一例非免疫H7N9禽流感陽性雞群的處置

文│徐曉虎 （陜西省漢中市漢臺區畜牧獸醫技術推廣中心）

H7N9禽流感又被稱為高致病性禽流感，不僅嚴重危害禽類健康，導致生產及經濟損失，且能通過不同媒介感染人類，進而對人類生命健康造成巨大威脅。2013年在我國上海發現首例人感染H7N9禽流感病例，2013—2014年該疫病一度呈現散發狀態，2016年以后病例明顯增多，2017年是發現該病以來發病數最多的一年。當年截至2017年5月10日，陜西省共發現4例人感染H7N9流感病例，其中咸陽2例，寶雞1例，西安1例。因漢臺區地處候鳥南北遷徙路線途中棲息地，且家禽養殖量大；水網湖泊眾多，野鳥數量多、遷徙范圍大，病毒感染家禽和跨區域傳播風險巨大，對漢臺區禽流感防控工作帶來了巨大威脅。因此，通過檢測診斷技術，對疫情發生、流行趨勢進行預警預報，并在禽流感疫情發展初期做到早發現、早處理，使禽流感疫情得到有效控制顯得尤為重要。

H 7 N 9 病毒屬正黏病毒科甲型流感病毒屬， 為有囊膜的單股副鏈R N A 病毒。血凝素（Hemagglutinin，HA）和神經氨酸酶（Neuraminidase，NA）是存在于禽流感病毒（AIV）表面的兩種重要抗原蛋白，根據兩種表面蛋白的不同，將AIV劃分為18個HA亞型和11個NA亞型。其中H7N9亞型AIV是對家禽危害最大的亞型之一，對蛋雞的危害較大。該病可經呼吸道傳播，也可通過密切接觸禽類分泌物和排泄物等被感染，目前尚無人傳人的確切證據。家禽感染H7N9流感病毒后出現精神沉郁、呼吸困難、流淚、雞冠紺紫或有出血斑塊、腳鱗片出血等癥狀；有的出現神經癥狀，如共濟失調、偏頭、扭頸等。

2017年5月，動物疫控部門對轄區內10個規模養雞場、1個活禽交易市場進行了H7N9流感緊急血清學監測和病原學采樣。初步探查了全區H7N9禽流感的感染情況，并按照國家相關疫情防控政策對涉及的一個蛋雞養殖戶血清學陽性但病原學陰性的禽群作出禁止流通、就近無害化處理等對策。

一、材料和方法

1.樣品采集。對漢臺區涉及10個規模養雞場戶和1個活禽交易市場，進行血清和咽喉/泄殖腔拭子采樣，共計采集雞血清360份、咽喉/泄殖腔拭子360份。所有樣本均在4℃保存運輸。

2.檢測試劑。禽流感病毒H7亞型（H7N9株）血凝抑制試驗診斷抗原（批號2016002）和禽流感H7亞型陽性血清（批號2015011），均購自哈爾濱維科生物技術開發公司；H7N9 RT-PCR檢測試劑盒（生產批號：A IV H 7 20130418P），購自北京世紀元亨動物防疫技術有限公司。

3.主要儀器設備。Eppendorf移液器、生化恒溫培養箱、一次性反應板（90°）、離心機、核酸提取儀、PCR分析儀。

二、檢測方法與結果判定

血清學檢測：采用血凝抑制（HI）試驗，檢測血清中H7亞型禽流感病毒血凝素抗體。具體操作參照《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T 18936-2003）中HI試驗進行，在陽性和陰性對照的前提下，被檢血清HI抗體水平≥24（或4㏒2），結果判定為陽性。

病原學檢測：對血清學檢測為陽性的樣本，將采集的咽喉/泄殖腔拭子樣品送由上級動物疫控部門獸醫實驗室采用反轉錄-聚合酶鏈式反應（RT-PCR）進行H7亞型禽流感病毒HA基因片段檢測。按照試劑（盒）說明書進行操作。

三、檢測結果

1.H7N9血清學檢測結果。通過H7N9 HI試驗檢測出360份血清樣品中共有陽性血清55份（抗體滴度為24～27），且均出自同一養雞場戶，陽性率為15.3%，結果見表1。其余養殖場戶和活禽交易市場血清學檢測均為陰性。

2.H7N9病原學檢測結果。對血清學檢測為陽性的55份樣品所對應的泄殖腔/咽喉拭子進行RT-PCR檢測，結果均為陰性。

四、應急處置措施

1.規范上報疫情信息。將檢出的H7N9流感血清學陽性信息立即按程序報告給上級動物疫病預防控制部門和區農業行政主管部門，并將同步采集、對應的咽喉/泄殖腔拭子送至上級動物疫病預防控制中心獸醫實驗室進行病原學檢測，同時啟動動物H7N9流感緊急流行病學調查。

2.立即開展動物衛生監督。按照《陜西省家禽H7N9流感剔除計劃實施方案》要求，動物衛生執法人員第一時間前往陽性雞場，給業主下發了動物衛生監督文書，隔離陽性禽群，嚴禁養殖戶擅自出售和移動，嚴禁其產品（雞蛋）進入流通環節，同時做好被污染場地、物品的清洗消毒和飼料原料消毒工作。

3.迅速無害化處置陽性雞群。

根據《陜西省動物H7N9禽流感應急處置指南（試行）》規定，政府按程序緊急啟動應急預案，于5月14日進行陽性雞群的無害化處理，同時銷毀了染疫的飼料、原料、雞蛋、蛋盤等，并在舍內和院子投放毒餌誘殺疑似帶毒野禽。并深入開展疫源追蹤和緊急流行病學調查工作。

4.做好消毒滅源工作。由屬地鎮獸醫站技術人員監督該養殖戶開展消毒滅源工作，雞舍周圍污物要進行堆積發酵，雞舍、飼槽、用具、環境等立即用3%燒堿溶液消毒，每天1次，堅持一周。同時加強養殖戶家庭成員及外來人員的消毒措施，防止疫情傳播。

五、分析與討論

在本次H7N9禽流感疫情監測中，通過流行病學調查發現，該批雞群雞苗為2016年7月，由本省其他地市引入，有檢疫證但無H7N9流感檢測報告，也沒有進行落地報檢。在開產前（即130日齡以前），采用由政府提供的禽流感病毒（H5亞型）三價滅活疫苗（Re-6株＋Re-7株＋Re-8株）進行程序化免疫，開產后分別進行加強免疫2次。該雞群目前為310日齡，精神狀態正常，未出現明顯的臨床癥狀，產蛋率≥90%，且雞蛋外觀無異常。由于該雞群未接種過禽流感病毒（H7亞型）疫苗，根據血清學檢測結果初步判斷該雞群近期（3～6個月以內）感染了H7亞型禽流感病毒，核酸檢測結果為陰性可能是該雞群已處于病毒感染后期，抗體水平升高致使病毒載量下降導致核酸檢測為陰性，也不能排除采集的樣本不合格導致檢測結果異常或不準確。

根據流調結果我們分析該雞群感染可能有以下3點原因。

（1）該養殖戶雞舍沒有安裝防護野禽設施，舍內麻雀等野禽覓食隨處可見，隔壁鄰居飼養鴿子，野（飛）禽感染后傳入病原的可能性很大。

（2）雞舍緊鄰村鎮交通干道，距316國道1千米，且該戶開辦有零售商店，接觸人員復雜，易造成病原傳入。

（3）該戶養殖環境衛生狀況較差，隔離、消毒工作不嚴格，是造成疫病感染及群內水平傳播的重要原因。

H7N9亞型禽流感作為一種人畜共患病，對公共衛生造成巨大威脅。自2013年發現該疫情以來，科學家在疫苗研究方面不斷探索和嘗試，并取得了一定進展。多種新型疫苗應運而生，如核酸疫苗、亞單位疫苗、VLP疫苗等效果顯著。2017年農業農村部批準使用（H5＋H7）二價滅活疫苗，從源頭控制家禽中H7N9禽流感病毒載量，使疫情得到有效控制。但近些年H7N9亞型流感病毒變異速度加快，導致疫情防控難度加劇，至今零星散發疫情仍時有發生。

禽流感的發生沒有季節性，加強飼養管理，構建有效的生物安全體系，是防控高致病性禽流感的關鍵措施。養殖場需要做到以下幾點：

（1）做好衛生消毒措施，定期對舍內、舍外環境進行消毒，為畜禽提供一個干燥、清潔的生產環境。

（2）為防止外界病毒入侵，應盡量做到自繁自養，如果必須從外界引種，則應對新引入的家禽進行嚴格隔離和檢測，確保不攜帶病原體。

（3）養殖場也應根據實際情況定期對家禽進行抗體水平監測，做到早發現、早處理，防止病情擴散或蔓延，降低經濟損失。當場內有疑似或確診病例時，應及時隔離病雞并對所在養殖區域進行徹底消毒。

（4）加強飼養管理，對家禽進行科學飼養。使用優質飼料，提供家禽生長所必需的營養物質，提高家禽對疾病的抵抗力，同時為家禽提供充足、干凈的飲用水。夏季注意通風，冬季注意保暖，飼養棚內保持適宜的濕度，消除由此引起的應激反應，從而防止禽流感的發生。

同時，H7N9亞型禽流感作為一種危害公眾健康的疫病，除在養殖環節加強疫病防控外，還需要政府相關部門的統籌協調工作。

（1）獸醫部門應和各地疾病預防控制部門加強溝通合作，以便疫情信息的快速溝通和疫情控制。

（2）加強職業人群防護。研究表明，人感染H7N9禽流感患者均有活禽暴露史，而活禽市場和家禽相關職業人群是人感染H7N9禽流感病例中的主要人群。因此，需要規范管理活禽市場，采取有效的消毒措施，保證活禽市場環境衛生，部分城市采取定期關閉活禽市場措施，對疫情起到一定的遏制作用。

（3）加強禽流感防疫宣傳工作，政府部門可充分利用廣播、電視、板報、宣傳冊等宣傳手段提升公眾的防疫意識，養成良好的衛生習慣，做到科學防護。