基于γ-氨基丁酸抑制性神經通路探討“長強”配“太溪”穴電針治療自閉癥神經發(fā)育障礙的作用機制

摘要 目的：探討“長強”配“太溪”穴電針治療自閉癥神經發(fā)育障礙仔鼠的靶向調控機制。方法：選取已成功受孕SD大鼠10只，分為造模組和非造模組，每組5只，造模組大鼠給予丙戊酸鈉600 mg/kg灌胃造模，非造模組給予等量生理鹽水灌胃。將造模組大鼠所產36只仔鼠隨機分為電針穴位組、電針非經非穴組和模型組，每組12只，隨機選取非造模組仔鼠所產的仔鼠12只作為對照組。電針穴位組仔鼠在出生第24天即開始電針長強和太溪穴位。電針非經非穴組避開經絡和穴位針刺。分別于干預前后對所有仔鼠行曠場實驗和Morris水迷宮測試。并取仔鼠腹主動脈血檢測血清谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）水平。斷頭處死留取海馬組織，通過實時熒光定量聚合酶鏈式反應（RT-PCR）測定仔鼠海馬組織γ-氨基丁酸A型受體（GABAAR）mRNA相對表達水平，采用蛋白免疫印跡法（Western Blot）測定仔鼠海馬組織糖原合酶激酶-3β（GSK-3β）、β-catenin和微白蛋白（PV）相對表達水平。結果：曠場實驗結果表明，經干預后，電針穴位組水平得分和垂直得分高于模型組和電針非經非穴組，低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。Morris水迷宮測試結果表明，經干預后，與模型組和電針非經非穴組比較，電針穴位組逃避潛伏期縮短，而穿越次數增加，平臺停留時間延長，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與模型組比較，電針穴位組仔鼠Glu、GABA、海馬GABAAR mRNA、β-catenin和PV相對表達水平降低，而GSK-3β蛋白相對表達水平上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論：針刺長強和太溪穴可有效改善自閉癥仔鼠的空間學習和記憶能力，靶向調控自閉癥神經發(fā)育障礙，其具體機制可能與通過促進GABA神經通路的興奮-抑制平衡，同時作用于Wnt/β-catenin信號通路中的重要調節(jié)因子有關。

關鍵詞 自閉癥；γ-氨基丁酸；長強穴；太溪穴；針刺

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.13.008

The" Treatment of Autism Neurodevelopmental Disorders with \"Changqiang\" and \"Taixi\"

Acupoints Electroacupuncture

LIN Jintao， LI Aiwu， LIU Zhaoru， GONG Fengying， ZHANG Qiang， LI Yongchun， HUANG Ronglyu， LYU Ying， CHENG Yunshui

Southern Hospital， Southern Medical University， Guangzhou 510515， Guangdong， China

Corresponding Author " LYU Ying， E-mail： lvying1966@163.com; CHENG Yunshui， E-mail： ljyjghcv@163.com

Abstract Objective：To explore the targeted regulatory mechanism of \"Changqiang\" combined with \"Taixi\"

acupoints electroacupuncture in the treatment of autistic neurodevelopmental disorders in offspring mice.Methods：Ten SD rats were" divided into model group and non-model group，with 5 groups in each group.The rats in the model group were given 600 mg/kg sodium valproate by gavage to establish models，and the rats in the non-model group were given the equal volume of normal saline by gavage.The offspring of the rats in the model group were randomly divided into electroacupuncture acupoint group，electroacupuncture non-meridian non-acupoint group and model group with 12 rats，and 12 offspring rats from the non-model group were randomly selected as the control group.The rats in the electroacupuncture acupoint group started electroacupuncture at Changqiang and Taixi acupoints at the 24th day after birth.The electroacupuncture non-meridian non-acupoint group avoided meridian and acupoint acupuncture.Open field experiment and morris water maze test were performed before and after intervention.The hippocampus was collected by decapitation，and the relative expression level of γ-aminobutyric acid type A receptor（GABAAR） mRNA in the hippocampus of the offspring were determined by real-time quantitative PCR（RT-PCR）.The relative expression levels of glycogen synthase kinase-3β（GSK-3β），β-catenin and microalbumin（PV） were measured by Western Blot.Results：The open field experiment results showed that after intervention，the horizontal and vertical scores of electroacupuncture acupoint group were higher than those of model group and electroacupuncture non-meridian non-acupoint group，but lower than those of the control group（P＜0.05）.Morris water maze test results showed that after intervention，compared with the model group and the electroacupuncture non-meridian non-acupoint group，the escape latency of the electroacupuncture point group shortened，the crossing times increased，and the platform residence time prolonged（P＜0.05）.Compared with model group，the relative expression levels of Glu，GABA，GABAAR mRNA，β-catenin and PV in hippocampus of rats in electroacupuncture acupoint group decreased，while the relative expression levels of GSK-3β protein increased（P＜0.05）.Conclusion：Acupuncture at Changqiang and Taixi acupoints can effectively improve the spatial learning and memory ability of autistic offspring mice，and target the regulation of autistic neurodevelopmental disorders.The specific mechanism may be related to promoting the excitation-inhibition balance of GABA neural pathway and acting on important regulatory factors in Wnt/β-catenin signaling pathway.

Keywords autism; γ-aminobutyric acid; Changqiang acupoint; Taixi acupoint; acupuncture

自閉癥是一種廣泛性神經發(fā)育障礙性疾病，主要表現為智力低下，行為刻板，興趣范圍狹窄及社會交往和語言障礙。目前，我國兒童自閉癥的患病率雖然低于國外平均水平，但呈現出逐年增加趨勢。有調查發(fā)現，我國6～12歲兒童自閉癥的患病率約為0.7%，其中男性兒童患病率高達0.95%，自閉癥不僅對患兒的身心成長造成巨大危害，且大部分患兒無法獨立生活，需要終生照顧和養(yǎng)護，極大地增加了家庭和社會負擔［1］。然而，目前尚無針對自閉癥的特效藥物，臨床治療主要以早期康復教育訓練為主，治療手段非常有限，效果不佳。近期有研究通過計算機斷層掃描發(fā)現，在自閉癥病人丘腦和額葉中γ-氨基丁酸（γ-amino-butyric acid，GABA）濃度水平明顯增高，且與自閉癥的嚴重程度成正比，提示GABA作為大腦中的一種抑制性神經遞質可能在自閉癥的發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用［2］。中醫(yī)學對自閉癥認識歷史悠久，積累了豐富的治療經驗，其中頭針針刺療法已經被證實可通過調節(jié)頭部經脈循行，改善大腦皮層功能和神經元疾

病狀態(tài)，并通過額葉內側回特異性激活認知、情感、記憶及內分泌功能［3-4］。本研究基于GABA抑制性神經通路，探討“長強”配“太溪”穴電針治療對孤獨癥神經發(fā)育障礙的靶向調控機制。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選取無特定病原體級成熟的同品系雌性和雄性SD大鼠各20只（購置于南方醫(yī)科大學動物實驗中心），雌性大鼠體質量為200～250 g，雄性大鼠體質量為300～350 g，合格證號SCXK（粵）2017-0002。所有大鼠于實驗前雌雄分籠適應性飼養(yǎng)7 d，保持環(huán)境溫度（21±2）℃，相對濕度50%～60%，晝夜明暗交替12 h，所有動物予以自由食水。本研究動物實驗過程經南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院實驗動物福利倫理委員會審查通過（批準編號：2110002）。

1.2 主要試劑及儀器

自發(fā)活動視頻分析系統(tǒng)、曠場實驗視頻分析系統(tǒng)、Morris水迷宮視頻分析系統(tǒng)均購自江蘇賽昂斯生物科技有限公司；30號0.5寸一次性不銹鋼毫針、SXDZ-50型針刺手法針療儀均購自蘇州醫(yī)療用品廠有限公司；LEIA-X4實時熒光定量聚合酶鏈式反應（RT-PCR）儀購自濟南愛來寶儀器設備有限公司；十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）凝膠、多功能電泳儀均購自上海碧云天生物技術有限公司；γ-氨基丁酸A型受體（GABAAR）抗體、γ-氨基丁酸B型受體（GABABR）抗體、內參甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）抗體均購自上海戶實醫(yī)藥科技有限公司；大鼠GABA酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）試劑盒、大鼠谷氨酸（Glu）ELISA試劑盒均購自武漢賽培生物科技有限公司。

1.3 動物分組和造模

所有大鼠適應性飼養(yǎng)結束后，按照雌性和雄性1∶1比例進行合籠，于合籠第2天清晨觀察大鼠托盤底下有無透明、凝膠狀陰栓，若有即為受孕成功，記為孕第0.5天，并單獨分籠飼養(yǎng)。選取成功受孕的10只雌性大鼠，按照隨機數字表法，將孕鼠分為造模組和非造模組，每組5只，其中造模組在孕12.5 d時腹腔注射丙戊酸鈉，藥液劑量按600 mg/kg（丙戊酸鈉粉末用生理鹽水定容至250 mg/mL溶液）配制，非造模組孕鼠腹腔注射等量生理鹽水。造模組所產仔鼠，根據其睜眼時間、斷乳時體質量、行為學表現監(jiān)測，共獲得36只造模成功的自閉癥模型仔鼠，將其隨機分為電針穴位組、電針非經非穴組和模型組，每組12只，同時選取非造模組所產的12只仔鼠作為對照組。

1.4 電針干預措施

電針穴位組仔鼠在出生第24天即開始電針長強和太溪穴位，穴位定位參考《實驗針灸學》［5］，其中“長強”定位于仔鼠肛門和尾根間凹陷處，“太溪”定位于內踝尖與跟腱之間的凹陷處。具體操作過程為：電針前，將仔鼠固定，并對穴位進行消毒，使用一次性不銹鋼毫針單手進針，進針深度為3～5 mm，待手下有緊澀感時，將針柄連接電針儀的正負極，并接通電源，設置波形為連續(xù)波，頻率、電流強度和時間分別設置為2 Hz、2 mA和20 min，每日1次，連續(xù)干預10 d。電針非經非穴組干預方法參考孫培養(yǎng)等［6］的研究，選取仔鼠雙側前肢足部背側第3和第4跖骨間隙凹陷處，避開經絡和穴位。模型組和對照組仔鼠每天模擬抓握動作1次，但不做其他干預。

1.5 神經行為學測試

1.5.1 曠場實驗［7］

曠場實驗箱為36 cm×36 cm×36 cm無頂立方形裝置，內壁四周和箱底均為黑色，同時將箱底劃分為面積相等的9個小方格，所有仔鼠曠場實驗均在干預前1 d（出生第23天）和干預后第2天（出生第33天）08：00～18：00進行，記錄仔鼠穿越地面的方塊數作為水平活動得分，直立次數作為垂直得分。測試過程均在恒溫恒濕環(huán)境下進行，且保持周圍安靜，避免人為因素對仔鼠造成應激刺激反應。

1.5.2 Morris水迷宮實驗［8］

Morris水迷宮為120 cm×50 cm×30 cm的無頂水池裝置，由池壁上的4個等距離點將水池分為4個象限空間，其中，在第1象限放置1個高28 cm，直徑12.5cm的黑色圓形平臺，測試時使水面高于該平臺2 cm，并保持水溫在22 ℃。Morris水迷宮測試內容主要包括定位航行試驗和空間探索試驗。定位航行試驗具體測試方法為試驗人員從水池的4個象限分別將仔鼠放入水中，記錄仔鼠的逃避潛伏期，若大鼠在60 s內找不到位于第1象限的平臺，則由試驗人員幫助其放置于平臺上，此時記錄潛伏期為60 s，仔鼠站立于平臺并保持10 s后，拿下放回籠內休息60 s，再按順序從下1象限繼續(xù)測試。定位航行試驗連續(xù)測試5 d，測試時間為每日08：00～18：00進行，每日4次。定位航行試驗結束后第2天即進行空間探索試驗，具體方法為拆去原水池中的平臺，將仔鼠放置水迷宮中自由游泳，并記錄仔鼠在原平臺位置的穿越次數和在原平臺位置的停留時間，每次只進行1次。

1.6 組織取材

待所有仔鼠完成干預和神經行為學測試后，首先，采集腹主動脈血液并離心取上清液待測，然后，處死仔鼠，于冰上暴露腦組織，使用精細鑷子剝離腦膜，0.9%氯化鈉注射液輕輕沖洗表面血漬，用毛筆取出左右大腦海馬組織，并使用液氮冷藏待測。

1.7 仔鼠血清Glu和GABA水平檢測

嚴格按照GABA和Glu的ELISA試劑盒中的說明書測定各組仔鼠血清GABA和Glu水平。

1.8 RT-PCR測定仔鼠海馬組織GABAAR mRNA相對表達水平

取仔鼠海馬組織50 μg，采用Trizol法提取細胞中總RNA，并通過紫外分光光度計測定提取總RNA的濃度和質量。嚴格按照反轉錄試劑盒說明書要求獲得cDNA，反應體系（10 μL）為5×RT buffer 4 μL，10 mmol dNTPs 2 μL，Rnasin（40 U/μL）0.4 μL，M-MLV-RTase（200 U/μL）1 μL，RNase-Free 2.6 μL。反應條件為42 ℃水浴孵育60 min，70 ℃加熱10 min。聚合酶鏈式反應（PCR）反應體系（12 μL）為SYBR Premix Ex Taq 6.0 μL，上下游引物各0.3 μL，模板0.6 μL，RNase-Free 5.1 μL。反應條件設置為95 ℃預變性30 s，1個循環(huán)，95 ℃變性5 s，60 ℃退火和延伸30 s，共40個循環(huán)。采用2－ΔΔCT計算GABAAR mRNA相對表達水平，其中ΔCt＝目的RNA Ct值－內參RNA Ct值。

1.9 蛋白免疫印跡法（Western Blot）檢測

Western Blot測定仔鼠海馬組織糖原合酶激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β）、β-catenin和微白蛋白（parvalbumin，PV）相對表達水平。

取仔鼠海馬組織50 μg，使用RIPA裂解液提取組織中的總蛋白質，并調整各組仔鼠組織蛋白濃度一致，通過SDS-PAGE凝膠電泳和電轉膜至經甲醛預處理后的聚偏二氟乙烯（PVDF）膜。密封2 h，并加入兔抗鼠GSK-3β、β-catenin、PV及GAPDH一抗4 ℃孵育過夜，使用Tris鹽緩沖液（TBST）漂洗10 min，共洗滌3次后，加入辣根過氧化物酶標記的二抗孵育60 min，再次TBST漂洗10 min，洗滌3次，最后使用電化學發(fā)光（ECL）法增敏發(fā)光液將PVDF膜顯色，并曝光至X線片，使用Quantity one灰度分析軟件分析各組條帶灰度值，以目標蛋白與內參蛋白積分吸光度值比值表示蛋白的相對表達水平。

1.10 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 22.0軟件進行數據分析。符合正態(tài)分布的定量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 神經行為學觀察結果

2.1.1 曠場實驗

組間比較，4組仔鼠干預前后水平得分和垂直得分比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其中，模型組、電針穴位組和電針非經非穴組干預前水平得分和垂直得分均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；經干預后，電針穴位組水平得分和垂直得分高于模型組和電針非經非穴組，但低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

組內比較，對照組、模型組和電針非經非穴組干預前后水平得分和垂直得分差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），電針穴位組經干預后水平得分和垂直得分均較干預前升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表1。

2.1.2 Morris水迷宮實驗

組間比較，4組仔鼠干預前后逃避潛伏期、穿越次數和平臺停留時間比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其中，模型組、電針穴位組和電針非經非穴組干預前逃避潛伏期高于對照組，而穿越次數和平臺停留時間低于對照組（P＜0.05）；經干預后，與模型組和電針非經非穴組比較，電針穴位組逃避潛伏期縮短，而穿越次數增加，平臺停留時間延長，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

組內比較，對照組、模型組和電針非經非穴組干預前后逃避潛伏期、穿越次數和平臺停留時間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），電針穴位組經干預后逃避潛伏期明顯縮短，穿越次數增加，平臺停留時間延長，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表2。

2.2 電針治療對仔鼠血清Glu和GABA水平的影響

與對照組比較，模型組和電針非經非穴組仔鼠血清Glu水平及模型組、電針非經非穴組和電針穴位組血清GABA水平升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；與模型組比較，電針穴位組仔鼠血清Glu和GABA降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表3。

2.3 電針治療對仔鼠海馬組織中GABAAR mRNA相對表達水平的影響

與對照組比較，模型組和電針非經非穴組仔鼠海馬組織GABAAR mRNA相對表達水平升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；與模型組比較，電針穴位組仔鼠海馬組織GABAAR mRNA相對表達水平下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見圖1。

2.4 電針治療對仔鼠海馬組織中GSK-3β、β-catenin和PV蛋白相對表達水平的影響

與對照組比較，模型組、電針非經非穴組和電針穴位組仔鼠GSK-3β蛋白相對表達水平下調，而β-catenin和PV蛋白相對表達水平上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與模型組比較，電針穴位組仔鼠GSK-3β蛋白相對表達水平上調，而β-catenin和PV蛋白相對表達水平下調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見圖2、表4。

3 討 論

自閉癥系腦神經發(fā)育障礙性疾病，是孤獨癥譜系障礙最常見類型之一，常發(fā)病于3歲以下兒童，患兒多以社會行為異常和語言功能障礙為主要臨床表現，是全球共同關注的公共健康問題［9］。目前，現代醫(yī)學針對自閉癥主要以康復教育訓練和抗精神藥物治療為主，但治療周期較長，且長期服用該類藥物極易導致各種不良反應的發(fā)生［10］。中醫(yī)學并無“自閉癥”病名，但根據其癥狀和體征描述，應歸類于“神昏”“輕狂”“視無情”和“目無情”等范疇，而其病機主要為先天腎精虧虛，神失所養(yǎng)，肝失條達，升發(fā)不利，陰陽失調所致，病位在腦［11］，由此可見，我國古人已認識到精神活動異常與腦關系密切，腦是主宰人體生命活動，維持視聽、語言、思維及記憶功能的重要臟器。

現代以來，隨著對自閉癥認識的不斷深入，針刺逐漸成為自閉癥治療的熱點研究領域。針刺治療作為我國中醫(yī)學的瑰寶，屬于一種綠色療法，治療過程簡便，價格低廉，且對患兒的傷害較小，患兒及其家屬依從性較高，已經成為目前中醫(yī)藥治療自閉癥的主要手段之一。有系統(tǒng)性評價研究證實，針刺治療在自閉癥的臨床治療取得了良好療效［12］。然而，關于其具體的作用機制仍不十分清楚。有研究認為，針刺療法可能通過協(xié)調神經體液和神經網絡方面而發(fā)揮作用［13］，也有研究認為，針刺可能通過促進或抑制某些神經遞質的釋放，通過多種途徑影響與神經發(fā)育相關的信號轉導通路而發(fā)揮其治療自閉癥的功能［14］。本研究通過給予丙戊酸鈉，降低大鼠突觸前后的GABA水平，成功構建自閉癥仔鼠模型，同時采用針刺“長強”配“太溪”穴位干預手段，觀察其對自閉癥仔鼠的臨床治療作用，并分析其可能作用機制。

長強穴為人體督脈的絡穴，督脈起源于長強，至腦腑形成了軸向緊密連接，由此可見長強穴與中樞神經系統(tǒng)關系密切。通過針刺督脈之長強穴，使氣血上行榮于腦，可達升陽醒腦、開竅安神之效，故可增強認知和記憶功能。現代醫(yī)學同樣有研究表明，通過針刺長強穴，有利于急性脊髓損傷后大鼠神經生長因子和腦圓形神經營養(yǎng)因子的表達，有利于神經系統(tǒng)損傷的修復［15］。太溪穴是足少陰腎經原穴，《靈樞·經脈》道：“足少陰腎經貫督脈，絡腦，且腎藏精、生髓，為先天之本”，根據中醫(yī)學“經脈所過，主治所及”理論可知，太溪穴主治腎臟和腦腑之病。蔣瑾等［16］研究發(fā)現，通過刺激太溪穴，有利于脊髓和延髓相關核團在下一級神經遞質的傳遞，同時證實了針刺太溪在治療神志異常方面的功效。曠場實驗和水迷宮測試是反映動物中樞神經系統(tǒng)興奮或抑制狀態(tài)，空間記憶和學習能力的主要測試手段。本研究通過對自閉癥仔鼠進行上述測試發(fā)現，相較于對照組，模型組仔鼠水平得分、垂直得分、穿越平臺次數和平臺停留時間明顯降低，而逃避潛伏期延長，而電針穴位組仔鼠水平得分、垂直得分、逃避潛伏期、穿越平臺次數和平臺停留時間相較于模型組得到明顯改善（P＜0.05），但電針非經非穴組仔鼠上述指標水平在干預前后無顯著變化（P＞0.05）。該結果提示，中樞神經系統(tǒng)抑制是自閉癥仔鼠的主要表現，在空間學習和記憶能力均出現下降，而通過電針長強和太溪穴可明顯改善仔鼠的空間記憶和學習能力，緩解神經系統(tǒng)抑制狀態(tài)。

神經遞質功能失衡是自閉癥發(fā)病機制的主要假說之一，其中，Glu是人體重要的興奮性神經遞質，幾乎分布于所有的神經元細胞，而Glu受體主要介導了神經元細胞間興奮性突觸的傳遞［17］；GABA則是中樞神經細胞最重要的抑制性神經遞質之一，在不同的時期GABA發(fā)揮著不同的生理學作用，對平衡興奮性傳導和抑制性傳導起著非常關鍵的作用［18］。本研究發(fā)現，相較于對照組，模型組仔鼠血清Glu和GABA水平均明顯升高（P＜0.05），經干預后，電針穴位組仔鼠上述血清指標水平較模型組明顯降低（P＜0.05），但電針非經非穴組仔鼠Glu和GABA水平則與模型組無明顯差異（P＞0.05）。經典的Wnt信號通路也是自閉癥發(fā)病機制的重要假說之一［19］。其中，PV作為該通路的重要調節(jié)因子，是參與動物視覺反射和協(xié)調眼掃視過程的重要物質［20］。本研究結果發(fā)現，相較于對照組，模型組仔鼠β-catenin和PV蛋白相對表達水平上調，而GSK-3β蛋白相對表達水平明顯降低（P＜0.05），經干預后，電針穴位組仔鼠GSK-3β蛋白相對表達水平較模型組明顯上調，而β-catenin和PV蛋白相對表達水平明顯下調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。這表明，Wnt/β-catenin通路中重要調控蛋白表達異常與孤獨癥的發(fā)生具有密切關聯(lián)，而電針改善自閉癥仔鼠空間學習和記憶能力很可能通過作用于Wnt/β-catenin通路的相關蛋白調控因子有關。

綜上所述，針刺長強和太溪穴可有效改善自閉癥仔鼠的空間學習和記憶能力，靶向調控自閉癥神經發(fā)育障礙，其具體機制可能與通過促進GABA神經通路的興奮-抑制平衡，同時作用于Wnt/β-catenin信號通路中的重要調節(jié)因子有關。但長強和太溪穴的具體調控機制尚需進一步深入研究。

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（收稿日期：2022-10-22）

（本文編輯鄒麗）

基金項目 國家自然青年科學基金項目（No.82105006）；2019年廣東省中醫(yī)藥局面上項目（No.20191224，20201232）；南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院院長基金項目（No.2019B026，2020B031）

通訊作者 呂英，E-mail：lvying1966@163.com；成云水，E-mail：ljyjghcv@163.com

引用信息 林錦韜，李愛武，劉釗汝，等.基于γ-氨基丁酸抑制性神經通路探討“長強”配“太溪”穴電針治療自閉癥神經發(fā)育障礙的作用機制［J］.中西醫(yī)結合心腦血管病雜志，2024，22（13）：2357-2362.