懷化市新生兒地中海貧血基因特征分析

[摘要]目的了解懷化市2020—2022年新生兒地中海貧血基因分型。方法對2020年1月至2022年12月懷化市進行地中海貧血篩查的46931名新生兒進行回顧性分析。結果初篩陽性4443例，召回2153例，地中海貧血基因確診1536例。基因確診α地中海貧血1077例（70.12%），β地中海貧血431例（28.06%），中間型α地中海貧血4例；臨床表型以靜止型α地中海貧血、輕型α地中海貧血和輕型β地中海貧血為主。結論懷化市新生兒地中海貧血以α地中海貧血為主，其中又以靜止型、輕型多見。懷化市新生兒地中海貧血基因攜帶率高于全國平均水平，地區分布不均，地中海貧血防治工作形勢較嚴峻。

[關鍵詞]地中海貧血；篩查；基因；新生兒

[中圖分類號]R725.5[文獻標識碼]A[DOI]10.3969/j.issn.1673-9701.2024.18.015

GeneticcharacteristicsofnewbornthalassemiainHuaihua

GUZhenxiang，FENGZonghui，XIAOGang

DepartmentofMedicalGenetics，HuaihuaMaternalandChildHealthHospital，Huaihua418000，Hunan，China

[Abstract]ObjectiveTounderstandthegenotypesofneonatalthalassemiainHuaihua Cityfrom2020to2022.MethodsAretrospectiveanalysiswasperformedon46931newbornsscreenedforthalassemiafromJanuary2020toDecember2022inHuaihuaCity.Results4443caseswerepositiveinpreliminaryscreening，2153caseswererecalled，and1536caseswereconfirmedwiththalassemiagene.Therewere1077cases（70.12%）ofα-thalassemiadiagnosedbygene.431（28.06%）casesofβ-thalassemia;Intermediateα-thalassemia（4cases）;Theclinicalphenotypesweremainlystaticα-thalassemia，mildα-thalassemiaandmildβ-thalassemia.ConclusionTheneonatalthalassemiinhuaihuacityismainlyα-thalassemia，andtheresttypeandmildtypearemorecommon.ThegenecarryingrateofnewbornthalassemiainHuaihuaCityishigherthanthenationalaveragelevel，theregionaldistributionisuneven，andthesituationofthalassemiapreventionandcontrolisserious.

[Keywords]Thalassemia;Screening;Gene;Newborn

地中海貧血又稱海洋性貧血，是最常見的單基因遺傳病，主要由珠蛋白基因的缺陷使一種或幾種珠蛋白肽鏈合成不足或不能合成，導致血紅蛋白（hemoglobin，Hb）的組成成分改變，紅細胞穩定性變差、壽命縮短，出現不同程度的貧血[1]。地中海貧血是中國南方地區常見的遺傳性血液病，具有明顯的人群和地區分布差異，主要包括α地中海貧血和β地中海貧血[2]。地中海貧血目前無確切有效的治療方法，干細胞移植需花費巨大的人力、財力，基因治療目前處于臨床研究階段。出生前積極干預可降低重型地中海貧血的發生；對新生兒進行地中海貧血篩查并定期進行追蹤和發育評估，可提高地中海貧血患兒智力和生長發育水平，此外還可指導婚配。懷化市地處湖南省西南部，與地中海貧血高發地區廣西壯族自治區接壤，且為多民族聚居區，地中海貧血發生率位居湖南省前列。本研究對懷化市婦幼保健院新生兒疾病篩查中心2020—2022年新生兒地中海貧血篩查情況進行統計分析，以了解懷化市新生兒地中海貧血基因分布特征及臨床表型。

1資料與方法

1.1研究對象

對懷化市婦幼保健院新生兒疾病篩查中心2020—2022年新生兒地中海貧血篩查情況進行統計分析。在新生兒家屬知情同意下，對新生兒足底末梢血標本采用毛細管電泳法進行初篩檢測。召回初篩陽性新生兒，家屬知情同意下，采集血斑或靜脈血進行基因確診。本研究經懷化市婦幼保健院醫學倫理委員會審批通過（倫理審批號：202323）。

1.2標本的采集和保存

初篩標本采集時間為新生兒出生后48～72h。采集足底末梢血，血斑直徑>8mm，無污染、無滲透環，室溫下自然晾干制成干血片密閉保存在2～8℃冰箱中。初篩陽性者召回進行基因檢測，同樣以血斑或抽靜脈血2ml置于乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraaceticacid，EDTA）抗凝管中，2～8℃冰箱中保存。

1.3主要實驗儀器及試劑

CAPILAYS2全自動毛細管電泳儀購自法國Sebia公司；緩沖液、溶血素、沖洗液、正常HbA2質控品等購自法國Sebia公司；聚合酶鏈式反應（polymerasechainreaction，PCR）擴增儀購自賽默飛世爾科技公司；α地中海貧血和β地中海貧血基因檢測試劑盒購自深圳亞能生物技術有限公司；DNA快速提取試劑盒購自西安天隆科技有限公司。

1.4篩查結果判讀

α地中海貧血陽性：Hb電泳中出現HbBarts帶。β地中海貧血陽性：依據HbA值結合HbA2/HbA比值的綜合分析法進行判讀[當8.0＜HbA≤9.5時，HbA2>0（早產兒：當7.3＜HbA≤9.5時，HbA2>0）；當9.5＜HbA≤11.5時，HbA2/HbA≥0.008；當11.5＜HbA≤15.0時，HbA2/HbA≥0.015；當15.0＜HbA≤20.0時，HbA2/HbA≥0.02；當HbA>20時，HbA2/HbA≥0.025]。

1.5基因診斷

采用DNA快速提取試劑盒提取血斑或全血DNA，在PCR擴增儀上擴增。缺失型α地中海貧血基因用單管多重跨越斷裂點聚合酶鏈擴增技術法檢測（--SEA，- α3.7，- α4.2），采用聚合酶鏈擴增-反向斑點雜交技術檢測非缺失型α地中海貧血基因（ αCSα， αQSα， αWSα）和β地中海貧血基因（CD17、CD31、CD43、CD41-42、CD27-28、CD14-15、CD71-72、IVS-Ⅱ-654、IVS-Ⅰ-1、IVS-Ⅰ-5、-28、-29、-30、-32、Int、βE、CAP）。

2結果

2.1一般資料

懷化市2020—2022年新生兒活產99864人，地中海貧血篩查46931人，篩查率46.99%；篩查陽性4443人，篩查陽性率9.47%；召回2153人，基因確診1536人，確診陽性率3.27%；確診α地中海貧血1077例（占70.12%），β地中海貧血431例（占28.06%），α合并β地中海貧血28例（占1.82%），見表1。

2.2α地中海貧血臨床表型及基因型

確診α地中海貧血1077例，包括基因突變攜帶者1073例（占99.63%），HbH病4例（占0.37%），分布在通道侗族自治縣2例，麻陽苗族自治縣和靖州苗族侗族自治縣各1例；基因突變攜帶者包括靜止型α地中海貧血686例（63.69%），輕型α地中海貧血385例（35.75%），其他型α地中海貧血2例（0.19%）。共檢出14種α地中海貧血基因型，主要是-α3.7/αα（44.75%）、-- SEA/αα（35.00%）、- α4.2/αα（11.14%），見表2。

2.3β地中海貧血臨床表型及基因型

確診β地中海貧血431例，占28.06%，均為地中海貧血基因突變攜帶者，臨床表型為輕型。檢出10種β地中海貧血基因型，主要為CD41-42/βN（47.80%）、CD17/βN（25.06%）、IVS-Ⅱ-654/βN（12.30%），見表3。

2.4α合并β地中海貧血臨床表型及基因型

確診α合并β地中海貧血患兒28例，臨床表型均為輕型地中海貧血。共檢出10種基因型，主要為- α3.7/αα合并CD41-42/βN（28.57%），-- SEA/αα合并CD41-42/βN（25%），- α3.7/αα合并CD17/βN（14.29%），-- SEA/αα合并CD17/βN（10.71%），見表4。

3討論

地中海貧血在我國主要以廣西壯族自治區、廣東省及海南省高發，北方地區少見。懷化市在湖南省屬相對高發地區，3年新生兒地中海貧血基因確診異常1536例，因只召回2153例，相較于4443例篩查陽性數，理論基因確診陽性率約6.75%。2020—2021年湖南省出生缺陷協同防治重大科技項目地中海貧血專項調查顯示懷化市地中海貧血基因攜帶率約為7.22%，與新生兒地中海貧血基因攜帶率大致相符[3]。通過制定出臺地中海貧血防控實施方案，開展孕產婦及新生兒地中海貧血篩查，將防控關口前移。

懷化市確診的新生兒地中海貧血以α地中海貧血（70.12%）為主，檢出α地中海貧血基因型14種，主要為-α3.7/αα（44.75%）、--SEA/αα（35.00%），與以往國內多數報道相似[4-7]。其次為β地中海貧血（28.06%），檢出β地中海貧血基因型10種，主要為CD41-42/βN（47.80%）、CD17/βN（25.06%）；廣西壯族自治區報道以CD41和CD42為主[5]；云南省以CD17為主[8]；福建省以IVS-Ⅱ-654為主[9]。α合并β地中海貧血（1.82%）主要以-α3.7/αα合并CD41-42/βN（占28.57%）、--SEA/αα合并CD41-42/βN（25.00%）為主。另確診中間型地中海貧血（HbH病）4例（0.26%），4例HbH病患者至2022年11月生長發育尚可，Hb維持在60～100g/L，尚未進行輸血治療。通過定期隨訪，指導家長做好患兒Hb及生長發育相關指標監測。根據需要開展輸血和除鐵治療，積極提升患兒的生存質量。新生兒地中海貧血篩查對中間型地中海貧血可做到早篩查、早診斷、早治療，以便讓患兒的生活質量得到進一步提高[10-11]。

本研究未發現重型地中海貧血新生兒，防控成效的取得可能與加強婚檢、孕檢進行地中海貧血篩查，同型地中海貧血夫婦的產前診斷等防控措施有關。

本研究通過分析掌握懷化市地中海貧血的發生率、基因型，對制定出臺相關防控方案具有指導作用。懷化市作為地中海貧血相對高發地區，做好新生兒地中海貧血篩查、建立地中海貧血防控長效機制、落實三級預防措施非常必要。通過宣傳和普及地中海貧血防控知識、健全以新生兒家庭為主要對象的健康教育網絡、強化重點地區的經費保障、強化篩查質量，對降低重型地中海貧血患兒出生率、提升中間型地中海貧血患兒生活質量、提高人口素質具有重要意義。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

[參考文獻]

• 王衛平，孫錕，常立文，等.兒科學[M].9版.北京：人民衛生出版社，2019.
• 楊陽，張杰.中國南方地區地中海貧血研究進展[J].中國實驗血液學雜志，2017，25（1）：276–280.
• HUIX，QINL，HUADX，etal.Epidemiologicalsurveyofhemoglobinopathiesbasedonnext-generationsequencingplatforminHunanProvince，China[J].BiomedEnvironSci，2023，36（2）：127–134.
• 鐘玉杭，葉立新，蔡小娟，等.東莞地區新生兒地中海貧血基因特征及變化趨勢[J].中國當代兒科雜志，2020，22（5）：454–459.
• 李東明，何升.30417例兒童地中海貧血基因類型分析[J].中國當代兒科雜志，2021，23（8）：841–847.
• 鄧向群，黃姿.惠州市惠城區學齡前兒童α-和β-地中海貧血的分子流行病學研究[J].中國現代藥物應用，2019，13（7）：227–228.
• LAIK，HUANGG，SUL，etal.TheprevalenceofthalassemiainmainlandChina：Evidencefromepidemiologicalsurveys[J].SciRep，2017，7（1）：920.
• HUANGTL，ZHANGTY，SONGCY，etal.Genemutationspectrumofthalassemiaamongchildreninyunnanprovince[J].FrontPediatr，2020，8：159.
• YANGZ，ZHOUW，CUIQ，etal.GenespectrumanalysisofthalassemiaforpeopleresidinginnorthernChina[J].BMCMedGenet，2019，20（1）：86.
• 方建培，尹曉林，蘭和魁，等.兒童非輸血依賴型地中海貧血的診治和管理專家共識[J].中國實用兒科雜志，2018，33（12）：929–934.
• 許呂宏，方建培.《重型β地中海貧血的診斷和治療指南（2017年版）》解讀[J].中國實用兒科雜志，2018，33（12）：940–943.

（收稿日期：2023–11–26）

（修回日期：2024–06–18）