宮頸病變和宮頸癌組織中嗜酸性粒細胞浸潤及其臨床意義

［摘 要］ 目的：探討嗜酸性粒細胞 （EOS） 在宮頸組織中的浸潤差異及其與宮頸相關疾病之間的關系，闡明EOS對宮頸上皮不典型增生（CIN）和宮頸癌發生發展的影響。方法：收集256例宮頸疾病患者的臨床資料，根據其發病情況分為宮頸癌組（n=46，其中宮頸鱗狀細胞癌26 例、宮頸腺癌15 例和宮頸腺鱗癌5 例）、慢性宮頸炎組（n=50）、CINⅠ期組（n=50）、CINⅡ期組（n=50）、CINⅢ期組（n=30） 和正常組（癌旁正常宮頸組織，n=30）。陰道鏡觀察各組患者宮頸組織形態表現，薄層液基細胞學測試（TCT） 法觀察各組患者宮頸脫落細胞形態表現，雜交捕獲-化學發光法檢測各組患者宮頸組織人乳頭瘤病毒（HPV） 感染情況，HE 染色觀察各組患者宮頸組織病理形態表現，剛果紅染色檢測各組患者宮頸組織中EOS 浸潤數，Pearson 相關性分析EOS 浸潤數與宮頸癌惡性程度的相關性。結果：正常組患者宮頸表面光滑，呈粉紅色，毛細血管均勻分布；慢性宮頸炎組患者宮頸表面呈紅色炎性改變，部分伴有納氏囊腫形成，可見不同程度的糜爛和潰瘍等；CINⅠ期、CINⅡ期和CINⅢ期組患者宮頸可見上皮潰瘍、增厚和形態不規則，細鑲嵌及點狀血管明顯；宮頸癌組患者宮頸表面隆起，可見新生腫物及壞死性潰瘍，質脆易出血。醋酸染色后，正常組患者宮頸無明顯改變；慢性宮頸炎組患者宮頸呈少量白色改變，持續時間較短；CINⅠ期、CINⅡ期和CINⅢ期組患者宮頸薄醋白上皮不規則、呈地圖樣邊界，其中CINⅠ期組患者宮頸部分組織呈醋白反應，CINⅡ期組患者宮頸出現明顯醋白反應，CINⅢ期組患者宮頸醋白反應非常明顯，面積較大，且持續時間較長；宮頸癌組患者宮頸醋白反應明顯，白色上皮厚，持續時間久，輪廓硬直，邊界清晰。正常組患者宮頸碘染色后呈棕褐色，著色均勻；慢性宮頸炎組患者宮頸炎性病變區著色差；CINⅠ期組患者宮頸上皮化生區碘著色不明顯；CINⅢ期組患者宮頸病變區著色差，轉化區周圍面積較大；宮頸癌組患者宮頸表面不規則，呈菜花樣生長，碘染色后不著色，呈現為橘黃或芥末黃色。TCT 法觀察，正常組患者宮頸脫落細胞中無異型性細胞，炎癥細胞浸潤少；慢性宮頸炎組患者宮頸脫落細胞中可見大量的中性粒細胞和EOS 等炎癥細胞，無異型性細胞；CINⅠ期和CINⅡ期組患者宮頸脫落細胞中可見雙核異型性細胞，核質比較高，細胞核較深染，周圍見空暈；CINⅢ期組患者脫落細胞中可見較多異型性細胞，核質比較高，核膜不規則；宮頸癌組患者宮頸脫落細胞中可見大而顯著的核仁，聚集成片，合胞體樣改變明顯；與正常組比較，CINⅠ期組、CINⅡ期組、CINⅢ期組和宮頸癌組患者宮頸脫落細胞異型性均明顯增加。雜交捕獲-化學發光法檢測，與正常組和慢性宮頸炎組比較，CINⅠ期、CINⅡ期和CINⅢ期組患者HPV感染數和TCT 異型性細胞數均明顯增加（Plt;0. 05）；與CINⅠ期、CINⅡ期和CINⅢ期組比較，宮頸癌組患者HPV 感染數和TCT 異型性細胞數均明顯增加（Plt;0. 05）。HE 染色觀察，正常組宮頸組織細胞形態正常，結構清晰，可見中性粒細胞、單核細胞、巨噬細胞、EOS 和淋巴細胞等炎癥細胞浸潤；慢性宮頸炎組患者炎癥細胞浸潤增加；CIN 組患者宮頸細胞核核仁稍大，可見異型性細胞，炎癥細胞主要分布于異型性細胞周圍；宮頸癌組患者宮頸細胞核仁大而深染，細胞異型性明顯，癌細胞周圍炎癥細胞浸潤增加。與正常組比較， 慢性宮頸炎組患者宮頸組織中炎癥細胞數和EOS 浸潤數均明顯增加（Plt;0. 05）， CIN 組患者炎癥細胞數和EOS 浸潤數均明顯增加（Plt;0. 05）； 與慢性宮頸炎組比較，CIN 組患者炎癥細胞數和EOS 浸潤數均明顯減少（Plt;0. 05）；與慢性宮頸炎組和CIN 組比較，宮頸癌組患者炎癥細胞數和EOS 浸潤數均明顯增加（Plt;0. 05）。宮頸癌組織中EOS 主要分布于癌巢周圍，與CINⅠ期組比較，CINⅡ期組和CINⅢ期組患者宮頸組織中EOS 浸潤數均明顯增加（Plt;0. 05）；與CINⅡ期組比較，CINⅢ期組患者宮頸組織中EOS 浸潤數明顯增加（Plt;0. 05）。腫瘤惡性程度越高，EOS 浸潤越多，EOS 浸潤數與宮頸癌浸潤深度呈正相關關系（r=0. 533 0，Plt;0. 01）。結論：HPV感染和EOS浸潤具有促進宮頸癌癌前病變及宮頸癌發生發展的作用。

［關鍵詞］ 嗜酸性粒細胞； 宮頸腫瘤； 宮頸上皮不典型增生； 慢性宮頸炎； 細胞浸潤

［中圖分類號］ R737. 33 ［文獻標志碼］ A

據世界衛生組織（World Health Organization，WHO） 統計，癌癥目前是世界人口死亡的主要原因之一，隨著世界人口的增加和老齡化日益加重，癌癥的發病和死亡率逐漸升高，探討癌癥病因及危險因素較為重要［1］。宮頸癌在女性癌癥中發病率較高，位居全球女性癌癥發病率和死亡率的第2 位，并呈逐年上升趨勢。宮頸癌以中老年女性發病居多， 嚴重威脅女性健康。2020 年， 全世界約有新發宮頸癌病例60. 4 萬， 死亡病例約34. 2 萬［2-3］，2000～2016 年， 中國宮頸癌新發病例119 300 例，因該疾病死亡人數達到37 200 例，其發病率在女性惡性腫瘤中位居第3 位［4-5］。宮頸癌發病機制尚未完全闡明， 但高危型人乳頭瘤病毒（humanpapilloma virus， HPV） 感染仍是宮頸癌發生發展的重要原因。HPV 感染可促進炎癥細胞的浸潤，其中嗜酸性粒細胞（eosinophils，EOS） 與炎癥反應性疾病及惡性腫瘤的發生發展有密切關聯［6］。研究［7-9］ 證實：惡性腫瘤，如胃癌、食管癌、頭頸部腫瘤、乳腺癌、卵巢癌和肺癌等， 伴有大量EOS浸潤，EOS 在Lewis 肺癌、直結腸癌及轉移性黑色素瘤中浸潤增加， 且EOS 在頭頸部腫瘤和口腔鱗狀細胞癌的診斷意義不一致。EOS 在宮頸癌發生發展過程中的作用及其相關機制的研究較少。因此， 本研究探討EOS 在宮頸組織中的浸潤差異及其與宮頸相關疾病之間的關系， 闡明EOS 對宮頸上皮不典型增生（cervical intraepithelial neoplasia，CIN） 和宮頸癌發生發展的影響，為宮頸癌的臨床診斷和預后研究提供實驗依據。

1 資料與方法

1. 1 研究對象 將2018年1月—2023年3月于吉林省長春市婦產醫院收治的宮頸疾病患者256 例，根據其發病情況分為宮頸癌組（n=46，其中宮頸鱗狀細胞癌26 例、宮頸腺癌15 例和宮頸腺鱗癌5 例）、慢性宮頸炎組（n=50）、CIN Ⅰ 期組（n=50）、CIN Ⅱ 期組（n=50）、CIN Ⅲ 期組（n=30） 和正常組（癌旁正常宮頸組織，n=30）。本研究經吉林省長春市婦產醫院醫學倫理委員會批準（倫理審批號：CLSP-LW-2023-02），所有患者自愿簽署知情同意書。

1. 2 主要試劑和儀器 剛果紅、蘇木素和陰離子防脫片劑（北京中杉金橋試劑有限公司），HPV 核酸檢測試劑盒（上海普洛麥格生物），Papanicolaou染色液（上海尚寶生物科技有限公司），石蠟、二甲苯、甲醛、無水乙醇、蘇木素和伊紅（天津化工有限公司），中性樹膠封片劑（上海研生生化試劑公司），甲醇剛果紅溶液（剛果紅0. 5 g，甲醇80 mL，甘油20 mL）、堿性乙醇分化液（氫氧化鉀0. 2 g，80% 乙醇100 mL）、自配3% 冰醋酸溶液（蒸餾水97 mL，冰醋酸3 mL） 和1% 碘溶液為北華大學基礎醫學院病理生理學教研室自配。陰道鏡（型號：Vostro 20-3052，中國廈門戴爾醫療集團），化學發光免疫分析儀（型號：KPS-QQ80） 和液基薄層細胞制片機（型號：TIB-AutoPrep 2406）（石家莊康普生科技有限公司），顯微鏡和配套攝像儀（型號：BX53， 日本Olympus 公司）， 電子天平（型號：FA1004B，上海圣科儀器有限公司），移液器（德國Eppendorf 公司）， 臺式低速離心機（型號：L400， 湖南湘儀集團）， 電熱鼓風干燥箱（型號：DHG-9053A，上海左樂儀器有限公司）。

1. 3 陰道鏡觀察各組患者宮頸組織形態表現 所有患者陰道鏡檢查前24 h 內避免陰道用藥、性交和其他陰道檢查，檢查前排空膀胱，患者外陰部充分清潔，并保持陰道干燥。檢查時患者采取截石位，外陰涂少量無菌潤滑劑，防止患者不適，輕柔插入窺器，充分暴露宮頸，利用陰道鏡進行觀察。為了保證視野清晰，用無菌棉拭子輕輕擦去多余宮頸分泌物，觀察宮頸引導區、轉化區和陰道穹窿部，尋找糜爛、潰瘍、腫塊及顏色變化等異常情況。將3% 冰醋酸溶液涂抹于宮頸，觀察宮頸表面出現醋白上皮的情況，判斷有無點狀血管、異常血管和醋酸后醋白上皮反應等， 對于可疑區域反復聚焦觀察。將1% 碘溶液涂抹于疑似病變區，觀察該區域形態表現，正常宮頸組織全部著色，宮頸異常區域有不同程度的不著色碘反應， 對于可疑的病變組織，用活檢鉗取適量的組織塊進行病理檢測。

1. 4 薄層液基細胞學測試（thin-cytologic test，TCT）法觀察各組患者宮頸脫落細胞形態表現 采用TCT 法觀察宮頸脫落細胞形態表現，將采樣的宮頸細胞刷于標本瓶，取出細胞染色機中的比率濁度標準液，將標準液放入標本中，混勻，搖晃，使細胞充分解離分散。將其放入液基薄層細胞制片機內，按設備說明書操作，系統自動制備薄層細胞圖片，完成細胞固定、水化、染色和分化等過程，人工封片，顯微鏡下觀察宮頸脫落細胞形態表現。

1. 5 雜交捕獲-化學發光法檢測各組患者宮頸組織HPV感染情況 采用雜交捕獲-化學發光法對收集的各組患者宮頸組織進行HPV 核酸檢測，所有操作過程嚴格遵循試劑盒說明書。

1. 6 HE 染色觀察各組患者宮頸組織病理形態表現 對所收集的各組患者宮頸組織進行HE 染色，光學顯微鏡下觀察各組患者宮頸組織病理形態表現和炎癥細胞浸潤情況，計數炎癥細胞數。

1. 7 剛果紅染色檢測各組患者宮頸組織中EOS浸潤數 10% 甲醛溶液固定宮頸組織，常規石蠟包埋，切片，取組織切片于二甲苯中脫蠟3 次，每次10 min。經梯度酒精脫水，蒸餾水沖洗5 min，剛果紅染色20 min， 堿性酒精分化液分化5 s， 自來水沖洗5 min，蘇木素復染15 min，自來水沖洗5 min，再經梯度酒精脫水，擦去玻片周圍多余水漬，二甲苯透明，中性樹脂封片保存。由2 位病理醫師雙盲獨立閱片，分別進行宮頸脫落細胞形態判定、HE 染色和剛果紅染色結果判定。在固定染色時間下，當細胞膜和（或） 胞質出現對比明顯的紅色顆粒時，判定為有EOS 陽性浸潤。在200 倍顯微鏡下拍攝，采用Image J 軟件分析各組患者宮頸組織中EOS 浸潤情況，以EOS 浸潤數代表EOS 浸潤情況。EOS 浸潤數=陽性細胞個數/染色面積（mm2）。

1. 8 統計學分析 采用 SPSS 20. 0統計軟件進行統計學分析。各組患者宮頸脫落細胞異型性細胞數和HPV 感染數為計數資料，組間比較采用χ2 檢驗或Fisher 確切概率法；EOS 浸潤數為計量資料，符合正態分布， 以x±s 表示， 多組間樣本均數比較采用單因素方差分析，組間樣本均數兩兩比較采用SNK-q 檢驗。采用Pearson 相關性分析EOS 浸潤數與宮頸癌惡性程度的相關性。以Plt;0. 05 為差異有統計學意義。

2 結 果

2. 1 各組患者一般資料 正常組患者平均年齡（48. 0±7. 0） 歲， 慢性宮頸炎組患者平均年齡（43. 5±5. 2） 歲， CIN Ⅰ 期組患者平均年齡（40. 2±2. 5） 歲， CIN Ⅱ 期組患者平均年齡（40. 9±3. 2） 歲， CIN Ⅲ 期組患者平均年齡（42. 2±2. 0） 歲，宮頸癌組患者平均年齡（56. 0±5. 0） 歲。所有患者術前均未行放療和化療，術后均有明確病理學診斷。見表1 和2。

2. 2 各組患者宮頸組織形態表現 正常組患者宮頸表面光滑，呈粉紅色，毛細血管均勻分布；慢性宮頸炎組患者宮頸表面呈紅色炎性改變，部分伴有納氏囊腫形成，可看到不同程度的糜爛和潰瘍等；CINⅠ期、CINⅡ期和CINⅢ期組患者宮頸可見上皮潰瘍、增厚和形態不規則，細鑲嵌及點狀血管明顯；宮頸癌組患者宮頸表面隆起，可見新生腫物及壞死性潰瘍，質脆易出血。

醋酸染色后，正常組患者宮頸無明顯改變；慢性宮頸炎組患者宮頸呈少量白色改變，持續時間較短；CINⅠ期、CINⅡ期和CINⅢ期組患者宮頸薄醋白上皮不規則、呈地圖樣邊界，其中CINⅠ期組患者宮頸部分組織呈醋白反應，CINⅡ期組患者宮頸出現明顯醋白反應，CINⅢ期組患者宮頸醋白反應非常明顯，面積較大，且持續時間較長；宮頸癌組患者宮頸醋白反應明顯，白色上皮厚，持續時間久，輪廓硬直，邊界清晰。見圖1。

復方碘實驗結果顯示：正常組患者宮頸碘染色后呈棕褐色，著色均勻；慢性宮頸炎組患者宮頸炎性病變區著色差；CINⅠ期組患者宮頸上皮化生區碘著色不明顯； CIN Ⅲ 期組患者宮頸病變區著色差，轉化區周圍面積較大；宮頸癌組患者宮頸表面不規則，呈菜花樣生長，碘染色后不著色，呈現為橘黃或芥末黃色。見圖2。

2. 3 各組患者宮頸脫落細胞形態表現 正常組患者宮頸脫落細胞中無異型性細胞， 炎癥細胞浸潤少；慢性宮頸炎組患者宮頸脫落細胞中可見大量的中性粒細胞和EOS 等炎癥細胞， 無異型性細胞；CINⅠ期和CINⅡ期組患者宮頸脫落細胞可見雙核異型性細胞，核質比較高，細胞核較深染，周圍見空暈；CINⅢ期組患者脫落細胞可見較多異型性細胞，核質比較高，核膜不規則；宮頸癌組患者宮頸脫落細胞可見大而顯著的核仁，聚集成片，合胞體樣改變明顯。與正常組比較，CINⅠ期組、CINⅡ期組、CINⅢ期組和宮頸癌組患者宮頸脫落細胞異型性均明顯增加。見圖3。

2. 4 各組患者宮頸脫落細胞中異型性細胞數和HPV 感染情況 與正常組和慢性宮頸炎組比較，CINⅠ期、CINⅡ期和CINⅢ期組患者HPV 感染數和TCT 異型性細胞數均明顯增加（Plt;0. 05）。與CINⅠ期、CINⅡ期和CINⅢ期組比較，宮頸癌組患者HPV 感染數和TCT 異型性細胞數均明顯增加（Plt;0. 05）。見表3。

2. 5 各組患者宮頸組織病理形態表現 正常組宮頸組織細胞形態正常， 結構清晰， 可見中性粒細胞、單核細胞、巨噬細胞、EOS 和淋巴細胞等炎癥細胞浸潤； 慢性宮頸炎組患者炎癥細胞浸潤增加；CIN 組患者宮頸細胞核核仁稍大，可見異型性細胞，炎癥細胞主要分布于異型性細胞周圍；宮頸癌組患者宮頸細胞核仁大而深染， 細胞異型性明顯， 癌細胞周圍炎癥細胞浸潤增加。與正常組比較，慢性宮頸炎組患者宮頸組織炎癥細胞數明顯增加（Plt;0. 05）， CIN 組患者炎癥細胞數明顯增加（Plt;0. 05）。與慢性宮頸炎組比較，CIN 組患者炎癥細胞數明顯減少（Plt;0. 05）。與慢性宮頸炎組和CIN 組比較，宮頸癌組患者炎癥細胞數明顯增加（Plt;0. 05）。見圖4 和5。

2. 6 各組患者宮頸組織中EOS浸潤情況 與正常組［（2. 3±0. 4） 個·mm-2］ 比較，慢性宮頸炎組患者宮頸組織中EOS 浸潤數［（37. 2±3. 2）個·mm-2］明顯增加（Plt;0. 05），CIN 組患者宮頸組織中EOS浸潤數［（23. 5±3. 5） 個·mm-2］ 明顯增加（Plt;0. 05）。與慢性宮頸炎組比較，CIN 組患者宮頸組織中EOS 浸潤數明顯減少（Plt;0. 05）。宮頸癌組織中EOS 主要分布于癌巢周圍， 與慢性宮頸炎組和CIN 組比較， 宮頸癌組患者宮頸組織中EOS 浸潤數［ （52. 5±8. 3） 個·mm-2］ 明顯增加（Plt;0. 05）。與CIN Ⅰ 期組［ （8. 2±2. 5） 個·mm-2］比較， CIN Ⅱ 期組和CIN Ⅲ 期組患者宮頸組織中EOS 浸潤數［（22. 3±4. 2） 個·mm-2和（39. 5±5. 2） 個·mm-2］ 均明顯增加（Plt;0. 05）。與CIN Ⅱ 期組比較， CIN Ⅲ 期組患者宮頸組織中EOS 浸潤數明顯增加（Plt;0. 05）。見圖6 和7。

2. 7 EOS 浸潤數與宮頸癌浸潤深度的相關性 腫瘤惡性程度越高， EOS 浸潤越多， EOS 浸潤數與宮頸癌浸潤深度呈正相關關系（r=0. 533 0，Plt;0. 01）。見圖8。

3 討 論

宮頸癌病變周期長，對女性影響大，因此早期篩查對宮頸癌防治具有重要意義。陰道鏡是一種立體放大鏡， 可以清楚、自然和立體地進行活體檢查，通過觀察宮頸上皮的結構及血管形態，可及時發現與癌相關的異型組織和血管。同時，陰道鏡對可疑病變的組織切片具有一定指導意義，有助于早期宮頸癌的診斷，提高宮頸病變的檢出率。

近年來，對惡性腫瘤發生發展機制的探索逐漸擴展到腫瘤組織和腫瘤免疫微環境的協同作用，其中免疫和炎癥反應是當前研究的熱點［10］。研究［11］證實：腫瘤發生發展過程中伴有炎癥細胞浸潤和細胞因子分泌，在微生物作用下的菌群環境改變和炎癥刺激均可導致宮頸脫落細胞形態改變及宮頸內微環境變化，同時誘導大量炎癥細胞和免疫細胞（如中性粒細胞、單核細胞、巨噬細胞EOS 和淋巴細胞等） 浸潤于炎癥組織區， EOS 作為重要的炎癥細胞參與疾病的發病過程。研究［12］發現：EOS 可浸潤于多種腫瘤組織，如鼻咽癌、乳腺癌和卵巢癌等，對腫瘤細胞有直接或間接殺傷作用。SIMSON 等［13］發現： EOS 具有明顯的抗纖維肉瘤效應。動物實驗和臨床研究［14-16］ 證實：白細胞介素（interleukin，IL）-4、IL-2 和IL-25 發揮抗腫瘤作用的主要機制與EOS 產生增加有密切關聯， EOS 可合成和分泌大量的過氧化物酶、陽離子蛋白及腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor， TNF） 等炎癥因子， 直接調控抗癌細胞的生長和轉移［17-19］。研究［20-21］ 發現：EOS 具有促進宮頸鱗狀細胞癌、Hodgkin’s 淋巴瘤和黑色素瘤細胞的生長及轉移等效應， EOS 可分泌大量的前列腺素E2， 加速Th1 細胞向Th2 細胞轉化，減少腫瘤抗原表達，抑制CD8+淋巴細胞的抗腫瘤效應。EOS 能夠加速細胞外基質的降解，產生大量基質金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs），促進腫瘤侵襲和轉移。EOS 分泌大量的細胞因子， 如血管內皮生長因子A （vascularendothelial growth factor-A， VEGF-A）、堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF） 和IL-8 等，促進腫瘤組織的血管生成。此外， EOS 與細胞程序性死亡配體1 （programmedcell death-ligand 1，PD-L1） 和程序性細胞死亡蛋白受體1 （programmed cell death protein-1，PD-1） 結合， 與細胞發揮促瘤效應有關［22-25］。因此， EOS在實體惡性腫瘤發生發展中的作用依據組織來源、腫瘤類型和分化程度等不同，發揮雙向調節效應。其機制較為復雜， 可能與EOS 表面富含模式識別受體（pattern recognition receptors， PRRs）， 能夠特異性識別病原微生物或其他致病信號發生炎癥反應，釋放大量的細胞因子、化學因子及顆粒陽性蛋白有關， 也可能與EOS 表達多種類型細胞因子（如IL-2、IL-3 和TNF- β 等） 受體、化學因子受體、整合素和黏附分子受體，并通過內分泌、旁分泌或自分泌等形式發揮促瘤或抗瘤效應有關。EOS是免疫球蛋白、補體、蛋白酶、脂類介質如白三烯（leukotrienes， LTs）、前列腺素（prostaglandins，PGs） 和唾液酸結合免疫球蛋白樣凝集素8 （sialicbindingimmunoglobulin-like lectin-8， Siglec-8） 等細胞因子的特異性識別部位，通過不同的信號途徑發揮雙向調節效應［26］。EOS 在宮頸癌發生發展過程中的作用及其機制還需要進一步驗證。

本研究結果顯示： CIN 組織HPV 感染率明顯增加，而宮頸癌組織幾乎均伴發HPV 感染，提示HPV 是促進CIN 及宮頸癌發生發展的重要因素。HPV 是一個包含環狀雙鏈DNA 的無包膜病毒，目前已發現200 多種亞型，分為高危型、中危型和低危型［27］。研究［28-29］ 證實：HPV 在機體多為一過性感染，可自行消退或好轉，但若宿主基因突變或缺陷， HPV 病毒基因部分片段與突變或缺陷的宿主基因整合，可引起基因調控紊亂，導致惡性腫瘤的發生發展。高危型HPV 癌蛋白E6 和E7 的表達是導致宮頸上皮細胞惡性轉化及維持致癌表型的關鍵因素，當E6 出現高表達時，原癌基因骨髓細胞瘤病病毒癌基因同源物（myelocytomatosis viraloncogene homolog，MYC） 表達水平隨之升高，進而影響人端粒酶催化亞單位（human telomerasereverse transcdptase， hTERT） 表達， 使受感染的細胞不斷復制。感染了HPV 的宮頸宿主細胞還可以通過信號傳導通路調整HPV 的感染狀態，E6 蛋白作用的重要靶點是P53 和含有底物的PDZ 結構域，E7 蛋白則通過結合視網膜母細胞瘤抑制蛋白（retinoblastoma tumor suppressor protein， pRB），間接使轉錄因子E2F 與pRB 分離，細胞周期失控，導致宮頸癌的發生［30］。除E6 和E7 外，E2 和E5 在宮頸癌發生過程中的作用不可忽視，HPV E2 可以啟動病毒DNA 復制，調節基因轉錄過程，可以通過與細胞蛋白相互作用的間接機制影響宿主細胞增殖、凋亡和衰老等關鍵過程。E5 可以改變表皮生長因子（epidermal growth factor，EGF） 的內吞途徑， 阻礙EGF 受體（EGF receptor， EGFR） 降解， 導致其介導的生長信號明顯增加， 從而擴大HPV 感染；E5 還可以通過細胞膜內堿化，使主要組織相容性復合體（major histocompatibilitycomplex，MHC）Ⅰ相關分子被限制在高爾基體內，進而下調細胞表面的MHCⅠ 類分子，通過損害T 淋巴細胞的抗原識別和呈遞過程逃避宿主的免疫監視，形成HPV 持續性感染［31］。此外，E5 通過與E6 和E7 相互作用協同促進宮頸癌的發展。HPV 感染宮頸后固有免疫功能下降和T 淋巴細胞介導的免疫逃逸在CIN 及宮頸癌患者發病中發揮重要作用［32］。盡管HPV 感染后患者短時間內無明顯的臨床表現，但通過采集患者宮頸脫落細胞及HPV 核酸檢測，有助于判斷患者的病情， HPV 感染是宮頸癌發生發展重要的因素。

CIN 目前被認為是宮頸癌的癌前病變［33］。本研究結果顯示：與正常宮頸組織及慢性宮頸炎組織比較，CIN 和宮頸癌組織中EOS 浸潤數明顯增加，且隨著CIN 的進展和宮頸癌浸潤深度的增加，EOS 浸潤數明顯增加，提示EOS 和HPV 的雙重協同作用促進宮頸癌惡性轉化。HPV 可通過弱化免疫反應和（或） 強化免疫調節表型適應新的免疫環境， EOS 作為效應因子和協調因子在先天性免疫及適應性免疫過程中發揮作用， 如EOS 以Th2 免疫依賴方式抵抗微生物感染或組織損傷， 也可與T 淋巴細胞亞群或樹突細胞相互作用發揮致瘤效應。HPV 和EOS 均可通過Th2 型免疫反應或影響TGF-β1、MMPs 和VEGF 合成及分泌，相關細胞因子均具有免疫抑制、促進腫瘤發生和進展的效應［34-35］。此外， HPV 感染后， 宿主的免疫調節因子由IL-2 向EOS 趨化的細胞因子蛋白轉變，導致大量EOS 分泌到外周血管， 富集于腫瘤組織周圍并活化，進一步使疾病惡化［36］。

綜上所述，HPV 感染和EOS 浸潤具有促進癌前病變及宮頸癌發生發展的作用，但其對宮頸癌作用的具體機制尚需通過體內外實驗進一步探索。

利益沖突聲明：所有作者聲明不存在利益沖突。

作者貢獻聲明：魯艷艷參與論文選題、實驗數據整理和論文撰寫，許翔博和吳亞梅參與數據收集，劉雨齊和王涵參與數據統計學分析，楊麗娟、王振江和肖梓屾參與實驗操作，劉艷波參與論文審校和指導。

[參考文獻]

［1］ BRAY F， LAVERSANNE M， WEIDERPASS E， et al.

The ever-increasing importance of cancer as a leading

cause of premature death worldwide［J］. Cancer， 2021，

127（16）： 3029-3030.

［2］ SUNG H， FERLAY J， SIEGEL R L， et al. Global

cancer statistics 2020： GLOBOCAN estimates of

incidence and mortality worldwide for 36 cancers in

185 countries［J］. CA Cancer J Clin， 2021， 71（3）：

209-249.

［3］ 蔡會龍， 原偉光. 全球及我國宮頸癌流行現狀及防治

策略［J］. 臨床腫瘤學雜志， 2023， 28（1）： 90-93.

［4］ ZHENG R S， ZHANG S W， ZENG H M， et al.

Cancer incidence and mortality in China， 2016［J］. J Natl

Cancer Cent， 2022， 2（1）： 1-9.

［5］ KPOGHOMOU M A， GENEAU M， MENARD J，

et al. Assessment of an onco-sexology support and

follow-up program in cervical or vaginal cancer patients

undergoing brachytherapy［J］. Support Care Cancer，

2021， 29（8）： 4311-4318.

［6］ 何朝奎. 腫瘤免疫治療中嗜酸性粒細胞作用的研究

進展［J］. 中國腫瘤生物治療雜志， 2023， 30（2）： 178-182.

［7］ GRISARU-TAL S， ROTHENBERG M E， MUNITZ A.

Eosinophil-lymphocyte interactions in the tumor

microenvironment and cancer immunotherapy［J］.

Nat Immunol， 2022， 23（9）： 1309-1316.

［8］ REICHMAN H， KARO-ATAR D， MUNITZ A.

Emerging roles for eosinophils in the tumor

microenvironment［J］. Trends Cancer， 2016， 2（11）：

664-675.

［9］ DAVIS B P， ROTHENBERG M E. Eosinophils and

cancer［J］. Cancer Immunol Res， 2014， 2（1）： 1-8.

［10］王思羽， 王寬松. 嗜酸性粒細胞在腫瘤免疫微環境中的

作用研究進展［J］. 中國普通外科雜志， 2022， 31（5）：

675-687.

［11］肖梓屾， 刁書騰， 張莉爽， 等. IL-17A對前列腺癌細胞

遷移的促進作用及其機制［J］. 吉林大學學報（醫學

版）， 2020， 46（6）： 1194-1201.

［12］GHAFFARI S， REZAEI N. Eosinophils in the tumor

microenvironment： implications for cancer

immunotherapy［J］. J Transl Med， 2023， 21（1）： 551.

［13］SIMSON L， ELLYARD J I， DENT L A， et al.

Regulation of carcinogenesis by IL-5 and CCL11： a

potential role for eosinophils in tumor immune

surveillance［J］. J Immunol， 2007， 178（7）： 4222-4229.

［14］SOSMAN J A， BARTEMES K， OFFORD K P， et al.

Evidence for eosinophil activation in cancer patients

receiving recombinant interleukin-4： effects of

interleukin-4 alone and following interleukin-2

administration［J］. Clin Cancer Res， 1995， 1（8）：

805-812.

［15］HULAND E， HULAND H. Tumor-associated

eosinophilia in interleukin-2-treated patients： evidence of

toxic eosinophil degranulation on bladder cancer cells［J］.

J Cancer Res Clin Oncol， 1992， 118（6）： 463-467.

［16］BENATAR T ， CAO M Y ， LEE Y ， et al. IL-17E ，

a proinflammatory cytokine， has antitumor efficacy

against several tumor types in vivo［J］. Cancer Immunol

Immunother， 2010， 59（6）： 805-817.

［17］GRISARU-TAL S ， ITAN M ， KLION A D ， et al.

A new dawn for eosinophils in the tumour

microenvironment［J］. Nat Rev Cancer， 2020， 20（10）：

594-607.

［18］VESTERINEN E， PUKKALA E， TIMONEN T， et al.

Cancer incidence among 78 000 asthmatic patients［J］.

Int J Epidemiol， 1993， 22（6）： 976-982.

［19］ZHU J， WANG H， GAO M J， et al. Prognostic values

of lymphocyte and eosinophil counts in resectable

cervical squamous cell carcinoma［J］. Future Oncol，

2019， 15（30）： 3467-3481.

［20］ZHU J， WANG H， GAO M J， et al. Prognostic values

of lymphocyte and eosinophil counts in resectable

cervical squamous cell carcinoma［J］. Future Oncol，

2019， 15（30）： 3467-3481.

［21］PESCE S， THOREN F B， CANTONI C， et al. The

innate immune cross talk between NK cells and

eosinophils is regulated by the interaction of natural

cytotoxicity receptors with eosinophil surface ligands［J］.

Front Immunol， 2017， 8： 510.

［22］BANDEIRA-MELO C， BOZZA P T， WELLER P F.

The cellular biology of eosinophil eicosanoid formation

and function［J］. J Allergy Clin Immunol， 2002，

109（3）： 393-400.

［23］NISSIM BEN EFRAIM A H， LEVI-SCHAFFER F.

Roles of eosinophils in the modulation of

angiogenesis［J］. Chem Immunol Allergy， 2014， 99：

138-154.

［24］YOUSEFI S ， HEMMANN S ， WEBER M ， et al.

IL-8 is expressed by human peripheral blood eosinophils.

Evidence for increased secretion in asthma［J］.

J Immunol， 1995， 154（10）： 5481-5490.

［25］KLEFFEL S， POSCH C， BARTHEL S R， et al.

Melanoma cell-intrinsic PD-1 receptor functions promote

tumor growth［J］. Cell， 2015， 162（6）： 1242-1256.

［26］MATTEI F， ANDREONE S， MARONE G， et al.

Eosinophils in the tumor microenvironment［J］. Adv Exp

Med Biol， 2020， 1273： 1-28.

［27］LEGRAND F， DRISS V， DELBEKE M， et al.

Human eosinophils exert TNF- α and granzyme

A-mediated tumoricidal activity toward colon carcinoma

cells［J］. J Immunol， 2010， 185（12）： 7443-7451.

［28］QIU Y F， NGUYEN K D， ODEGAARD J I， et al.

Eosinophils and type 2 cytokine signaling in macrophages

orchestrate development of functional beige fat［J］. Cell，

2014， 157（6）： 1292-1308.

［29］李 雙， 李明珠， 叢 青， 等. 人乳頭瘤病毒疫苗臨床

應用中國專家共識［J］. 中國婦產科臨床雜志， 2021，

22（2）： 225-234.

［30］薛劍俠， 王玉蘭， 李曉旭， 等. 人乳頭瘤病毒在宮頸癌

發病機制中的研究進展［J］. 中國藥物與臨床， 2017，

17（4）： 542-543.

［31］崔湘杰， 史 荔， 陶玉芬. HPV E2、E5致癌機制及相關

疫苗研究進展［J］. 中華疾病控制雜志， 2024， 28（1）：

96-100.

［32］王佳森， 張 妍， 付曉雪， 等. 宮頸癌免疫學發病機制

研究進展［J］. 國際婦產科學雜志， 2022， 49（2）：

207-211.

［33］賈榮霞， 周 旭， 石贄堃， 等. 宮頸上皮內瘤變Ⅰ級患

者病變進展危險因素分析［J］. 吉林大學學報（醫學

版）， 2022， 48（6）： 1528-1534.

［34］RIMINI M， FRANCO P， BERTOLINI F， et al. The

prognostic role of baseline eosinophils in HPV-related

cancers： a multi-institutional analysis of anal SCC and

OPC patients treated with radical CT-RT［J］.

J Gastrointest Cancer， 2023， 54（2）： 662-671.

［35］REGAUER S， REICH O. The histologic and molecular

spectrum of highly differentiated HPV-independent

cervical intraepithelial neoplasia［J］. Am J Surg Pathol，

2023， 47（8）： 942-949.

［36］MARKS M A， VISCIDI R P， CHANG K， et al.

Differences in the concentration and correlation of

cervical immune markers among HPV positive and

negative perimenopausal women［J］. Cytokine， 2011，

56（3）： 798-803.