UCH-L1、PRDX1與AIS患者阿替普酶治療效果的關系

[摘要]目的研究泛素羧基末端水解酶L1（ubiquitincarboxylterminalhydrolaseL1，UCH-L1）、過氧化還原蛋白1（peroxiredoxprotein1，PRDX1）與急性缺血性腦卒中（acuteischemicstroke，AIS）患者阿替普酶治療效果的關系。方法選取2020年6月至2022年6月嘉興市第一醫院收治的198例AIS患者作為研究組，選取同期100名健康體檢者作為健康組，利用酶聯免疫吸附試驗（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）檢測血清UCH-L1、PRDX1水平。AIS患者均使用阿替普酶靜脈溶栓治療，治療10d后評價臨床療效，比較不同療效患者臨床資料及血清UCH-L1、PRDX1水平差異，分析UCH-L1、PRDX1與阿替普酶治療效果的關系。結果研究組患者的UCH-L1、PRDX1水平高于健康組（P<0.05）。重癥AIS患者的UCH-L1、PRDX1水平高于中癥、輕癥患者（P<0.05）。完全前循環梗死型AIS患者的UCH-L1、PRDX1水平高于腔隙性梗死、后循環梗死、部分前循環梗死型（P<0.05）。AIS患者阿替普酶治療后UCH-L1、PRDX1水平低于治療前，且阿替普酶治療效果越差UCH-L1、PRDX1水平越高（P<0.05）。UCH-L1、PRDX1聯合預測AIS患者阿替普酶治療效果的效能優于單一預測（P<0.05）。年齡、疾病嚴重程度、入院時美國國立衛生研究院卒中量表評分、UCH-L1、PRDX1是影響AIS患者阿替普酶治療效果的危險因素（P<0.05）。結論UCH-L1、PRDX1水平在AIS患者血清中升高，與患者疾病嚴重程度、腦卒中分型有關，是影響AIS患者阿替普酶治療效果的危險因素，可用于阿替普酶治療效果的早期預測。

[關鍵詞]泛素羧基末端水解酶L1；過氧化還原蛋白1；急性缺血性腦卒中；阿替普酶

[中圖分類號]R743[文獻標識碼]A[DOI]10.3969/j.issn.1673-9701.2024.18.003

TherelationshipbetweenUCH-L1，PRDX1andthetherapeuticeffectofateplaseinAISpatients

PANJie，MENGDanyang，HUJin

DepartmentofNeurology，theFirstHospitalofJiaxing，Jiaxing314001，Zhejiang，China

[Abstract]ObjectiveTostudytherelationshipbetweenubiquitincarboxylterminalhydrolaseL1（UCH-L1），peroxiredoxprotein1（PRDX1），andthetherapeuticeffectofateplaseinpatientswithacuteischemicstroke（AIS）.MethodsAtotalof198AISpatientsadmittedtotheFirstHospitalofJiaxingfromJune2020toJune2022wereselectedasthestudygroup，and100healthyindividualswhounderwentphysicalexaminationsduringthesameperiodwereselectedasthehealthygroup.TheserumlevelsofUCH-L1andPRDX1weredetectedusingenzymelinkedimmunosorbentassay（ELISA）.AISpatients&nbsp;werealltreatedwithintravenousthrombolysiswithateplase.After10daysoftreatment，theclinicalefficacywasevaluated.ClinicaldataofpatientswithdifferenttherapeuticeffectsanddifferencesinserumUCH-L1andPRDX1levelswerecompared，andtherelationshipbetweenUCH-L1，PRDX1andthetherapeuticeffectofateplasewasanalyzed.ResultsTheUCH-L1andPRDX1ofpatientsinthestudygroupwerehigherthanthoseinthehealthygroup（P<0.05）.ThelevelsofUCH-L1andPRDX1insevereAISpatientswerehigherthanthoseinmoderateandmildAISpatients（P<0.05）.UCH-L1andPRDX1incompleteanteriorcirculationinfarctiontypeAISpatientswerehigherthanthoseinlacunarinfarction，posteriorcirculationinfarction，andpartialanteriorcirculationinfarctiontypes（P<0.05）.Aftertreatmentwithateplase，thelevelsofUCH-L1andPRDX1inAISpatientswerelowerthanbeforetreatment，andtheworsethetreatmenteffectofateplase，thehigherthelevelsofUCH-L1andPRDX1（P<0.05）.ThecombinedpredictionofUCH-L1andPRDX1fortheefficacyofateplasetherapyinAISpatientswasbetterthanasingleprediction（P<0.05）.Age，severityofdisease，NationalInstituteofHealthstrokescalescoreatadmission，UCH-L1，PRDX1areriskfactorsthataffecttherecoveryofAISpatientsafterateplasetreatment（P<0.05）.ConclusionTheelevatedlevelsofUCH-L1andPRDX1intheserumofAISpatientsarerelatedtotheseverityofthediseaseandstrokeclassification，andareriskfactorsaffectingtheefficacyofateplasetreatmentinAISpatients.Theycanbeusedforearlypredictionoftheefficacyofateplasetreatment.

[Keywords]UbiquitincarboxylterminalhydrolaseL1;Peroxiredoxprotein1;Acuteischemicstroke;Ateplase

急性缺血性腦卒中（acuteischemicstroke，AIS）是一種腦組織血液供應障礙性疾病，其發病率、致死率、致殘率均較高。目前，阿替普酶靜脈溶栓是AIS的主要治療方法，其可快速溶解血栓、開通罪犯血管，但仍有部分患者受多種因素的影響治療效果并不理想[1-3]。研究發現，當腦組織缺氧、缺血時過氧化還原蛋白1（peroxiredoxprotein1，PRDX1）為清除機體過氧化脂質而大量生成，但隨著腦缺血的加重和神經細胞壞死，PRDX1失去氧化還原平衡功能，經誘導炎癥介質釋放加重腦組織損傷[4]；且在腦組織病理損傷后泛素羧基末端水解酶L1（ubiquitincarboxylterminalhydrolaseL1，UCH-L1）分泌增加，通過影響神經元細胞存活和突觸重塑性引起神經功能進行性損傷[5]。由于AIS發生過程中腦組織病理損傷涉及多個細胞因子，總結既往研究UCH-L1、PRDX1在此過程中均有一定的致腦組織病理損傷加重效應，推測兩者可能在某一機制下共同影響AIS。鑒于此，本研究擬分析AIS患者血清UCH-L1、PRDX1水平與阿替普酶治療效果的關系，為AIS的臨床研究提供參考。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2020年6月至2022年6月嘉興市第一醫院收治的198例AIS患者作為研究組，其中男104例，女94例，年齡50～78歲。納入標準：①符合AIS診斷[6]，且經影像學確診，疾病嚴重程度根據患者確診時美國國立衛生研究院卒中量表（NationalInstituteofHealthstrokescale，NIHSS）評分評價：≤3分為輕癥，4～15分為中癥，>15分為重癥；②首次確診，發病12h內入院；③研究對象均知情，簽署知情同意書。排除標準：①顱內血管畸形、顱腦腫瘤或外傷者；②出血性腦卒中者；③凝血功能不全者；④入院前已治療者；⑤腦干梗死者；⑥嚴重感染性疾病者。選取同期100名健康體檢者作為健康組，無腦血管疾病史，男58名，女42名，年齡51～77歲。兩組納入者的基線資料比較差異無統計學意義（P>0.05）。本研究經嘉興市第一醫院倫理委員會審批通過（倫理審批號：2024-LY-362）。

1.2方法

1.2.1UCH-L1、PRDX1檢測抽取兩組納入者3ml空腹靜脈血，3000轉/min、r=10cm離心10min獲得血清，使用賽默飛VarioskanLUX多功能酶標儀利用酶聯免疫吸附試驗（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）法檢測血清UCH-L1、PRDX1水平，試劑盒由上海烜雅生物科技有限公司提供。

1.2.2阿替普酶治療及效果評價AIS患者在入院確診后使用阿替普酶（批準文號：國藥準字S20160055，生產單位：BoehringerIngelheimPharmaGmbH&Co.KG，規格：50mg）治療，總療程為10d。治療10d后根據NIHSS評分評價治療效果，降低率>90%為痊愈，降低率45%～90%為顯效，降低率18%～44%為有效，降低率<18%為無效。

1.3指標觀察

①比較兩組納入者的血清UCH-L1、PRDX1水平，并進一步分析不同疾病嚴重程度、不同腦卒中分型AIS患者血清UCH-L1、PRDX1水平差異。疾病嚴重程度根據患者確診時NIHSS評分評價，其中輕癥35例，中癥95例，重癥68例。腦卒中分型依據英國牛津郡社區腦卒中分型[7]：腔隙性梗死（lacunarinfarction，LACI）型34例，后循環梗死（posteriorcirculationinfarction，POCI）型38例，部分前循環梗死（partialanteriorcirculationinfarction，PACI）型56例，完全前循環梗死（completeanteriorcirculationinfarction，TACI）型70例。②比較AIS患者阿替普酶治療前后血清UCH-L1、PRDX1水平的變化，并根據阿替普酶治療效果分為痊愈組65例、顯效組55例、有效組48例、無效組30例。比較四組患者的性別、年齡、吸煙史、飲酒史、高血壓病史、糖尿病病史、冠心病病史、腦卒中分型、疾病嚴重程度、發病至入院時間、入院時NIHSS評分、實驗室指標等臨床資料及UCH-L1、PRDX1水平變化。

1.4統計學方法

采用SPSS25.0統計學軟件對數據進行處理分析。計量資料以均數±標準差（）表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用方差齊性檢驗，兩兩比較采用LSD-t事后分析方法檢驗；計數資料以例數（百分率）[n（%）]表示，比較采用c2檢驗；等級資料采用秩和檢驗；經Spearman相關性分析UCH-L1、PRDX1水平與AIS患者阿替普酶治療效果的相關性；經受試者操作特征曲線（receiveroperatingcharacteristiccurve，ROC曲線）分析UCH-L1、PRDX1水平對AIS患者阿替普酶治療效果的預測價值；經多因素Logistic回歸分析探討影響AIS患者阿替普酶治療效果的危險因素。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1UCH-L1、PRDX1水平的比較

研究組患者的UCH-L1[（0.49±0.09）ng/ml]、PRDX1[（9.50±1.08）ng/ml]水平高于健康組[（0.20±0.05）ng/ml、（3.00±0.76）ng/ml]（P<0.05），且重癥患者的UCH-L1、PRDX1水平高于中癥、輕癥患者（P<0.05）；TACI型患者的UCH-L1、PRDX1水平高于LACI、POCI、PACI型（P<0.05），見表1。

2.2AIS患者阿替普酶治療前后UCH-L1、PRDX1水平的比較

AIS患者阿替普酶治療后UCH-L1[（0.28±0.05）ng/ml]、PRDX1[（4.63±0.79）ng/ml]水平低于治療前[（0.49±0.09）ng/ml、（9.50±1.08）ng/ml]（P<0.05），且無論是輕癥、中癥，還是重癥患者在阿替普酶治療后UCH-L1、PRDX1水平均低于治療前（P<0.05），見表2。

2.3阿替普酶不同治療效果AIS患者臨床資料及血清UCH-L1、PRDX1水平比較

四組患者的年齡、冠心病病史、疾病嚴重程度、入院時NIHSS評分、白細胞計數、中性粒細胞計數、中性粒細胞與淋巴細胞比值、UCH-L1水平、PRDX1水平比較差異有統計學意義（P<0.05），見表3。

2.4UCH-L1、PRDX1與AIS患者阿替普酶治療效果的相關性

UCH-L1、PRDX1與AIS患者阿替普酶治療效果有關，見圖1。

2.5UCH-L1、PRDX1對AIS患者阿替普酶治療效果的預測價值

血清UCH-L1、PRDX1聯合預測AIS患者阿替普酶治療效果的效能優于單一預測（P<0.05），見表4。

2.6影響AIS患者阿替普酶治療效果的危險因素分析

年齡、疾病嚴重程度、入院時NIHSS評分、UCH-L1、PRDX1是影響AIS患者阿替普酶治療效果的危險因素（P<0.05），見表5。

3討論

臨床針對AIS的發生機制提出可通過有效時間窗內經阿替普酶靜脈溶栓挽救組織缺血損傷，但由于有效時間窗較窄，血管再通后機體再灌注損傷，加之多種細胞因子表達異常引起腦組織缺血性進行性損傷，從而降低臨床療效[8]。

PRDX1屬于過氧化物酶家族成員，被認為與腦組織缺血性疾病有關。臨床認為，在缺血應激期間，一方面腦細胞內PRDX1的高表達對缺血導致的氧化應激具有神經保護作用，但在死亡細胞所釋放的細胞外PRDX1可激活免疫細胞中的Toll樣受體并產生炎癥因子，從而誘發T細胞介導的AIS后遲發性炎癥[9-11]；另一方面，缺血性腦細胞死亡的基礎在于受損腦細胞及內皮細胞中一氧化氮合酶產生的一氧化氮反應和缺血時產生的亞硝化應激，而更長期、更嚴重的缺血發生時PRDX1可介導亞硝化應激，從而引起更嚴重的腦細胞損傷[12]。本研究發現，PRDX1水平在AIS患者的血清中升高，此結果與張俊湖等[13]報道一致；尤其是重癥患者、TACI型患者，可能與AIS發生后PRDX1從凋亡的神經元細胞中釋放，無以保護腦組織，反而激活神經炎癥促進疾病進展有關。

UCH-L1是一種廣泛分布于神經纖維、神經元的泛素-蛋白酶降解系統的重要蛋白，具有維持突觸穩定、腦損傷后自我修復的作用。研究表明，UCH-L1主要包括3種功能[14-15]：①水解多聚泛素鏈，使泛素單體可重復使用；②穩定泛素分子單體，經調節泛素單體水平穩定泛素-蛋白酶體系統；③以二聚體形式競爭性抑制k-48形式泛素鏈與異常蛋白的結合，使異常蛋白不能被蛋白酶體識別、降解。AIS發生后血-腦脊液屏障通透性增加，促使神經元釋放的UCH-L1直接經受損血-腦脊液屏障由腦組織間隙入血[16-17]。研究顯示腦組織損傷加重過程中，神經元內的UCH-L1被大量釋放后經細胞膜、損傷的血-腦脊液屏障釋放入血[18]。本研究發現重癥患者、TACI型患者血清UCH-L1水平明顯高于非重癥、非TACI型患者，推測可能與神經元損傷越嚴重，UCH-L1經損傷的神經元釋放入血越多有關。

阿替普酶是目前治療AIS的常用藥物，可在短時間內清除血栓部位的纖維蛋白溶酶，恢復血供，避免缺血半暗帶腦組織壞死[19]。本研究發現，雖有84.85%的患者治療有效，但仍有15.15%的患者治療無效，治療無效的患者UCH-L1、PRDX1水平明顯更高。

綜上所述，AIS患者血清UCH-L1、PRDX1高表達，且UCH-L1、PRDX1水平與阿替普酶治療效果有關，可用于阿替普酶治療效果的早期預測。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

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