纖維對白羽肉雞生長性能、生理生化、胃腸結構和盲腸微生物的影響

摘" 要：

本試驗旨在探究不同纖維種類和添加水平對白羽肉雞生長性能、雞糞中氮代謝和糞纖維含量、血清生化指標、胃腸結構和盲腸微生物的影響，為肉雞日糧中纖維的合理利用提供理論依據。研究選用體重為（47.07±0.26）g 的1日齡圣澤“901”白羽肉雞公雛360羽，隨機分成6組，每組6個重復，每個重復10羽。各組飼糧情況分別為基礎飼糧+1.5 kg·t－1纖維樣品1（T1組）、基礎飼糧+2.5 kg·t－1纖維樣品1（T2組）、基礎飼糧+150 g·t－1纖維樣品2（T3組）、基礎飼糧+2 kg·t－1纖維樣品3（T4組）、基礎飼糧+3 kg·t－1纖維樣品3（T5組）和基礎飼糧（T6組）。試驗分1～21 d和22～42 d兩階段，共42 d。結果表明： 與T6組相比，1）T2組22～42 d平均日采食量和1～42 d料重比分別顯著提高了5.04%和3.07%（Plt;0.05），T3組22～42 d和1～42 d料重比分別顯著提高了4.16%和3.68%（Plt;0.05），T5組21 d和42 d平均體重、1～21 d和1～42 d平均日增重以及22～42 d平均日采食量分別顯著提高6.26%和4.93%、6.70%和5.02%以及4.87%（Plt;0.05）；2）T1組21 d氮的攝入量和氮存留量、T4組21 d氮存留率、T5組21 d氮存留率和42 d氮存留量分別顯著提高了11.24%和16.77%、6.18%、7.65%和9.95%（Plt;0.05），T5組21 d糞氮含量顯著降低了6.87%（Plt;0.05）；3）T1組42 d尿素氮和總抗氧化能力分別顯著提高333.33%和57.14%（Plt;0.05），T2組21 d和42 d尿素氮含量分別顯著提高375.00%和466.67%，21 d丙二醛含量顯著降低17.69%（Plt;0.05），T3組21 d和42 d尿素氮分別顯著提高350.00%和233.33%，21 d丙二醛含量顯著降低15.58%，42 d總蛋白和低密度脂蛋白分別顯著降低15.34%和20.00%，谷丙轉氨酶顯著提高了102.70%（Plt;0.05），T4組42 d 葡萄糖含量顯著提高35.36%（Plt;0.05），T5組21 d白蛋白、甘油三酯和丙二醛分別顯著降低10.79%、25.45%和33.60%，42 d高密度脂蛋白和谷丙轉氨酶分別顯著提高25.32%和62.16%（Plt;0.05）；4）T1組42 d回腸長度、T2組空腸重量和回腸長度、T3組空腸和回腸長度以及T5組回腸長度分別顯著提高了5.04%、13.71%和19.26%、19.38%和21.84%以及23.18%（Plt;0.05）；5）T3組42 d回腸絨毛高度顯著降低29.20%（Plt;0.05），T5組42 d十二指腸和空腸隱窩深度分別顯著提高116.67%和73.33%，十二指腸絨隱比顯著降低48.02%（Plt;0.05）；6）Alpha和Beta 多樣性分析各組間盲腸微生物種群結構有明顯差異，21 d腸道微生物OTU種類和數量增加，其中以Bacteroides和Allstilpes中的Bacteroides fragilis A和Alistipes finegoldii豐富度最高，為優勢屬種，21 d Bacteroides和Bacteroides fragilis A豐富度最高，42 d Allstilpes和Alistipes finegoldii豐富度最高；KEGG通路功能預測分析其主要在碳水化合物代謝和氨基酸代謝中發揮功能作用，其次是轉運和復制與修復。由此可見，基礎飼糧添加纖維可促進肉雞的腸道發育、改善和穩定腸道菌群結構，提高營養物質利用率，從而提高日增重和采食量。在本試驗條件下，添加3 kg·t－1木之纖產品效果最佳。

關鍵詞：

白羽肉雞；膳食纖維；生長性能；腸道結構；腸道微生物

中圖分類號：S831.5

文獻標志碼：A """"文章編號： 0366-6964（2024）12-5602-18

doi： 10.11843/j.issn.0366-6964.2024.12.024

開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：

收稿日期：2024-07-12

基金項目：福建省人民政府·中國農業科學院農業高質量發展“5511”協同創新工程項目（XTCXGC2021012；XTCXGC2021019）

作者簡介：陳鑫珠（1985-），女，福建龍巖人，副研究員，博士，主要從事動物營養與飼料科學研究，E-mail：010622051@163.com

*通信作者：李忠榮，主要從事動物營養研究，E-mail： 448655630@qq.com；劉" 景，主要從事動物營養研究，E-mail： 184660569@qq.com

Effects of Fibers on Growth Performance， Physiology and Biochemistry， Gastrointestinal Structure and Cecal Microflora of Broilers

CHEN" Xinzhu1，2，3， YUE" Wen1， FANG" Guiyou1， MIAO" Furong1， HUANG" Qingxiang2， LIN" Pingdong1， LI" Zhongrong1*， LIU" Jing1*

（1.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine， Fujian Academy of Agricultural Sciences/Fujian Key Laboratory of Animal Genetics and Breeding， Fuzhou 350013， China;

2.Fujian Best Biological Co.， LTD， Quanzhou 362599，" China;

3.Postdoctoral Programme of Fujian Fuda Biotech Co.， Ltd.， Fuzhou 350007，" China）

Abstract：

This trial was conducted to investigate the effect of different kind of fiber and different adding levels on growth performance， fecal nitrogen metabolism， fecal fiber content， serum biochemical index， the gastrointestinal structure and cecal microflora of broilers， in order to provide theoretical basis for the rational utilization of fiber in broilers' diet. Three hundred and sixty one-day-old healthy Shengze “901” male broilers with similar body weight （47.07±0.26 g） were randomly allotted into 6 groups with 6 replicates per group and 10 broilers per replicate. The broilers were randomly subjected to one of the following 6 treatments for 42 days with 2 periods： control group （T6 group） fed the basal diet， the addition groups were fed a basal diet supplemented with 1.5 kg·t－1 fiber sample 1 （T1 group）， 2.5 kg·t－1 fiber sample 1 （T2 group）， 150 g·t－1 fiber sample 2 （T3 group）， 2 kg·t－1 fiber sample 3 （T4 group） and 3 kg·t－1 fiber sample 3 （group T5）， respectively. The results showed as follows：

compared with T6 group， 1） The average daily feed intake （ADFI） for 22-42 d and the feed/gain （F/G） for 1-42 d in T2 group were significantly increased by 5.04% and 3.07% （Plt;0.05） respectively， the F/G for 22-42 d and 1-42 d in T3 group were significantly increased by 4.16% and 3.68% （Plt;0.05） respectively， and average body weight （ABW） for 21 d and 42 d， average daily gain （ADG） for 1-21 d and 1-42 d and ADFI for 22-42 d in T5 group were increased significantly by 6.26% and 4.93%， 6.70% and 5.02% and 4.87% （Plt;0.05） respectively; 2） The nitrogen intake and retention （NI and NR） at 21 d in group T1， the nitrogen retention rate （NRR） at 21 d in group T4， the NRR at 21 d in group T5 and the NR at 42 d were significantly increased by 11.24% and 16.77%， 6.18%， 7.65% and 9.95%， respectively （Plt;0.05）. Fecal nitrogen content in T5 group at 21 d was significantly decreased by 6.87% （Plt;0.05）; 3） Urea nitrogen （UN） and total antioxidant capacity （T-AOC） at 42 d in T1 group were significantly increased by 333.33% and 57.14% （Plt;0.05） respectively， UR at 21 and 42 d in T2 group were significantly increased by 375.00% and 466.67% respectively， and malondialdehyde （MDA） at 21 d was significantly decreased by 17.69% （Plt;0.05）. In T3 group， UR at 21 and 42 d was significantly increased by 350.00% and 233.33% respectively， MDA at 21 d was significantly decreased by 15.58%， total protein （TP） and low density lipoprotein （LDL） at 42 d were significantly decreased by 15.34% and 20.00% respectively， and alanine aminotransferase （ALT） was significantly increased by 102.70% （Plt;0.05）. At 42 d， glucose content in T4 group was significantly increased by 35.36% （Plt;0.05）， and albumin （ALB）， triglyceride （TG） and MDA at 21d in T5 group were significantly decreased by 10.79%， 25.45% and 33.60%， respectively. At 42 d， high density lipoprotein （HDL） and ALT were significantly increased by 25.32% and 62.16%， respectively （Plt;0.05）; 4） At 42 d， the ileum length （IL） in T1 group， the jejunum weight （JW） and IL in T2 group， the jejunum length （JL） and IL in T3 group and IL in T5 group were significantly increased by 5.04%， 13.71% and 19.26%， 19.38% and 21.84% and 23.18%， respectively （Plt;0.05）; 5） The villus height （VH） of ileum in T3 group was significantly decreased by 29.20% （Plt;0.05） at 42 d， the crypt depth （CD） of duodenum and jejunum in T5 group were significantly increased by 116.67% and 73.33%， respectively， and the VH/CD of duodenum was significantly decreased by 48.02% （Plt;0.05）. 6）

Alpha and Beta diversity analysis showed that caecum microflora has obvious difference between each group. The type and quantity of microbes OTU for 21 d was increased. Bacteroides fragilis A and Alistipes finegoldii in genus of Bacteroides and Allstilpes were the most abundant and were the dominant genera. Bacteroides and Bacteroides fragilis A were the highest richness at 21 days， and Allstilpes and Alistipes finegoldii were the highest richness at 42 days. It mainly played a functional role in carbohydrate metabolism and amino acid metabolism， and transport and replication and repair by KEGG pathway analysis. In conclusion， dietary fiber supplementation can promote intestinal development， improve and stabilize intestinal microflora， improve nutrient utilization， and thus increase daily gain and feed intake of broilers. Under the conditions of this experiment， adding 3 kg·t-1 Muzhiqian product has the best effect.

Key words： white-feathered broiler; dietary fiber; growth performance; intestinal development; microflora

*Corresponding authors： LI Zhongrong，E-mail： 448655630@qq.com；LIU Jing，E-mail： 184660569@qq.com

1953年澳大利亞科學家 Hipsley首先提出膳食纖維（dietary fiber，DF），但至今國際上尚未有達成一致的定義［1］ 。目前，動物營養學家對膳食纖維采用生理學或化學上的定義，從生理學上定義膳食纖維為抵抗動物酶降解的食物成分，從化學上定義膳食纖維為非淀粉多糖（NSP）和木質素的總和［2-3］ ?，F代養殖業過度追求動物飼糧精細化，忽略了膳食纖維營養，養殖中常出現因飼糧中纖維不足或失衡引起腸道菌群失調、腸絨毛萎縮、黏膜免疫被破壞，導致腹瀉、死亡等問題［4］。膳食纖維具有促進腸道蠕動、減少食物在腸道中停留時間等生理作用，而且能夠被腸道微生物發酵生成短鏈脂肪酸，對于改善腸道功能、維持機體的代謝和健康具有重要作用［5-7］。膳食纖維已經被列為繼傳統的六大營養素（蛋白質、脂肪、水、礦物質、維生素、碳水化合物）之后，能夠改善機體營養狀況，調節機體功能的“第七類營養素”［4］。隨著膳食纖維研究的不斷深入，其對動物的營養健康和生長性能的積極影響越來越受重視［7］。

適當的膳食纖維水平可以提高畜禽對飼料的消化吸收率、肉品質和腸道健康［8］。Rybicka等［9］研究發現，在肉仔雞中添加不溶性膳食纖維與低聚果糖等益生元高發酵纖維可以提高營養物質的消化率和屠宰性能。Liu等［10］研究表明，在母豬泌乳期添加10%苜蓿草粉，可使母豬腸道中抗炎細菌的相對豐度顯著增加，而促炎細菌和幽門螺桿菌減少。候林岳［11］研究表明，無論是放養還是籠養，在邊雞飼糧中添加益生木質纖維素，其腸道微生物豐度均發生了顯著變化。溫曌等［12］研究表明，添加2%益生木質纖維素可有效改善伊莎褐雞和邊雞盲腸黏膜免疫屏障。不同纖維類飼料原料在腸道內的發酵速度、位點和短鏈脂肪酸組成存在很大差異［13-14］。Xue等［8］研究表明，適當增加飼料纖維含量可減輕定安豬的炎癥反應，提高飼料效率，改善腸道微生物組成，且不同纖維種類引起的腸道微生物響應也不同。低聚木糖極難被消化吸收，腸道內殘存率高，具有極好的雙歧桿菌增殖性［15］，在肉雞飼糧中添加0.01% 低聚木糖可使料重比降低3.42%［16］。Bulsiewicz［17］研究表明，膳食纖維攝入量不夠，無法發揮其生理作用。目前針對膳食纖維在家禽中利用的研究報道較少，尤其是在快長型肉雞中的研究尚未見報道。本文以白羽肉雞為研究對象，通過在飼糧中添加不同品種和不同水平的膳食纖維，探究膳食纖維對白羽肉雞生長性能、消化器官、雞糞中氮和纖維含量、血清生化指標、腸道結構和盲腸微生物的影響，為膳食纖維在肉雞中的應用提供理論依據。

1" 材料與方法

1.1" 試驗材料

纖維樣品：購于福建倍思達生物有限公司。纖維樣品1的組成為低聚木糖（1%）+木之纖（99%），纖維樣品2的組成為低聚木糖（25%）+木之纖（75%），纖維樣品3為木之纖（100%）。木之纖主要成分為粗纖維61.60%，中性洗滌纖維79.26%，酸性洗滌纖維75.21%，酸性木質素28.11%，粗灰分1.30%。其中可溶性纖維1.56%，不溶性纖維84.35%。

雞苗：試驗品種為“圣澤901”公雞，購于福建圣農發展股份有限公司。

1.2" 試驗設計

試驗分為6個處理組，即1個對照組、5個試驗組。每個組設6個重復，每個重復10羽，共計360羽1日齡公雞，平均體重為47.07±0.26 g，各組間差異不顯著（Pgt;0.05）。試驗設計見表1。對照組飼喂不添加纖維產品的基礎飼糧，參考《雞飼養標準》（NY/T 33—2004）肉用仔雞營養需要配制試驗飼糧，基礎飼糧組成及營養水平見表2。試驗期42 d。

1.3" 飼養管理

試驗雞采用封閉式雞舍籠養方式飼養，飼喂粉狀飼料，自由采食和飲水。按商品代肉雞（AA）飼養管理手冊進行日常管理和免疫。所有試驗程序和動物保護方案經過通過福建省農業科學院畜牧獸醫研究所實驗動物倫理委員會的倫理審查，倫理審查受理號為FAAS-KQXM-202307FJ005。

1.4" 樣品采集與指標測定

1.4.1" 生長性能測定

以重復為單位，測定試驗第1天、第21天及第42天肉雞空腹體重，每天記錄各重復飼料消耗量、死淘數，計算1～21 d、22～42 d和1～42 d平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）及料重比（F/G） ，并計算肉雞歐洲效益指數。

肉雞歐洲效益指數=［（成活率×體重（kg） /（料重比×出欄日齡）］ ×10 000［18］。

1.4.2" 糞中氮及纖維含量測定

分別于試驗第19～21天、第39～42天，每天上午08：30收集各重復雞籠下糞盤中所有雞糞，剔除毛屑雜物后，稱量總重量。用10%的鹽酸固定氮（每100 g加入20 mL HCl），充分混勻后，用培養皿取150 g糞樣，65℃烘干72 h至恒重，室溫回潮1 h后，粉碎過40目篩。糞樣中氮元素、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維分別采用《飼料中粗蛋白的測定 凱氏定氮法（GB/T 6432—2018）》《飼料中中性洗滌纖維（NDF）的測定（GB/T20806—2022）》和《飼料中酸性洗滌纖維的測定（NY/T 1459—2022）》方法測定。

氮攝入量（NI，g·d－1）=當日采食量×飼料中氮含量；

氮排泄量（NE，g·d－1）=當日鮮糞總量×干物質含量×糞中氮含量；

氮存留量（NR，g·d－1）=當日氮攝入量-當日氮排泄量;

氮存留率（NRR，%）=100×氮存留量/氮攝入量。

1.4.3" 血清、腸道組織及微生物指標測定

于試驗21 d和42 d，每個重復隨機選取接近平均體重、健康的2只雞，進行采血、屠宰，采集相關樣品備用。

血清生化指標測定：采用翅靜脈采血，采集5 mL靜脈血樣本，4℃冰箱靜置60 min、3 000 r·min－1離心10 min后，取上清液分裝于1.5 mL冷凍管，-20℃冷凍保存，待測。

消化器官及腸道組織形態測定：雞只采血、屠宰后，分別摘取肌胃、腺胃、十二指腸、空腸及回腸。測定肌胃和腺胃重量，測定十二指腸、空腸和回腸的重量和長度。

組織切片：分別剝離十二指腸、空腸、回腸，分別截取長度約1 cm十二指腸、空腸和回腸中段，用生理鹽水將內容物沖洗干凈后，放入甲醛固定液中固定。固定狀態良好后，嚴格按照病理實驗檢測SOP程序進行修剪、脫水、包埋、切片、染色、封片。使用Eclipse Ci-L（Nikon）拍照顯微鏡對組織目的區域進行40倍成像，成像完成后使用Image-Pro Plus 6.0分析軟件，分別測量每張切片上5根完整腸絨毛高度（mm）、5處隱窩深度（mm）和5處黏膜層厚度（mm）。

1.4.4" 腸道微生物菌群分析

無菌采集盲腸內容物放置-80℃冰箱保存。取盲腸內容物測定其微生物菌群多樣性差異。按照糞便基因組提取試劑盒（Omege D40-15）說明書操作，提取盲腸內容物總DNA，用核酸濃度測定儀檢測其濃度和純度。采用0.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA完整性。16S rRNA V3-V4區擴增、基因測序文庫構建和Illumina Miseq測序及數據生物學分析部分委托諾禾致源生物信息科技有限公司完成。

1.5" 數據統計

試驗數據用“平均值±標準差”表示，采用Excel軟件對數據進行初步整理統計，采用SPSS 26.0（International Business Machines Corporation，美國紐約）對試驗數據進行單因子方差分析（one-way ANOVA），Duncan’s多重比較檢驗，Plt;0.05為差異顯著。利用RDP classifier（http：//rdp.cme.msu.edu/，version 2.2）對每條序列進行物種分類注釋，比對 Silva 16S rRNA 數據庫（v138），設置比對閾值為 80%。為了得到每個OTU對應的物種分類信息，采用 uclust 算法對OTU代表序列進行分類學分析。根據ASV/OTU在不同樣本中的分布，利用QIIME2軟件計算Alpha多樣性指數，通過Kruskal-Wallis秩和檢驗和Dunn’ test作為事后檢驗驗證差異顯著性，并使用R語言軟件制圖。Beta多樣性分析是在ASV/OTU層面計算各樣本的距離矩陣，使用R語言軟件進行主成分分析。功能預測通過PICRUSt對OTU豐度進行標準化，并根據KEGG數據庫信息進行分析。

2" 結" 果

2.1" 不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞生長性能的影響

不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞生長性能的影響見表3。1～21 d階段，不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞21 d平均體重、平均日采食量和平均日增重有顯著影響（Plt;0.05），各組間的料重比無顯著差異（Pgt;0.05）；22～42 d階段，不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞42 d平均體重、平均日采食量和平均日增重和料重比有顯著影響（Plt;0.05）；1～42 d階段，不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞平均日采食量和平均日增重和料重比有顯著影響（Plt;0.05）。不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞歐洲效益指標有顯著影響，但對死淘率無顯著影響。與T6組相比，T2組22～42 d平均日采食量和1～42 d料重比分別顯著提高了5.04%和3.07%（Plt;0.05），T3組22～42 d和1～42 d料重比分別顯著提高了4.16%和3.68%（Plt;0.05），T5組21 d和42 d平均體重、1～21 d和1～42 d平均日增重以及22～42 d平均日采食量分別顯著提高6.26%和4.93%、6.70%和5.02%以及4.87%（Plt;0.05）。

2.2" 不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞糞中氮代謝和糞纖維含量的影響

不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞糞中氮代謝和糞纖維含量的影響見表4。不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞21 d糞氮含量、氮攝入量、存留量和存留率有顯著影響（Plt;0.05），對氮排放量、中性和酸性洗滌纖維含量無顯著影響（Pgt;0.05）；對白羽肉雞42 d氮攝入量、存留量和存留率以及中性和酸性洗滌纖維有顯著影響（Plt;0.05），對糞氮含量和氮排放量無顯著影響（Pgt;0.05）。與T6組相比，T1組21 d氮攝入量和存留量分別顯著提高11.24%和16.77%（Plt;0.05），T4組21 d氮存留率顯著提高6.18%、T5組21 d氮存留率和42 d氮存留量分別顯著提高7.65%和9.95%（Plt;0.05），T5組21 d糞氮含量顯著降低6.87%（Plt;0.05）。

2.3" 不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞血清生化指標的影響

不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞血清生化指標的影響見表5。不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞21 d血清白蛋白、甘油三酯、尿素氮、尿酸、葡萄糖和丙二醛含量有顯著影響（Plt;0.05），對血清總蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、谷丙轉氨酶、堿性磷酸酶、肌酐、總膽固醇和總抗氧化能力無顯著影響（Pgt;0.05）;對白羽肉雞42 d血清總蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、谷丙轉氨酶、堿性磷酸酶、尿素氮、葡萄糖和總抗氧化能力有顯著影響（Plt;0.05），對其他血清生化指標無顯著影響（Pgt;0.05）。與T6組相比，T1組42 d尿素氮和總抗氧化能力分別顯著提高333.33%和57.14%（Plt;0.05），T2組21 d和42 d尿素氮含量分別顯著提高375.00%和466.67%，21 d丙二醛含量顯著降低了17.69%（Plt;0.05），T3組21 d和42 d尿素氮分別顯著提高350.00%和233.33%，21 d丙二醛含量顯著降低了15.58%，42 d總蛋白和低密度脂蛋白分別顯著降低15.34%和20.00%，谷丙轉氨酶顯著提高了102.70%（Plt;0.05），T4 組42 d 葡萄糖含量顯著提高35.36%（Plt;0.05），T5組21 d白蛋白、甘油三酯和丙二醛分別顯著降低10.79%、25.45%和33.60%，42 d高密度脂蛋白和谷丙轉氨酶分別顯著提高25.32%和62.16%（Plt;0.05）。

2.4" 不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞消化器官的影響

不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞消化器官的影響見表6。不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞21 d肌胃重、空腸重量和回腸重量有顯著影響（Plt;0.05），對腺胃重、十二指腸長度與重量以及空腸和回腸長度無顯著影響（Pgt;0.05）；對白羽肉雞42 d十二指腸重量以及空腸和回腸的重量與長度有顯著影響（Plt;0.05），對其他消化器官指標無顯著影響（Pgt;0.05）。與T6組相比，T1組42 d回腸長度顯著提高5.04%（Plt;0.05），T2組空腸重量和回腸長度分別顯著提高13.71%和19.26%（Plt;0.05），T3組空腸和回腸長度分別顯著提高19.38%和21.84%（Plt;0.05），T5組回腸長度顯著提高23.18%（Plt;0.05）。

2.5" 不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞腸道結構的影響

不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞腸道結構的影響見表7。不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞21 d十二指腸絨毛高度和黏膜厚度，42 d十二指腸和空腸隱窩深度和絨隱比以及回腸絨毛高度、隱窩深度和絨隱比有顯著影響（Plt;0.05），對其他腸道結構無顯著影響（Pgt;0.05）。與T6組相比，同行數據肩標相同或無字母表示差異不顯著（Pgt;0.05），不同小寫字母表示差異顯著（Plt;0.05）。下表同T3組42 d回腸絨毛高度顯著降低29.20%（Plt;0.05），T5組42 d十二指腸和空腸隱窩深度分別顯著提高116.67%和73.33%，十二指腸絨隱比顯著降低48.02%（Plt;0.05）。

2.6" 不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞盲腸微生物的影響

2.6.1" 不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞盲腸微生物Alpha多樣性指數的影響

不同處理兩個階段在屬（圖1A）和種水平（圖1B）上的熱圖。如圖1所示，各組間肉雞腸道的微生物群落結構組成有一定的差異，尤其在Bacteroides和Alistipes兩個屬的Bcteriodes fragilis-A和Alistipes finegoldii兩個種上表現較為明顯。

不同纖維產品和添加水平處理組肉雞腸道微生物的Venn圖（圖2）。如圖2所示，兩個階段6個處理肉雞的微生物共有的菌種有229個OTUs。21 d階段，T2、T4與T5組OTU數量顯著高于T6組；42 d階段，除T4組外，各組OTU數量差異不明顯。兩階段相比，T1、T3和T6組OTU數量明顯增加，而T2、T4和T5組OTU數量無明顯變化，菌群結構較穩定。

通過單樣本的多樣性分析（Alpha多樣性）可以反映微生物群落的豐度和多樣性。由表8可知，各組間的Observed_species、Chao1值、ACE指數、Shannon指數和Simpson指數均無顯著差異，說明各處理對肉雞盲腸物種總數和物種豐富度沒有顯著影響。

2.6.2" 不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞腸道微生物Beta多樣性的影響

不同纖維產品和添加水平處理組肉雞腸道微生物的主成分分析圖（圖3）。主坐標分析（Principal co-ordinates "analysis），也是一種非約束性的數據降維分析方法，可用來研究樣本群落組成的相似性或差異性，通過降維找出影響樣本群落組成差異的。圖3的PCOA圖所示，在第一主成分上，兩階段各處理的Beta多樣性無顯著差異，但是在第二主成分上，第一階段和第二階段相同處理間Beta多樣性有顯著差異（Plt;0.05）。

2.6.3" 不同纖維產品和添加水平對白羽肉雞腸道微生物菌群的影響

不同纖維產品和添加水平處理組肉雞腸道微生物菌群的影響（圖4）。由圖可知，各處理中以Bacteroides和Allstilpes兩個屬中的Bacteroides fragilis A和Alistipes finegoldii兩個種的豐富度最高，為優勢菌屬。在21 d中Bacteroides和Bacteroides fragilis A豐富度最高，其中T1處理組豐富度明顯高于其他處理組；T6處理組的Allstilpes和Alistipes finegoldii豐富度明顯高于其他處理組。42 d中，Allstilpes和Alistipes finegoldii豐富度最高，其中T2和T5處理組的豐富度明顯高于其他處理組；T6處理組Bacteroides和Bacteroides fragilis A豐富度明顯高于其他處理。圖4B和4D中顯示，在T3組和T5組中，有益菌Lactobacillus和Lactobacillus crispatus明顯比例升高。

2.6.4" 功能預測分析

不同纖維產品和添加水平處理組肉雞腸道微生物功能預測分析（圖5）。KEGG通路六個板塊圖中，相關度最高的功能板塊為代謝，主要是碳水化合物代謝和氨基酸代謝；其次為遺傳信息處理板塊，主要是轉運和復制與修復。

3" 討" 論

20世紀至21世紀初家禽養殖主要以高能量、高蛋白質、低纖維的營養方案為主，在肉雞飼糧中盡可能限制纖維性飼料的添加，追求最大限度的生長性能水平［19］。2020年后，“飼料禁抗”相關政策法規實施后，腸道健康越來越受重視，纖維對對動物腸道健康的影響開始被關注［2］。機體纖維不足，將導致腸道屏障受損，增加病原體敏感性［4］。充足的纖維水平可能會促進性能［20］。Tejeda和Kim［21］研究發現，適量添加纖維可改善肉雞的生長性能，提高飼料轉化效率，促進其腸道發育，增強腸道免疫或降低腸道炎癥，維持腸道微生物穩定性。本試驗基礎飼糧中添加3 kg·t－1 木之纖平均體重、平均日增重、平均日采食量和歐洲生產效率指數等均呈現最高值，且大部分指標具有顯著性，料重比也呈最低值。另外T5組在促進消化器官發育，降低白羽肉雞糞氮含量和排放量，提高氮的攝入量、氮存留率和存留量，降低血清中丙二醛含量，增加白羽肉雞21 d腸道微生物OTU種類和數量，提高腸道菌群的穩定性等方面表現出顯著效果，與前人的一些研究報道相似［9，20-23］。機體攝入的氮，一部分被合成組織蛋白，在體內沉積，另一部分成為消化代謝后的廢棄產物，隨糞便或尿液排出，進而構成氮的平衡代謝，而血清總蛋白、尿素氮、尿酸等是反映畜禽體內氮代謝的重要指標。目前探討纖維對肉雞氮代謝的研究較少。本試驗發現各處理總蛋白和尿酸等指標也無顯著差異，但纖維的添加，可提高肉雞氮的攝入量和存留率，降低氮的排放量，促進了組織蛋的沉積，這可能也是其生產性能提高的主要原因。本試驗中，纖維的添加促進了肉雞腸道的發育，尤其是十二指腸的隱窩深度，提高消化率，從而提高其日增重。

纖維的化學成分多樣而復雜，可溶性和不溶性，溶解度、黏度和可發酵性等，每種特性均會影響其在動物體內的作用效果［2，24］。Suresh等［24］研究報道，纖維成分對肉雞生長性能的生理影響取決于不同的因素，包括基礎飼糧的特征（成分和纖維水平）、纖維來源的內在特性（即溶解度、粒徑和水合能力）和包含水平，以及動物的特征（如年齡或物種）。另外，由于家禽獨特的消化特性，添加不同形態的膳食纖維對其生長性能和腸道健康的影響存在差異，尤其是膳食纖維溶解性或發酵特性［25-26］。Mateos等［27］研究表明，添加適量的不溶性膳食纖維會改善肉雞生長性能和腸道健康，添加3%～5%不溶性膳食纖維，可降低肉雞2%左右料重比，提高2%～5%出欄體重。本試驗獲得相似結果。T1組和T4組與無添加的T6組相比，生長性能上的各項指標均無顯著差異，T2組平均日采食量（22～42 d）和料重比（1～42 d）以及T3組料重比（22～42 d和1～42 d）顯著提高，這兩組在促進生長性能上也無明顯效果。T1-T3組均為低聚木糖+“木之纖”樣品，低聚木糖的添加水平遞增，而T4組和T5組為“木之纖”樣品，添加水平遞增，說明不同的纖維成分和添加水平對肉雞的生長性能有顯著的影響，尤其“木之纖”作為膳食纖維，添加水平對生長性能有顯著影響。低纖維（4.2%～5.5% NDF）飼糧中添加高水平（2.5%～7.5%）不溶性纖維能夠改善屏障功能和腸道健康［27］。中纖維（11.0%～11.4% NDF）飼糧中添加3.0%不溶性纖維也可能改善肉雞的腸道免疫和屏障功能，并誘導微生物組成發生有益的變化［28］。低聚木糖為可溶性纖維，木之纖為不溶性纖維，可溶性膳食纖維的添加對家禽生長性能的影響與不溶性膳食纖維存在明顯的差異。可溶性膳食纖維的添加將提高肉雞的料重比，但與基礎飼糧組相比差異不顯著［27］。另外，與水合能力較低的纖維來源相比，高水合能力纖維可能會損害肉仔雞的采食量和生長（0～21d）［9］。這可能是T2組出現采食量增加的原因。在飼糧中添加低水平的不溶性纖維與益生元可溶性纖維的混合物可能更有利于肉雞在育肥期的生長性能［9］。本試驗T1～T3組為低聚木糖和木之纖的混合添加，但卻未獲得有利于生長性能的效果，可能是不溶性纖維水平較高的原因。也有研究報道，在肉雞飼糧中添加0.01%低聚木糖可使料重比降低3.42%［16］。本試驗添加低聚木糖組料重比不降反升，推測，低聚木糖添加水平高于0.015%將導致肉雞料重比顯著升高。因此，綜合推測，可溶性纖維和不溶性纖維混合添加存在一個適合的配合比例，若非達到這個比例，效果可能不盡人意。另外，這個比例可能并非通用，不同種類其比例有其特異性。因此，低聚木糖和木之纖混合樣本若想達到二者相乘的效果，其比例需要進一步優化。

飼糧中添加適當的膳食纖維可增加腸道微生物的Alpha多樣性，并誘導Beta多樣性的改變［29-30］。本試驗未在處理組中發現新增特異的微生物菌種，但添加纖維素樣品處理顯著提高了21 d階段的OTU數量，且在兩階段中添加纖維素樣品處理的菌群結構較穩定，這與前人的研究報道相似［2］。據報道，低聚木糖能促進體內雙歧桿菌等有益菌的增殖［31］，本試驗未獲得相似結果。采用雙歧桿菌專用培養基對試驗組肉雞盲腸內容物進行體外培養，未能分離到雙歧桿菌菌株。對肉雞盲腸微生物進行16S rDNA測序分析，也未獲得雙歧桿菌序列信息，具體原因尚待進一步探究。Teng和Kim［32］研究報道，具有益生元活性的纖維來源（如菊粉、低聚果糖、低聚木糖或甘露寡糖）可促進腸道微生物群的有益轉變，使盲腸中的致病物種減少和有益菌豐度增加。本試驗微生物多樣性分析中獲得的兩個屬種，Bacteroides fragilis是重要的臨床病原體，存在于大多數厭氧菌感染中，畜禽的相關死亡率約為19%［33］。Alistipes finegoldii具有條件特異性功能屬性［34］，是結腸炎保護作用相關的微生物種類［35］。據報道，Bacteroides fragilis在黏膜屏障被破壞時，會導致膿腫形成和菌血癥［36］。在后期，肉雞腸道Bacteroides fragilis顯著降低，Alistipes finegoldii顯著提高，尤其是添加纖維處理的5個組，Bacteroides fragilis顯著低于T6組，T2組和T5組Alistipes finegoldii顯著高于T6組，同時T3組和T5組的有益菌Lactobacillus和Lactobacillus crispatus的比例顯著提高，說明纖維的添加能夠有效降低肉雞腸道有害菌數比例，提高有益菌的比例，在維護腸道健康方面具有顯著效果，且功能主要是在碳水化合物物代謝中發揮作用，這與前人的報道結果相似［27-29，37-39］。

4" 結" 論

基礎飼糧添加纖維可促進肉雞的腸道發育、改善和穩定腸道菌群結構，提高營養物質利用率，從而提高日增重和采食量。在本試驗條件下，添加3 kg·t－1木之纖產品效果最佳。

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（編輯" 范子娟編輯）