清熱養陰丸中丹皮酚的研究

關鍵詞：清熱養陰丸，質量標準，丹皮酚

DOI編碼：10.3969/j.issn.1002-5944.2025.03.041

0 引言

清熱養陰丸收載于《衛生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊，處方由梔子、黃連、牡丹皮、白芍、薄荷、地黃、玄參、麥冬、浙貝母等十二味中藥組成[1-2]。通過對處方中十二味藥進行粉碎成細粉，過篩，混勻，每100g粉末加煉蜜30～40g，及適量的水，制成大蜜丸，即得。具有養陰清熱，消腫止痛。用于肺胃積熱，火熱上攻引起的口舌生瘡，牙齦出血，煩躁口渴，咽喉疼痛，肺熱咳嗽，失音聲啞，頭暈耳鳴，大便秘積等癥。其中牡丹皮作為處方中的重要組成成分，牡丹皮具有清熱涼血、活血化瘀的功效，用于熱入營血、溫毒發斑、吐血、夜熱早涼、無汗古蒸、經閉痛經、跌撲傷痛、癰腫瘡毒等癥狀，主要含丹皮酚（即芍藥醇）、牡丹皮原苷等主要成分。由于清熱養陰丸原質量標準于2014年之后一直沒有進行修訂，該標準中只針對性狀、顯微鑒別及丸劑制劑通則的一般檢查項目，沒有對處方中任何一位中藥材進行專屬鑒別，所以本次研究建立了處方中牡丹皮的薄層色譜鑒別，以便更好地控制藥品質量，同時對藥品的生產、檢驗、應用等方面也有一定的實用價值。

1 實驗材料

1.1 實驗儀器

（1）超聲波清洗機SB-5200 DTDN（寧波新芝生物科技股份有限公司）；

（2）羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板（自制）；

（3）超聲波清洗機SB-5200 DTDN（寧波新芝生物科技股份有限公司）；

（4）萬分之一天平AL204〔梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司〕；

（5）十萬分之一天平XP205〔梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司〕；

（6）電熱鼓風干燥箱GZX-9076 MBE上海博迅實業有限公司醫療設備廠；

（7）密理博超純水機Milli Direct-Q16美國；

（8）卡瑪薄層色譜成像系統TLC Visualizer瑞士卡瑪。

1.2 實驗樣品與試劑

1.2.1 實驗樣品

石膏、梔子（姜制）、黃連、牡丹皮、白芍、地黃、麥冬、玄參、浙貝母、薄荷、山豆根、甘草。均購自重慶澤凱有限公司。

丹皮酚對照品（中國食品藥品檢定研究院提供，批號110708-200506）。

樣品來源如表1所示。

1.2.2 實驗試劑

（1）甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、環己烷、乙醚、甲苯、鹽酸、硫酸（均為分析純 重慶川東化工有限公司）；

（2）5%三氯化鐵乙醇溶液（稱5 g三氯化鐵用95%定容到100 mL）；

（3）鹽酸酸性5%三氯化鐵乙醇溶液（每100 mL三氯化鐵乙醇溶液中加5滴鹽酸）；

（4）2%的香草醛硫酸溶液（每100mL硫酸溶液中含2g香草醛）。

2 實驗方法與結果

2.1 供試品溶液制備

取本品大蜜丸6 g，剪碎，加乙醚30 mL，超聲處理45 min，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醚1 mL使溶解，作為供試品溶液。

2.2 對照品溶液制備

取丹皮酚對照品適量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。

按處方量稱取缺牡丹皮的陰性樣品6g，加乙醚30mL，超聲處理45min，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醚1 mL使溶解，制成陰性對照溶液。

2.3 薄層色譜

照薄層色譜法（中國藥典2020年版四部通則0502）檢驗，吸取上訴三種溶液各10 uL，分別點于同一硅膠G薄層板上，分別也以環己烷-乙酸乙酯（5：1）、環己烷-乙酸乙酯-冰醋酸（4：1：0.1）為展開劑[3-4]，展開，取出，晾干，分別噴以2%的香草醛硫酸溶液、鹽酸酸性的5%三氯化鐵乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰）。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾。具體如圖1、圖2所示。

2.4 耐用性考察

由于薄層板硅膠所用的粒度、性質以及粘合劑各有不同，可能導致其重現性及色譜行為也產生了相對差異。為此，針對自制薄層板硅膠G及預制薄層板硅膠G兩種不同的薄層板進行相同條件下薄層鑒別實驗。結果顯示，兩種薄層板上的主成分斑點和雜質斑點可分離，Rf值在0.3～0.5之間，說明該方法對薄層板耐用性良好。以及在恒溫恒濕試驗箱中，以擬訂方法在不同溫濕度下進行薄層鑒別試驗。結果顯示，高溫高濕條件下（T=35℃，RH =75%）及低溫低濕條件下（T=4℃，RH =15%）主成分斑點和雜質斑點均分離效果優良，Rf值在0.3～0.5之間。結果表明該方法受溫濕度影響較小，對不同溫濕度耐用性良好。

3 結語與討論

隨著人們對生活質量的日益提高，人們對養陰清肺丸需求量日漸增大。養陰清肺丸不但能夠潤肺止咳，對治療慢性支氣管炎、咳嗽等呼吸系統疾病有很好的效果，因其含有麥冬等藥物，可以增加肺部的潤滑程度，減級肺部炎癥，從而緩解咳嗽癥狀；而且養陰清肺丸還能夠清熱解毒，對治療肺部感染、肺炎等疾病有顯著療效，其中的黃芪等藥物能夠提高機體免疫力，增強扺御病菌的能力，同時牡丹皮也具有清熱解毒的作用；還具有滋陰養顏養的作用，因其含黨參、人參等藥物能夠滋補肝腎、養陰補血，使身體保持良好的狀態，同時還能夠延緩衰老，提高皮膚的彈性和光澤度。所以保證其藥品的安全有效、穩定和質量可控非常重要。因其中藥成分制劑組分多，成分復雜，在定性和定量研究過程中，需要通過對處方中各藥物進行分析，了解其主要成分和有效成分的理化性質，從而找到合適的提取分離方法。

此次在清熱養陰丸原有標準的基礎上，增加了對牡丹皮的薄層鑒別。牡丹皮薄層鑒別供試品的制備采用兩種方法（一種為加乙醚30 mL，低溫回流一小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醚1 mL使溶解；一種為加乙醚30 mL，超聲處理45 min，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醚1 mL使溶解），兩種方法均能提出牡丹皮中的丹皮酚，但由于超聲處理更加簡單快捷，所以最后選擇采用加乙醚30 mL，超聲處理45 min；在牡丹皮的博層鑒別展開劑選擇中分別采用：（1）環己烷：乙酸乙酯（5：1），（2）環己烷：乙酸乙酯：冰醋酸（4：1：0.1）方法Rf值為0.45，采用第二個展開劑Rf值為0.48，（最佳Rf值為0.3～0.5），所以兩種展開劑均可；噴2%的香草醛硫酸溶液，由于香草醛為萬能的顯色劑，此方中成分復雜，苷類成分較多，無法分開，最后采用鹽酸酸性的5%三氯化鐵乙醇溶液，試驗結果比較理想。

作者簡介

秦德松，本科，工程師，研究方向為藥品質量檢驗檢測。

龔艷，通信作者，研究方向為藥品質量檢驗檢測。

（責任編輯：張瑞洋）