸遷入我國云南省江城縣后，由南向北快速擴散蔓延［2-3］，對我國多種農(nóng)作物的安全生產(chǎn)造成重大威脅［4-7］。

化學防控具有速效、便捷、不受地域季節(jié)影響的特點，是當前應急防控草地貪夜蛾暴發(fā)性危害的主要手段［8-11］，但殺蟲劑的長期不合理使用必將加速草里貪夜蛾抗藥性的發(fā)生和發(fā)展［12］。目前，草地貪夜蛾已對40多種殺蟲劑有效成分產(chǎn)生了不同程度的抗性，包括有機磷類、擬除蟲菊酯類和氨基甲酸酯類等傳統(tǒng)殺蟲劑，以及雙酰胺類、苯甲酰脲類和乙基多殺菌素等新型殺蟲劑［13-17］。草地貪夜蛾遷飛能力強、繁殖能力高和易產(chǎn)生抗藥性的特點極有利于其抗性基因的擴散［18-19］，因此加強我國草地貪夜蛾的抗藥性監(jiān)測及抗性治理對于其有效防控尤為重要。

2019年5月8日在湖北省仙桃市首次發(fā)現(xiàn)草地貪夜蛾，短短2個月內迅速擴散至全省17個地市（州、區(qū)），至2019年10月底在湖北省玉米主產(chǎn)區(qū)累計發(fā)生面積達10.08萬hm2［20］。武漢地區(qū)的玉米產(chǎn)區(qū)不僅是草地貪夜蛾的適生區(qū)，也是其在我國東部南北往返遷飛的必經(jīng)之地和中轉區(qū)［7，21］。武漢地區(qū)的玉米播種面積約13.33萬hm2/年，草地貪夜蛾對武漢地區(qū)夏秋季鮮食玉米的危害相對較重，且存在世代重疊現(xiàn)象［20］。在武漢地區(qū)夏秋季玉米種植區(qū)，經(jīng)常出現(xiàn)連續(xù)多次施用1種或同類型殺蟲劑防控草地貪夜蛾的現(xiàn)象，因此抗藥性產(chǎn)生的風險不容忽視。本研究通過測定入侵武漢地區(qū)的草地貪夜蛾種群對農(nóng)業(yè)農(nóng)村部推薦使用的6種首選防控藥劑的敏感性，以期掌握草地貪夜蛾對區(qū)域性應急防控藥劑的敏感性變化，為該蟲的抗藥性監(jiān)測和抗性治理提供理論依據(jù)。研究結果對于在武漢地區(qū)制定合理的藥劑復配和輪換用藥策略，以延長農(nóng)藥的田間使用壽命具有實踐意義。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

（1）供試草地貪夜蛾對照種群。2020年5月采自武漢市農(nóng)業(yè)科學院蔬菜研究所（114°47′E，30°71′N）未施用過化學農(nóng)藥的玉米試驗基地，攜至實驗室內用未接觸任何農(nóng)藥的4～5葉期幼嫩玉米葉群體飼養(yǎng)。幼蟲化蛹后放至尼龍網(wǎng)紗內（長×寬×高= 30 cm×30 cm×30 cm），羽化后在籠內放置新鮮的玉米葉片供雌蟲產(chǎn)卵，每天飼喂5%紫云英蜂蜜水。飼養(yǎng)條件：光—暗周期為14 h—10 h，溫度為（27±1） ℃，相對濕度為70%～80%。繼代繁殖12代以上，隨機選取生長發(fā)育一致的3齡幼蟲供試。

（2）供試草地貪夜蛾田間種群。2021年10月于武漢市農(nóng)業(yè)科學院受害玉米田采集老熟幼蟲和蛹，攜至室內按照上述方法飼養(yǎng)，隨機選取生長發(fā)育一致的F1代3齡幼蟲供試。

1.2 供試藥劑

75%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（甲維鹽）原藥，海利爾藥業(yè)集團股份有限公司；60 g/L乙基多殺菌素懸浮劑，科迪華農(nóng)業(yè)科技有限責任公司；95.3%氯蟲苯甲酰胺原藥，陜西先農(nóng)生物科技有限公司；98%蟲螨腈原藥，海利爾藥業(yè)集團股份有限公司；90%茚蟲威原藥，海利爾藥業(yè)集團股份有限公司；95%4氯蟲酰胺原藥，沈陽科創(chuàng)化學品有限公司；丙酮和N，N-二甲基甲酰胺，分析純，國藥集團化學試劑有限公司；Triton X-100，阿拉丁試劑有限公司。

1.3 生物測定方法

采用浸葉法［22-23］測定6種藥劑對草地貪夜蛾3齡幼蟲的生物活性。先將原藥溶解于1%丙酮或N，N-二甲基甲酰胺溶液中配制成母液，再用體積分數(shù)為0.05%的Triton X-100水溶液，按等比法分別稀釋成5～7個濃度梯度備用，制劑直接配制成不同濃度梯度藥液備用。于玉米拔節(jié)期采摘未施用任何農(nóng)藥且不含抗蟲基因的葉片，洗凈晾干后剪成5～8 cm 的長方形葉段，分別在不同濃度梯度的藥液中浸泡10 s，取出后自然晾干；放入底層鋪有 2 mL 1.5%瓊脂的12孔細胞培養(yǎng)板內，接入 1頭/孔 經(jīng)4～6 h饑餓處理且發(fā)育一致的3齡幼蟲。以體積分數(shù)為0.05%的Triton X-100水溶液作為對照，每個處理重復3次，每個重復12頭幼蟲。藥劑處理后的試蟲置于上述正常飼養(yǎng)環(huán)境中，分別于48、72 h后檢查并記錄幼蟲的存活情況。幼蟲死亡標準為以毛筆輕觸蟲體無反應，或出現(xiàn)畸形、僵縮、不能正常爬行等中毒癥狀。按照公式（1）、公式（2）計算試蟲的死亡率和校正死亡率。參照Wang等的方法［24］，分別計算48 h和72 h的濃度-死亡率的回歸方程。

1.4 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)經(jīng)Excel處理后，使用PASW Statistics 22.0對校正死亡率進行單因素方差分析（ANOVA）和差異顯著性檢驗（LSD）。使用PASW Statistics 22.0的Log-Probit模型擬合毒力回歸方程，并計算斜率值、致死20%試蟲的藥劑濃度（LC20）、半數(shù)致死濃度（LC50）、致死90%試蟲的藥劑濃度（LC90）值及其95%置信限和卡方值（χ2）等。抗性倍數(shù)以田間種群LC50值除以室內對照種群的LC50值計算所得。

2 結果與分析

2.1 6種藥劑對武漢地區(qū)草地貪夜蛾幼蟲的毒力

6種藥劑對采自湖北省武漢地區(qū)草地貪夜蛾3齡幼蟲的室內毒力測定結果見表1、表2。藥后 48 h，甲維鹽、乙基多殺菌素、氯蟲苯甲酰胺、4氯蟲酰胺、蟲螨腈和茚蟲威對室內對照種群3齡幼蟲的LC50值分別為0.025、0.076、1.032、1.427、2.112、47.638 mg/L，6種藥劑對田間種群3齡幼蟲的LC50值分別為0.035、0.118、4.006、5.015、10.434、71.403 mg/L。說明甲維鹽、乙基多殺菌素、氯蟲苯甲酰胺和4氯蟲酰胺對草地貪夜蛾3齡幼蟲均具有較好的殺蟲活性；蟲螨腈和茚蟲威的毒力作用相對較低，對田間種群3齡幼蟲的LC50值分別達到甲維鹽的298倍和2 040倍。

隨著藥劑處理時間延長至72 h，藥劑對室內對照種群和田間種群幼蟲的LC20、LC50和LC90值總體上降低，說明這6種藥劑在處理后48～72 h持續(xù)發(fā)揮毒力作用，相同幼蟲死亡率下的致死濃度值依次為甲維鹽lt;乙基多殺菌素lt;氯蟲苯甲酰胺、4氯蟲酰胺lt;蟲螨腈lt;茚蟲威。藥劑濃度（對數(shù)轉換）與幼蟲死亡率（概率單位）的線性回歸直線見圖1，所有處理的線性回歸相關性系數(shù)范圍為0.953～0.998。

2.2 武漢地區(qū)草地貪夜蛾對6種殺蟲劑的抗藥性

武漢地區(qū)草地貪夜蛾的田間種群對6種殺蟲劑的抗藥性監(jiān)測結果見圖2。藥劑處理后48 h，蟲螨腈、氯蟲苯甲酰胺和4氯蟲酰胺對田間種群3齡幼蟲的LC50值，是室內對照種群的倍數(shù)較高，分別達4.94、3.88、3.51倍，其次為乙基多殺菌素、茚蟲威、甲維鹽（1.55、1.50、1.40倍）。說明武漢地區(qū)草地貪夜蛾種群對甲維鹽、茚蟲威和乙基多殺菌素較敏感，對蟲螨腈、氯蟲苯甲酰胺和4氯蟲酰胺的抗性水平呈上升趨勢。

3 結論與討論

本研究測定了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部推薦使用的6種主打防治藥劑對武漢地區(qū)草地貪夜蛾田間種群的敏感性，結果表明，入侵武漢地區(qū)的草地貪夜蛾田間種群對6種供試殺蟲劑均仍較敏感。敏感性依次為甲維鹽＞乙基多殺菌素＞氯蟲苯甲酰胺＞4氯蟲酰胺＞蟲螨腈＞茚蟲威；武漢地區(qū)草地貪夜蛾對甲維鹽和乙基多殺菌素敏感性較高，對蟲螨腈、氯蟲苯甲酰胺和4氯蟲酰胺的抗性水平呈上升趨勢。這與我國報道的“甲維鹽、氯蟲苯甲酰胺、乙基多殺菌素和4氯蟲酰胺均具有較強殺蟲活性”的研究結果［10，25-30］基本一致。說明甲維鹽、乙基多殺菌素、氯蟲苯甲酰胺和4氯蟲酰胺可作為推薦藥劑在武漢地區(qū)草地貪夜蛾防治中使用。

化學防治是草地貪夜蛾應急防控的主要手段，然而草地貪夜蛾危害程度和殺蟲劑使用頻率的不同導致草地貪夜蛾對藥劑的敏感性存在地域性差異［28］。而短期內在田間大量使用同一類殺蟲劑，勢必增加殺蟲劑對靶標害蟲的選擇壓力，帶來較大的抗藥性風險。

甲維鹽屬大環(huán)內酯類殺蟲劑，對草地貪夜蛾幼蟲的LC50值在0.011 9～0.090 0 mg/L之間［10，26，31］，本研究中甲維鹽對武漢地區(qū)田間種群的LC50為0.035 mg/L，表現(xiàn)出優(yōu)異的毒殺作用，但由于甲維鹽存在因易光解導致持效期短的問題［31］，可考慮從延長持效期的角度（如制備緩釋劑型或與持效期長的藥劑復配劑等）開展田間防治。

乙基多殺菌素屬煙堿型乙酰膽堿受體的變構調節(jié)劑，對入侵我國的草地貪夜蛾表現(xiàn)出較高的活性和良好的防效，并進行了大面積推廣［10，27-29］。本研究結果顯示，乙基多殺菌素對武漢地區(qū)草地貪夜蛾表現(xiàn)出較好的速效性和優(yōu)異的殺蟲活性，與前期研究［28-29，33］結論一致。

雙酰胺類殺蟲劑廣泛應用于草地貪夜蛾的防治中［10，34］。本研究結果顯示，草地貪夜蛾對氯蟲苯甲酰胺、4氯蟲酰胺均較敏感，其LC50分別為4.006、5.015 mg/L，與先前的報道［28，35］基本相符。但草地貪夜蛾已對該類藥劑氯蟲苯甲酰胺產(chǎn)生了一定的抗性［16，36］，因此需注意與其他藥劑交替輪換使用。

武漢地區(qū)草地貪夜蛾田間種群對蟲螨腈、茚蟲威的敏感性相對較低，LC50值分別為10.434、71.403 mg/L，這可能是草地貪夜蛾在北遷至武漢地區(qū)的過程中受到了蟲螨腈和茚蟲威的“篩選”，導致其敏感性略低于其他藥劑［37-38］。蟲螨腈對廣州地區(qū)草地貪夜蛾的殺蟲活性良好，藥劑處理72 h后，對2齡幼蟲的致死率為93.3%（10 mg/L）和100%（20 mg/L）［38］。區(qū)域性草地貪夜蛾危害程度及殺蟲劑使用強度不同，這是導致茚蟲威在湖北地區(qū)不同種群間的存在敏感性差異的原因［28］。

湖北省玉米產(chǎn)區(qū)是草地貪夜蛾從華南越冬區(qū)遷往黃淮海玉米主產(chǎn)區(qū)的重要遷飛過渡帶［3，7，20-21］，這就決定了入侵武漢地區(qū)草地貪夜蛾復雜多樣的蟲源性質，因此掌握武漢地區(qū)不同草地貪夜蛾遷入種群的抗藥性動態(tài)，是開展其精準防控和抗藥性治理的前提。本研究結果明確了入侵武漢地區(qū)草地貪夜蛾田間種群對常用應急防控藥劑的敏感性變化，為其抗藥性監(jiān)測及抗性治理提供了理論依據(jù)和基礎資料，對于在武漢地區(qū)制定合理的殺蟲劑復配和輪換用藥策略，以延長殺蟲劑的田間使用壽命具有實踐意義。

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