鹽酸特比萘芬乳膏質量評價

摘要：目的 對鹽酸特比萘芬乳膏的質量現狀進行綜合評價。方法 采用法定檢驗方法結合探索性研究對不同國產鹽酸特比萘芬乳膏樣品進行檢驗。通過對pH值、延展性、有關物質、抑菌劑含量、抑菌效力、刺激性研究和體外釋放等項目的考察，與原研企業產品比對分析國產制劑的質量狀況。結果 134批次樣品按法定標準檢驗均符合規定。在雜質譜分析中對樣品中各雜質的來源與結構進行了確證；通過pH值和延展性測定揭示，部分企業產品與原研產品相差較大；刺激性試驗與體外釋放試驗也表明多數企業產品與原研產品存在差異；利用相容性試驗揭示，制劑中的硬脂酸、吐溫80、吐溫60等輔料可加速制劑中雜質的產生；溫度影響乳膏質量；部分產品可能存在處方不合理導致抑菌劑過度添加問題。結論 鹽酸特比萘芬乳膏質量仍需提升，現行質量標準需進一步完善。

關鍵詞：鹽酸特比萘芬乳膏；質量分析；有關物質；穩定性

中圖分類號：R917 文獻標志碼：A

Quality evaluation of terbinafine hydrochloride cream

Li Yilan1， Fu Xiaoli1， Wu Yaning1， Wu Meifang2， Chen Ermei2， Hong Shuhua2， Zheng Zhihua1，

Yu Wenxia1， and Zhou Xiaoxi1

（1 Shanxi Inspection and Testing Center， Taiyuan 030031; 2 Guangdong Huaren Shunfeng Pharmaceutical Co.， Ltd， Foshan 528300）

Abstract Objective To comprehensively evaluate the quality status of terbinafine hydrochloride cream. Methods The quality of domestic terbinafine hydrochloride creams from different manufacturers was evaluated by using the statutory testing method combined with exploratory research. By determination of the pH value， ductility， related substances， preservative content， antimicrobial efficacy， irritation study， and in vitro release， the quality of domestic preparations was compared with that of the original product. Results All the 134 batches of samples tested complied with the regulations according to the legal specifications. The sources and structures of impurities in the samples were confirmed in impurity profiling; pH value and ductility measurements revealed that some domestic products differed significantly from the original product， and the irritation tests and the in vitro release rate tests also showed their differences. The compatibility tests revealed that excipients， such as stearic acid， Tween 80， and Tween 60， could accelerate the generation of impurities in the formulation. The temperature affected the quality of the cream too. In addition， some products might have problems with excessive preservative addition due to unreasonable prescriptions. Conclusion The quality of domestic terbinafine hydrochloride cream needs to be improved， and the current quality specifications need to be further refined.

Key words Terbinafine hydrochloride cream; Quality evaluation; Related substances; Stability

鹽酸特比萘芬（terbinafine hydrochloride）屬于丙烯胺類抗真菌藥物[1-2]，1981年由瑞士山德士藥廠開發，1991年鹽酸特比萘芬乳膏（商品名蘭美抒，原名療霉舒）在英、法、瑞、德等國相繼上市，1993年在中國上市。鹽酸特比萘芬乳膏為皮膚外用制劑，用于治療手癬、足癬、體癬、股癬、花斑癬及皮膚念珠菌病等，常見不良反應為皮膚脫屑和瘙癢[1-4]。

鹽酸特比萘芬乳膏為2023年國家藥品抽檢品種。本文在按法定標準進行檢驗的基礎上，結合探索性研究結果，從安全性、有效性及質量可控性角度對國產制劑的質量現狀進行綜合評價，為進一步提高產品質量與完善現行質量標準提供依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Ultimate 3000高效液相色譜儀（美國ThermoFisher Scientific公司）；LC-20AT高效液相色譜儀（日本Shimadzu公司）；Agilent1260高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；AL- 204電子天平（瑞士Mettler Toledo公司）；CPA225D電子天平（德國Sartorius公司）；U3000/QE液質聯用儀（美國ThermoFisher Scientific公司），FE20酸度計（瑞士Mettler Toledo公司）、918-12干加熱自動透皮測試系統（美國Logan公司）等。

1.2 試藥

對照品：鹽酸特比萘芬（批號100563-202103，含量：99.8%）購自中國食品藥品檢定研究院；鹽酸特比萘芬系統適用性對照品（批號3.0）為EP對照品；鹽酸特比萘芬雜質A（批號22-TER-09-64，含量：99.91%），鹽酸特比萘芬雜質B（批號23-TER-35-71，含量：100.00%），鹽酸特比萘芬雜質C（批號23-TER-15-80，含量：99.17%），鹽酸特比萘芬雜質D（批號23-TER-87-61，含量：99.37%），鹽酸特比萘芬雜質E（批號23-TER-49-02，含量：97.67%），鹽酸特比萘芬雜質F（批號22-TER-54-68，含量：98.51）%，雜質206-89（批號23-TER-02-84，含量：99.64%）均購自Pharmaceutical chemistry laboratory Co.，Ltd。苯甲醇（批號190019-202205，含量：99.7%），羥苯乙酯（批號100847-202105，含量：100%），苯氧乙醇（批號190242-202001，含量：99.1%），苯扎溴銨（批號135051-202002，含量：10.2 mg/mL）均購自中國食品藥品檢定研究院。水為超純水，甲醇、乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

試驗菌種：金黃色葡萄球菌[CMCC（B）26003]，銅綠假單胞菌[CMCC（B）10104]，白念珠菌[CMCC（F）98001]，黑曲霉[CMCC（F）98003]，均購自中國食品藥品檢定研究院。

1.3 樣品

134批鹽酸特比萘芬乳膏包括兩批原研企業GSK Consumer Healthcare SARL樣品（規格：1%）為2023年國家藥品抽檢樣品，其中生產企業抽樣46批，經營機構抽樣86批，使用單位抽樣2批。樣品來自16家生產企業（分別以A～P表示），共涉及17個批準文號。

2 試驗方法

2.1 法定標準檢驗

法定標準檢驗涉及13個標準，包括《中國藥典》2020年版（ChP 2020）、10個國家藥品監督管理局藥品注冊標準及2個國家藥品監督管理局進口藥品注冊標準。134批次鹽酸特比萘芬乳膏分別按各自執行標準檢驗，主要檢驗項目包括裝量、有關物質、pH值、延展性和含量測定等。

2.2 探索性研究

鹽酸特比萘芬乳膏為多劑量外用乳膏，處方復雜，影響產品質量的因素較多。根據法定標準檢驗中發現的問題，結合文獻報道[5-9]以及品種特點、企業調研等情況， 通過與原研制劑的對比，開展以下研究。

2.2.1 pH值

參照原研企業標準中的pH值測定方法[6]：測定各制劑的pH值。

2.2.2 延展性

按原研企業標準中的延展性測定方法[6]操作：溫度：20～25 ℃。將含內徑（直徑為15 mm，孔厚度為3 mm）的模具置樹脂玻璃板上，小心將樣品填充至圓孔中，避免產生氣泡，用刮刀將模具外多余的部分刮去，小心移走模具，將一玻璃板（8.5 cm×8.5 cm， 2 mm）小心置于樣品中心之上，并將200 g的砝碼置于玻璃板上中心位置，準確計時3 min，移去砝碼，測量樣品延伸的范圍，即最大直徑（dmax）與最小直徑（dmin），按下述公式計算。

2.2.3 雜質譜分析

（1）新HPLC有關物質分析方法：采用Agilent ZORBAX SB-C18（5 μm，4.6 mm×250 mm）色譜柱；流動相A為三乙胺緩沖液（取0.2%三乙胺溶液，用冰醋酸調節pH值至7.5）-甲醇-乙腈（40：36：24）；流動相B為三乙胺緩沖液（取0.2%三乙胺溶液，用冰醋酸調節pH值至7.5）-甲醇-乙腈（5：57：38）；梯度洗脫，洗脫程序見表1；流速為1.1 mL/min；檢測波長為280 nm；進樣體積為20 μL。

（2）通過酸、堿、光、熱和氧化強制降解試驗，結合鹽酸特比萘芬原料的合成路線、降解途徑以及鹽酸特比萘芬乳膏的生產工藝分析其雜質譜；比對乳膏、原料及強制降解試驗的HPLC圖譜，分析雜質來源；采用LC-MS及雜質對照品對乳膏中的較大雜質進行結構確證。

2.2.4 刺激性比較

采用雞胚絨毛尿囊膜血管試驗[10]。選用SPF級受精雞胚，孵化至9～10 d齡，建立雞胚絨毛尿囊膜（CAM）模型，觀察暴露于試樣前后尿囊膜血管的變化（鬼影、充血、出血、凝血），根據評價標準（表2和圖1），對給藥前后CAM的變化情況進行評分 。比較不同企業的9批樣品與F企業（原研）樣品的差異。

2.2.5 體外釋放試驗

選取不同企業的代表性產品與F企業（原研）產品，采用Franz擴散池法 [11-13]，比較不同樣品體外釋放特性的差異。試驗條件：實驗用膜為尼龍6膜（0.45 μm）；接收池擴散面積為2.2 cm2，擴散池體積為12 mL；接收液體為0.1%磷酸溶液（pH值約2.1），接收液溫度32 ℃，600 r/min。分別在0.5、1、2、3和4 h時將接收池中的接收液全部取出，并補充相同溫度的接收液。采用HPLC法測定接收液中鹽酸特比萘芬含量；計算不同取樣時間單位面積釋放的藥物量。體外釋放率：用單位面積釋放的藥物量—對應時間平方根繪圖，所得直線的斜率（回歸）代表制劑的釋放率。計算受試制劑批次體外釋放率的中位數與參比制劑體外釋放率的中位比值的90%置信區間，比較不同生產企業鹽酸特比萘芬乳膏與原研制劑釋放特性的差異。

2.2.6 穩定性

選取不同企業產品各1批，在40 ℃條件下放置10、20和30 d，以pH值、延展性和有關物質為指標比較不同樣品的穩定性。

2.2.7 原料藥與輔料的相容性試驗

根據制劑有關物質的變化趨勢及乳膏處方，選擇硬脂酸、吐溫80、吐溫60、司盤60與原料藥進行配伍實驗。稱取原料藥25 mg，參照處方按輔料：原料藥（8：1）的比例分別加入上述輔料，在100 ℃水浴加熱2 h，測定有關物質的變化。

2.2.8 抑菌劑含量及抑菌效力測定

（1）建立HPLC法同時測定苯甲醇、羥苯乙酯、苯氧乙醇、苯扎溴銨的含量。采用Waters SPHERISORSB ODS2 C18色譜柱（5 μm，4.6 mm×250 mm）；流動相A為三乙胺緩沖液（0.2 mol/L三乙胺溶液，用磷酸調節pH值為3.0），流動相B為甲醇，梯度洗脫，見表3，流速為1.0 mL/min，檢定波長：254 nm，210 nm（苯扎溴銨）。進樣體積20 μL。選取不同生產企業的43批樣品測定抑菌劑含量。

（2）參考ChP 2020四部通則1121抑菌效力檢查法，以金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、白念珠菌、黑曲霉作為試驗菌種，分別設置2、7、14和28 d 4個時間點進行試驗，選取不同生產企業的12批樣品進行抑菌效力測定。

3 結果與討論

3.1 法定檢驗結果及發現問題

134批次鹽酸特比萘芬乳膏樣品按法定標準檢驗均符合規定。但不同企業的產品執行不同的標準，不同標準中的檢驗項目及限度均不統一，使得無法對產品質量進行直接比較。且發現部分標準存在檢驗項目設置不全、檢驗方法不合理等問題。

對各標準進行比對分析，鹽酸特比萘芬乳膏ChP 2020標準收載的檢查項僅有裝量、有關物質和微生物限度，原研藥品質量標準及部分國家藥品監督管理局藥品注冊標準增加了pH值、延展性及抑菌劑檢查；此外，ChP 2020標準規定有關物質測定時忽略2 min前的色譜峰，但檢驗過程中發現主峰的保留時間及2 min前色譜峰受儀器的影響較大[7]，不能有效區分雜質和輔料，且ChP 2020標準未對特定雜質進行控制。

3.2 探索性研究結果

3.2.1 pH值

134批次樣品的pH值分布在2.57～6.62之間，F企業（原研）樣品的pH值為4.15～4.95。參考原研企業標準（pH值為4.0～6.0）[6]，國產制劑有63批次（47%）達不到原研標準的規定。部分生產企業樣品的pH值與F企業（原研）樣品存在較大差異（圖2）。

3.2.2 延展性

原研標準中鹽酸特比奈芬乳膏延展性的限度為1800～4200 mm2[6]，134批次國產制劑的延展性結果分布在752.0～3628.8 mm2之間，其中90批次樣品（57.2%）的延展性低于1800 mm2，部分企業樣品的延展性與F企業（原研）樣品存在較大差異（圖3）。

3.2.3 雜質譜分析

采用新建立的HPLC分析方法對134批次樣品及5批不同來源原料藥的有關物質進行測定，鹽酸特比萘芬中各已知雜質、輔料均可以得到良好分離（圖4a）。鹽酸特比萘芬乳膏中共檢出7個雜質，其中雜質1為雜質A，雜質2為雜質206-89（圖4b）。雜質1含量在0～0.244%之間；雜質2在0～0.752%之間，其他單個雜質在0.005%～0.298%之間，總雜質的量在0.017%～1.300%之間。鹽酸特比萘芬原料藥中未檢測到雜質。

進一步對雜質來源進行分析。原料藥的強制降解試驗顯示（圖5a），酸、堿、熱條件下原料藥未觀測到降解；光照條件下原料藥能檢測到雜質1、雜質6和雜質7；氧化條件下雜質1、雜質2、雜質3會大幅增長。在酸、堿、熱、光及氧化條件下乳膏中的輔料可加速雜質的生成（圖5b）。

對諸雜質的結構進行確證（表4）。通過與鹽酸特比萘芬雜質對照品的比對，雜質1為N-甲基-1-萘甲胺（BP雜質A），雜質2為6，6-二甲基-2-庚烯-4-炔醛（雜質206-89，為原研企業命名），通過LC-MS推斷雜質3為鹽酸特比萘芬氧化生成的N氧化物雜質。

3.2.4 刺激性比較

利用雞胚絨毛尿囊膜（CAM）模型比較不同產品刺激性的差異。根據評估標準評分，不同企業產品的平均分值為5.7～9.2。H企業與F企業（原研）產品所用的輔料一致，B企業與F企業產品所用的輔料相似，F企業、H企業、B企業樣品表現出的刺激性反應相似，為應激性刺激；其余企業產品所用的輔料與F企業的產品差異較大，樣品表現出的刺激性反應也不同，為輕微刺激（表5）。

3.2.5 體外釋放試驗（IVRT）

根據《新注冊分類皮膚外用仿制藥的技術評價要求》的規定，受試制劑的中位體外釋放率與參比制劑的中位體外釋放率比值的90%置信區間應在75%～133.33%范圍內。K企業、B企業、H企業樣品與參比制劑的中位釋放速率比值的90%置信區間在此范圍內，認為他們的釋放速率一致；其余企業樣品的釋放速率與原研樣品不一致（表6）。

3.2.6 穩定性

不同企業樣品在40 ℃條件下分別放置10、20和30 d，其pH值、延展性無明顯變化。但隨著放置時間延長，樣品中的雜質A、雜質206-89和總雜質含量均增加，部分企業尤其是J企業和M企業的樣品，雜質增長率明顯高于F企業（原研）樣品（圖6），表明溫度對樣品質量有一定影響。

3.2.7 原料藥與輔料的相容性試驗

相容性試驗表明，制劑中的硬脂酸、吐溫80、吐溫60能加速雜質A、雜質206-89、雜質3的產生，司盤60對原料藥無影響（圖7）。J企業和M企業產品的處方中均含有硬脂酸，但M企業的產品雜質高于J企業，可能與M企業在生產過程中原料藥與硬脂酸的接觸溫度更高，接觸時間更長有關。即工藝的合理性亦是避免工藝雜質產生的關鍵因素。

3.2.8 抑菌劑含量及抑菌效力

對16家企業43批次樣品中抑菌劑含量的測定結果顯示，F企業（原研）等8家企業的產品中添加有苯甲醇，添加量在8.13～10.44 mg/g；E企業等5家企業的產品中添加有羥苯乙酯，添加量在0.29～1.52 mg/g；C企業的產品中添加有苯甲醇及羥苯乙酯，添加量分別為9.74和1.03 mg/g；O企業的產品中添加有苯氧乙醇，添加量為8.17 mg/g；N企業的產品中添加有苯扎溴銨，添加量為0.77 mg/mL，各企業抑菌劑添加種類與添加量與處方基本一致。

進一步評估不同企業產品的抑菌效力。結果顯示，使用苯甲醇、苯氧乙醇作為抑菌劑對金黃色葡萄球菌的抑菌效果低于其他兩種，使用羥苯乙酯作為抑菌劑對黑曲霉的抑菌效果低于其他3種，不同種類的抑菌劑對銅綠假單胞菌、白念珠菌的抑菌效果均可以達到最佳。

F（原研）、B、G和H企業的產品均采用苯甲醇為抑菌劑，苯甲醇的添加量也基本相同，但B企業產品的抑菌效果優于原研產品，G和H企業產品的抑菌效果低于原研產品，提示應考慮原輔料、抑菌劑的添加工藝流程等多方面因素對產品抑菌效力的影響。

I、J、K、P和E企業的產品均采用羥苯乙酯為抑菌劑，I、J、K和P企業的產品對黑曲霉的抑菌效果均可達到“A級”， E企業的產品可達到“B”級。抑菌劑濃度較高的I、K和E企業產品的抑菌效果低于濃度較低的J和P企業的產品，提示I、K和E企業通過處方、工藝的優化，降低了產品處方中羥苯乙酯的添加量。

4 小結

本次抽檢結果顯示，鹽酸特比萘芬乳膏產品合格率100%，但結合探索性研究結果提示國產制劑的質量尚需提升。

處方工藝是影響藥物質量的重要因素。國產制劑與原研產品的處方越接近，其產品在pH值、延展性、刺激性試驗、體外釋放試驗及有關物質等方面與原研產品的差異越小。原輔料相容性試驗表明，國產制劑部分輔料與原料藥存在相容性問題，會加速雜質的生成。

抑菌劑含量及抑菌效力檢測結果提示，除應關注抑菌劑的種類選擇及抑菌劑是否存在過度添加的風險外，還應關注制劑處方、工藝對產品抑菌效力的影響。

溫度對制劑質量有一定影響，部分國產制劑的說明書中未規定貯藏溫度，可能導致貯藏不當，影響藥品質量。建議貯藏條件規定為“避光密封置20 ℃以下貯藏，不得冷凍”。

鹽酸特比萘芬乳膏現行標準較多，檢驗項目及限度均不統一；部分標準存在檢驗項目設置不全、檢驗方法不合理等問題。建議開展標準提高工作，增訂pH值、延展性檢查項，修訂有關物質檢查項。

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收稿日期：2024-12-06

作者簡介：李一蘭，女，生于1984年，主管藥師，碩士，主要從事抗感染抗腫瘤及生化藥品的檢驗檢測及質量評價工作，E-mail： 18603458435@163.com

*通信作者，E-mail： zhouxiaoxi1134@126.com

第一作者：李一蘭，女，生于1984年，主管藥師。畢業于溫州醫學院藥理學專業，碩士，主要從事抗感染抗腫瘤及生化藥品的檢驗檢測及質量評價工作。多次參與或承擔國家藥品抽檢工作，參與并完成國家藥品標準的制修訂及復核工作。

通信作者：周曉溪，碩士，主任藥師，現任山西省檢驗檢測中心藥品檢驗技術研究所抗生素室主任，長期從事抗生素藥品檢驗及質量研究工作，多次主持完成國家藥品抽檢工作、國家藥品標準的制修訂及復核工作，在國家級核心期刊發表論文20余篇，獲省科技進步二等獎1項。