流式細胞儀在腎移植術后慢性腎衰竭患者免疫功能監測中的應用價值分析

【摘要】目的 分析流式細胞儀在腎移植術后慢性腎衰竭患者免疫功能監測中的應用價值，為臨床治療提供參考。方法 選取2021年10月至2022年10月益陽市中心醫院收治的45例行腎移植手術的慢性腎衰竭患者，將其納入手術組；將同期未行腎移植手術的45例慢性腎衰竭患者納入非手術組，進行回顧性分析。比較兩組患者T淋巴細胞亞群（CD4+T淋巴細胞百分比、CD3+T淋巴細胞百分比、CD4+/CD8+比值）水平、自然殺傷細胞（NK）水平及不良反應發生情況。結果 手術組患者CD4+T淋巴細胞百分比、CD3+T淋巴細胞百分比、NK水平均低于非手術組，CD4+/CD8+比值水平高于非手術組（均P<0.05）。兩組患者不良反應總發生率比較，差異無統計學意義（P>0.05）。結論 流式細胞儀在腎移植術后慢性腎衰竭患者免疫功能監測中具有積極意義，能夠有效對患者的免疫情況進行預警和提示，從而指導臨床后續治療，值得臨床應用。

【關鍵詞】流式細胞儀；腎移植；T淋巴細胞亞群；自然殺傷細胞

【中圖分類號】R446.11 【文獻標識碼】A 【文章編號】2096-2665.2024.20.0093.03

DOI：10.3969/j.issn.2096-2665.2024.20.030

腎移植是慢性腎衰竭患者的主要治療方法之一，腎移植術后使用免疫抑制劑（如他克莫司、嗎替麥考酚酯等）對預防術后排斥反應至關重要[1]。若患者服用過小劑量的免疫抑制劑可能會引起移植器官的排斥反應，甚至導致移植失敗，從而使患者不得不進行二次透析，影響患者預后。雖然長期使用免疫抑制劑可有效減少移植器官的排斥反應，但會增加患者感染（特別是肺部細菌和病毒感染）的發生風險，從而影響患者預后[2-3]。 T淋巴細胞亞群檢測被認為是評估腎移植術后慢性腎衰竭患者免疫功能的有效方法，有助于醫師準確識別患者免疫系統的變化，對預防排斥反應或感染具有重要意義[4]。基于此，本研究選取90例慢性腎衰竭患者為研究對象，分析流式細胞儀在腎移植術后慢性腎衰竭患者免疫功能監測中的應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021年10月至2022年10月益陽市中心醫院收治的45例行腎移植手術的慢性腎衰竭患者，將其納入手術組；將同期未行腎移植手術的45例慢性腎衰竭患者納入非手術組，進行回顧性分析。非手術組患者中男性30例，女性15例；年齡37～75歲，平均年齡（63.44±10.70）歲。手術組患者中男性32例，女性13例；年齡39～76歲，平均年齡（63.18±10.82）歲。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），組間具有可比性。本研究經益陽市中心醫院醫學倫理委員會批準。納入標準：⑴符合《慢性腎衰竭中西醫結合診療指南》[5]中慢性腎衰竭的診斷標準，且經臨床檢查確診；⑵年齡＞18歲；⑶手術組患者術后群體反應性抗體（PRDJZUEbUsdSD9HWavm7RERg==A）結果為（-）；⑷臨床資料完整。排除標準：⑴合并肝功能障礙者；⑵合并惡性腫瘤或嚴重心腦血管系統疾病者；⑶血流動力學指標異常者；⑷妊娠后哺乳期女性；⑸合并嚴重感染疾病者。

1.2 檢測方法 使用一次性使用真空采血管（康緣愛電子有限公司，鄂械注準20222223906，型號： EDTA.K2）采集兩組患者空腹靜脈血5 mL，采用逆向抽取法取適量全血樣品于試管底部（注意不要讓全血樣品接觸到試管壁），加入適量熒光標記抗體，后蓋好管帽，輕晃3 s，于室溫下避光孵育25 min后上機檢測。在檢測前，使用質控球對該儀器進行標定與校準，使其熒光探測CV值＜2％。采用流式細胞儀[碧迪醫療器械（上海）有限公司，國械注進20152221424，型號： BD FACSCanto Ⅱ]檢測兩組患者T淋巴細胞亞群（CD4-+、 CD3+、 CD8+T淋巴細胞百分比）水平、自然殺傷細胞（NK）水平。

1.3 觀察指標 ⑴T淋巴細胞亞群。記錄兩組患者CD4+、 CD3+、 CD8+T淋巴細胞百分比，并計算CD4+/CD8+比值。⑵自然殺傷細胞（NK）。記錄兩組患者NK水平。⑶不良反應發生情況。觀察并記錄兩組患者檢測過程中不良反應的發生情況，包括頭暈乏力、惡心嘔吐、面色蒼白、心悸。不良反應總發生率=不良反應總發生例數/總例數×100%。

1.4 統計學分析 采用SPSS 20.00統計學軟件處理數據。計量資料以（x）表示，采用t檢驗；計數資料以[例（％）]表示，采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者T淋巴細胞亞群比較 手術組患者CD4+、 CD3+T淋巴細胞百分比均低于非手術組， CD4+/CD8+比值高于非手術組，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表1。

2.2 兩組患者NK水平比較 手術組患者NK水平為（11.36±3.26） %，低于非手術組的（16.70±3.77） %，差異有統計學意義（t值=7.187， P＜0.001）。

2.3 兩組患者不良反應發生情況比較 兩組患者不良反應總發生率比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表2。

3 討論

慢性腎衰竭疾病進展緩慢，通常由糖尿病、高血壓、慢性腎小球腎炎等疾病引起，主要臨床表現為疲勞、水腫、尿量減少、貧血、高血壓等，臨床常見治療方法包括控制基礎病、透析、腎移植等[6]。此外，該病患者在腎移植術后需接受免疫抑制劑藥物治療，以調節其免疫系統、改善腎功能，降低腎移植失敗及感染的發生風險[7]。

T淋巴細胞亞群與移植器官免疫細胞亞群存在差異，且與移植器官免疫應答啟動時的白細胞抗原（HLA）抗體水平及機體的排斥反應有關[8]。此外，T淋巴細胞亞群可直觀地反映腎移植術后慢性腎衰竭患者的免疫狀況，有助于對患者腎臟功能進行早期評價和干預[9]。臨床常采用流式細胞儀檢測患者T淋巴細胞亞群水平，該儀器能夠在短時間內分析數萬個細胞，利用熒光標記的單克隆抗體或熒光染料對單個細胞進行多項特性的分析，進而獲取多重信息[10]。

CD4+T淋巴細胞是人體內最重要的免疫反應細胞，其活化程度能夠反映機體的免疫狀態。腎移植術后慢性腎衰竭患者的CD4+T淋巴細胞被激活，進而分泌多種細胞因子，對維持機體的免疫平衡起重要作用[11-12]。NK作為一種重要的免疫細胞，可有效殺死病毒感染的靶細胞。當腎移植患者發生病毒感染后，其NK水平明顯降低，提示NK可能在巨細胞病毒感染中發揮重要作用。而CD8+T淋巴細胞百分比水平的升高則與機體發生排斥反應（發熱、尿少、血尿，可能伴有移植腎區出血等）有關[13]。當機體發生排斥反應時，CD8+T淋巴細胞的異常升高，釋放大量免疫活性物質，進而影響腎臟的正常代謝功能，導致腎小球濾過率下降，腎小管重吸收功能受損，嚴重威脅患者生命健康。

本研究結果顯示，手術組患者CD4+T淋巴細胞百分比、CD3+T淋巴細胞百分比、NK水平均低于非手術組，CD4+/CD8+比值水平高于非手術組。這提示流式細胞儀能夠有效檢測出腎移植術后慢性腎衰竭患者的T淋巴細胞亞群水平，從而評估患者的免疫功能情況，有利于對該疾病進行早期診斷、早期治療。分析原因為，本研究使用前向與側向的散射光作為門控裝置，可保證淋巴細胞的純度，提高測量結果的可重復性，具有較高的預測價值[14]。此外，該儀器細胞計數結果更準確、自動化程度更高、使用更便捷，可準確有效地反映腎移植術后慢性腎衰竭患者的免疫排斥反應（如宿主抗移植物反應、移植物抗宿主反應、急性排斥反應、遲發型變態反應等），從而及時發現患者的感染情況并及時采取干預措施[15-16]。本研究結果還顯示，兩組患者不良反應總發生率比較，差異無統計學意義，提示流式細胞儀檢測具有一定的安全性，不會引起受試者較大的不適，更易被接受。

綜上所述，流式細胞儀在腎移植術后慢性腎衰竭患者免疫功能監測中具有積極意義，能有效地對患者具體免疫情況進行預警，從而指導臨床后續治療，值得臨床應用。但本研究仍存在一定缺陷，如為確保研究的順利實施，受到時間限制納入樣本量較少，因此，在后續的研究中仍需要擴大樣本量、開展多中心的研究繼續探究流式細胞儀在腎移植術后慢性腎衰竭患者免疫功能監測中的應用價值，為臨床治療提供參考。

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