西瓜炭疽病的苗期抗性鑒定

摘" " 要：西瓜炭疽病對(duì)產(chǎn)業(yè)穩(wěn)定發(fā)展構(gòu)成嚴(yán)重威脅，是西瓜種植中急待解決的關(guān)鍵病害。為了鑒定西瓜炭疽病病原菌Colletotrichum orbiculare對(duì)不同西瓜種質(zhì)資源的抗性，通過分離純化自江蘇鹽城的西瓜病瓜中的病原菌，利用多種培養(yǎng)基進(jìn)行產(chǎn)孢培養(yǎng)，篩選出最優(yōu)產(chǎn)孢培養(yǎng)基為燕麥培養(yǎng)基。通過點(diǎn)滴法和噴霧法接種不同濃度的孢子懸浮液，確定了噴霧法及1×105個(gè)·mL-1為最佳的接種方法和濃度。最后，對(duì)18份不同來源的西瓜種質(zhì)資源進(jìn)行苗期接種鑒定，篩選出高抗資源1份，抗病資源5份。研究結(jié)果在西瓜抗病育種中具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。

關(guān)鍵詞：西瓜；炭疽病；抗性；苗期

中圖分類號(hào)：S651 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1673-2871（2024）12-054-06

收稿日期：2024-04-19；修回日期：2024-08-27

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金聯(lián)合項(xiàng)目（U21A20229）；中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程（CAAS-ASTIP-2022-ZFRI-09）

作者簡(jiǎn)介：劉楓楠，男，在讀碩士研究生，研究方向?yàn)楹J科作物抗病遺傳。E-mail：82101225373@caas.cn

通信作者：康保珊，女，副研究員，研究方向?yàn)楹J科作物抗病遺傳。E-mail：kangbaoshan@caas.cn

Evaluation of watermelon for resistance to anthracnose at seedling stage

LIU Fengnan1， 2， SUN Chaoyi1， 3， GUO Zhen1， 4， LIU Liming1， WU Huijie1， GU Qinsheng1， KANG Baoshan1， 2

（1. Zhengzhou Fruit Research Institute， Chinese Academy of Agricultural Sciences/Henan Key Laboratory of Fruit and Cucurbit Biology， Zhengzhou 450009， Henan， China; 2. Zhongyuan Research Center， Chinese Academy of Agricultural Sciences， Xinxiang 453500， Henan， China; 3. College of Horticulture， Nanjing Agricultural University， Nanjing 210095， Jiangsu， China; 4. College of Bioengineering and Biotechnology， Tianshui Normal University， Tianshui 741001， Gansu， China）

Abstract： Watermelon anthracnose poses a critical challenge to the stable development of the watermelon industry， and is a key disease that urgently needs to be addressed. The aims of this study is to identify the resistance of different watermelon varieties to the watermelon anthracnose pathogen， Colletotrichum orbiculare. By isolating and purifying the pathogen from diseased watermelon fruits in Yancheng， Jiangsu， and using various culture media for sporulation， the optimal sporulation medium was determined to be oat medium. Through inoculation with different concentrations of spore suspensions using both the drop method and spray method， the spray method with a concentration of 1×105 spores·mL-1 was determined as the best inoculation method and concentration. Finally， 18 watermelon germplasm resources from different sources were inoculated at the seedling stage， and 1 highly resistant resource and 5 resistant resources were screened out. The research results have potential application value in watermelon disease-resistant breeding.

Key words： Watermelon; Anthracnose; Resistance; Seedling stage

炭疽病，作為西瓜生產(chǎn)中的重要真菌性病害，其病原主要?dú)w屬于半知菌亞門刺盤孢屬真菌。炭疽病的侵襲范圍廣泛，能夠侵染西瓜的所有地上部分，包括至關(guān)重要的果實(shí)，一旦發(fā)生，不僅會(huì)在西瓜植株的葉片和莖蔓上形成黑褐色病斑，果實(shí)表面出現(xiàn)輪紋病斑，而且隨著病斑的不斷擴(kuò)大，最終可能引發(fā)植株的干枯死亡或果實(shí)腐爛，從而嚴(yán)重影響西瓜的產(chǎn)量和品質(zhì)[1]。此外，在西瓜的貯運(yùn)過程中，炭疽病病菌使果實(shí)變得更為脆弱，易于腐敗，進(jìn)而引發(fā)大批果實(shí)腐爛變質(zhì)，失去其食用價(jià)值[2]。

目前，在西瓜的實(shí)際生產(chǎn)過程中，對(duì)炭疽病的防治仍主要依賴于化學(xué)藥劑。然而，長(zhǎng)期使用化學(xué)藥劑不僅可能導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗藥性，而且容易引發(fā)農(nóng)殘含量超標(biāo)的問題，且這些問題正日益凸顯。因此，為了從根本上解決炭疽病的威脅，選育具有抗性的西瓜品種顯得尤為重要。通過深入研究西瓜的抗病種質(zhì)資源，可以為培育高效、安全的抗性品種奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，從而為西瓜產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供有力保障。

美國(guó)在19世紀(jì)末便著手西瓜抗炭疽病的育種研究，至20世紀(jì)50年代初便成功選育出Charleston Gray和Fairfax等既抗炭疽病又抗枯萎病的西瓜品種，以及僅抗炭疽病的Congo品種，這些品種迅速得到推廣與應(yīng)用。20世紀(jì)80年代，美國(guó)又相繼培育出具有炭疽病抗性的西瓜多抗品種，如Au-Producer、Au-Jubilant和Icebox等[3]，為西瓜產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)。

我國(guó)自1986年西瓜抗病育種協(xié)作小組成立以來，也積極投身于抗病品種的選育工作。經(jīng)過不懈努力，先后育成了京抗2號(hào)、京抗3號(hào)、抗病948等優(yōu)質(zhì)抗性品種[4]，有效緩解了炭疽病對(duì)我國(guó)西瓜產(chǎn)業(yè)的威脅。然而，炭疽病病原菌種類繁多且易于變異，突破了一些西瓜品種的抗性，進(jìn)而在生產(chǎn)中造成嚴(yán)重危害。因此，為了應(yīng)對(duì)這一挑戰(zhàn)，必須不斷加強(qiáng)品種及種質(zhì)資源的抗性鑒定工作，以豐富抗源，為培育出更多抗病新品種奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。這不僅是確保西瓜產(chǎn)業(yè)持續(xù)健康發(fā)展的必然要求，也是維護(hù)我國(guó)農(nóng)業(yè)生態(tài)安全的重要舉措。

關(guān)于西瓜炭疽病的抗性鑒定，多數(shù)研究主要依賴于苗期噴霧接種法[5-8]。此外，還有滴液法、菌餅打孔法、葉片涂刷接種法以及離體接種法等多種方法[9]。崔召明等[6]及羅婷[8]在鑒定西瓜炭疽病抗性時(shí)，均采用了濃度為1×106個(gè)·mL-1的孢子液，且均在西瓜苗達(dá)到2片真葉時(shí)進(jìn)行接種，抗性調(diào)查則在接種后的7～10 d內(nèi)進(jìn)行。孫玉燕等[10]則運(yùn)用點(diǎn)滴法，對(duì)西瓜離體葉片進(jìn)行炭疽病抗性鑒定，接種時(shí)孢子液濃度為1×106個(gè)·mL-1，且選用4片真葉期的離體葉片，接種后5 d進(jìn)行抗性評(píng)價(jià)。Sowell等[11]將孢子液濃度設(shè)定為2×104個(gè)·mL-1，接種后7 d進(jìn)行抗性評(píng)估。Bhatta等[5]選擇接種濃度為1×105個(gè)·mL-1的孢子液，同樣在接種后7 d進(jìn)行抗性評(píng)價(jià)。而Boyhan等[12]則使用濃度為5×104個(gè)·mL-1的孢子液接種西瓜幼苗，在接種15 d后進(jìn)行抗性評(píng)價(jià)。

然而，由于前人研究中采用的接種方法不同，因此鑒定結(jié)果存在差異，進(jìn)而影響了抗性資源的有效交流和利用。因此，筆者致力于通過比較不同苗期接種方法和孢子液濃度，探索出最適合西瓜苗期炭疽病抗性鑒定的接種方法，同時(shí)調(diào)查不同西瓜種質(zhì)的抗性表現(xiàn)，旨在為西瓜炭疽病抗性品種的選育提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

西瓜炭疽病病原菌：Colletotrichum orbiculare分離純化自2020年采集的江蘇鹽城西瓜病瓜，保存于中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹研究所西瓜甜瓜病蟲害防控課題組。

供試西瓜種質(zhì)資源：PI 244019、PI 482322、PI 482261、PI 500303、PI 482312、PI 595200、PI 386018、PI 542117、PI 357709、Sugarlee為野生種，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹研究所西甜瓜種質(zhì)資源中期庫(kù)提供；Z21-05、Z21-06、Z21-07、Z21-09、090為雜交種，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹研究所西瓜甜瓜病蟲害防控課題組提供；金城五號(hào)、西農(nóng)八號(hào)、早佳、華欣為F1代雜交種，購(gòu)置于安徽荃銀高科瓜菜種子有限公司；紅和平為感病對(duì)照品種，購(gòu)置于浙江浙農(nóng)種業(yè)有限公司。試驗(yàn)過程中使用90 mm一次性營(yíng)養(yǎng)缽進(jìn)行栽培。

1.2 方法

試驗(yàn)于2022年8月在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹研究所綜合實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

1.2.1" " 培養(yǎng)基" " 配制9種不同的培養(yǎng)基，其中參照羅婷[8]的方法配制PDA培養(yǎng)基、胡蘿卜培養(yǎng)基、菜豆培養(yǎng)基、西瓜皮培養(yǎng)基、西瓜汁培養(yǎng)基；參照唐爽爽[13]的方法配置西瓜莖葉煎汁培養(yǎng)基、番茄燕麥片培養(yǎng)基、燕麥片瓊脂培養(yǎng)基；燕麥培養(yǎng)基購(gòu)置于索萊寶公司。

各培養(yǎng)基高溫滅菌后分裝倒入平板備用。接種15 d后觀察分生孢子的生長(zhǎng)情況。

1.2.2" " 接種孢子懸浮液的制備" " 挑取保存在4 ℃ PDA斜面培養(yǎng)基上的瓜類刺盤孢菌至PDA平板上于27 ℃培養(yǎng)，待菌絲長(zhǎng)出后，從菌絲邊緣用打孔器切取直徑0.5 cm的菌塊置于產(chǎn)孢培養(yǎng)基上，然后放置于27 ℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)，待產(chǎn)生分生孢子后，用無(wú)菌水清洗分生孢子，并經(jīng)滅菌擦鏡紙過濾，用血球計(jì)數(shù)板鏡檢計(jì)數(shù)，分別制成濃度為1×106 、1×105、1×104個(gè)·mL-1的分生孢子懸浮液。

1.2.3" " 接種方法" " （1）點(diǎn)滴法：西瓜幼苗生長(zhǎng)到3～4片真葉期時(shí)，使用移液槍分別將10 μL不同濃度的孢子懸浮液滴在西瓜真葉上，每片葉對(duì)稱接種4～6個(gè)點(diǎn)，每株接種2片真葉，每個(gè)濃度處理5株。接種后將西瓜植株放置于培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)24 h，溫度27 ℃，濕度100%，然后在培養(yǎng)箱中正常生長(zhǎng)管理，培養(yǎng)條件為：25～27 ℃，黑暗10 h/光照14 h，濕度100%，接種后7～10 d測(cè)量每個(gè)接種點(diǎn)病斑的最大長(zhǎng)度和最大寬度，記作縱徑和橫徑。病斑直徑為所有接種點(diǎn)病斑橫徑和縱徑的平均值，計(jì)算病情指數(shù)。

（2）噴霧法：西瓜幼苗生長(zhǎng)到3～4片真葉期時(shí)，采用噴霧接種法將炭疽病孢子懸浮液均勻噴灑到西瓜真葉上，放置于培養(yǎng)室中黑暗培養(yǎng)24 h，溫度27 ℃，濕度100%；然后在培養(yǎng)室中正常生長(zhǎng)管理，培養(yǎng)條件為：25～27 ℃，黑暗10 h/光照14 h，濕度100%，7～10 d后調(diào)查植株的病情指數(shù)。每個(gè)濃度處理5株，設(shè)3個(gè)重復(fù)。

1.2.4" " 不同西瓜種質(zhì)資源的苗期人工接種鑒定試驗(yàn)" " 根據(jù)1.2.3結(jié)果中篩選出的最優(yōu)接種方法對(duì)供試的18份西瓜種質(zhì)資源以完全隨機(jī)的試驗(yàn)方法，進(jìn)行苗期人工接種鑒定，每份種質(zhì)接種15～20株，重復(fù)3次，10 d后調(diào)查植株病情指數(shù)。

1.2.5" " 病情指數(shù)與抗性評(píng)價(jià)" " 采用點(diǎn)滴法接種的植株，病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)在孫玉燕等[10]的方法上稍作調(diào)整，具體如下：根據(jù)病斑直徑將植株抗性劃分為6個(gè)級(jí)別（圖1），0級(jí)：病斑直徑=0 mm；1級(jí)：病斑直徑≤0.50 mm；3級(jí)：0.50 mm＜病斑直徑≤1.50 mm；5級(jí)：1.50 mm＜病斑直徑≤2.00 mm；7級(jí)：2.00 mm＜病斑直徑≤3.00 mm；9級(jí)：病斑直徑 ＞3.00 mm。采用鋼質(zhì)尺測(cè)量病斑直徑。每個(gè)葉片的病情級(jí)別為所有接種點(diǎn)病情級(jí)別的平均數(shù)。

病情指數(shù)（DI）計(jì)算公式： DI=Σ（各病情級(jí)別代表數(shù)值×各病情級(jí)別的葉片數(shù)）/（調(diào)查總?cè)~片數(shù)×最高病情級(jí)別的代表數(shù)值）×100。

抗性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為：DI=0，免疫；0＜DI≤10，高抗；10＜DI≤35，抗病；35＜DI≤55，中抗；55＜DI≤75，感病；DI＞75，高感。

發(fā)病率/%=發(fā)病點(diǎn)/總接種點(diǎn)×100。

采用噴霧法接種的植株，病情分級(jí)及抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)參考農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《黃瓜棒孢葉斑病、蔓枯病、炭疽病抗病性鑒定技術(shù)規(guī)程》[14]的方法進(jìn)行，具體如下：以幼苗葉片出現(xiàn)病斑為感病指標(biāo)，調(diào)查每個(gè)單株葉片病情級(jí)別，按照以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí)，0級(jí)：無(wú)病斑；1級(jí)：病斑面積小于5%；3級(jí)：病斑面積≥5%～10%；5級(jí)：病斑面積＞10%～25%；7級(jí)：病斑面積＞25%～50%；9級(jí)：病斑面積＞50%。

病情指數(shù)（DI）計(jì)算公式和抗性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)同點(diǎn)滴法。發(fā)病率/%=發(fā)病株數(shù)/總接種株數(shù)×100。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用 SPSS 16.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，應(yīng)用Duncan氏新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 產(chǎn)孢培養(yǎng)基的篩選

C. orbiculare菌在PDA培養(yǎng)基上不能產(chǎn)生分生孢子，為獲得足夠多的孢子接種液，筆者在本試驗(yàn)中設(shè)置了9種不同的培養(yǎng)基，以期篩選出具有產(chǎn)孢能力的培養(yǎng)基。病原菌在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)20 d后，觀察菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)孢情況，結(jié)果表明，菌絲在9種培養(yǎng)基上均可正常生長(zhǎng)，狀態(tài)均勻致密，在燕麥培養(yǎng)基、西瓜莖葉煎汁培養(yǎng)基和西瓜汁培養(yǎng)基上產(chǎn)生橘紅色分生孢子團(tuán)，在其余培養(yǎng)基上均不能產(chǎn)生，其中燕麥培養(yǎng)基產(chǎn)生的孢子量遠(yuǎn)大于其余兩種培養(yǎng)基（圖2），刮取少量孢子鏡檢觀察，發(fā)現(xiàn)分生孢子呈現(xiàn)出C. orbiculare菌的典型特征，即無(wú)色，圓柱形或棒狀，一端圓形另一端較鈍，表明燕麥培養(yǎng)基可以作為 C. orbiculare的產(chǎn)孢培養(yǎng)基。

2.2 最適接種孢子液濃度篩選

采用噴霧法接種感病西瓜品種紅和平，7 d后接種濃度為1×104個(gè)·mL-1的植株發(fā)病率不足50%，表明此濃度不是有效接種濃度；而孢子濃度為1×106和1×105個(gè)·mL-1的植株發(fā)病率均達(dá)到100%，且接種葉片的病情指數(shù)差異不大，但孢子濃度越高，植株的莖蔓及葉柄發(fā)病越快，濃度為1×106個(gè)·mL-1時(shí)，莖蔓和葉柄在5 d時(shí)即溢縮腐爛（圖3），最后導(dǎo)致葉片干枯，植株萎蔫，無(wú)法準(zhǔn)確評(píng)估葉片的病情指數(shù)；而濃度為1×105個(gè)·mL-1時(shí)，莖蔓及葉柄的病情發(fā)展相對(duì)較慢，葉片的病情指數(shù)不受莖蔓和葉柄病情的影響，可真實(shí)地反映植株抗性水平，因此采用噴霧法接種西瓜炭疽病病菌的最適孢子濃度為1×105個(gè)·mL-1。

采用點(diǎn)滴法接種時(shí)，3個(gè)濃度中只有1×106個(gè)·mL-1濃度的孢子液可以產(chǎn)生病斑，1×105個(gè)·mL-1和1×104個(gè)·mL-1濃度幾乎不產(chǎn)生病斑，因此點(diǎn)滴法中接種的最適孢子濃度為1×106個(gè)·mL-1。

2.3 最適接種方法

植株生長(zhǎng)到3～4片真葉時(shí)，在噴霧法接種中，金城五號(hào)和090兩個(gè)品種發(fā)病率都為100%，抗性表現(xiàn)分別為感病（S）和高感（HS），而在點(diǎn)滴法接種中，兩個(gè)品種的發(fā)病率均未達(dá)到100%，其中金城五號(hào)的發(fā)病率為83.33%，表現(xiàn)為感病，而090的發(fā)病率為62.50%，表現(xiàn)為中抗（MR）（表1）。在兩種接種方法中，090的病情指數(shù)具有顯著差異。采用點(diǎn)滴法接種時(shí)，同一葉片每個(gè)接種點(diǎn)的病情等級(jí)差異較大，發(fā)病率不穩(wěn)定，可能導(dǎo)致抗性評(píng)價(jià)結(jié)果與實(shí)際抗性產(chǎn)生較大偏差。在抗病品種選育過程中，要避免接種方法對(duì)抗性結(jié)果的影響，噴霧法的發(fā)病率更加穩(wěn)定，因此后續(xù)選擇噴霧法進(jìn)行接種。

2.4 不同西瓜品種資源的苗期鑒定試驗(yàn)

根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果，在接種孢子濃度為1×105個(gè)·mL-1條件下，采用噴施法對(duì)供試的18份西瓜資源進(jìn)行苗期接種鑒定。結(jié)果表明，接種后5 d感病對(duì)照品種紅和平葉片開始出現(xiàn)病斑，7 d時(shí)病情達(dá)到感病級(jí)別，10 d時(shí)病情指數(shù)為63.70，與7 d時(shí)的抗性水平一致。供試資源中大部分資源在接種7 d后病情發(fā)展變緩，但個(gè)別品種如西農(nóng)八號(hào)在7 d時(shí)病情指數(shù)僅為35.00，但到第10天時(shí)病情指數(shù)達(dá)到70.79（圖4）。為保證所有資源的病情能充分發(fā)展，筆者選擇在接種后10 d調(diào)查植株的發(fā)病情況，結(jié)果如表2所示，不同資源對(duì)西瓜炭疽病病菌C. orbiculare的抗性不同。18份供試材料中，未發(fā)現(xiàn)對(duì)炭疽病免疫的資源，其中PI 244019表現(xiàn)高抗，PI 482261、PI 386018、PI 500303、PI 482312和華欣表現(xiàn)抗病，Sugarlee、PI 482322、PI 595200、 Z21-05、Z21-06和Z21-07表現(xiàn)中抗，西農(nóng)八號(hào)、PI 542117、PI 357709和Z21-09表現(xiàn)感病，早佳表現(xiàn)高感。從表2數(shù)據(jù)中可以發(fā)現(xiàn)，栽培品種的表現(xiàn)比較多樣，既有抗病的華欣、Z21-06，中抗的Z21-05、Z21-07和Sugarlee，也有感病的早佳、西農(nóng)八號(hào)、Z21-09。PI 244019、PI 482322、PI 482261、PI 500303、PI 482312、PI 595200、PI 386018、PI 542117、PI 357709、Sugarlee均為野生種，抗病表現(xiàn)比較穩(wěn)定，除了PI 542117和PI 357709表現(xiàn)為感病外，其余資源均表現(xiàn)為中抗或抗病。

3 討論與結(jié)論

西瓜炭疽病的抗性鑒定主要采用室內(nèi)離體或苗期鑒定法。其中，苗期鑒定法因能排除外部干擾、縮短周期且能精確控制條件，直觀展現(xiàn)品系間的抗性差異而備受青睞[15]。噴霧法因其高效、穩(wěn)定而被研究者廣泛采用[7，16-17]。

孢子濃度、菌株致病力等因素可能影響鑒定結(jié)果。孢子液濃度的選擇存在差異，羅婷[8]發(fā)現(xiàn)106個(gè)·mL-1為最適濃度，而Shim等[18]則篩選出4×105個(gè)·mL-1為最佳濃度。筆者在本研究中發(fā)現(xiàn)，孢子濃度105個(gè)·mL-1能有效侵染西瓜葉片，展示不同資源間抗病性差異。但濃度升至106個(gè)·mL-1時(shí)，莖蔓和葉柄受害嚴(yán)重，難以區(qū)分抗性差異。因此，筆者選擇105個(gè)·mL-1為最適接種濃度。接種操作時(shí)要避免孢子直接噴于莖蔓和葉柄上，以提高鑒定準(zhǔn)確性[19]。

不同研究中接種孢子液濃度的最佳取值差異，可能與病原菌致病力不同有關(guān)。在本試驗(yàn)中，西農(nóng)八號(hào)西瓜對(duì)炭疽病感病，但羅婷[8]的研究結(jié)果表明，西農(nóng)八號(hào)高度抗病，這種差異可能是由不同病原菌的致病性差異造成的[9]。不同炭疽病菌致病力差異顯著，C. nymphaeae對(duì)葉片侵染弱但對(duì)果實(shí)侵染強(qiáng)，而C. magnum在無(wú)傷條件下對(duì)果實(shí)侵染力減弱[20]。

筆者在本試驗(yàn)所篩選出的接種條件，主要是針對(duì)C. orbiculare這一復(fù)合種。該復(fù)合種在我國(guó)是引起西瓜炭疽病的優(yōu)勢(shì)種[21]，能夠侵染西瓜的整個(gè)地上部分，且在西瓜的整個(gè)生育期內(nèi)均具有侵染能力。然而，鑒于西瓜炭疽病病原菌的種類復(fù)雜多樣，在實(shí)際應(yīng)用中，仍需要根據(jù)所使用的具體菌株，對(duì)接種條件進(jìn)行適當(dāng)優(yōu)化，以確保獲得可靠且準(zhǔn)確的試驗(yàn)結(jié)果。

綜上所述，筆者通過篩選產(chǎn)孢培養(yǎng)基、接種孢子懸浮液濃度及接種方法，建立了針對(duì)西瓜炭疽病病原菌Colletotrichum orbiculare的苗期人工接種鑒定體系。噴霧法接種孢子濃度為1×105個(gè)·mL-1時(shí)效果最佳，能準(zhǔn)確評(píng)估西瓜資源的抗病性，在18份供試材料中，鑒定出高抗、抗病、中抗、感病及高感品種。研究結(jié)果為西瓜抗病育種奠定了基礎(chǔ)。

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