掃描電子顯微鏡在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用

摘 要 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是高等農(nóng)林院校生物學(xué)、林學(xué)、農(nóng)學(xué)、食品科學(xué)等專(zhuān)業(yè)的重要基礎(chǔ)課程之一。掃描電子顯微鏡是一種廣泛應(yīng)用于生物學(xué)領(lǐng)域微觀形貌分析的大型精密儀器。為提升北京林業(yè)大學(xué)本科專(zhuān)業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)質(zhì)量，充分激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性，對(duì)掃描電子顯微鏡應(yīng)用于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行探索與實(shí)踐，將實(shí)驗(yàn)拆分為取材、戊二醛固定、乙醇梯度脫水、叔丁醇置換100%乙醇、冷凍干燥和掃描電子顯微鏡觀察六個(gè)部分。初步構(gòu)建掃描電子顯微鏡應(yīng)用于本科微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)體系，旨在培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐操作技能，創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容并提高教學(xué)效果。

關(guān)鍵詞 掃描電子顯微鏡；微生物學(xué)；實(shí)驗(yàn)教學(xué)；青霉

中圖分類(lèi)號(hào)：G642.423 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1671-489X（2024）20-00-04

DOI：10.3969/j.issn.1671-489X.2024.20.040

0 引言

微生物學(xué)是全國(guó)各高等農(nóng)林院校生物科學(xué)、生物技術(shù)、農(nóng)學(xué)、林學(xué)、食品科學(xué)等本科專(zhuān)業(yè)的基礎(chǔ)課程之一，是一門(mén)實(shí)踐性很強(qiáng)的應(yīng)用課程。微生物學(xué)是研究微生物生命活動(dòng)的基本規(guī)律、生長(zhǎng)特點(diǎn)、生態(tài)分布和相關(guān)基因工程的一門(mén)學(xué)科，其應(yīng)用廣泛涉及發(fā)酵工程、食品安全、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、醫(yī)藥衛(wèi)生等領(lǐng)域[1]。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)和方法是微生物學(xué)創(chuàng)建與發(fā)展的基礎(chǔ)，也為整個(gè)生命科學(xué)技術(shù)的發(fā)展作出了積極而重要的貢獻(xiàn)。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，越來(lái)越多的新方法和新應(yīng)用融入微生物學(xué)的教學(xué)中，構(gòu)建微生物學(xué)相關(guān)內(nèi)容與新技術(shù)、新方法相融合的課程結(jié)構(gòu)，不僅有助于豐富微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的內(nèi)容，也有利于推動(dòng)微生物學(xué)研究的發(fā)展[2]。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程不僅能夠強(qiáng)化學(xué)生對(duì)微生物學(xué)理論知識(shí)的學(xué)習(xí)和掌握，還在培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力和實(shí)踐能力中發(fā)揮重要作用[3]。

掃描電子顯微鏡（Scanning Electron Micros-

cope，SEM）是一種大型的微觀形態(tài)成像儀器，能夠用來(lái)觀察和分析材料表面的成分、形貌和結(jié)構(gòu)等，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于材料學(xué)[4]、生物學(xué)[5]、醫(yī)學(xué)[6]、化學(xué)[7]、農(nóng)業(yè)[8]等研究領(lǐng)域。目前，以掃描電子顯微鏡觀察為代表的分子微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)在細(xì)菌形態(tài)觀察、細(xì)菌生長(zhǎng)檢測(cè)、代謝產(chǎn)物精準(zhǔn)識(shí)別、分子標(biāo)記與功能基因定位等方面發(fā)揮重要的作用[9]。利用掃描電子顯微鏡技術(shù)可以對(duì)細(xì)菌、真菌組織進(jìn)行顯微研究，這些結(jié)果有助于了解其潛在功能和作用機(jī)理[10]。

為提高北京林業(yè)大學(xué)本科微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)質(zhì)量，充分發(fā)揮實(shí)驗(yàn)教學(xué)在創(chuàng)新人才培養(yǎng)中的作用，加強(qiáng)學(xué)生對(duì)大型精密儀器的認(rèn)知和操作能力，本研究選取北京林業(yè)大學(xué)生物科學(xué)專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)學(xué)科拔尖學(xué)生培養(yǎng)計(jì)劃2.0基地拔尖班學(xué)生為對(duì)象，以青霉分生孢子結(jié)構(gòu)為材料，重新設(shè)置微生物形態(tài)觀察的實(shí)踐教學(xué)內(nèi)容，在原有的基礎(chǔ)上增加掃描電子顯微鏡的相關(guān)知識(shí)，開(kāi)展掃描電子顯微鏡應(yīng)用于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)探索與實(shí)踐探析，并且改進(jìn)學(xué)生實(shí)驗(yàn)教學(xué)的考核和評(píng)價(jià)機(jī)制，旨在在提升學(xué)生微生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作技能的同時(shí)，培養(yǎng)學(xué)生利用掃描電子顯微鏡對(duì)微生物學(xué)材料進(jìn)行分析研究的能力，進(jìn)而有效提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果和人才培養(yǎng)質(zhì)量。

1 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革內(nèi)容設(shè)計(jì)與學(xué)時(shí)

安排

顯微鏡應(yīng)用技術(shù)是高等農(nóng)林院校生物學(xué)、林學(xué)、食品科學(xué)等專(zhuān)業(yè)的必修課程教學(xué)內(nèi)容之一，已有近15年的教學(xué)發(fā)展歷程，主要講授光學(xué)顯微鏡的使用方法。掃描電子顯微鏡等大型儀器往往由于運(yùn)營(yíng)成本較高而沒(méi)有用于本科實(shí)驗(yàn)教學(xué)。2023年秋季，北京林業(yè)大學(xué)微生物學(xué)教研室選擇生物科學(xué)專(zhuān)業(yè)的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程為對(duì)象，以生物科學(xué)專(zhuān)業(yè)拔尖班學(xué)生為實(shí)踐對(duì)象，增加電子顯微鏡觀察技術(shù)的創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)課程。在教學(xué)過(guò)程中，教師先通過(guò)PPT以圖片、視頻或者動(dòng)畫(huà)的方式向?qū)W生講述掃描電子顯微鏡的基本工作原理、儀器結(jié)構(gòu)、性能參數(shù)、樣品制備和操作方法等理論知識(shí)，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作的順利進(jìn)行奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

掃描電子顯微鏡觀察實(shí)驗(yàn)首先要選取和制備實(shí)驗(yàn)材料，本實(shí)驗(yàn)課程選取的材料為北京林業(yè)大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室保存的青霉（1號(hào)penicillium chrzaszczii和2號(hào)penicillium osmophilum）。

由于實(shí)驗(yàn)材料制備步驟多、過(guò)程復(fù)雜，包括固定、脫水、置換、干燥、粘樣、導(dǎo)電處理等環(huán)

節(jié)[11]，本研究將其分為六個(gè)實(shí)驗(yàn)開(kāi)展：1）取材；2）戊二醛固定；3）乙醇梯度脫水；4）叔丁醇置換100%乙醇；5）冷凍干燥；6）掃描電子顯微鏡觀察。本實(shí)驗(yàn)課共12學(xué)時(shí)，六個(gè)實(shí)驗(yàn)分別安排1、2、2、2、2、3學(xué)時(shí)，如表1所示。

2 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的實(shí)踐過(guò)程

2.1 取材

生物科學(xué)專(zhuān)業(yè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)開(kāi)課前，將學(xué)生分為六個(gè)小組，每組派一名學(xué)生提前五天于北京林業(yè)大學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備，具體步驟如下。

首先，把青霉1號(hào)和2號(hào)的菌株號(hào)簡(jiǎn)化后寫(xiě)于相應(yīng)的無(wú)菌培養(yǎng)皿上，將熔化好的培養(yǎng)基注入該培養(yǎng)皿內(nèi)，注入量以達(dá)到在皿底形成約2 mm（因太厚不便使用）的平板為宜，培養(yǎng)基凝固后待用。

其次，在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行轉(zhuǎn)接操作，接種后置于28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)約四天，此時(shí)分生孢子結(jié)構(gòu)正好成熟。

最后，取該帶有分生孢子結(jié)構(gòu)的培養(yǎng)基切一3～4 mm小條，并將切好的瓊脂塊一起放入一個(gè)無(wú)菌的小容器（如無(wú)菌培養(yǎng)皿）內(nèi)，此材料即可開(kāi)始實(shí)施戊二醛固定實(shí)驗(yàn)。

此外，注意切除組織的過(guò)程要快，觀察面需與長(zhǎng)軸垂直，選擇部位準(zhǔn)確無(wú)誤，無(wú)關(guān)部分切去，并且全程操作需保持在冰上進(jìn)行，防止組織自溶。

2.2 戊二醛固定

戊二醛穿透性強(qiáng)，能夠使蛋白質(zhì)等成分凝固，使組織結(jié)構(gòu)或細(xì)胞形態(tài)更接近生活狀態(tài)，因此，分別將帶有不同青霉分生孢子結(jié)構(gòu)的瓊脂塊進(jìn)行戊二醛固定。具體操作步驟如下。

首先，將由2.5%的戊二醛、磷酸鹽、去離子水組成，pH為7.2～7.4的戊二醛固定液放置于4 ℃

冰箱預(yù)冷。

其次，將戊二醛固定液用5 mL移液槍加入裝有分生孢子結(jié)構(gòu)瓊脂塊的無(wú)菌小容器內(nèi)，使得戊二醛固定液的厚度可以沒(méi)過(guò)該瓊脂塊。

最后，將添加戊二醛固定液的瓊脂塊放置于室溫干燥地方固定2 h后轉(zhuǎn)入4 ℃冰箱內(nèi)，再次固定過(guò)夜。添加試劑時(shí)注意不要澆到樣品上，以免損傷分生孢子結(jié)構(gòu)，影響電鏡觀察。

此外，在進(jìn)行下一步乙醇梯度脫水前，將戊二醛用5 mL的移液槍吸凈，并將吸出的戊二醛廢液排于廢液缸中，廢液缸中的廢液于實(shí)驗(yàn)結(jié)束后倒入廢液桶中，以免造成下水道水體污染，槍頭打在另一干燥的廢液缸中。

2.3 乙醇梯度脫水

青霉分生孢子材料經(jīng)過(guò)充分固定后即可開(kāi)展乙醇梯度脫水實(shí)驗(yàn)。脫水的具體操作過(guò)程如下。

首先，配制不同濃度梯度（30%、50%、70%、95%和100%）的乙醇溶液50 mL，盛入干凈的50 mL容積離心管中以備后續(xù)兩次脫水使用，每次使用的量需使乙醇溶液沒(méi)過(guò)樣品塊。為避免第一次乙醇用量過(guò)多致使第二次的量不足以沒(méi)過(guò)樣品塊，可以配制100 mL的乙醇溶液分裝于兩個(gè)離心管中。制備之前需在離心管上標(biāo)注好乙醇濃度，以免后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用時(shí)混淆。

其次，分別用已配制好的30%、50%、70%、95%和100%的乙醇，由低至高的濃度進(jìn)行梯度脫水，且同一濃度使用相同的加液方法重復(fù)脫水兩次，每個(gè)濃度處理時(shí)間均為5 min，操作過(guò)程中注意最后一次的100%乙醇不要排除。

此外，添加相同濃度的乙醇溶液時(shí)可以使用一只槍頭，添加不同濃度的溶液時(shí)需要及時(shí)更換槍頭，并且不要混淆。

2.4 叔丁醇置換100%乙醇

叔丁醇是一種傳統(tǒng)的冷凍干燥置換溶劑，具有較高的凝固點(diǎn)和蒸氣壓，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞的完整性，因此常用于SEM快速制樣，并且通過(guò)叔丁醇置換進(jìn)行冷凍干燥的效果優(yōu)于直接冷凍干燥。置換的具體操作過(guò)程如下。

首先，將乙醇-叔丁醇分別按3∶1、1∶1、1∶3的比例配比，并將配好的溶液裝入50 mL離心管中，標(biāo)注比例備用。

其次，將青霉分生孢子組織浸沒(méi)在依次盛有乙醇-叔丁醇3∶1、1∶1、1∶3比例混合溶液的離心管中，置于室溫下進(jìn)行置換，處理時(shí)間均為20 min。

最后，樣品統(tǒng)一使用100%叔丁醇進(jìn)行置換（叔丁醇的厚度剛好浸沒(méi)樣品，利于后續(xù)進(jìn)行冷凍干燥處理），處理時(shí)間為15 min，并重復(fù)操作本置換實(shí)驗(yàn)兩次。

2.5 冷凍干燥

經(jīng)過(guò)上一步置換后，進(jìn)行冷凍干燥，具體操作過(guò)程如下。

首先，將保存于適量100%叔丁醇溶液中的青霉分生孢子組織置于冰上，用保鮮膜將樣品所在的無(wú)菌小容器包裹一層，保證該樣品在冷凍干燥機(jī)的干燥過(guò)程中不會(huì)飛出來(lái)，隨后用牙簽在上面扎小孔，保證冷凍干燥時(shí)，容器內(nèi)是通氣的，以達(dá)到干燥的效果。

其次，將樣品放入-80 ℃冰箱冷凍2 h或?qū)悠贩湃?20 ℃冰箱過(guò)夜預(yù)冷。

最后，待試管中叔丁醇凍成冰晶后，按照操作流程，把樣品置于提前預(yù)冷（預(yù)冷時(shí)間30 min）的冷凍干燥機(jī)中進(jìn)行干燥處理，時(shí)間為12 h，之后將干燥好的樣品按照操作流程從冷凍干燥機(jī)中取出，關(guān)閉機(jī)器和電源，注意冷凍干燥機(jī)使用前后都應(yīng)在登記本上記錄使用情況。樣品保存于室溫干燥環(huán)境中。

2.6 掃描電子顯微鏡觀察

青霉分生孢子經(jīng)過(guò)取材、固定、脫水、置換、干燥后即可開(kāi)展掃描電子顯微鏡觀察實(shí)驗(yàn)。具體操作過(guò)程如下。

1）粘樣：按預(yù)約時(shí)間于電子顯微鏡樣品準(zhǔn)備室將干燥的青霉分生孢子組織用導(dǎo)電性好的黏合劑或膠帶粘在金屬樣品臺(tái)上，粘樣時(shí)注意不要破壞樣品表面結(jié)構(gòu)，正面（帶有分生孢子結(jié)構(gòu)的一面）朝上，保證樣品粘牢，并標(biāo)記好樣品組號(hào)。

2）噴金：將冷凍干燥后的青霉分生孢子組織粘于樣品臺(tái)上，在真空環(huán)境下進(jìn)行濺射噴金。在濺射噴金過(guò)程中，根據(jù)具體的樣品和金屬靶材的性質(zhì)控制濺射參數(shù)，電流為15 mA，電壓為220 V，濺射時(shí)間為60 s，以保證所需的金屬涂層厚度和均勻性。濺射噴金完成后，使用電子顯微鏡檢查金屬涂層的質(zhì)量，包括涂層的均勻性、致密性等。此外，可以根據(jù)不同需求進(jìn)行后續(xù)處理，如調(diào)整合適的退火溫度，以改善涂層性質(zhì)。

3）觀察：進(jìn)行電子顯微鏡觀察，并保存青霉優(yōu)質(zhì)圖像，如圖1所示。

3 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)結(jié)果分析

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是將理論知識(shí)與實(shí)際應(yīng)用結(jié)合起來(lái)的課程，對(duì)于不同種類(lèi)微生物的學(xué)習(xí)與認(rèn)識(shí)，實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)操作的完成都需要學(xué)生的探索與創(chuàng)新。

在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程中增加掃描電子顯微鏡觀察的內(nèi)容，可以使學(xué)生對(duì)微生物的微形態(tài)特征有直觀感受，還能豐富教學(xué)內(nèi)容，開(kāi)拓學(xué)生的視野，提高學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的積極性。例如，實(shí)驗(yàn)一選取實(shí)驗(yàn)的觀察樣品，每組由學(xué)生代表完成菌種的活化、轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)，培養(yǎng)基的制備和分生孢子組織的切除等工作，這些樣品制備環(huán)節(jié)能夠切實(shí)鍛煉學(xué)生的無(wú)菌操作能力。

按照實(shí)驗(yàn)二到實(shí)驗(yàn)六的順序依次進(jìn)行“固定—脫水—置換—干燥—粘樣—噴金—SEM觀察”，學(xué)生必須嚴(yán)格按照該樣品制備流程進(jìn)行操作，但固定液、脫水劑的配比，固定、脫水、置換的時(shí)間，冷凍干燥方法的選擇都需要學(xué)生不斷探索調(diào)整，以確定最佳的材料制備方案。

此外，進(jìn)行掃描電子顯微鏡觀察時(shí)，學(xué)生需要根據(jù)樣品的特點(diǎn)確定噴金所用電壓、時(shí)間和SEM儀器拍照參數(shù)的設(shè)置，直至獲得清晰度高、立體感強(qiáng)且質(zhì)量高的青霉分生孢子結(jié)構(gòu)圖像，從而對(duì)微生物材料的超微結(jié)構(gòu)有更加深入的了解。

4 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程考核

青霉的掃描電子顯微鏡觀察實(shí)驗(yàn)采用課前準(zhǔn)備、課堂展示、課后考核相結(jié)合的考核方式，其中課前準(zhǔn)備占10%，課堂展示占20%，課后考核占70%。教學(xué)過(guò)程中，課前準(zhǔn)備主要包括自主觀看視頻、學(xué)習(xí)知識(shí)點(diǎn)、查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料和設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，教學(xué)目標(biāo)集中在學(xué)生的自學(xué)能力培養(yǎng)上；課堂展示包括學(xué)生的小組討論、個(gè)人發(fā)言和實(shí)驗(yàn)操作三個(gè)環(huán)節(jié)，主要考查學(xué)生的實(shí)踐操作能力和團(tuán)結(jié)協(xié)作能力，確保學(xué)生能夠掌握該課程的基本知識(shí)和主要技術(shù)；課后考核由實(shí)驗(yàn)報(bào)告考核（60%）和期末考核（10%）兩部分組成。由于本實(shí)驗(yàn)被拆分為取材、戊二醛固定、乙醇梯度脫水、叔丁醇置換100%乙醇、冷凍干燥、掃描電子顯微鏡觀察六次實(shí)驗(yàn)課程，因此每次實(shí)驗(yàn)課程分別 提交一次實(shí)驗(yàn)報(bào)告，每次實(shí)驗(yàn)報(bào)告考核占比為10%，共計(jì)60%。實(shí)驗(yàn)報(bào)告重點(diǎn)考查學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的掌握程度、對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中重要問(wèn)題的解決能力和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。期末考核采用PPT匯報(bào)的形式，每小組派一名代表對(duì)青霉的掃描電子顯微鏡觀察實(shí)驗(yàn)進(jìn)行綜合介紹。匯報(bào)內(nèi)容包括取材、戊二醛固定、乙醇梯度脫水、叔丁醇置換100%乙醇、冷凍干燥、粘樣、噴金處理、掃描電子顯微鏡觀察以及對(duì)課程改革的體會(huì)和評(píng)價(jià)。任課教師分別對(duì)每組的PPT匯報(bào)內(nèi)容進(jìn)行點(diǎn)評(píng)，并按照統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)給出考核分值。

5 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革效果評(píng)價(jià)與反饋

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)方式改革實(shí)施后，微生物學(xué)教研室設(shè)計(jì)了微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革評(píng)價(jià)反饋表，要求生物科學(xué)專(zhuān)業(yè)拔尖班參與微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的學(xué)生填寫(xiě)并在期末考核前上交。現(xiàn)將學(xué)生的評(píng)價(jià)反饋匯總?cè)缦隆?/p>

1）掃描電子顯微鏡觀察技術(shù)與微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)相結(jié)合，輔助本科實(shí)驗(yàn)教學(xué)，能夠充分發(fā)揮大型精密儀器在本科實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的作用。此外，增加學(xué)生接觸大型精密儀器的機(jī)會(huì)，可以增強(qiáng)他們對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備的理解和操作技能，有效地將理論知識(shí)與實(shí)際操作相結(jié)合，從而顯著提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)的效果。

2）充分利用掃描電子顯微鏡建立多樣的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ剑緦?shí)驗(yàn)課程支持和輔助大學(xué)生開(kāi)放實(shí)驗(yàn)、大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)實(shí)驗(yàn)，將教學(xué)實(shí)踐與科學(xué)研究相結(jié)合，通過(guò)實(shí)踐教學(xué)促進(jìn)科研的發(fā)展。同時(shí)允許學(xué)生結(jié)合所屬院校和專(zhuān)業(yè)的特點(diǎn)，自備材料、自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，對(duì)掃描電子顯微鏡觀察技術(shù)進(jìn)行深入研究。

3）優(yōu)化整合微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程體系和教學(xué)內(nèi)容，將本實(shí)驗(yàn)拆分為取材、戊二醛固定、乙醇梯度脫水、叔丁醇置換100%乙醇、冷凍干燥和掃描電子顯微鏡觀察六個(gè)實(shí)驗(yàn)，這一套完整的課程體系可以鍛煉學(xué)生使用戊二醛固定法和叔丁醇冷凍干燥法制備電子顯微鏡材料的技能；讓學(xué)生通過(guò)掃描電子顯微鏡檢驗(yàn)并于顯微鏡下觀察真菌樣品，在生物科學(xué)專(zhuān)業(yè)拔尖班進(jìn)行了有益的嘗試，該教學(xué)方法的創(chuàng)新獲得了大部分學(xué)生的認(rèn)可。

4）在實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革中，生物科學(xué)專(zhuān)業(yè)拔尖班學(xué)生從制備青霉的分生孢子結(jié)構(gòu)入手，全程參與取材、戊二醛固定、乙醇梯度脫水、叔丁醇置換100%乙醇、冷凍干燥、粘樣、噴金、觀察這一系列完整的實(shí)驗(yàn)流程，不但可以激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣和積極性，而且可以培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐操作能力、創(chuàng)新思維、團(tuán)結(jié)協(xié)作能力，提升學(xué)生的綜合素質(zhì)。

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*項(xiàng)目來(lái)源：北京林業(yè)大學(xué)教育教學(xué)改革與研究項(xiàng)目“OBE理念下虛擬仿真實(shí)驗(yàn)在微生物學(xué)實(shí)踐教學(xué)中的改革與實(shí)踐”（BJFU

2023JY043）。

作者簡(jiǎn)介：毋瑞華，博士，實(shí)驗(yàn)師；何曉青，博士，教授；何湘?zhèn)ィ┦浚苯淌冢秽嵎疲ㄐ抛髡撸┦浚v師。