貴州銅仁發現砂鱉

關鍵詞：新紀錄；銅仁市；砂鱉；鱉屬

鱉屬（Pelodiscus）隸屬于龜鱉目（Testudines）鱉科（Trionychidae），廣泛分布于俄羅斯、朝鮮半島、日本、中國以及越南北部，同時已人工引入馬來西亞、泰國、菲律賓以及美國的夏威夷群島等地［1］。目前，鱉屬共包含7個有效種，中國均有分布［1?2］。

砂鱉［Pelodiscus axenaria（Zhou，Zhang amp; Fang，1991）］是周工健等［3］1991年描述的鱉屬物種，模式產地位于湖南。由于鱉屬物種間形態相似度較高、種內形態變異較大等原因，目前砂鱉的形態識別特征尚不明確，但此前的多個分子遺傳學研究已經證明了砂鱉的有效性［4?10］。砂鱉個體較小，常棲息于水質清澈的砂礫石底質的江河上游和寬闊溪流中。由于棲息地被破壞、人為捕撈和環境污染等原因，砂鱉數量銳減，2016年《中國脊椎動物紅色名錄》將其列為瀕危等級［11］。目前僅湖南省、廣東省和廣西壯族自治區有分布記錄［10］。

此前，研究人員認為貴州省分布的鱉屬物種僅有中華鱉［P. sinensis（Wiegmann，1835）］一種［10，12?15］。2024年3月，筆者在貴州省銅仁市碧江區的野外調查中采集到2號雄性鱉屬物種標本，綜合形態特征比較和分子系統發育分析，鑒定所采集標本為砂鱉，為貴州省首次記錄（圖1）。

1 材料與方法

1. 1 標本采集與形態鑒定和測量

于2024年3月5—7日在貴州省銅仁市碧江區（27°43′ N，109°5′ E）采集到2號雄性鱉屬物種標本。取少量肌肉組織保存于95%的乙醇溶液中，整體標本在10%的福爾馬林中固定1 d后轉入75%乙醇溶液中永久保存。標本存放于青海大學標本館（標本號：LFR2024013、LFR2024014）。

標本測量依據周工健等［3］、唐業忠［16］和Gong etal. ［1］的研究，使用卷尺（精度1 mm）和電子游標卡尺（德國美耐特不銹鋼數顯卡尺，0 ～ 200 mm，精度0. 1 mm）對標本進行外部形態測量。形態量度指標包括體全長、背甲長、背甲寬、腹甲長、頭長、頭寬、吻突長、尾長、眼徑、眼間距、內腹甲寬和內腹甲高。

1. 2 分子實驗與系統發育關系分析

使用血液/細胞/組織基因組提取試劑盒（天根生化科技（北京）有限公司）提取2號標本的肌肉組織總DNA。采用引物Gludg（5′-TGACTTGAARAACCAYCGTTG-3′）和CB3（5′-GGCAAATAGGAAATATCATTC-3′）擴增線粒體Cyt b 基因［17］。PCR反應程序：95 ℃預變性4 min；95 ℃變性40 s，53 ℃退火30 s，72 ℃延伸60 s，35個循環；72 ℃終延伸10 min。PCR產物使用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測，產物由上海邁浦生物科技有限公司測序。原始序列使用DNAStar軟件進行編輯拼接［18］。

根據Gong et al.［1］的研究，從GenBank下載鱉屬7個物種27條序列進行系統發育分析（表1），選取滑鱉［Apalone mutica（Lesueur，1827）］、山瑞鱉［Paleasteindachneri（Siebenrock，1906）］和幼發拉底鱉［Rafetus euphraticus（Daudin，1801）］作為外群［6］。將以上Cyt b 序列導入MEGA X軟件［19］中，使用ClustalW 對獲得的序列進行比對，并人工矯正比對結果。使用未校正距離模型（uncorrected genetic distance，P-distance）計算鱉屬物種間遺傳距離，并在IQTREE1. 6. 12［20］中使用最大似然法（maximum likelihood，ML）構建系統發育樹。新獲得的序列上傳至GenBank 數據庫（GenBank 登錄號：PP682562、PP682563）。

2 結果

2. 1 形態特征及描述

采集到的2號鱉屬標本均為成年雄性，標本的形態學量度見表2。其中，標本LFR2024013體全長193 mm，背甲長76. 8 mm，背甲寬72. 3 mm，腹甲長74. 2 mm，頭長44. 1 mm，頭寬29. 4 mm，眼徑2. 5 mm，眼間距3. 3 mm，吻突長4. 7 mm，尾長31. 1 mm。背甲橢圓形，長略大于寬；背甲中央有隆起脊骨，形成中央突起，向兩側傾斜；體背革質較薄，可印出背甲骨板；體背皮膚較光滑，背部中央無明顯疣狀突起，僅裙邊和肩部有少量顆粒疣狀突起；內腹甲呈“⌒”形，寬22. 6 mm，高9. 7 mm，夾角 gt; 90°；吻長，呈管狀，兩個鼻孔著生于吻的前端；四肢強健，每肢具五指（趾），僅前三指（趾）具爪，蹼膜發達；尾粗長，可伸出裙邊。

生活時，砂鱉頭背、側面以橄欖棕色為主，頭背前端散布少量黑褐色小斑點；眼周具不規則、斷續的黑褐色斑點和線紋，略呈放射狀排布；唇橄欖綠色，散布黑褐色、乳白色小斑點；頭腹灰棕色，前端顏色較深，向后逐漸變淺；頸側無白色斑紋；體背橄欖棕色，中央具稀疏的黑褐色網狀花紋，體背外側及裙邊具對稱的不規則黑褐色斑；體腹面乳白色，腹中央具1枚黑褐色斑；四肢背面橄欖棕色，四肢腹面淺灰色，前肢腋下具一枚深色斑（圖2，圖3）。

2. 2 分子系統發育分析和遺傳距離

對2號樣本的Cyt b 基因進行擴增和測序，有效序列長度為781 bp。最大似然系統發育樹結果顯示，鱉屬所有的物種聚在一支，呈單系（圖4）。采自貴州銅仁的2號樣本與湖南、廣東和廣西的砂鱉種群以高支持率聚為一支（SH 100/UFB 100），再與黃山馬蹄鱉（Pelodiscus huangshanensis Gong，Peng，Huang，Lin，Huang，Xu，Yang amp; Nie，2021）和石片鱉（P. shipian Gong，Fritz，Vamberger，Gao amp; Farkas，2022）以較高支持度構成姊妹群（SH 73/UFB 81）。

基于線粒體基因Cyt b 序列比對與遺傳距離分析顯示，貴州銅仁的2號樣本與湖南的砂鱉遺傳距離為1. 1%，與廣西的遺傳距離為2. 3%，與廣東的遺傳距離為2. 1% ～ 2. 5%，低于鱉屬種間的遺傳距離。上述分子系統學分析結果支持本研究所采集的2號鱉屬標本為砂鱉。

3 生境描述

銅仁市碧江區位于貴州省東北部，地處云貴高原東部邊緣，武陵山脈腹地，向湖南湘西低山丘陵過渡的斜坡地帶，與湘、渝相鄰，屬中亞熱帶季風濕潤氣候，境內山峰林立，支流縱橫，森林覆蓋率達68. 21%，年均濕度較高。本次所采集的砂鱉標本于2024年3月被發現于碧江區宋家壩村附近的淺河灣中，該河屬沅江流域，系洞庭湖水系的一大支流。海拔約260 m，多彎曲，河床多由砂石、淤泥沉積而成，較為穩定，深潭與淺灘具存，符合砂鱉生存和繁衍需求。

4 討論

砂鱉是周工健等［3］在湖南龜鱉野生資源調查中采集到的鱉屬新種，其形態結構、生活習性、繁殖習性及分布區域與中華鱉明顯不同，按其發現地主要俗稱（砂鱉，鐵殼，灰殼）定名為砂鱉。2022年，Gonget al. ［10］將江西和湖南的部分砂鱉種群描述為一個新種：石片鱉，并對砂鱉重新研究，研究指定了砂鱉的新模，對其形態進行了詳細描述，并總結了砂鱉的幾種常見色斑類型。本次新采集到的砂鱉標本總體形態與Gong et al. ［10］研究中的砂鱉形態基本相符，但仍有區別：（1）體背黑褐色斑紋較稀疏，僅體背邊緣處具數枚對稱分布的黑褐色斑塊（vs. 體背密布深灰色至黑褐色斑紋，呈蝶狀或網狀）；（2）體腹面乳白色，僅前肢腋下和腹部中央具黑色或深灰色斑（vs.腹甲及四肢腹面散布深灰色斑塊）；（3）尾腹面兩側無黑斑（vs. 尾腹面兩側具黑斑）。這些形態上的變化可能是部分個體色型的改變，或是物種地理種群變異的結果。

砂鱉對棲息環境要求較高，僅分布于水質清澈、水質優異的砂礫石底質的江河上游和溪流中。造成砂鱉資源減少主要有3方面原因［1，10］：一是棲息環境被破壞，環境污染、開墾灘涂、修建護岸堤壩和開采河砂礫石，使砂鱉賴以生存繁衍的資源被消耗殆盡；二是砂鱉生長緩慢、繁殖率低，砂鱉3 ～ 4齡達到性成熟，單次產卵量僅4 ～ 8枚［3，21］；三是人為捕捉的影響，通過走訪銅仁地區水產市場及當地居民發現，當地砂鱉與中華鱉有同域分布的現象，但當地居民早已認識到砂鱉和中華鱉的區別，在捕捉到鱉類后，會將砂鱉挑出單獨售賣。由于砂鱉生長緩慢、種群恢復能力弱，因此亟須開展生物學和人工馴養繁殖技術研究，為保護和恢復物種資源提供技術支撐。

洞庭湖水系位于長江中游右岸，包括湘江、資水、沅江和澧水4條大河及汨羅江、新墻河等許多中小河流。洞庭湖水系及湖區包括湖南省的絕大部分及貴州、湖北、廣西、重慶、江西和廣東的一小部分［22］。砂鱉已知分布在湖南、廣東和廣西等地（圖1），主要沿湘江和沅江流域分布。沅江流域多為山區，湘江多丘陵，支流密布。本研究新增紀錄點為貴州省銅仁市碧江區的淺河灣，該河屬于沅江流域，屬于洞庭湖水系，與砂鱉的已知主要分布區為同一水系。此次新紀錄點的發現，擴大了砂鱉已知的分布范圍，對其地理分布、基礎生物學和遺傳多樣性研究具有重要意義，未來應加強對該物種的檢測與研究。