重組結核桿菌融合蛋白(EC)在結核病潛伏感染診斷和篩查中的應用價值

摘要：目的 研究重組結核桿菌融合蛋白（EC）在結核病潛伏感染診斷和篩查中應用價值。方法 選取我縣2023年9月秋季入學的3000名高一年級新生進行結核病篩查，采用隨機數字表法分為對照組（n=1500）和觀察組（n=1500），對照組進行卡介菌純蛋白衍生物（BCG-PPD）皮膚試驗檢測，觀察組進行EC皮膚試驗檢測，同時篩查肺結核可疑癥狀及結核病密切接觸史。對PPD皮膚試驗強陽性者進行胸片DR檢查，EC皮膚試驗陽性者進行胸片DR檢查。比較兩組皮試陽性率、有肺結核可疑癥狀及結核病密切接觸史患者陽性率、胸片DR結果及試驗不良反應。結果 觀察組皮試陽性率（0.80%）低于對照組（16.53%）（P<0.05）;觀察組有肺結核可疑癥狀及結核病密切接觸史者陽性率與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）;觀察組皮試陽性/強陽性者胸片DR檢出率為8.33%，高于對照組的6.67%（P<0.05）;觀察組檢測不良反應發生率低于對照組（P<0.05）。結論 EC在結核病潛伏感染診斷和篩查中具有顯著的作用，可一定程度提高篩查準確性，同時檢測安全性相對高，可作為學校結核病篩查的首選方法。

關鍵詞：結核病;重組結核桿菌融合蛋白;潛伏感染;篩查

中圖分類號：R52 文獻標識碼：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2024.20.031

文章編號：1006-1959（2024）20-0147-04

Application of Recombinant Mycobacterium Tuberculosis Fusion Protein （EC） in the Diagnosisand Screening of Latent Infection of Tuberculosis

LIAO Yuanyuan1，SUN Yanfei2，CHEN Dasheng1，ZHANG Zhicong2

（1.Department of Tuberculosis Prevevtion，Anyuan County Center for Disease Control and Prevention，Anyuan 342100，Jiangxi，China;

2.Department of Infectious Diseases，Anyuan County People's Hospital，Anyuan 342100，Jiangxi，China）

Abstract：Objective To study the application value of recombinant Mycobacterium tuberculosis fusion protein （EC） in the diagnosis and screening of latent tuberculosis infection. Methods A total of 3000 high school freshmen enrolled in the autumn of September 2023 in our county were selected for tuberculosis screening. They were divided into control group （n=1500） and observation group （n=1500） by random number table method. The control group was tested by BCG-PPD skin test， and the observation group was tested by EC skin test. At the same time， the suspicious symptoms of tuberculosis and the history of close contact with tuberculosis were screened. Chest DR examination was performed on those with strong positive PPD skin test， and chest DR examination was performed on those with positive EC skin test. The positive rate of skin test， the positive rate of patients with suspicious symptoms of tuberculosis and close contact history of tuberculosis， the results of chest X-ray DR and adverse reactions were compared between the two groups.Results The positive rate of skin test in the observation group （0.80%） was lower than that in the control group （16.53%） （P<0.05）. There was no significant difference in the positive rate of patients with suspicious symptoms of tuberculosis and close contact history of tuberculosis between the observation group and the control group （P>0.05）. The detection rate of chest DR in patients with positive/strong positive skin test in the observation group was 8.33%， which was higher than 6.67% in the control group （P<0.05）. The incidence of adverse reactions in the observation group was lower than that in the control group （P<0.05）.Conclusion EC plays a significant role in the diagnosis and screening of latent tuberculosis infection， which can improve the accuracy of screening to a certain extent， and the safety of detection is relatively high. Thus， it can be used as the preferred method for tuberculosis screening in schools.

Key words：Tuberculosis;Recombinant Mycobacterium tuberculosis fusion protein;Latent infection;Screening

結核病（tuberculosis）是由結核分枝桿菌感染引起的慢性傳染病，嚴重危害人類的健康[1]。結核潛伏感染是指機體內感染了結核分枝桿菌，但沒有發生臨床結核病，沒有臨床細菌學或者影像學方面活動結核的證據[2]。結核潛伏感染者沒有結核病相關的癥狀和體征，沒有傳染性[3]。相關數據調查顯示[4]，結核潛伏感染人群（latent tuberculosis infection， LTBI）是結核新發病的重要來源。目前檢測診斷 LTBI 者尚缺乏統一的方法及相應的標準[5]。因此，如何簡便且確性又高地診斷感染者并實施預防是結核病防治工作的關鍵。目前我國注冊上市的TBST產品ESAT-6/CFP-10蛋白有重組結核桿菌融合蛋白（EC），EC具有結核分枝桿菌復合群抗原特異性，可將其作為變態反應原用于結核感染篩查[6，7]。本研究選擇我縣2023年9月秋季入學的3000名高一年級新生作為篩查對象，進一步探究EC 在結核病潛伏感染診斷和篩查中的價值，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 選取安遠縣2023年9月秋季入學的3000名高一年級新生進行結核病篩查，采用隨機數字表法分為對照組（n=1500）和觀察組（n=1500），對照組男780名，女720名;年齡15～17歲，平均年齡（16.02±1.03）歲;有肺結核可疑癥狀及結核病密切接觸史者20名。觀察組男765名，女735名;年齡14～17歲，平均年齡（15.98±0.80）歲;有肺結核可疑癥狀及結核病密切接觸史者17名。兩組性別、年齡及有肺結核可疑癥狀及結核病密切接觸史者比例比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。所有學生均自愿參加本研究，并簽署知情同意書。

1.2納入和排除標準 納入標準：①均為高一年級新生;②均進行現場流行病學個案調查。排除標準：①隨訪資料不完善者;②依從性較差，不能積極配合者。

1.3方法 對照組進行卡介菌純蛋白衍生物（BCG-PPD）皮膚試驗檢測[8]，觀察組進行EC皮膚試驗檢測，同時篩查肺結核可疑癥狀及結核病密切接觸史。皮膚試驗檢測法：分別在對照組、觀察組的受試者左前臂掌側中下1/3的皮膚部位皮內注射BCG-PPD 0.1ml（5 IU）、EC 0.1 ml（5 IU）試劑，直至出現6～10 mm大小橘皮樣的圓形丘，不要揉摩，將針稍捻轉后退出，在皮試后72 h（48～72 h）查驗反應，PPD皮試以觸摸和測皮膚硬結為陽性判斷標準，EC皮試以紅暈或硬結為判斷標準。對PPD和EC皮膚試驗陽性者進行胸片DR檢查。

1.4觀察指標 在皮試后72 h （48～72 h）查驗反應，比較兩組皮試陽性率、有肺結核可疑癥狀及結核病密切接觸史患者陽性率、胸片DR結果以及試驗不良反應。

1.4.1 BCG-PPD判斷標準[9] 以觸摸和測皮膚硬結為陽性判斷標準，根據《肺結核診斷標準》（WS 288-2017），皮試硬結平均直徑[（橫徑+縱徑）/2）]<5 mm或無反應者為陰性;硬結平均直徑 ≥5 mm為陽性反應（其中硬結平均直徑5～10 mm為一般陽性;硬結平均直徑10～15 mm為中度陽性;硬結平均直徑≥15 mm或局部出現雙圈、水皰、壞死及淋巴管炎者為強陽性，為結核感染強陽性反應）。

1.4.2 EC判斷標準[10] 以紅暈或硬結大者為準。無紅暈或硬結反應為陰性;紅暈或硬結平均直徑[橫徑+縱徑）/2]≥5 mm或水皰、壞死、淋巴管炎者為陽性，為結核感染。

1.5統計學方法 采用統計軟件包SPSS 20.0版本對本研究的數據進行統計學處理，采用（x±s）表示符合正態分布的計量資料，組間比較采用t檢驗;計數資料采用[n（%）]表示，采用χ2檢驗，P<0.05說明差異有統計學意義。

2結果

2.1兩組皮試陽性率比較 觀察組陽性率低于對照組（P<0.05），見表1。

2.2兩組有肺結核可疑癥狀及結核病密切接觸史者陽性率比較 觀察組陽性率與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表2。

2.3兩組胸片DR檢測結果比較 觀察組皮試陽性/強陽性者胸片DR檢出率高于對照組DR檢出率（P<0.05），見表3。

2.4兩組檢測不良反應發生率比較 觀察組檢測不良反應發生率低于對照組（P<0.05），見表4。

3討論

當前，結核病潛伏感染的診斷主要依賴于特定的診斷技術和輔助檢查[11]。目前，世界衛生組織（WHO）推薦的主要診斷技術包括結核菌素皮膚試驗（PPD）、γ-干擾素釋放試驗以及新型皮膚試驗如EC，其中EC是一種新型檢測方法，它結合了兩種檢測技術的特點，成為結核感染檢測技術家族的新成員[12，13]。但是目前關于EC對結核病潛伏感染診斷和篩查的相關研究較少，且已有研究結論存在差異，是否具有良好應用有效性、安全性，還需要臨床進一步探究證實[14，15]。

本研究結果顯示，觀察組陽性率低于對照組（P<0.05），提示EC皮試檢測陽性檢出率低于BCG-PPD皮試。但是EC皮試均為陽性或強陽性，提示兩者強陽性率基本相似。因此，EC與BCG-PPD皮膚試驗檢測均可對結核病潛伏感染進行篩查。分析認為，因為PPD 成分復雜，易受卡介苗接種和非結核分枝桿菌感染產生的交叉免疫反應影響，從而假陽性概率較高[16，17]。本研究顯示，觀察組陽性率與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05），表明對肺結核可疑癥狀及結核病密切接觸史者進行篩查，EC皮膚試驗檢測陽性率與BCG-PPD結果基本相似，進一步提示對高危人群進行篩查，以上兩種方法可自由選擇[18]。盧鵬等[19]的研究與本次結果類似，說明在肺結核可疑癥狀及結核病密切接觸史人群中，采用EC皮膚試驗診斷結核潛伏感染可能更為合適。建議在肺結核可疑癥狀及結核病密切接觸史人群中采用EC皮膚試驗陽性以提高靈敏度。因此，臨床在高危人群篩查中EC皮膚試驗檢測具有顯著的優勢[19]。本研究發現，觀察組皮試陽性/強陽性者胸片DR檢出率為8.33%，高于對照組DR檢出率6.67%（P<0.05），提示對EC皮試陽性者進行胸片DR檢查，可提高檢出率。該結論表明通過EC皮試大規模篩查后，進行DR進一步檢查，可相對提高結核病潛伏感染檢出率，有效降低假陽性，縮小篩查范圍。同時EC皮膚試驗檢查價格適中，操作簡便，在大規模人群篩查中具有優勢。此外，觀察組檢測不良反應發生率低于對照組（P<0.05），提示EC皮試檢測安全性更好，檢測不良反應少，利于良好的篩查耐受性，尤其適合學校大規模篩查[20]。

總之，EC作為我國自主研發的一種新型結核感染皮膚試驗的檢測，不僅價格適中，操作簡便，而且具有良好的敏感度，可避免卡介疫苗影響，降低假陽性。同時EC在高危人群篩查中可獲得與比BCG-PPD高的靈敏度，且不良反應少，在大規模人群篩查中具有顯著的應用優勢。

參考文獻：

[1]盧鵬，劉巧，竺麗梅，等.中國東部地區結核菌素試驗診斷結核病感染臨界值的確定：基于人群的現況調查[J].中華流行病學雜志，2020，41（3）：363-367.

[2]祖筱雯，要玉霞，龔德華，等.肺結核患者密切接觸者對6個月單用異煙肼預防性治療方案的接受度[J].中國公共衛生，2020，36（3）：369-374.

[3]史四九，方雪暉，張根友.《中國學校結核病防控指南（2020年版）》重點問題解讀與思考[J].熱帶病與寄生蟲學，2021，19（5）：245-248，300.

[4]張婷，汪清雅，張婭，等.重慶市2009-2019年貧困地區肺結核登記情況分析[J].中國熱帶醫學，2021，21（4）：329-433.

[5]World Health Organization.WHO guidelines on tuberculosis infection prevention and control：2019 update[M].Genera：World Health Organization，2019.

[6]張婷，楊眉，吳成果，等.重組結核分枝桿菌融合蛋白在學校結核病篩查中的應用[J].預防醫學情報雜志，2021，37（11）：1609-1613.

[7]丁曉艷，陸偉，劉巧，等.γ干擾素釋放試驗與結核菌素皮膚試驗應用于人群結核潛伏性感染診斷的比較[J].江蘇預防醫學，2018，29（3）：237-240.

[8]夏勇，夏嵐，陳闖，等.2017-2019 年四川省肺結核登記率時空分布特征[J].預防醫學情報雜志，2022，38（3）：307-313.

[9]蘇倩，汪清雅，張婷，等.重組結核分枝桿菌融合蛋白皮膚試驗與TST在學校結核潛伏感染篩查中的比較[J].中國感染控制雜志，2023，22（5）：547-551.

[10]譚壽南，鄭志剛，黃寶楊，等.2014-2019 年廣西壯族自治區柳州市耐藥結核病趨勢預測分析[J].疾病檢測，2021，36（7）：714-718.

[11]郭茹，蔡寶云，黃學銳，等.肺結核患者治愈后復發危險因素分析和耐藥狀況調查[J].現代生物醫學進展，2020，20（9）：1699-1702.

[12]何鈺玨，楊樞敏，張嵐，等.甘肅省病原學陽性肺結核患者耐藥篩查情況分析[J].衛生職業教育，2021，39（2）：139-141.

[13]馬聰興，張秀芝，王鹛，等.2019 年北京市朝陽區高中及以下階段新生入學肺結核篩查結果分析[J].現代預防醫學，2020，47（21）：3908-3910.

[14]Moodley N，Velen K，Saimen A，et al.Digital Chest Radiography Enhances Screening Efficiency for Pulmonary Tuberculosis in Primary Health Clinics in South Africa[J].Clin Infect Dis，2022，74（9）：1650-1658.

[15]楊碩，李貴霞，郭映輝，等.2010-2020 年石家莊地區兒童結核病流行病學特征及實驗室檢查結果分析[J].中國預防醫學雜志，2020，21（12）：1302-1306.

[16]Su W，Ruan Y，Li T，et al.Epidemiological Characteristicsof Rifampicin-Resistant Tuberculosis in Students-China，2015-2019[J].China CDC Wkly，2021（26）：549-552.

[17]楊蕾，韋芬，張凱，等.重組結核桿菌融合蛋白（EC）的穩定性與有效性研究[J].中國防癆雜志，2020，42（8）：799-807.

[18]葛芳，金櫻，吳凱，等.重組結核桿菌融合蛋白皮膚試驗在腎透析患者診斷結核潛伏感染的應用價值[J].江蘇預防醫學，2023，30（5）：26-29.

[19]盧鵬，劉巧，竺麗梅，等.中國東部地區結核菌素試驗診斷結核病感染臨界值的確定：基于人群的現況調查[J].中華流行病學雜志，2020，41（3）：363-367.

[20]陳同，賀天鋒，于梅，等.浙江省寧波市16795名入學新生結核菌素試驗結果分析[J].疾病監測，2023，20（6）：206-209.

編輯/成森

基金項目：2023年贛州市指導性科技計劃項目（編號：GZ2023ZSF372）

作者簡介：廖媛媛（1979.10-），女，江西安遠縣人，本科，主治醫師，主要從事結核病預防及治療工作