植物乳桿菌發酵四君子散對肉雞生長性能的影響

摘 要：在減抗替抗的要求下，發酵中藥因其綠色天然、無藥物殘留的優點被廣泛應用于畜禽養殖中。為研究植 物乳桿菌發酵四君子散對肉雞生長性能的影響，選取 75 只健康羅斯 308 肉雞，隨機分為 5 組，每組 3 個重復，分別 飼喂基礎日糧（對照）、基礎日糧+1% 四君子散、基礎日糧+0.5% 植物乳桿菌、基礎日糧+0.5% 植物乳桿菌 +1% 四君子散、基礎日糧+1% 發酵四君子散，通過測定肉雞平均日增質量、平均日采食量、料肉比、飼料和糞便 中粗蛋白和粗脂肪的含量、血清生化指標和小腸中消化酶的活性來分析發酵四君子散對肉雞生產性能的影響。 結果表明，與對照相比，發酵四君子散顯著降低了肉雞料肉比，顯著提高了肉雞粗蛋白和粗脂肪消化率，顯著降 低了血清中丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）活性，而對血清中尿素氮（BUN）、葡萄糖 （GLU）含量無顯著影響。同時，發酵四君子散能顯著提高十二指腸中 α-淀粉酶和脂肪酶的活性以及小腸各腸段 胰蛋白酶活性。綜上，發酵四君子散可作為飼料添加劑，有效降低肉雞料肉比，增加養分表觀消化率，增強小腸 消化酶的活性，提高肉雞生長性能。

關 鍵 詞 ：發酵中藥；四君子散；植物乳桿菌；肉雞；生長性能

中 圖 分 類 號 ：S831 文 獻 標 識 碼 ：A 文 章 編 號 ：1002?2481（2024）02?0097?06

我國中藥資源豐富，種類眾多，產量巨大。中 草藥的微生物發酵有著悠久的歷史，漢代以前就有一些關于中草藥的簡單記載?，F代微生物發酵中 草藥的研究始于 20 世紀 80 年代，最早為單味中藥 進行發酵，并且主要為真菌自身發酵[1] ，近年來發酵 技術不斷發展，發酵中藥制劑已成為中草藥現代化 的一個活躍課題。用于中草藥發酵的微生物主要 有酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌、雙歧桿菌和各種藥用 真菌[2] 。發酵類型可以分為固態發酵、液態發酵和 雙向固體發酵[3] 。

四君子湯出自宋代《太平惠民和濟局方》，方劑 由人參、白術、茯苓、炙甘草配伍而成。在動物臨床 應用中，常用黨參代替人參，組成四君子散。該方 具有廣泛的藥理作用，可以調節胃腸運動、增強消 化吸收能力、改善免疫功能、促進代謝，是中獸醫健 脾益氣的經典方劑[4] 。植物乳桿菌在動物養殖中常 被用作飼料添加劑，具有調節腸道菌群平衡、提高 抗氧化能力和動物生長性能的作用[5] 。在國家減抗 替抗政策的推動下，研發出新型綠色、健康促生長 的飼料添加劑成為重點。中藥經益生菌發酵后，藥 物結構發生改變，形成更易被機體吸收的新的活性 物質[6] ，有效成分提取率增加，藥效提高。張桂枝 等[7] 研究發現，在肉雞基礎日糧中添加 1% 發酵中 藥后，熱應激肉雞的生長性能和免疫功能顯著提 高，效果優于未發酵中藥組。本研究通過發酵四君 子散，研究中藥對肉雞生長性能、表觀消化率、血清 生化指標和小腸消化酶的影響，旨在為發酵中藥制 劑在生產實際中的應用提供理論依據。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物 本試驗所用動物為羅斯 308 白 羽肉雞，購自山東東營市華譽公司。試驗于山東濱 州博興某養雞場進行。

1.1.2" 菌 種 及 試 劑" 植 物 乳 桿 菌（Lactobacillus plantarum）編號為 CICC21809，購自中國工業菌種 保藏中心，現保存于山西農業大學環境獸醫學山西 省重點實驗室；黨參、白術、茯苓、炙甘草購于北京 同仁堂大藥房；MRS 培養基購于青島賓得生物技 術有限公司；脂肪酶、胰蛋白酶、α-淀粉酶試劑盒購 于南京建成生物工程研究所。

1.1.3 樣品制備 將黨參、白術、茯苓、炙甘草置于 65 ℃烘干 2 h，粉碎后過 0.45 mm 篩，按照 2∶2∶2∶1 的 比 例 混 合 均 勻 配 制 四 君 子 散 ，調 整 含 水 量 為 20%，使用食品級碳酸鈉調整 pH 為 6.8，按照 5% 的接種量接入植物乳桿菌，在 37 ℃下恒溫發酵 24 h。

1.2 試驗方法

將 75 只健康的羅斯 308 肉雞隨機分為 5 組，每 組 3 個重復，每個重復 5 只雞。一組為對照組，飼喂 基礎日糧；二組為中藥組，在基礎日糧中添加 1% 的 四君子散；三組為益生菌組，在飲水中加入 0.5% 的 植物乳桿菌菌液；四組為益生菌+中藥組，在基礎日 糧中加入 1% 的四君子散并在飲水中加入 0.5% 的 植物乳桿菌菌液；五組為發酵中藥組，在飲水中加入 1% 發酵四君子散藥液。試驗飼糧標準符合國家 GB/T 5916—2020《產蛋雞和肉雞配合飼料》營養要 求。雞只自由飲水和采食，試驗周期為 40 d。飼養 期間，定時對雞舍進行消毒，監控雞舍內溫度和濕 度，觀察雞群的精神狀態和采食飲水情況。

1.3 測定項目及及方法

1.3.1 生產性能測定 在試驗第 7、14、21、28、35 天 的上午對肉雞進行空腹稱質量，并對采食量進行記 錄，計算每組各階段的平均日增質量（ADG）、平均 日采食量（ADFI）和料肉比（F/G）。

平均日增質量=（試驗末平均體質量—試驗初 平均體質量）/試驗天數 （1）

平均日采食量=（配料總質量—剩余飼料量）/ 試驗天數

1.3.2 表觀消化率的測定 在試驗第 35～40 天， 每天收集肉雞全糞 2 次，稱質量，按照 GB 6432— 2018 和 GB 6433—2006 中的方法測定飼料和糞便 中營養成分的含量，計算粗脂肪和粗蛋白的消化率。

粗脂肪表觀消化率=（每日攝入飼料總量×單 位飼料中脂肪含量—每日排出糞便總量×單位糞 便中脂肪含量）/（日攝入飼料總量×單位飼料中脂 肪含量）×100% （4）

粗蛋白表觀消化率=（每日攝入飼料總量×單 位飼料中蛋白含量—每日排出糞便總量×單位糞 便中蛋白含量）/（日攝入飼料總量×單位飼料中蛋 白含量）×100% （5）

1.3.3 血清生化指標測定 在飼養第 41天，肉雞頸 靜脈采血 10 mL，并置于促凝管中，將促凝管傾斜靜 置，血清析出后 3 500 r/min離心 10 min，收集血清并 分裝，置于-80 ℃保存。采用微板法測定血清中丙氨 酸 氨 基 轉 移 酶（ALT）、天 門 冬 氨 酸 氨 基 轉 移 酶 （AST）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）含量。

1.3.4 小腸消化酶活性測定 在飼養第 41 天，屠 宰剖檢肉雞，將小腸各部系膜剝離，收集十二指腸、空腸、回腸內容物于 EP 管中，冷凍保存，按照試劑 盒說明書方法測定十二指腸、空腸、回腸中脂肪酶、 胰蛋白酶、α-淀粉酶的活性。

1.4 統計分析

試驗數據使用 GraphPad Prism 8 軟件進行方 差分析。統計結果以平均值±標準差表示，試驗結 果中小寫字母不同表明 Plt;0.05，差異顯著。

2 結果與分析

2.1 發酵中藥對肉雞生產性能的影響

由表 1 可知，在整個試驗階段，5 組之間肉雞的 ADG 差 異 不 顯 著（Pgt;0.05）。 比 較 各 組 ADFI 發 現，在 7～14 日齡段和 14～21 日齡段，試驗各組結 果差異不顯著（Pgt;0.05）。在 21～30 日齡段，與對 照組相比，中藥組、益生菌+中藥組和發酵中藥組 ADFI 明顯下降，分別下降 11.18%、6.60%、8.15% （Plt;0.05）。在 30～35 日齡段，試驗組 ADFI 顯著 低于對照組，分別下降了 22.78%、8.77%、22.71%、 26.44%（Plt;0.05）。分析 F/G 結果，各組在 7～14日 齡段均無顯著差異。在 14～21 日齡段和 30～35 日 齡段，益生菌+中藥組的 F/G 較對照組明顯降低 （Plt;0.05）；在 30～35 日齡時，下降了 15.08%，差異 極顯著（Plt;0.01）。在 14～21 日齡、21～30 日齡、 30～35 日齡 3 個階段，與對照組相比，發酵四君子 散組肉雞的 F/G 均顯著下降，并且在 30～35 日齡 段下降 16.75%，差異極顯著（Plt;0.01）。與同日齡 中藥組相比，F/G 也顯著降低（Plt;0.05）

2.2 發酵中藥對肉雞表觀消化率的影響

由表 2 可知，與對照組相比，各組粗蛋白消化 率 均 顯 著 提 高（Plt;0.05），分 別 提 高 了 15.16%、 5.39%、16.18%、30.53%，其中發酵中藥組粗蛋白 消化率較其他處理組分別提高了 13.35%、23.85%、 6.73%，差異顯著（Plt;0.05）。益生菌+中藥組和 發酵中藥組粗脂肪消化率較對照組顯著升高（Plt; 0.05），中藥組和益生菌組無顯著變化。

2.3 發酵中藥對肉雞血清生化指標的影響

由表 3 可知，試驗組血清中的 ALT 含量顯著 低于對照組（Plt;0.05），各試驗組之間含量差異不 顯著（Pgt;0.05）。與對照組相比，發酵中藥組血清AST 的含量顯著降低（Plt;0.05），下降 44.93%。 各 組 血 清 中 的 GLU 含 量 差 異 不 顯 著（Pgt;0.05）。 試驗組血清中 BUN 含量較對照組有所升高，但差 異不顯著（Pgt;0.05）。

2.4 發酵中藥對肉雞小腸消化酶活性的影響

從表 4 可以看出，與對照組相比，中藥組和發 酵中藥組肉雞十二指腸中的 α-淀粉酶的活性顯著 提高（Plt;0.05）。各組空腸和回腸中 α-淀粉酶的活 性差異不顯著（Pgt;0.05）。分析各腸段中脂肪酶的 結果，發酵四君子散組肉雞十二指腸中脂肪酶的活 性較對照組顯著升高，各組空腸和回腸中脂肪酶的 活性無顯著變化（Pgt;0.05）。與對照組相比，中藥 組、益生菌+中藥組和發酵中藥組肉雞十二指腸中 胰蛋白酶的活性均顯著升高（Plt;0.05），分別升高 了 63.23%、68.92% 和 85.67%。 與 對 照 組 和 四 君 子散組相比，發酵四君子散組肉雞空腸中的胰蛋白 酶活性顯著升高（Plt;0.05）。分析回腸中胰蛋白酶 的活性，與對照組相比，中藥組和發酵中藥組的活 性均顯著升高，且發酵中藥組回腸中胰蛋白酶的活 性顯著高于中藥組（Plt;0.05）。

3 結論與討論

四君子散可以調節胃腸道功能，提高機體免疫 力[8] ，具有益氣健脾的功效，主治脾胃氣虛。植物乳 桿菌是一種常見的發酵益生菌，在蔬菜、發酵產品 及腸道中廣泛存在[9] 。植物乳桿菌在代謝過程中產 生纖維素酶和果膠酶，能夠分解中藥的細胞壁，促 進活性物質的釋放[10] 。植物乳桿菌在代謝過程中 產生多種消化酶，將難以被機體吸收的生物大分子 轉化為小分子，促進動物機體對飼料中營養物質的 消化吸收，使飼料利用率得到提高[11] 。石建存等[12] 在飼料中攪拌混飼植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌發 酵復方中藥液，結果表明，發酵中藥能顯著增加蛋 雞 ADG，提高血清中的新城疫抗體滴度。趙壽培 等[13] 研究發現，在育肥羔羊飼料中添加 1.0% 發酵 中藥，可以顯著提高羔羊的生長性能。何維敏等[14] 添加發酵中藥合劑飼喂斷奶仔豬，相對于對照組， 平均日增質量提高 18.70%，料肉比顯著降低。本 試驗結果發現，不同飼喂方法對肉雞平均日增質量 影響較小，在試驗后期，1% 四君子散組、0.5% 植物 乳桿菌+1% 四君子散組和 1% 發酵四君子散組肉 雞平均日采食量降低，原因可能是在飼料或飲水中 加入四君子散，影響了飼料和飲水的適口性，導致 肉雞采食量下降。在試驗中后期，發酵四君子散能夠有效降低料肉比，并且效果優于未發酵組。單獨 添加益生菌對料肉比的影響不明顯。

表觀消化率可以反映出動物機體對飼料的消 化能力以及飼料的營養價值。丁亞偉等[15] 研究表 明，在羔羊的開食料中添加 10% 的發酵飼料可以 顯著提高粗蛋白質的表觀消化率。王超普等[16] 在 仔豬日糧中添加 1% 發酵中藥粉，顯著提高了斷奶 仔豬對粗脂肪、粗灰分和鈣的表觀消化率。本試驗 結果顯示，與其他各組相比，四君子散發酵后，機體 對粗脂肪和粗蛋白的消化率得到顯著提高。發酵 中藥使用的植物乳桿菌在代謝過程中產生消化酶， 促進了肉雞對粗蛋白和粗脂肪的消化吸收[17] ，同時 四君子散能夠補脾益氣，促進胃動素的分泌，增強 胃腸道的消化功能[18] ，從而提高了飼料中粗蛋白、 粗脂肪的表觀消化率。

血液生化指標可以反映出動物體內的新陳代 謝 、營 養 物 質 吸 收 分 布 情 況 以 及 機 體 的 健 康 狀 況[19] 。尿酸和尿素是禽類蛋白質和氨基酸代謝的 終產物，尿素氮含量降低時，說明蛋白質代謝情況 良好。谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶是評估動物肝臟 健康情況的重要指標[20] 。血清中的葡萄糖能夠反 映出機體對葡萄糖的轉化和利用能力，用來衡量機 體內的糖原代謝情況[21] 。沈學懷等[22] 在母豬飼料 中添加 20% 復方中藥發酵飼料，在第 15 天和 30 天 時，試驗組血清中 ALT 和 AST 含量較對照顯著降 低。本試驗結果表明，試驗組血清中 ALT 含量顯 著低于對照，發酵四君子散組血清中 AST 含量較 其 他 組 也 明 顯 降 低 ，但 各 組 肉 雞 血 清 中 GLU 和 BUN 的含量無明顯變化。說明發酵四君子散可以 增強機體對肝臟的保護能力，并且效果優于四君子 散組和益生菌與中藥聯用組。

胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶是腸道中影響動物 機體消化和營養利用的 3 種主要的消化酶。在消 化畜禽飼料的過程中，淀粉酶可以消化和分解腸道 中的碳水化合物；脂肪酶將粗脂肪水解為甘油和脂 肪酸；胰蛋白酶促進多肽的產生，使抗營養因子含 量降低，提高肉雞對營養物質的吸收能力[23] 。發酵 中藥中應用的益生菌在腸道中生長和繁殖，能夠維 持腸道菌群平衡，產生多種消化酶，分解碳水化合 物和蛋白質[24] 。張家才等[25] 研究發現，在日糧中添 加 2% 和 7% 的發酵啤酒糟可以顯著增加蛋雞十二 指腸中 α-淀粉酶和脂肪酶的活性。本研究中，在飼 料中添加四君子散和發酵四君子散，對十二指腸中 α-淀粉酶的活性都有一定程度的提高。與對照組相 比，發酵四君子散顯著提高了十二指腸中脂肪酶的 活性，這與劉瑩露等[26] 的研究結果一致，說明發酵四 君子散能夠改善小腸內環境，促進小腸對淀粉、脂 肪和粗蛋白等的消化吸收，以提高肉雞生長性能。

本研究表明，在肉雞日糧中添加 1% 植物乳桿 菌發酵的四君子散，能夠顯著降低肉雞在 14～35 日 齡時的料肉比，與單獨添加四君子散相比，更能提 高飼料中粗蛋白、粗脂肪的表觀消化率，增強小腸 中消化酶的活性，維持腸道的正常生理功能，有利 于提高肉雞的生產性能。本研究對乳酸菌發酵中 藥的藥理功能進行了初步論證，但中藥成分多種多 樣，具體發揮作用的成分及作用機制尚未可知，未 來將通過深入的藥理學研究加組學分析，加強對發 酵中藥的認識。

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