無防腐劑復方托吡卡胺滴眼液的兔散瞳效果實驗

張志剛，趙 寅，盛小莉，吳文娟，鄭 煒

（匯禹遠和< 海南> 藥業有限公司，海南 澄邁 571900）

屈光不正是影響視力發育的重要因素，屈光檢查前一般需散瞳驗光。復方托吡卡胺滴眼液含托吡卡胺與鹽酸去氧腎上腺素，臨床主要用于以診斷及治療為目的的散瞳及調節麻痹，其作用迅速，藥效維持時間短［1］；且可聯合其他藥物治療假性近視，能有效改善視力和眼調節幅度［2］。復方托吡卡胺滴眼液（商品名美多麗，即參比制劑）含防腐劑苯扎氯銨，長期使用可引起變態反應性結膜炎、視力減退、接觸性皮炎等不良反應［3］。本研究中對比分析了不含防腐劑的復方托吡卡胺滴眼液（受試制劑）與參比制劑對實驗兔的散瞳效果，為評價二者藥物效應動力學（簡稱藥效學）的一致性提供參考。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器、試藥與動物

儀器：HL-GTC 型兔瞳孔尺（北京合力科創科技發展有限公司）；ES - 8000H 型電子天平（長沙湘平科技發展有限公司，精度為0.1 g）；KJ5S1 型手持裂隙燈顯微鏡（蘇州康捷醫療股份有限公司）。

試藥：受試制劑（天津金耀集團河北永光制藥有限公司，規格為每瓶0.4 mL∶托吡卡胺2 mg∶鹽酸去氧腎上腺素2 mg，批號為Y0542301）；參比制劑（Santen Pharmaceutical Co.，Ltd. Shiga Plant，規格為每瓶10 mL∶托吡卡胺50 mg∶鹽酸去氧腎上腺素50 mg，批號為MP2250）；0.9%氯化鈉注射液（湖南康源制藥有限公司，批號為22101901D）。

動物：普通級新西蘭兔，雌雄各半，體質量2.4～3.4 kg，購于湖南太平生物科技有限公司，實驗動物生產許可證號SCXK（湘）2020-0005，實驗動物質量合格證號430730231100024282，飼養于湖南普瑞瑪藥物研究中心有限公司的普通環境動物實驗室E區，實驗動物使用許可證號SYXK（湘）2020-0015。本研究經湖南普瑞瑪藥物研究中心有限公司實驗動物管理倫理委員會批準［審批號IACUC-2023（2）004］。

1.2 分組與給藥

取實驗兔30只，按體質量隨機分為空白對照組（予等體積0.9%氯化鈉注射液），參比制劑組（予參比制劑50 μL），受試制劑組（予受試制劑50 μL），各10只。各組實驗兔單眼均予相應藥物或0.9%氯化鈉注射液1次。

1.3 觀察指標

分別于給藥后0（即給藥前），0.25，0.5，1，2，4，8，12，24 h 采用兔瞳孔尺檢測實驗兔的雙眼瞳孔最大直徑［4］，計算給藥前后的最大直徑差；測量雙眼正向（0°、90°）的軸線直徑A1和B1及斜向（45°、135°）的軸線直徑A2和B2，通過公式S=π（A1×B1+A2×B2）/8 計算瞳孔面積［5］。

1.4 統計學處理

采用SPSS 23.0 統計學軟件分析。計量資料行正態性和方差齊性檢驗。若滿足正態性，則采用單因素方差分析，并根據方差齊性情況行LSD + Dunnet-t檢驗或Tamhane's T2 檢驗；若不滿足正態性，則行Kruskal -Wallis 檢驗和Mann - WhitneyU檢驗。P< 0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

與空白對照組比較，參比制劑組與受試制劑組實驗兔給藥后除24 h 外其余時間點的瞳孔最大直徑差均顯著增大（P< 0.01），給藥后24 h 基本恢復正常；參比制劑組給藥后各時間點、受試制劑組實驗兔給藥后除24 h 外的其余時間點瞳孔面積均顯著增大（P<0.05 或P<0.01）。與參比制劑組比較，受試制劑組實驗兔給藥后各時間點的瞳孔最大直徑差及瞳孔面積均無顯著差異（P>0.05）。詳見表1、圖1。

a. 受試制劑組 b. 參比制劑組 c. 空白對照組A. 瞳孔直徑（部分） B. 瞳孔面積（部分）圖1 實驗兔瞳孔a.Test preparation group b.Reference preparation group c.Blank control groupA.Pupil diameter（partial） B.Pupil area（partial）Fig.1 Pupils of experimental rabbits

表1 各組實驗兔瞳孔最大直徑差及面積比較（±s，n=20）Tab.1 Comparison of difference in maximum pupil diameter and pupil area in each group（±s，n = 20）

表1 各組實驗兔瞳孔最大直徑差及面積比較（±s，n=20）Tab.1 Comparison of difference in maximum pupil diameter and pupil area in each group（±s，n = 20）

注：與空白對照組比較，*P < 0.05，**P < 0.01。Note：Compared with those in the blank control group，*P < 0.05，**P < 0.01.

給藥后時間點0 h 0.25 h 0.5 h 1 h 2 h 4 h 8 h 12 h 24 h瞳孔最大直徑差（mm）空白對照組0.0±0.8 0.1±0.6 0.2±0.8 0.3±0.7 0.2±0.5 0.1±0.7 0.1±0.8 0.1±0.6參比制劑組2.6±0.9**2.8±0.8**3.5±0.8**2.8±0.9**2.6±0.7**2.1±0.5**1.4±0.7**0.3±0.9受試制劑組2.4±0.7**2.7±0.7**3.3±1.0**3.0±1.2**2.5±0.8**2.0±0.9**1.5±0.8**0.4±0.8瞳孔面積（mm2）空白對照組22.9±3.9 22.5±4.3 22.3±4.3 22.7±3.5 23.1±4.1 22.3±3.3 22.1±4.8 22.2±3.8 20.9±4.2參比制劑組22.7±2.5 45.8±4.8**47.0±6.8**53.0±7.6**46.1±8.9**43.8±7.2**38.6±4.4**31.4±7.0**24.3±4.3*受試制劑組22.3±2.8 43.5±5.0**44.6±5.6**48.4±6.8**47.4±8.9**44.0±6.3**38.2±9.1**30.1±5.1**23.5±4.4

3 討論

近年來，近視發病率逐漸升高，且低齡化趨勢明顯［6-10］。矯正屈光不正的方法包括佩戴框架眼鏡、角膜塑形鏡、軟性角膜接觸鏡等，但效果依賴于屈光檢查的精準度［11-12］。散瞳是眼科手術前及屈光檢查前的重要準備工作，會直接影響手術質量；在臨床實踐中，部分患者的術前散瞳效果欠佳，一定程度上增加了手術風險［13］，故需根據患者的病情，科學選擇合適的散瞳藥物。與硫酸阿托品滴眼液、鹽酸環噴托酯滴眼液等散瞳藥物相比，復方托吡卡胺起效迅速、恢復快，但參比制劑含防腐劑，長期使用會引起眼表不良反應［14-15］，故需開發不含防腐劑且與參比制劑等效的散瞳藥物。

本研究中，受試制劑不含防腐劑，裝量由10 mL 調為0.4 mL，可避免多人多次使用，降低眼用制劑反復開啟帶來的微生物污染風險。結果表明，與空白對照組比較，受試制劑組與參比制劑組實驗兔給藥后除24 h 外其余時間點的瞳孔最大直徑差均顯著增大，且參比制劑組給藥后各時間點、受試制劑組除給藥后24 h 外的其余時間點的瞳孔面積均顯著增大；散瞳起效時間均為給藥后0.25 h，藥效均在給藥后1 h達峰值，且瞳孔面積在該時間點的差異不顯著（P= 0.085）；受試制劑組給藥后各時間點的瞳孔最大直徑差和瞳孔面積與參比制劑組比較均無顯著差異。

綜上所述，復方托吡卡胺滴眼液受試制劑與參比制劑均能發揮增大實驗兔的瞳孔最大直徑差和瞳孔面積的作用，表明二者的散瞳效果基本一致，可為其藥效學研究提供數據支持。