槐杞黃顆粒聯合纖維支氣管鏡治療兒童肺炎支原體肺炎的臨床療效及對患兒炎癥因子、免疫功能的影響

賈曉丹，劉陽*，陳樸，宋哲

肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae，MP）是介于細菌和病毒之間可實現自我繁殖的無細胞壁原核微生物，可引發呼吸系統病變［1］。由于兒童自身免疫功能尚未發育完全，更易受到肺炎支原體的感染與攻擊，臨床表現為咳嗽、發熱、咳痰等癥狀，若治療不當，易進展為重癥肺炎并引發多種肺外并發癥［2-3］。纖維支氣管鏡（fiberoptic bronchoscopy，FOB）作為一種具備圖像傳輸功能的導光器械，已被廣泛用于治療兒童肺炎支原體肺炎（Mycoplasma pneumoniaepneumonia，MPP），其可及時清除黏液栓，解除氣道阻塞，減少后遺癥的發生［4］。然而FOB 對于氣管黏膜的修復作用有限，部分支氣管形成氣道重塑導致支氣管改變、患兒轉歸較差［5］。因此，尋求一種有效且安全的治療方式對于提高患兒的臨床療效及預后具有重要意義。槐杞黃顆粒的主要成分為槐耳菌質、枸杞子、黃精，可益氣養陰，具有增強機體免疫力、改善微循環等作用［6］。研究表明［7-8］，槐杞黃顆粒聯合丙種球蛋白或大環內酯類藥物等治療MPP 患兒臨床療效較好，可有效改善患兒的臨床癥狀。MPP 可造成多種炎癥反應并引發某些免疫應答，如趨化因子白介素-8（interleukin-8，IL-8），促炎性細胞因子白介素-17（interleukin-17，IL-17）， 模式識別受體Toll 樣 受 體2（Toll-like receptor 2，TLR2），以肺局部炎癥侵犯明顯，而外周血循環炎癥及免疫因子變化幅度較小，故研究肺泡灌洗液內炎癥、免疫因子變化明確患兒肺局部炎癥浸潤狀況。目前，作者尚未見將槐杞黃顆粒聯合FOB 治療兒童MPP的臨床研究。基于此，本研究首次將槐杞黃顆粒聯合FOB 治療兒童MPP，探討其臨床療效，并記錄肺泡灌洗液 IL-8、IL-17、TLR2 水平變化情況，以期為臨床治療MPP 提供參考。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020 年6 月～2022 年7 月期間于某院治療的90 例MPP 患兒作為研究對象，采用隨機數字表法分為FOB 組和聯合組，每組45 例。FOB 組：男性29 例，女性16 例；年齡4～12 歲，平均年齡（5.51±1.77）歲；病程3～9天，平均病程（5.04±0.68）天。聯合組：男性26 例，女性19 例；年齡2～12 歲，平均年齡（5.57±1.31）歲；病程2～10 天，平均病程（5.11±0.92）天。兩組患兒性別、年齡、病程等一般資料比較均無統計學差異（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準。所有患兒家屬均知情同意本研究。

納入標準：①符合《諸福棠實用兒科學》（第8 版）［9］中MPP 相關診斷標準者：有發熱、干咳、乏力臨床癥狀；影像學提示有肺部炎癥；單份血清MP-IgM 抗體滴度≥1：160。②年齡2～12 歲者。③FOB 均發現1 個及以上肺段支氣管管腔內黏液栓形成者。④支氣管肺泡灌洗液中MP-DNA 熒光定量PCR 檢測陽性者。

排除標準：①伴隨如慢性粒細胞減少癥、IgA缺乏癥等原發性免疫缺陷疾病，更易感染、過敏者。②合并先天性心、肝、肺、腎等機體重要器官嚴重不全者。③對本研究藥物過敏者。

1.2 治療方法

兩組患兒入院后均給予祛痰、止咳、退熱、補液等常規對癥治療。FOB 組患者給予FOB 治療：根據患兒年齡、體重選擇合適型號的OLYMPUS纖維支氣管鏡［日本潘泰克斯（賓得）公司］，采用咪達唑侖注射液（江蘇九旭藥業有限公司，國藥準字H20153019，規格3ml：15mg）+鹽酸利多卡因注射液（北京益民藥業有限公司，國藥準字H11020322，規格2ml：40mg）局麻，經鼻行FOB 介入治療。依次觀察患兒會厭、聲門、氣管隆突及各葉、段支氣管，吸出病變肺段的黏液栓。若黏液栓與支氣管管壁粘合緊密，可采用細胞刷刷檢或活檢鉗鉗夾治療。使用37℃氯化鈉注射液（上海百特醫療用品有限公司，國藥準字H19994066，規格250ml：2.25g）0.5ml/kg 對黏液栓阻塞部位進行灌洗。最后給予鹽酸氨溴索注射液（國藥集團國瑞藥業有限公司，國藥準字H20133372，規格4ml：30mg）50mg 混合緩沖生理鹽水（北京生物制品研究所有限責任公司，國藥準字S10870001，規格1.5ml/支；5.0ml/支）100ml 再次行灌注，回收灌洗液。術中常規吸氧，持續監測患兒血氧飽和度、心率、呼吸、面色、循環等狀況。在肺不張部位用活檢鉗或毛刷清除肉芽和膿苔后，予以緩沖生理鹽水多次沖洗感染部位，并注入 1：10 000 鹽酸腎上腺素注射液［遠大醫藥（中國）有限公司，國藥準字H42021700，規格1ml：1mg（按C9H13NO3計）］減少局部出血。住院期間根據患兒病情行FOB 下肺泡灌洗 1～3 次。聯合組在FOB 基礎上口服槐杞黃顆粒（啟東蓋天力藥業有限公司，國藥準字B20020074，規格：每袋裝10g）5g/次，bid。兩組均連續治療2 周。

1.3 觀察指標

（1）細胞炎癥因子水平。分別于治療前后采用酶聯免疫吸附法測定兩組患兒回收肺泡灌洗液中IL-8、IL-17、TLR2 水平，試劑盒購自北京索萊寶科技有限公司。

（2）免疫球蛋白水平。分別于治療前后采集患兒空腹肘靜脈血5ml，采用免疫透射比濁法檢測兩組患兒免疫球蛋白A（immunoglobulin A，IgA）、免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）、免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）。

（3）T 細胞亞群。分別于治療前后采集患兒空腹肘靜脈血5ml，采用CytoFlex LX 全自動流式細胞分析儀（貝克曼庫爾特公司）檢測兩組患兒CD3+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

（4）臨床療效。參考《兒童肺炎支原體肺炎中西醫結合診治專家共識》（2017 年制定）［10］中評價標準評估患兒的臨床療效：①痊愈：發熱、咳嗽等臨床癥狀及肺部啰音完全消失，影像學顯示正常。②有效：體溫正常，咳嗽、肺部啰音明顯減少，影像學顯示肺部陰影基本吸收。③無效：發熱、干咳、呼吸困難和胸痛等臨床癥狀、肺部啰音、影像學均無改善甚至加重。治療總有效率（%）=（痊愈+有效）病例數/每組總病例數×100%。

（5）不良反應發生情況。觀察并記錄兩組患兒治療期間惡心、嘔吐、刺激性咳嗽、胸悶、腹痛等不良反應的發生情況。

1.4 統計學方法

患者涉及的各項臨床指標數據經Excel 2020建立數據庫，應用SPSS 20.0 軟件進行處理分析。計數資料以n（%）表示，采用χ2檢驗；計量資料以±s表示，采用t檢驗。P＜0.05 為具有統計學差異。

2 結果

2.1 治療前后兩組患兒細胞炎癥因子水平比較

治療前，兩組患兒IL-8、IL-17、TLR2 水平比較均無統計學差異（P＞0.05）。治療后，兩組患兒IL-8、IL-17、TLR2 水平均降低（P＜0.05），且聯合組低于FOB 組（表1）。

表1 治療前后兩組患兒IL-8、IL-17、TLR2 水平比較 n=45，±s

表1 治療前后兩組患兒IL-8、IL-17、TLR2 水平比較 n=45，±s

IL-8：白介素-8；IL-17：白介素-17；TLR2：Toll 樣受體2；與同組治療前比較，a：P＜0.05；與FOB 組比較，b：P＜0.05。下同

組別IL-8（pg/ml）IL-17（pg/ml）TLR2（μg/L）治療前治療后治療前治療后治療前治療后FOB 組89.84±9.53 60.63±7.46a86.43±6.14 65.37±4.51a21.76±3.82 16.73±2.06a聯合組88.77±6.31 53.28±5.85ab87.25±8.99 59.62±7.44ab21.84±3.77 13.97±1.39ab t 值0.6285.2010.5054.4330.1007.450 P 值0.5320.0000.6150.0000.9210.000

2.2 治療前后兩組患兒免疫球蛋白水平比較

治療前，兩組患兒IgA、IgG、IgM 水平比較均無統計學差異（P＞0.05）。治療后，兩組患兒IgA、IgG、IgM 水平均升高（P＜0.05），且聯合組高于FOB 組（P＜0.05）（表2）。

表2 治療前后兩組患兒IgA、IgG、IgM 水平比較 n=45，±s，g/L

表2 治療前后兩組患兒IgA、IgG、IgM 水平比較 n=45，±s，g/L

IgA：免疫球蛋白A；IgG：免疫球蛋白G；IgM：免疫球蛋白M

組別IgAIgGIgM治療前治療后治療前治療后治療前治療后FOB 組0.70±0.110.94±0.18a6.88±1.248.55±0.82a0.83±0.121.27±0.18a聯合組0.69±0.17 1.23±0.33ab6.81±0.8710.31±1.04ab0.85±0.111.55±0.26ab t 值0.3315.1750.3108.9150.8245.940 P 值0.7410.0000.7570.0000.4120.000

2.3 治療前后兩組患兒 T 細胞亞群水平比較

治療前，兩組患兒CD3+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較均無統計學差異（P＞0.05）。治療后，兩組患兒CD3+、CD4+/CD8+水平均升高（P＜0.05），且聯合組高于FOB 組（P＜0.05）；兩組患兒CD8+水平均降低（P＜0.05），且聯合組低于FOB 組（P＜0.05）（表3）。

表3 治療前后兩組患兒CD3+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較 n=45，±s，%

表3 治療前后兩組患兒CD3+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較 n=45，±s，%

組別CD3+CD8+CD4+/CD8+治療前治療后治療前治療后治療前治療后FOB 組53.36±8.29 58.09±8.31a38.90±7.14 27.59±6.62a1.10±0.141.51±0.22a聯合組54.18±9.22 63.42±7.58ab38.36±8.45 21.47±5.31ab1.07±0.111.79±0.30ab t 值0.4443.1790.3274.8381.1305.049 P 值0.6580.0000.7440.0000.2610.000

2.4 兩組患兒臨床療效比較

聯合組患兒治療總有效率（95.56%）高于FOB組（77.78%，P＜0.05）（表4）。

表4 兩組患兒臨床療效比較 n=45，n（%）

2.5 兩組患兒不良反應發生率比較

兩組患兒惡心、嘔吐、刺激性咳嗽、胸悶、腹痛等不良反應總發生率比較無統計學差異（P＞0.05）（表5）。

表5 兩組患兒不良反應發生率比較 n=45，n（%）

3 討論

目前，MP 已成為兒童社區獲得性肺炎的主要病原體，其可通過與宿主氣道上皮細胞結合而粘附在氣道上，引起氣道纖毛柱狀上皮受損、脫落，氣道清除功能下降，并促進氣道黏液腺高分泌，造成不同程度的管腔堵塞、黏液栓形成［11］。一旦形成較大的固化狀塑形支氣管樹樣痰栓，可導致支氣管炎癥性狹窄、閉塞、肉芽增生，并最終發展為遷延性肺炎，均可對患兒心、腦、腎等其他重要臟器造成損傷［12］。FOB 肺泡灌洗為MPP 常用的治療手段，在迅速清除氣道炎性黏液栓、解除氣道阻塞的同時，還可將藥物直達病灶，維持局部高藥物濃度，獲得更佳的治療效果。寇志軍等［13］將FOB 聯合谷氨酰胺顆粒治療82 例MPP 患兒，在解除氣道栓塞的同時，減輕了患兒的炎癥反應，促進氣道黏膜修復，臨床療效較好。槐杞黃顆粒由槐耳菌質、枸杞、黃精組成，具有槐耳菌質多糖、蛋白質等多種活性成分，可益氣養陰、滋肝補腎。溫利軍［8］將槐杞黃顆粒聯合阿奇霉素及布地奈德治療MPP 患兒，結果提示，其可有效緩解患兒的臨床癥狀，提高患兒免疫力，并降低再次感染率。本研究將槐杞黃顆粒聯合FOB 用于治療MMP 患兒，結果顯示聯合組患兒治療總有效率（95.56%）高于FOB 組（77.78%，P＜0.05），提示槐杞黃顆粒聯合FOB 治療MMP 患兒臨床療效較好。

IL-8 為氣道炎癥中較早開始研究的細胞因子之一，是一種由單核細胞、上皮細胞或內皮細胞合成的中性粒細胞趨化因子，可造成中性粒細胞脫顆粒，釋放溶酶體酶、超氧化物，造成免疫損傷［14］。IL-17 為近年來新發現的細胞因子，可與IL-8 協同激活氣道內T 細胞，調節炎癥細胞尤其是中性粒細胞的募集，誘發和加重氣道炎癥反應［15］。TLR2為一種跨膜受體，也是機體最主要的模式識別受體，可誘導IL-8 等炎癥因子的合成與分泌，其介導的炎癥信號通路與MPP 的嚴重程度有關，可能參與了支原體的長期定植［16-17］。IL-8、IL-17、TLR2 水平異常上升常提示機體炎癥活躍，免疫屏障受損，可能導致病情進展。本研究結果顯示，經治療后，兩組患兒IL-8、IL-17、TLR2 水平均降低（P＜0.05），且聯合組低于FOB 組（P＜0.05），提示槐杞黃顆粒聯合FOB 治療MPP 可有效降低患兒IL-8、IL-17、TLR2 水平，減輕患兒炎癥反應。這可能與槐杞黃顆粒可通過發揮抗炎、抗過敏、改善微循環、調節免疫反應等作用減少氣道感染、緩解氣道炎癥反應有關。考慮到MP 感染和免疫系統之間存在密切關系，當機體受到MP 感染后，病原對B 淋巴細胞形成刺激，產生Ig 抗體，促使自身抗體出現病理免疫反應，導致IgA、IgG、IgM 降低，機體免疫抵抗能力下降，從而加劇了肺部炎癥反應。因此，本研究分析了MPP 患兒治療前后免疫因子IgA、IgG、IgM 的水平變化，結果顯示，經治療后，兩組患兒IgA、IgG、IgM 水平均升高（P＜0.05），且聯合組高于FOB 組（P＜0.05），提示槐杞黃顆粒聯合FOB 治療MPP 可有效調節患兒體液免疫。而在細胞免疫中，T 淋巴細胞發揮著重要作用。CD3+細胞是一種存在于血液和免疫系統中的T 淋巴細胞，其對維持機體免疫反應和防御機制至關重要；CD4+細胞通常被稱為輔助性T 淋巴細胞，可激活其他免疫細胞，包括B 淋巴細胞和CD8+細胞；CD8+細胞也被稱為細胞毒性T 淋巴細胞，屬于白細胞分化抗原，可殺滅被病毒感染的細胞和腫瘤細胞，抑制病毒增殖、擴散及傳播；CD4+/CD8+為免疫調節的一項指標，可反映自身免疫疾病、慢性炎癥狀態［18］。CD3+、CD4+/CD8+水平異常降低，CD8+水平異常上升代表患者機體免疫功能下降，免疫防御減弱。本研究結果顯示，經治療后，兩組患兒CD3+、CD4+/CD8+水平均升高（P＜0.05），且聯合組高于FOB 組（P＜0.05）；兩組患兒CD8+水平均降低（P＜0.05），且聯合組低于FOB 組（P＜0.05），提示槐杞黃顆粒聯合FOB 治療可有效調節MPP 患兒細胞免疫功能。槐杞黃顆粒中的枸杞多糖可增加非特異性免疫功能，增強機體抗病能力［19］；黃精中的有效成分黃精多糖可調節巨噬細胞吞噬指數，促進巨噬細胞活化，調節炎癥反應，增強機體免疫應答等［20］。此外，兩組患兒惡心、嘔吐、刺激性咳嗽、胸悶、腹痛等不良反應總發生率比較無統計學差異（P＞0.05），提示槐杞黃顆粒聯合FOB 治療并未增加不良反應的發生風險。

綜上所述，槐杞黃顆粒聯合FOB 治療MPP患兒臨床療效較好，可有效降低IL-8、IL-17、TLR2 水平，調節患兒免疫功能，且未增加不良反應的發生風險。然而，本研究仍存在一定局限性，如納入樣本量有限，其結果可能不足以代表所有MPP 患兒群體，且目前的研究主要關注短期內的臨床療效和安全性，后續將進行更廣泛的多中心、大樣本研究對本研究結果加以論證，同時進行長期追蹤研究，評估患兒的長期療效和安全性，特別是對患兒成長發育的影響。