不同茄子對瓜薊馬的抗性研究

摘""" 要：為篩選出對瓜薊馬具有抗性的茄子材料，并探究抗感材料間部分代謝產物的差異，以101份茄子材料為試驗材料，采用葉片為害指數法與盆栽蟲口密度法進行篩選，并測定了抗蟲與感蟲材料葉片中可溶性糖、游離脯氨酸、可溶性蛋白、類黃酮和總酚含量。結果表明，澤農A7（556007）、37號紫紅（501011）、陽興十一（327031）、燒烤短棒（403026）、早糯茄1號（003022）為抗瓜薊馬材料，蟲情指數分別為40.21%、38.36%、39.47%、42.89%、40.01%。測定發現，感蟲材料葉片中類黃酮和總酚的平均含量均顯著高于抗蟲材料，可溶性糖、游離脯氨酸和可溶性蛋白的平均含量在抗、感材料間差異不顯著。為害指數最低的材料澤農A7（556007），其葉片中的類黃酮含量最低；為害指數最高的材料紫艷（626001），其葉片中的類黃酮和總酚含量均較高。綜上，篩選出了5份抗瓜薊馬的茄子材料并揭示了葉片中的可溶性糖、類黃酮和總酚含量等的特點，這些研究可為抗薊馬茄子材料的進一步選育奠定理論基礎。

關鍵詞：茄子；瓜薊馬；抗蟲性；代謝產物

中圖分類號：S641.1"""""""""" 文獻標志碼：A""""""""""" 文章編號：1673-2871（2024）11-158-07

收稿日期：2024-06-03；修回日期：2024-06-24

基金項目：國家自然科學基金委員會專項項目（M2342003）；廣東省大學生創新創業訓練計劃項目（S202310566031）

作者簡介：郭一博，男，在讀本科生，研究方向為作物逆境生物學。E-mail：gyb3824@163.com

通信作者：吳正偉，男，講師，研究方向為農業昆蟲與害蟲防治。E-mail：zhengwei_wu@gdou.edu.cn

肖熙鷗，男，副研究員，研究方向為蔬菜育種及生物技術。E-mail：xiao-forlearning@163.com

DOI：10.16861/j.cnki.zggc.2024.0366

Research on the resistance of different eggplant germplasm resources to Thrips palmi Karny （Thysanoptera： Thripidae）

GUO Yibo1， CHEN Youyang1， GUO Sile1， DU Wei1， YANG Bingnan1， LIN Jingrui1， YANG Rongchao1， WU Zhengwei1， XIAO Xi’ou2

（1. College of Coastal Agricultural Sciences， Guangdong Ocean University， Zhanjiang 524088， Guangdong， China; 2. South Subtropical Crop Research Institute， Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences， Zhanjiang 524091， Guangdong， China）

Abstract： In order to identify eggplant varieties with resistance to melon thrips and compare the differences between resistant and susceptible varieties， 101 eggplant germplasm resources were evaluated using the leaf infestation index" method and potting population density method in this experiment. The content of soluble sugar， free proline， soluble protein， flavonoids and total phenol in the leaves of both insect-resistant and insect-sensitive varieties were analyzed. The results indicated that the 556007， 501011， 327031， 403026， and 003022 varieties exhibited high resistance to melon thrips with pest indexes of 40.21%， 38.36%， 39.47%， 42.89% and 40.01%， respectively. Flavonoid and total phenol content in leaves of insect-sensitive varieties were significantly higher than those of insect-resistant varieties， while the differences in average content of soluble sugar， free proline， and soluble protein between insect-resistant and insect-sensitive varieties were not significant. The variety Zenong A7（556007） with the lowest infestation index exhibited the lowest flavonoid content in its leaves， whereas the variety Ziyan （626001） with the highest infestation index demonstrated high levels of flavonoid and has elucidated the characteristics of soluble sugars， flavonoids， and total phenols in their leaves. These findings can provide a theoretical basis for further selection and breeding of thrips-resistant eggplant varieties.

Key words： Eggplant; Melon thrips; Insect resistance; Metabolites

茄子為茄科茄屬作物，是我國主要的蔬菜種類之一，在農業生產中占有重要地位。我國茄子的栽培歷史悠久，栽培的品種類型繁多，據統計，2021年我國茄子栽培面積將近80萬hm2，且隨著國內經濟的發展，茄子種植面積也在逐年增加[1]。瓜薊馬又稱棕櫚薊馬（Thrips palmi Karny），首次于20世紀70年代在我國南部省份被發現，并在過去的50年中逐漸向北傳播[2-3]。到2023年，瓜薊馬已列入我國一類農作物病蟲害名錄，是蔬菜薊馬中常見的一種。瓜薊馬不僅可以對農作物造成直接危害，還能傳播多種病毒，近年來危害呈上升趨勢，已成為溫室蔬菜中危害最為嚴重的害蟲之一[4-5]。瓜薊馬也是我國茄子上的重要害蟲之一，隨著保護地種植面積的擴大，其已成為我國多地蔬菜上主要的微小型害蟲，且在茄子上的發生危害日益嚴重[6]。長期以來，茄子上瓜薊馬的防治主要靠化學防治手段，目前，瓜薊馬已對擬除蟲菊酯、DDT和茚蟲威等多種化學藥劑產生了不同的抗藥性[5-7]。

抗蟲品種的篩選和應用是害蟲綠色防控的重要手段，近年來選用抗性品種防控瓜薊馬越來越受到人們的關注，并在作物品種對瓜薊馬抗性機制方面開展了較多研究，如瓜薊馬對不同黃瓜品種代謝產物的影響[8]，瓜類作物的營養成分與瓜類抗瓜薊馬特性的相關性分析[9]等。然而，關于茄子抗瓜薊馬的研究卻沒有相關報道。筆者以101種茄子植株為研究對象，通過分析茄子葉片中的重要生化物質與其抗瓜薊馬的相關性，探討茄子材料對瓜薊馬的抗性機制，為茄子瓜薊馬的綠色防控提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗茄子材料共101份，為中國熱帶農業科學院南亞熱帶作物研究所收集和保存的種質資源。

1.2 抗蟲材料篩選

于2023年3月將101個材料的茄子同期播種于育苗盤中，每穴2粒種子，每份材料24穴。將育苗盤置于發生過瓜薊馬危害的溫室里，1個月后調查茄子苗期的蟲情。統計每株的葉片總數和受瓜薊馬危害的葉片數并對每片葉子受害情況進行分級，受害癥狀共分6級[10]，每株苗受害的嚴重度（蟲害葉百分率）也分6級[11]（表1），最后計算為害指數和蟲情指數。根據為害指數將101份茄子材料按降序排列，選出前10種與后10種，再根據蟲情指數與茄子植株生長狀況淘汰掉長勢較差的材料，初步篩選出9份抗蟲和7份感蟲材料。

從初步篩選出的9個抗蟲材料與7個感蟲材料中，挑選生長狀況良好的幼苗定植在15 cm口徑的花盆中，每份材料9～12株，隨后使用吡蟲啉、氟氯氰菊酯等殺蟲劑清除定植苗上的瓜薊馬。待茄子生長至開花前期再次進行蟲情調查，統計方法同上，第2次篩選以蟲情指數小于50%作為抗蟲材料，大于75%作為感蟲材料[12]。

為害指數/%=[Σ（受害級葉片數×受害級代表值）/（調查總葉片數×受害最高級值）]×100；

蟲情指數/%=（a0X0+a1X1+…+anXn）/nT×100，式中a0、a1、…、an表示蟲情等級（嚴重度等級），X0、X1、…、Xn表示各級蟲情的頻率，n為最高的蟲情等級，T為調查總株數。

1.3 指標測定及方法

1.3.1 可溶性糖含量的測定 供試材料取樣：取一株測定材料中間部位的葉片，清洗掉表面雜物后用吸水紙擦干，使用打孔器在茄子植株中間部位的葉片上均勻取樣，避開葉脈部位，為1份試樣，共取3份。除需烘干后測定的指標外，測定時間控制在采摘后1 h內。

采用植物可溶性糖含量試劑盒（上海晶抗生物工程有限公司），通過分光光度計（UV-5100B）測定在620 nm處的OD值。獲得標準曲線為y＝8.55x-0.07，R2=0.998 6。式中，x為標準品質量濃度（mg·mL-1），y為吸光值。

可溶性糖含量/（mg·g-1 鮮質量）=[（ΔA+0.07）/8.55×V1]/（W×V1/V2）。

式中：V1為加入樣本體積（0.2 mL），V2為加入提取液體積（10 mL），W為樣本鮮質量（g），ΔA為測定管與空白管吸光值之差。

1.3.2 可溶性蛋白含量的測定 采用植物可溶性蛋白ELISA試劑盒（上海晶抗生物工程有限公司）。通過酶標儀（800/TS）測定在450 nm處的OD值。在微孔酶標板的標準品孔加50 μL標準液，樣本孔加10 μL樣本和40 μL樣本稀釋液，除空白孔外，標準品孔和樣品孔中每孔加入辣根過氧化氫酶（HRP）標記的檢測抗體100 μL，用封板膜封住反應孔，37 ℃水浴鍋溫育 60 min。棄去液體，在吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1 min，甩去洗滌液，在吸水紙上拍干，重復洗板 5 次。每孔加入底物 A、B 各 50 μL，37 ℃避光孵育 15 min后每孔加入終止液 50 μL，15 min內，在 450 nm波長處測定各孔的 OD值。

1.3.3 游離脯氨酸含量的測定 采用植物組織游離脯氨酸含量試劑盒（上海晶抗生物工程有限公司）。稱取0.2 g茄子葉片，加入2.4 mL試劑一，震蕩提取3 h，隨后8000 r·min-1，4 ℃離心10 min，取上清液為待測液。測定管：取待測液1 mL，加入0.5 mL試劑三，充分振蕩5 min，室溫靜置5 min，取上層清液0.8 mL于1 mL玻璃比色皿，測定吸光值為A。對照管：取待測液1 mL，加入0.5 mL試劑二，充分震蕩5 min，室溫靜置5 min，取上層清液0.8 mL于1 mL玻璃比色皿，調零。對照管每個樣品各測定1次。

標準曲線為：y＝0.007 5 x+0.005 5，R2=0.994。

游離脯氨酸含量（nmol·g-1 鮮質量）=[（A-0.0055）/0.0075×V1]/（V1/V2×W），式中，V1為加入樣本液體積（1 mL），V2為提取液體積（2.4 mL），W為樣品鮮質量（g）。

1.3.4 類黃酮化合物含量的測定 采用植物類黃酮含量試劑盒（上海晶抗生物工程有限公司）。

標準曲線為：y＝5.02 x+0.000 7，R2=0.999 6。

類黃酮含量（mg·g-1）=（ΔA-0.0007）/5.02/（W/V樣總），式中：V樣總為加入提取液體積（2 mL），W為樣品干質量（g），ΔA為測定管與空白管吸光值之差。

1.3.5 酚類化合物含量的測定 采用植物總酚含量試劑盒（上海晶抗生物工程有限公司）。測得標準曲線為y＝5.615 x+0.001 2，R2=0.999 4，式中，x為標準品質量濃度（mg·mL-1），y為吸光值。

總酚含量（mg·g-1）=（ΔA-0.001 2）/5.615×V樣/（V樣/V樣總×W），式中：V樣總為加入提取液體積（2 mL），V樣為反應中樣品體積（0.05 mL），W為樣本干質量（g），ΔA為測定管與空白管吸光值之差。

1.4 數據分析

利用SPSS 25 對試驗數據進行統計分析，各個茄子材料之間的代謝產物含量通過ANOVA進行差異顯著性分析，采用Duncan法進行比較?？瓜x與感蟲之間采用獨立樣本的t測驗進行差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 抗性材料篩選結果

通過苗期調查獲得每份茄子材料的為害指數和蟲情指數，然后先根據為害指數的高低，再根據蟲情指數的高低順序篩選出相對感蟲和抗蟲材料，初步篩選出9份相對抗蟲材料與7份相對感蟲材料（圖1～2）。抗蟲材料編號：403026、501011、327031、556007、003022、305001、522003、320004、516007。感蟲材料編號：626001、305015、522004、305017、048008、522010、048007。

針對初篩材料的二次篩選，綜合蟲情指數（小于50%為抗性材料）和為害指數的高低篩選出感蟲材料和抗蟲材料各5份（表2）。抗蟲材料：澤農A7（556007）、37號紫紅（501011）、陽興十一（327031）、燒烤短棒（403026）、早糯茄1號（003022），感蟲材料：蘇茄801（048008）、澤農104（522004）、黑神（305017）、紫艷（626001）、三木2034（305015）。抗蟲材料葉片綠色，無明顯蟲斑，葉片伸展，長勢較好。感蟲材料則葉片褪綠發黃或發白，有明顯蟲斑，植株矮小，長勢較差。

2.2 不同材料茄子葉片可溶性糖含量

茄子葉片可溶性糖含量在材料間存在一定差異（圖3），其中感蟲材料305015的可溶性糖含量（w，后同）最高（6.45 mg·g-1），抗蟲材料501011最低（2.72 mg·g-1），前者為后者的2.37倍。對5份抗蟲材料和5份感蟲材料整體比較，發現感蟲材料葉片的可溶性糖含量整體高于抗蟲材料，但除了305015之外，2個群體之間差異并不顯著。

2.3 不同品種茄子葉片可溶性蛋白含量

茄子葉片中可溶性蛋白含量在材料間存在一定差異（圖4），其中感蟲材料626001葉片的可溶性蛋白含量（ρ，后同）最高（85.59 ng·mL-1），抗蟲材料003022葉片中的可溶性蛋白含量最低（13.44 ng·mL-1），前者為后者的6.37倍?？扇苄缘鞍缀吭诳瓜x和感蟲材料中并不規律，但感蟲材料可溶性蛋白含量的均值低于抗蟲材料。對抗蟲材料和感蟲材料整體進行差異顯著性分析，表明抗蟲和感蟲材料可溶性蛋白含量差異不顯著。

2.4 不同材料茄子葉片游離脯氨酸含量

感蟲材料305015葉片的游離脯氨酸含量最高（59.90 nmol·g-1），其次為抗蟲材料556007（圖5），但兩者差異不顯著。另外，兩者均顯著高于其他材料，其他材料間差異不顯著。

2.5 不同材料茄子葉片類黃酮含量

茄子葉片類黃酮含量在材料間存在一定差異（圖6）。其中，感蟲材料305015類黃酮含量最高（18.42 mg·g-1），除305017外，感蟲材料之間差異不顯著但均顯著高于抗蟲材料。

2.6 不同材料茄子葉片總酚含量

感蟲材料305017和626001葉片總酚含量顯著高于其他材料（圖7），感蟲材料葉片中的總酚含量整體高于抗蟲材料，總酚含量最低的材料分別為556007和327031。

3 討論與結論

蟲情指數是衡量植物抗蟲性的重要指標。研究表明，蟲情指數在50.00%以下的植物品種具有較強的抗蟲性[13]。本研究結果表明，澤農A7（556007）、37號紫紅（501011）、陽興十一（327031）、燒烤短棒（403026）、早糯茄1號（003022）的蟲情指數分別為40.21%、38.36%、39.47%、42.89%、40.01%，與其他材料相比具有較強的抗蟲性，其中有3種均為紫紅茄，另外2種分別為圓茄和中茄。

為抵御植食性昆蟲的危害，植物在長期的協同進化中已經形成了一套完整的防御系統，以便應對各種植食性昆蟲的攻擊[14]。寄主植物中的可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸是昆蟲所需的重要營養物質，而類黃酮和酚類是重要的抗生物質，這些物質對昆蟲的生長發育影響較大[15-18]。本研究結果表明，瓜薊馬取食后，感蟲茄子葉片中的類黃酮和總酚含量整體顯著高于抗蟲材料，但抗蟲與感蟲材料之間可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸含量差異不顯著。本研究中抗蟲材料的可溶性糖含量整體低于感蟲材料，這與相關研究[19-21]中的可溶性糖含量對作物的抗蟲性有影響相符。感蟲材料紫艷（626001）的可溶性蛋白含量顯著高于抗蟲材料，與先前研究中發現的一些抗蟲植物材料中的蛋白質含量通常低于感蟲品種[22]相符。植物中的游離脯氨酸對植物的抗生性具有重要作用，病蟲危害后常誘導游離脯氨酸含量大幅度升高[23-25]，筆者的研究結果表明，感蟲品種中的游離脯氨酸含量均值高于抗蟲材料，但差異不顯著，或是因為在危害后期感蟲材料中的游離脯氨酸含量有所降低。瓜薊馬危害后，感蟲茄子材料葉片中的酚類和類黃酮含量顯著高于抗蟲材料，為害指數最低的材料澤農A7（556007），其葉片中的類黃酮含量最低；為害指數最高的材料紫艷（626001），其葉片中的類黃酮和總酚含量均較高。周福才等[26]研究發現，瓜蚜取食后會誘導黃瓜體內酚類和黃酮化合物含量上升，趙亞楠等[27]的研究發現，昆蟲取食可以顯著誘導取食點處類黃酮物質的表達上調，本試驗結果中感蟲材料葉片的酚類和類黃酮含量較高或許是因為受瓜薊馬取食誘導的結果。

抗性品種的篩選是抗性育種選擇材料的重要基礎，是綠色防控的基本保障[28]。筆者初步篩選出了對瓜薊馬具有抗蟲性的茄子材料并比較了抗感材料間葉片中5種代謝物的含量特點，而對瓜薊馬危害前后抗感材料茄子葉片內容物的動態變化尚未深入研究。另外，與植物抗蟲性有關的代謝物還有木質素、單寧和防御酶等，其含量對茄子抗蟲性的影響有待進一步研究。通過抗蟲特性研究，可以為培育抗蟲茄子材料和利用材料抗蟲性控制害蟲提供理論依據。

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