高穩定10%恩諾沙星溶液的制備及質量檢測

摘 要：本研究以恩諾沙星為原料，水、丙三醇為溶媒，亞硫酸氫鈉作為穩定劑，聚乙二醇400作為助溶劑，NaOH作為酸堿調節劑，制備了一種恩諾沙星溶液，并對其穩定性進行了考察。結果顯示，該溶液在0～5 ℃低溫環境下無晶體析出，在（-20±2）℃冷凍解凍后性狀穩定，含量符合標準；通過影響因素試驗與加速試驗，此款恩諾沙星溶液性質穩定。

關鍵詞：恩諾沙星溶液；制備；穩定性；加速試驗

中圖分類號：S859.79+6 文獻標識碼：B 文章編號：1673-1085（2024）08-0020-07

恩諾沙星（Enrofloxacin），屬于人工合成的第三代動物專用喹諾酮類（Fluoroquinolones）廣譜抗菌藥物，又名乙基環丙氟哌酸、乙基環丙沙星，在臨床上常使用原形或其鹽酸鹽及乳酸鹽[1]。恩諾沙星具有抗菌譜廣、殺菌力強、作用迅速、體內分布廣泛及與其他抗生素之間無交叉耐藥等多重優點，且其內服、肌注吸收迅速和較完全[2-3]。在獸醫臨床治療中，恩諾沙星對大腸桿菌、沙門氏菌、變形桿菌、巴氏桿菌、金色葡萄球菌、鏈球菌等致病菌都有殺菌效用，且被廣泛用于治療動物細菌性疾病和支原體感染等[3-5]。恩諾沙星，味苦，不溶于水，易溶于氫氧化鈉溶液、甲醇及氰甲烷等有機溶劑，其鹽酸鹽溶于水。在獸醫臨床使用中，恩諾沙星溶液也存在一定的問題，如適口性差、穩定性不足、低溫環境易析出結晶以及低溫運輸過程中凍裂包裝等[5-7]。本研究選用丙三醇和水作為溶媒，亞硫酸氫鈉作為穩定劑，聚乙二醇400作為助溶劑，NaOH作為酸堿調節劑，制備了一種恩諾沙星溶液，并對其穩定性進行了考察，以期為獸醫臨床應用提供理論依據。

1" 試驗材料

1.1" 試驗試劑

試驗所用的主要試劑見表1。

1.2" 試驗儀器

試驗所用的主要儀器見表2。

2" 試驗方法

2.1" 10%恩諾沙星溶液的制備方法

燒杯中加入處方量一半的蒸餾水，稱取處方所需的恩諾沙星粉末倒入燒杯中，磁力攪拌器以100 r/min邊攪拌邊加入NaOH，直至恩諾沙星粉末完全溶解；隨后加入處方量的丙三醇、聚乙二醇400和亞硫酸氫鈉，攪拌至完全溶解，NaOH調節pH值至11.0～13.0，蒸餾水定容，靜置，經過濾、灌封、高溫高壓滅菌，最后包裝。

2.2" 10%恩諾沙星溶液含量測定

恩諾沙星含量的測定使用2020年版《中國獸藥典》一部的高效液相色譜法[8]。十八烷基硅烷鍵合硅膠作為填充劑；0.025 mol/L的磷酸溶液（用三乙胺調節pH至3.0），乙腈（83：17）為流動相；檢測波長為278 nm。理論板數按恩諾沙星峰計算應不低于2 500，流速2 mL/min，進樣10 μL。

2.3" 10%恩諾沙星溶液穩定性檢測

2.3.1" 低溫試驗" 取不同批次包裝的10%恩諾沙星溶液樣品，分別置于0～5 ℃冷藏和（-20±2）℃冷凍條件下放置10 d，分別在第0天、第5天和第10天取樣檢測，觀察恩諾沙星溶液的外觀性狀及解凍[在（10±2） ℃解凍]后的情況。

2.3.2" 影響因素試驗

2.3.2.1" 強光照射試驗" 取不同批次包裝的10%恩諾沙星溶液樣品置于光照箱內，于照度

（4 500±500） lx條件下放置10 d，分別在第0天、第5天和第10天取樣檢測。

2.3.2.2" 高溫試驗" 取不同批次包裝的10%恩諾沙星溶液樣品，分別置于60 ℃條件下放置10 d，分別在第0天、第5天和第10天取樣檢測。

2.3.2.3" 高濕試驗" 取不同批次市售包裝的10%恩諾沙星溶液樣品，分別置于25 ℃、相對濕度（RH）95%±5%條件下放置10 d，分別在第0天、第5天和第10天取樣檢測。

2.3.3" 加速試驗" 按照中國《獸用化藥中藥研究技術指導原則匯編》（2022年）獸用化學藥物穩定性研究技術指導原則進行技術試驗[9]，取三批次包裝的10%恩諾沙星溶液樣品分別置于（40±2） ℃、相對濕度（RH）75%±5%條件下放置6個月，分別在第0、1、2、3、6個月末取樣檢測。

3" 試驗結果

3.1" 10%恩諾沙星溶液含量測定

本試驗所制備的恩諾沙星溶液，包裝規格為50 mL/瓶，標示含量為10%，根據《中國獸藥典》的方法測得的結果見表3。溶液中恩諾沙星有效含量為101.97%～105.22%，符合《中國獸藥典》對于恩諾沙星溶液的要求。

3.2" 10%恩諾沙星溶液穩定性檢測

3.2.1" 低溫試驗" 生產實踐中，恩諾沙星溶液存儲在低溫條件下易生成結晶，在運輸過程中有凍裂包裝的現象。為改善該問題，本試驗使用聚乙二醇400作為助溶劑，并在溶媒中加入丙三醇這一常見防凍劑，對配置的恩諾沙星溶液進行低溫檢測試驗，結果見表4。

由表4可見，試驗所選的3批次恩諾沙星溶液分別在冷藏和冷凍條件下放置10 d后，外觀性狀、pH值及恩諾沙星含量均無明顯變化，該溶液在0～5 ℃低溫環境下無晶體析出，在（-20±2） ℃解凍后性狀穩定，含量符合標準。

3.2.2" 影響因素試驗" 強光照射、高溫、高濕試驗結果，分別見表5、6、7。

由表5可見，包裝的恩諾沙星溶液在照度（4 500±500） lx條件下放置10 d后，外觀性狀、pH值均無明顯變化，含量雖有所下降但仍符合《中國獸藥典》的要求。已有的研究結果表明，恩諾沙星的降解與光照有關，且強光照射下易引起溶液顏色變化，所以該溶液產品應采用遮光瓶包裝，在存儲及運輸過程中應避免強光照射[10-11]。由表6、7可知，該恩諾沙星溶液在60 ℃條件下和25 ℃、相對濕度（RH）95%±5%條件下放置10 d，外觀性狀、pH值以及含量均無明顯變化，且符合獸藥典規定。

3.2.3" 加速試驗" 加速試驗結果，見表8。

由表8可見，經過6個月的加速試驗后，該款恩諾沙星溶液外觀性狀、pH值和含量均無明顯變化，表明該恩諾沙星溶液穩定性好。

4" 討論

針對恩諾沙星溶液在臨床應用中所出現的穩定性不足、低溫環境易析出結晶以及低溫運輸過程中凍裂包裝等問題，本研究采用具有廣泛相容性的高分子物質聚乙二醇400作為助溶劑來提高恩諾沙星的溶解度[12]；同時添加丙三醇這一溶媒來提高溶液的防凍性[13]，低溫試驗結果也表明該溶液在0～5 ℃低溫環境下無晶體析出，在（-20±2 ）℃冷凍解凍后性狀穩定，含量符合標準，且不存在凍裂包裝的現象，臨床應用中存在的問題得到了有效解決。添加的丙三醇具有暖甜味，并具有一定的潤滑作用[14-15]，這能改善恩諾沙星味苦的特性，有效提高恩諾沙星溶液的適口性，便于在養殖生產中使用。影響因素試驗及加速試驗結果顯示，10%恩諾沙星溶液具有較高的穩定性，這為生產更穩定的恩諾沙星溶液及注射液提供了理論依據。

綜上所述，本研究成功制備了一款符合質量要求且具有較高穩定性的恩諾沙星溶液，可采用混飲法用于治療禽類的細菌性疾病和支原體感染。該溶液為淡黃色澄明液體，pH值11.0～13.0，規格為10%

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Preparation and Quality Detection of Highly Stable 10 %

Enrofloxacin Solution

WANG Tongtong1" ，LI Jinxiang2，SUN Peizhi，LENG Dunpeng1，GAO Yan2，MENG Fanyun3，

ZHAO Shanshan2

（1.Qingdao Zhongren Animal Drug Co.， Ltd，Qingdao" 266000，China；

2. Jiaozhou Agricultural and Rural Bureau，Qingdao" 266000，China；

3.Jiaoxi Animal Health and Product Quality Workstation，Qingdao" 266000，China）

Abstract：" In this study， a highly stable enrofloxacin solution was prepared by using enrofloxacin as raw material， water and glycerol as solvent， sodium bisulfite as stabilizer， polyethylene glycol 400 as cosolvent and NaOH as acid-base regulator. We also investigated its stability. The results showed that the solution had no crystal precipitation at low temperature of 0～5 ℃， and the properties were stable after freezing and thawing at （-20±2 ）℃， and the content met the standard. Through the influence factor test and accelerated test， it can be seen that the enrofloxacin solution is stable.

Keywords：" Enrofloxacin; Manufacturing technology; Stability; Accelerated test