短暫性腦缺血發作病人血清MPO、TRAF6表達水平及其對腦梗死發生的預測價值

魏官 辛雁瑞 沈瀟

摘要 目的： 探討短暫性腦缺血發作（TIA）病人血清髓過氧化物酶（MPO）、腫瘤壞死因子受體相關因子6（TRAF6）水平及其對腦梗死（CI）發生的預測價值。 方法： 選取2020年3月—2022年3月大同市某三級甲等醫院收治的147例TIA病人為TIA組，同期年齡相匹配的147名健康體檢者為健康組。采用酶聯免疫吸附法檢測血清MPO、TRAF6水平。根據ABCD2評分將TIA病人分為高危組44例（ABCD2評分6～7分）、中危組52例（ABCD2評分4～5分）、低危組51例（ABCD2評分≤3分）；比較不同嚴重程度TIA病人血清MPO、TRAF6水平。根據TIA病人是否發生CI分為CI組（57例）和非CI組（90例），比較CI組、非CI組臨床資料及血清MPO、TRAF6水平差異。分析TIA病人發生CI的可能相關因素。 結果： 與健康組比較，TIA組血清MPO、TRAF6水平升高，差異均有統計學意義（ P ＜0.001）。不同嚴重程度TIA病人血清MPO、TRAF6水平比較，差異均有統計學意義（ P ＜0.001）。與低危組比較，中危組、高危組血清MPO、TRAF6水平均升高（ P ＜0.05）；與中危組比較，高危組血清MPO、TRAF6水平均升高（ P ＜0.05）。與非CI組比較，CI組高脂血癥占比、血清MPO、TRAF6水平較高，每個月發作次數增多，癥狀持續時間、發作至就診時間延長，差異均有統計學意義（ P ＜0.05）。高脂血癥、癥狀持續時間、每個月發作次數、發作至就診時間、 MPO、TRAF6是TIA病人發生CI的因素（ P ＜ 0.001）。受試者工作特征（ROC）曲線分析顯示，血清MPO、TRAF6預測TIA病人發 生CI的ROC曲線下面積（AUC）分別為0.870，0.862； MPO、TRAF6聯合預測TIA病人發生CI的AUC為0.945，表明MPO、TRAF6聯合可提高TIA病人發生CI的臨床預測價值。 結論： TIA病人血清MPO、TRAF6水平升高，可能與TIA疾病嚴重程度及CI發生相關，且MPO、TRAF6聯合預測TIA病人發生CI的臨床價值較高。

關鍵詞 ?短暫性腦缺血發作；腦梗死；腫瘤壞死因子受體相關因子6；髓過氧化物酶

doi： ?10.12102/j.issn.1672.1349.2024.10.032

短暫性腦缺血發作（transient ischemic attack，TIA）是一種腦血管痙攣疾病，其發生率逐年升高，且趨于年輕化，可反復發作，易引發腦梗死（cerebral infarction，CI），CI是我國成年人致殘、致死的重要原因 ?［1.2］ ，因此，尋找可預測TIA病人發生CI的方法尤其重要。相關研究顯示，TIA病人發生CI可能與炎癥反應、凝血功能異常、動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）、氧化應激等相關 ?［3.4］ 。髓過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）是一種血色素蛋白，可影響AS，其在急性腦梗死（acute cerebral infarction，ACI）中呈高水平，MPO具有診斷ACI的潛在價值 ?［5］ 。腫瘤壞死因子受體相關因子6（tumor necrosis factor receptor associated factor 6，TRAF6）參與炎癥反應，影響免疫調節，其在CI中水平升高，與CI嚴重程度相關，TRAF6可輔助診斷CI ?［6］ 。本研究通過檢測TIA病人血清MPO、TRAF6表達水平，分析二者對CI的預測價值，以期為臨床預防TIA病人發生CI提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2020年3月—2022年3月大同市某三級甲等醫院收治的147例TIA病人為TIA組，其中男103例，女44例，年齡50～72（60.94±7.25）歲。根據 ABCD2評分 ?［7］ 將TIA病人分為高危組44例（ABCD2 ?評分6～7分）、中危組52例（ABCD2評分4～5分）、低危組51例（ABCD2評分≤3分）。另納入同期健康體檢者147名為健康組，其中男92名，女55名，年齡50～72（59.51±7.08）歲。TIA組和健康組性別、年齡比較，差異均無統計學意義（ P ＞0.05）。本研究符合《赫爾辛基宣言》，且經醫院倫理委員會批準。

納入標準：TIA病人符合《急性缺血性腦血管病中西醫診療指南》 ?［8］ 中TIA診斷標準；所有病人均為初次TIA，發病后24 h內入院；臨床資料完整，且病人或家屬對本研究知情同意。排除標準：伴有偏頭痛、癲癇或其他神經系統疾病；伴有顱內出血、顱內感染、腦代謝性疾病、腦腫瘤、腦血管畸形；有顱腦外傷史、手術史；伴有免疫、凝血系統疾病或遺傳代謝疾病等。

1.2 方法

1.2.1 資料收集

收集所有研究對象年齡、性別、高血壓、高脂血癥、糖尿病、吸煙、主要臨床表現、發作次數、發作至就診時間、癥狀持續時間等。

1.2.2 血清MPO、TRAF6水平檢測

收集所有TIA病人入院次日和健康體檢者體檢當天空腹外周血，靜置40 min后，以4 500 r/min離心7 min，分離血清，采用人MPO酶聯免疫吸附法（enzyme ?linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒（QY.SZ0647， 購自上海喬羽生物科技有限公司）、人TRAF6 ELISA試劑盒（DLR.TRAF6.Hu，購自無錫市東林科技發展有限責任公司）、酶標儀（ELX800，購自美國BIOTEK公司）測定血清MPO、TRAF6水平。

1.3 CI評估及分組方法

發生CI的TIA病人符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2014》 ?［9］ 中CI診斷標準，顱腦CT檢查提示存在明顯低密度影，同時伴有嗜睡、意識障礙、昏睡、昏迷及肢體障礙等臨床表現。所有TIA病人入院后均進行3個月隨訪，隨訪方式為門診復查或電話，隨訪終點事件為發生CI或隨訪時間結束。將發生C I的TIA病人作為CI組（57例），未發生CI的TIA病人作為非CI組（90例）。

1.4 統計學處理

采用SPSS 22.0統計軟件進行數據分析。符合正態分布的定量資料以均數±標準差（ x ?± s ）表示，兩組間比較采用 ?t 檢驗，多組間比較采用單因素方差分析；定性資料以例數、百分比（%）表示，采用 χ ?2檢驗。采用Logistic回歸法分析TIA病人發生CI的影響因素；受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評估血清MPO、TRAF6預測TIA病人發生CI的臨床價值。以 P ＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 TIA組、健康組臨床資料比較

與健康組比較，TIA組血清MPO、TRAF6水平升高，差異均有統計學意義（ P ＜0.001）。詳見表1。

2.2 不同嚴重程度TIA病人血清MPO、TRAF6水平比較

不同嚴重程度TIA病人血清MPO、TRAF6水平比較，差異均有統計學意義（ P ＜0.001）。與低危組比 較，中危組、高危組血清MPO、TRAF6水平均升高 （ P ＜0.05）；與中危組比較，高危組血清MPO、TRAF6水平均升高（ P ＜0.05）。詳見表2。

2.3 CI組和非CI組臨床資料比較

與非CI組比較，CI組高脂血癥占比、血清MPO、TRAF6水平較高，發作次數增多，癥狀持續時間、發作至就診時間延長，差異均有統計學意義（ P ＜0.05）。詳見表3。

2.4 多因素Logistic回歸分析TIA病人發生CI的影響因素

以TIA病人是否發生CI為因變量（發生＝1，不發生＝0），高脂血癥（有＝1，無＝0）、癥狀持續時間（實測值）、每個月發作次數（實測值）、發作至就診時間（實測值）、MPO（實測值）、TRAF6（實測值）為自變量，進行Logistic回歸分析。結果顯示，高脂血癥、癥狀持續時間、每個月發作次數、發作至就診時間、MPO、TRAF6是TIA病人發生CI的因素（ P ＜0.001）。詳見表4。

2.5 血清MPO、TRAF6水平預測TIA病人發生CI的臨床價值

ROC曲線顯示，血清MPO預測TIA病人發生CI的ROC曲線下面積（area under curve，AUC）為0.870［95%CI（0.807，0.933）， P ＜0.001］，截斷值為416.03 U/mL，約登指數為0.674，敏感度為80.7%，特異度為86.7%；TRAF6預測TIA病人發生CI的AUC為0.862 ［95%CI（0.793，0.932）， P ＜0.001］，截斷值為6.06 μg/mL， 約登指數為0.678，敏感度為78.9%，特異度為89.9%；兩者聯合預測TIA 病人發生CI的AUC為0.945［95%CI （0.906，0.983）， P ＜0.001］，約登指數為0.803，敏感度為94.7%，特異度為85.6%。詳見圖1。

3 討 論

TIA是一種常見的缺血性腦血管疾病，多發生于中老年人群，若不及時治療，可能發展為CI，嚴重影響病人生存質量 ?［10.11］ 。因此，尋找可預測TIA病人發生CI的方法，盡早預防、及時干預，對降低CI發生率有積極的臨床意義。

MPO是由中性粒細胞分泌的一種蛋白，可促進活性氧產生，介導氧化應激反應，引起血管損傷，還可促進炎癥反應，影響巨噬細胞吸收及泡沫細胞形成，加速AS，與缺血再灌注損傷、CI等疾病有關 ?［12.13］ 。既往研究顯示，MPO在發生腦疝的CI病人中呈高水平，MPO對CI病人預后有較好的預測價值 ?［14］ 。Chen等 ?［15］ 研究顯示，MPO可促進氧化應激和神經炎癥反應，引起腦缺血再灌注損傷，MPO可能是治療ACI的潛在靶點。本研究中TIA病人血清MPO水平高于健康體檢者，說明MPO可能參與TIA發病過程。TIA病人病情越嚴重，血清MPO水平越高，提示MPO可能與TIA病情嚴重程度相關。進一步本研究結果顯示，發生CI的TIA病人血清MPO水平高于未發生CI的TIA病人，提示MPO可能與TIA病人發生CI密切相關，推測MPO可能通過調節活性氧產生，促進氧化應激反應，造成腦血管損傷，促使TIA病人發生CI；MPO可促進泡沫細胞形成，影響炎癥反應，加速AS，從而促進TIA病人發生CI。本研究回歸分析顯示，MPO升高是TIA病人發生CI的獨立危險因素，說明MPO水平增加，動脈硬化風險增加，促進CI發生。通過ROC曲線分析發 現，血清MPO預測TIA病人發生CI的AUC為0.870， 表明MPO對TIA病人發生CI有一定預測價值，檢測血清MPO水平可能有利于判定TIA病人是否發生CI，為臨床預防CI提供依據。

TRAF6是一種多功能信號轉導分子，可影響血栓及淋巴結形成，參與細胞凋亡，介導免疫反應，通過激活核因子.κB等分子調節炎癥反應，與腦缺血再灌注損傷病人有關 ?［16.17］ 。相關研究顯示，TRAF6在CI病人中表達上調，經唐古特白刺治療后，TRAF6表達下調，其可能通過影響腦缺血再灌注損傷進而影響CI病理變化 ?［18］ ；TRAF6在急性缺血損傷中呈高表達 ?［19］ 。本研究結果顯示，TIA病人血清TRAF6水平較高，且血清TRAF6水平隨著TIA疾病加重呈升高趨勢，提示TRAF6可能與TIA病情變化有關，輔助評估TIA病人病情；發生CI的TIA病人血清TRAF6水平高于未發生CI的TIA病人，與杜秀民等 ?［6］ 研究結果一致，且TRAF6是TIA病人發生CI的獨立因素，說明檢測TRAF6水平變化可預測CI發生。本研究 ROC分析顯示，血清TRAF6預測TIA病人發生CI的AUC為0.862， 提示TRAF6可能參與TIA病人發生CI的過程，且TRAF6可能是判定TIA病人是否發生CI的潛在指標，推測TRAF6可能通過影響核因子.κB等分子激活，進而促進炎癥反應，在TIA病人發生CI的過程中發揮促進作用。同時本研究結果還顯示，MPO、TRAF6聯合預測TIA病人發生CI的AUC為0.945，高于二者單獨預測，敏感度為94.7%，特異度為85.6%，表明MPO、TRAF6聯合可提高對TIA病人發生CI的預測價值，可能是采用并聯方式將兩個指標聯合預測CI，其中一個指標檢測結果為陽性即可以判定為陽性，降低單一指標預測存在的漏診現象，提高了敏感度。

本研究Logistic回歸分析結果顯示，患有高脂血癥、TIA癥狀持續時間及發作至就診時間越長、每個月發作次數越多是TIA病人發生CI的影響因素，與王海霞等 ?［20］ 研究結果一致。曹暉等 ?［10］ 研究顯示，發作次數、發作至就診時間、持續時間是TIA后發生CI的獨立影響因素。發作持續時間越長、發作次數多可能提示腦組織損害嚴重，預后較差，且隨著就診時間延長，缺血半暗帶損傷逐漸加重，導致更多的神經元損害 ?［11］ 。

綜上所述，MPO、TRAF6在TIA病人血清中水平較高，可能與TIA嚴重程度及其發生CI有關，二者均可作為預測TIA病人發生CI的血清標志物，且MPO、TRAF6聯合可提高TIA病人發生CI的臨床預測價值，作為臨床預測TIA病人發生CI的潛在方法。本研究樣本量有限，可能導致結果存在偏差，后期應擴大樣本量，深入分析MPO、TRAF6在TIA并發CI中的具體機制，以期為臨床防治CI提供依據。

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（收稿日期：2023.03.01）

（本文編輯 薛妮）