肉豆蔻揮發(fā)油納米粒制備工藝研究

【中圖分類號(hào)】R284.2 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【文章編號(hào)】1007－8517（2025）12-0054-08

DOI： 10.3969/j .issn.1007-8517.2025. 12. zgmzmjyyzz202512013

Abstract：ObjectiveThe preparationtechnologyof volatileoilchitosannanoparticlesof nutmeg wasoptimized.Methods Using ioncroslinkingndhighpresurehomogenzationtechique，thepaticlesiz，Zetapotential，polydispersionidex（PD）adeapsulationrateofthenanoparticleswereevaluated，andtheoptimumpreparationtechnologyofvolatileoilofnutmeg wasdeterinedby singlefactorexperimentandBox-Behnkenresponsesufaceanalysis.ResultsTheconcentrationofchitosansolution，sodiumtripolyphosphate（TPP）solutionandhomogeeouspresurehad greatinfluenceonthepreparationof nanoparticles.TheoptimalpreparationprocessandprescriptiondeterminedbyBox-Behnkenresponsesurfaceanalysiswereasfolows：chitosanconcentration 2.6mg/mL ，TPP solution concentration2.2mg/mL，homogenization pressure640 bar;The prepared nanoparticleshave average particle size （123.6±3.9 ）nm， Zeta potential （27.8±2 ） mV，and encapsulation rate （ 84±3.1 ） % . Conclusion The optimized recipe andprocessofmacevolatileoilnanoparticlesarestableandhavegoodrepeatability，whichcanprovidabasisforfurtherstudyofmace volatile oil nanoparticles.

yWords：Volatileoilof Nutmeg;Chitosan；Nanoparticles；Inflammatory Bowel Disease；Box-BehnkenResponse Su

肉豆蔻揮發(fā)油是肉豆蔻的主要活性成分，含量約為 8%～15%^[1] ，具有鎮(zhèn)痛、抗炎、止瀉、保護(hù)腸黏膜等多種藥理作用[2-3]。有文獻(xiàn)報(bào)道[4]肉豆蔻揮發(fā)油可以用于炎癥性腸病的治療，但其穩(wěn)定性較差，遇光、熱時(shí)易氧化分解并揮發(fā)，且脂溶性強(qiáng)、生物利用度較低，在一定程度上降低了其治療炎癥性腸病的藥理作用。因此，為提高肉豆蔻揮發(fā)油用于治療炎癥性腸病的生物利用度及穩(wěn)定性，本研究擬將其制成口服納米粒，并結(jié)合“藥輔合一”理念設(shè)計(jì)藥物輸送系統(tǒng)，采用具有潰瘍性結(jié)腸炎（UC）治療作用的殼聚糖[5]，作為負(fù)載揮發(fā)油納米粒的載體材料制備肉豆蔻揮發(fā)油納米粒。本研究主要采用離子交聯(lián)聯(lián)合高壓均質(zhì)技術(shù)制備肉豆蔻揮發(fā)油納米粒，并以納米粒的粒徑、

Zeta電位、PDI為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過單因素實(shí)驗(yàn)及Box-Behnken響應(yīng)面分析法確定肉豆蔻揮發(fā)油納米粒的最佳制備工藝及處方，為其胃腸道給藥治療炎癥性腸病的深人研究提供科學(xué)依據(jù)。

1儀器與材料

1.1儀器AH-NANO高壓均質(zhì)機(jī)［安拓思納米技術(shù)（蘇州）有限公司]，MMS4Pro磁力攪拌器（上海方瑞儀器有限公司），Litesizer500型納米粒度及Zeta電位分析儀（奧地利安東帕公司），UV-3010紫外分光光度計(jì)（日本日立公司），揮發(fā)油提取器（規(guī)格： 1000mL/5mL ，玻璃活塞，上海玻璃儀器廠），DZTW調(diào)溫電熱套（上海力辰邦西儀器科技有限公司）。

1.2材料肉豆蔻藥材（市售）經(jīng)鑒定符合藥典法定標(biāo)準(zhǔn)，殼聚糖（批號(hào)：S-11064，上海源葉生物科技有限公司），三聚磷酸鈉（TPP，批號(hào)：S-5751，solarbio公司），聚山梨酯80（批號(hào)：20120620，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），二氯甲烷（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司），乙酸（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）。

2方法

2.1水蒸氣蒸餾法提取肉豆蔻揮發(fā)油按肉豆蔻揮發(fā)油最佳制備工藝[6]，取過二號(hào)篩的肉豆蔻粉末約 50g ，精密稱定，置于 1000mL 圓底燒瓶中，加入 600mL 水后鏈接揮發(fā)油提取器與冷凝回流管，浸泡 ¹h 后用電熱套進(jìn)行加熱，保持微沸，提取5h，收集肉豆蔻揮發(fā)油。

2.2殼聚糖負(fù)載肉豆蔻揮發(fā)油納米粒的制備方法取適量殼聚糖粉末溶解在 40mL 的乙酸溶液（ 1% ，V/V）中，磁力攪拌 30min ，加入殼聚糖溶液 2.5% 的聚山梨酯80，磁力攪拌 ^2h 得到殼聚糖溶液。另將肉豆蔻揮發(fā)油溶于體積為殼聚糖溶液體積 20% 的二氯甲烷中，充分溶解后緩慢滴入攪拌狀態(tài)下的殼聚糖溶液，攪拌 ³h 至二氯甲烷全部揮發(fā)后獲得水包油乳液。將其置高壓均質(zhì)機(jī)中在一定壓力下循環(huán)一定次數(shù)后取出，加入體積為殼聚糖溶液體積 25% TPP溶液攪拌 30min 后，即得到負(fù)載肉豆蔻揮發(fā)油的殼聚糖納米粒溶液[

2.3 單因素實(shí)驗(yàn)

2.3.1單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)納米粒的粒徑對(duì)藥物的吸收與組織分布有重要影響，粒徑較小的納米粒更容易被細(xì)胞吸收并有利于運(yùn)輸[8]。Zeta 電位是對(duì)顆粒之間相互排斥或吸引力強(qiáng)度的度量。分子或分散粒子越小，Zeta電位的絕對(duì)值越高，體系越穩(wěn)定。PDI是反映粒徑分布寬度的無量綱數(shù)值，范圍為 0～1 之間，數(shù)值越小，代表粒度越越均勻。

粒徑、Zeta電位、PDI常常受到殼聚糖溶液濃度、TPP溶液濃度、攪拌速度、高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)過程的循環(huán)次數(shù)、均質(zhì)壓力等因素的影響9。為得到粒徑較小、分布均勻、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的納米粒，本研究以粒徑、Zeta電位、PDI為優(yōu)化指標(biāo)，通過單因素考察篩選出離子交聯(lián)法制備納米粒過程中對(duì)優(yōu)化指標(biāo)影響較大的因素后進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化。

2.3.2殼聚糖濃度考察按“2.1”步驟制備殼 聚糖負(fù)載肉豆蔻揮發(fā)油納米粒，固定加入TPP溶 液的濃度為 2mg/mL ，加入肉豆蔻揮發(fā)油的質(zhì)量為 200mg ，均質(zhì)壓力 600bar ，循環(huán)次數(shù)20次，攪拌 速度 500r/min 。考察不同濃度的殼聚糖溶液對(duì)制 備納米粒的影響。結(jié)果見表1。

表1殼聚糖溶液濃度對(duì)納米粒的影響結(jié)果表

由表1可知?dú)ぞ厶侨芤簼舛葘?duì)粒徑、Zeta電位、PDI均有影響，納米粒的粒徑在殼聚糖濃度為2mg/mL 時(shí)最小，隨后納米粒的粒徑。Zeta電位與PDI皆隨殼聚糖溶液濃度增大而變大，這與殼聚糖分子的氨基基團(tuán)有關(guān)[10]。當(dāng)殼聚糖濃度低于 2mg/ mL時(shí)由于溶液體系黏度不足會(huì)造成絮凝導(dǎo)致粒徑較大，綜合考慮殼聚糖溶液濃度在 2mg/mL 附近為優(yōu)。

2.3.3TPP溶液濃度考察按“2.1”步驟制備 殼聚糖負(fù)載肉豆蔻揮發(fā)油納米粒，固定殼聚糖溶 液濃度 2mg/mL ，加入肉豆蔻揮發(fā)油的質(zhì)量為200 mg，均質(zhì)壓力 600bar ，循環(huán)次數(shù)20次，攪拌速度 500r/min ，考察TPP溶液的濃度對(duì)制備納米粒的 影響。結(jié)果見表2。

由表2可知，TPP溶液濃度為 2.0mg/mL 時(shí)粒徑最小，且Zeta電位隨其增大而降低，電位過低會(huì)導(dǎo)致溶液體系不穩(wěn)定，故選擇 2.0mg/mL 的TPP溶液濃度進(jìn)行下一步優(yōu)化。

表2TPP溶液濃度對(duì)納米粒的影響結(jié)果表

2.3.4肉豆蔻揮發(fā)油加入量考察按“2.1”步 驟制備殼聚糖負(fù)載肉豆蔻揮發(fā)油納米粒，固定殼 聚糖濃度 2mg/mL ，加入TPP溶液濃度為 2mg/ mL，均質(zhì)壓力 600bar ，循環(huán)次數(shù)20次，攪拌速度 500r/min ，考察肉豆蔻揮發(fā)油加入量對(duì)制備殼納 米粒的影響。結(jié)果見表3。

表3肉豆蔻揮發(fā)油加入量對(duì)油納米粒的影響結(jié)果表

由表3可知，納米粒的粒徑隨肉豆蔻揮發(fā)油的加入量增加而增大，但對(duì)Zeta電位沒有影響。為保證納米粒具有一定的藥效，且粒徑較小，故選擇加入 200mg 的肉豆蔻揮發(fā)油進(jìn)行下一步優(yōu)化。2.3.5均質(zhì)壓力考察按“2.1”步驟制備殼聚糖負(fù)載肉豆蔻揮發(fā)油納米粒，固定殼聚糖濃度2mg/mL ，加入TPP溶液濃度為 2mg/mL ，加入肉豆蔻揮發(fā)油的質(zhì)量為 200mg ，循環(huán)次數(shù)20次，攪拌速度 500r/min ，考察高壓均質(zhì)機(jī)的壓力對(duì)制備納米粒的影響。結(jié)果見表4。

由表4可知，高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)過程中，粒徑先隨著壓力的增大而明顯減小，但當(dāng)壓力超過600bar后，粒徑會(huì)有所增大，可能是高壓均質(zhì)機(jī)壓力較大時(shí)會(huì)使其中的納米粒溶液溫度升高，破壞了納米粒體系的穩(wěn)定性。因此選擇 600bar 的均質(zhì)壓力進(jìn)行下一步優(yōu)化。

表4均質(zhì)壓力對(duì)納米粒的影響結(jié)果表

2.3.6循環(huán)次數(shù)考察按“2.1”步驟制備殼聚 糖負(fù)載肉豆蔻揮發(fā)油納米粒，固定殼聚糖溶液濃 度為 2mg/mL ，加入TPP溶液濃度為 2mg/mL ，加 入肉豆蔻揮發(fā)油 200mg ，均質(zhì)壓力 600bar ，攪拌 速度 500r/min ，考察高壓均質(zhì)中循環(huán)次數(shù)對(duì)制備 納米粒的影響。結(jié)果見表5。

表5循環(huán)次數(shù)對(duì)納米粒的影響結(jié)果表

由表5可知，粒徑、PDI隨著循環(huán)次數(shù)的增加逐漸減小，循環(huán)次數(shù)達(dá)到20次后，粒徑、PDI隨著循環(huán)次數(shù)的增加無規(guī)律性變化，考慮節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間，循環(huán)次數(shù)選取20次進(jìn)行優(yōu)化。2.3.7攪拌速度考察按“2.1”步驟制備殼聚糖負(fù)載肉豆蔻揮發(fā)油納米粒，固定殼聚糖溶液濃度 2mg/mL ，加入TPP溶液濃度為 2mg/mL ，加人肉豆蔻揮發(fā)油的質(zhì)量為 200mg ，均質(zhì)壓力 600bar ，循環(huán)次數(shù)20次，考察攪拌速度對(duì)制備納米粒的影響。結(jié)果見表6。

表6攪拌速度對(duì)納米粒的影響結(jié)果表

由表6可知，攪拌速度為 500r/min 時(shí)粒徑最小，此時(shí)溶液體系中的TPP與殼聚糖能夠充分接觸并交聯(lián)，并為了防止攪拌轉(zhuǎn)速過高導(dǎo)致液體飛濺，選攪拌速度 500r/min 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)優(yōu)化。

2.4Box-Behnken響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示殼聚糖溶液濃度、TPP溶液濃度、高壓均質(zhì)過程中的均質(zhì)壓力對(duì)納米粒制備影響較大，需要進(jìn)一步考察，因此以A（殼聚糖溶液濃度）、B（TPP溶液濃度）、C（均質(zhì)壓力）為自變量。納米制劑粒徑的大小可能會(huì)影響藥物的生物利用度，Zeta電位的大小是反應(yīng)納米粒溶液體系是否溫度的指標(biāo)，包封率是納米制劑的重要參考指標(biāo)之一。故以粒徑、Zeta電位、包封率為響應(yīng)值，利用De-sign-Expert13設(shè)計(jì)三因素三水平共17組的響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)。試驗(yàn)因素水平見表7。

表7響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素和水平編碼表

2.5殼聚糖負(fù)載肉豆蔻揮發(fā)油納米粒包封率的測(cè)定

2.5.1肉豆蔻揮發(fā)油標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備精密稱取 100mg 肉豆蔻揮發(fā)油于 100mL 量瓶中，加甲醇稀釋到刻度，隨后移取 1mL 置入 10mL 容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，得到 0.1mg/mL 的肉豆蔻揮發(fā)油標(biāo)準(zhǔn)貯備液。將不含肉豆蔻揮發(fā)油的殼聚糖納米粒用甲醇稀釋后進(jìn)行紫外掃描未發(fā)現(xiàn)有明顯吸收，說明殼聚糖等對(duì)肉豆蔻揮發(fā)油的吸光度值無影響。

2.5.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別精密移取肉豆蔻揮發(fā)油標(biāo)準(zhǔn)貯備液 0.6mL 、 0.8mL 、 1.0mL 、1.2mL 、 1.4mL 、 1.6mL 置于 10mL 量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，得到分別質(zhì)量濃度為6μg/mL 、 8μg/mL 、 10μg/mL 、 12μg/mL 、14μg/mL 、 16μg/mL 的一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別置于紫外分光光度計(jì)中以甲醇作為空白溶液，于205nm 處測(cè)定其吸光度A，以吸光度A對(duì)體積濃度C進(jìn)行線性回歸，可得肉豆蔻揮發(fā)油的回歸方程為：A=0.0928C-0.1831 （ n=6 ）相關(guān)系數(shù) R=0.9991。表明肉豆蔻揮發(fā)油濃度在 6～16μg/mL 濃度范圍內(nèi)與吸光度A呈良好的線性關(guān)系，故認(rèn)為用此回歸方程進(jìn)行工藝研究是可行的。

2.5.3包封率的測(cè)定方法精密量取肉豆蔻揮發(fā)油納米粒 1mL 置 25mL 量瓶中，加入適量甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻后移取 1mL 置人 10mL 量瓶中加甲醇稀釋，過 0.45μm 微孔濾膜，測(cè)定納米粒中總的藥物量（W1）。另精密量取納米粒溶液 1mL 于 5mL 離心管中，加入二氯甲烷 3mL 搖勻，振搖 3min ，靜置，待分層后，棄去二氯甲烷，同法再重復(fù)萃取1次，除去未包封游離的肉豆蔻揮發(fā)油。將下層納米粒溶液加入適量甲醇溶解，按上述同樣稀釋方法稀釋，搖勻，過 0.45μm 微孔濾膜，測(cè)定二氯甲烷萃取后包封的肉豆蔻揮發(fā)油量[1]（W2），計(jì)算包封率（EE）： EE%=W2/ W1×100% 。

2.6試驗(yàn)結(jié)果分析方法當(dāng)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)涉及多項(xiàng)指標(biāo)時(shí)，根據(jù)每個(gè)指標(biāo)所選取優(yōu)化條件會(huì)有所矛盾，因此引入歸一化綜合值，用Hassan[12]法對(duì)各個(gè)指標(biāo)進(jìn)行歸一化處理。對(duì)想要達(dá)到最小化的指標(biāo)如粒徑 （ ?d₁ ）其計(jì)算公式為（1）。

其中 Y_i 為實(shí)測(cè)值， Y_max 和 Y_min 是本試驗(yàn)組中指標(biāo)的最大值和最小值。對(duì)于想達(dá)到最大值的指標(biāo)如Zeta電位 （d₂） 、包封率 （d₃） 計(jì)算公式為（2）。

用1、2公式算出 d₁，d₂，d₃ 的值后， OD 值的運(yùn)算公式為： OD=（d₁d₂d₃）^1/n，n 為指標(biāo)數(shù)[13，計(jì)算出所得的綜合值越大則代表各項(xiàng)指標(biāo)最優(yōu)。

2.7響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果根據(jù)Design-Expert13設(shè)計(jì)出具體的實(shí)驗(yàn)方案，測(cè)定粒徑 （Y₁）/nm 、Zeta電位 （Y₂）/mV 、包封率/ % （ Y₃ ）、并根據(jù)公式計(jì)算出綜合得分值結(jié)果見表8。

2.7.1回歸方程的建立及方差分析用Design -Expert13軟件，對(duì)表8中的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行二次回歸分析，建立OD值的回歸模型，以O(shè)D值為因變量，得到編碼值的多元二次回歸方程為：

OD=0.73+0.2275A-0.0737B+0.1138C+ （204號(hào) ）.11AB-0.075AC+0.0725BC-0.2338A² 0.0762B²-0.0762C²

OD 值的二次回歸模型方差分析結(jié)果見表9。

表8響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果表

表9OD值的二次回歸模型的方差分析表

注：“**”為差異極顯著（ Plt;0.01 ）；“*”為差異顯著（ Plt;0.05 ）；“—”為差異不顯著。

由表9可知，回歸模型的 Plt;0.05 ，說明回歸擬合方程顯著性較高，失擬項(xiàng)的 P 值為0.2513（gt;0.05 ）說明失擬項(xiàng)不顯著，表明回歸模型與實(shí)驗(yàn)擬合度較高，可以很好地反映響應(yīng)值與各因素變量之間的關(guān)系，相關(guān)系 R²=0.9806 ，說明該模型響應(yīng)變量與因變量之間具有很高的相關(guān)性，校正決定系數(shù) R_adj²=0.9191 ，說明 91.91% 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的變異性可以用該模型解釋。因此，該回歸模型可對(duì)納米殼聚糖的粒徑進(jìn)行理論分析和預(yù)測(cè)。

2.7.2綜合值的響應(yīng)面分析與最佳制備工藝預(yù)測(cè)利用DesignExpert13軟件繪制綜合值與殼聚糖濃度（A），TPP溶液濃度 （B） ，均質(zhì)壓力（C）3個(gè)自變量的二維等高圖和三維響應(yīng)面。

圖1殼聚糖溶液濃度與TPP溶液濃度交互作用對(duì) oD 值影響的響應(yīng)曲面圖和二維等高圖

圖2殼聚糖溶液濃度與均質(zhì)壓力交互作用對(duì) ξ_OD 值影響的響應(yīng)曲面圖和二維等高圖

圖3TPP溶液濃度與均質(zhì)壓力交互作用對(duì) oD 值影響的響應(yīng)曲面圖和二維等高圖

由圖1、圖2和圖3可以看出響應(yīng)面為曲面且開口向下，響應(yīng)值存在最大值，并且殼聚糖濃度、TPP溶液濃度、均質(zhì)壓力三者與綜合值為非線性關(guān)系。固定其他變量，沿A軸方向響應(yīng)面比較陡峭，且從等高線圖可以看出沿A軸的等高線比較密集，說明殼聚糖溶液濃度對(duì)綜合值的影響最大，綜合值隨著殼聚糖溶液濃度的增加顯著增大后又逐漸降低。

以綜合值最大值為考察指標(biāo)利用Design-Ex-pert13軟件對(duì)肉豆蔻揮發(fā)油納米粒最佳制備工藝進(jìn)行預(yù)測(cè)，得出的條件為：殼聚糖濃度為2.55mg/mL 、TPP溶液濃度為 2.16mg/mL 、均質(zhì)壓力為 642.68bar 。在此條件下制備的納米粒各項(xiàng)指標(biāo)預(yù)測(cè)值為粒徑： 124.19nm ；Zeta： 26.28mV ；包封率： 85.27% ； oD ：0.80。

2.8最佳制備工藝驗(yàn)證按照優(yōu)化處方的條件并為了實(shí)驗(yàn)方便，選擇實(shí)驗(yàn)條件：殼聚糖濃度為2.6mg/mL 、TPP溶液濃度為 2.2mg/mL 、均質(zhì)壓力640bar 。制備三批肉豆蔻揮發(fā)油納米粒測(cè)得其粒徑、Zeta電位、包封率平均值分別為：（ 123.6± 3.9） nm 、 27.8±2 ） mV 、 84±3.1）% ，實(shí)測(cè)值與模型理論預(yù)測(cè)值相近，預(yù)測(cè)模型方程具有較高的可靠性，可以為肉豆蔻揮發(fā)油納米粒的制備工藝提供可靠依據(jù)。

圖4肉豆蔻揮發(fā)油納米粒溶液外觀及粒徑分布圖

3討論

3.1納米粒用于UC治療的特點(diǎn)納米粒藥物在治療UC等炎癥性腸病的領(lǐng)域中具有諸多優(yōu)點(diǎn)，UC等炎癥性腸病的主要表現(xiàn)為腸黏膜破損、上皮完整性喪失、免疫細(xì)胞增多、細(xì)胞間間隙增大，使水和電解質(zhì)大量流失、滲透效應(yīng)和滯留效應(yīng)增強(qiáng)、造成復(fù)雜的腸內(nèi)環(huán)境[14]。這導(dǎo)致普通傳統(tǒng)類非靶向藥物如5-氨基水楊酸、糖皮質(zhì)激素等藥物并不能有效治愈UC等炎癥性腸病，并因具有一定的副作用限制了其應(yīng)用[15]。而由于滲透和滯留效應(yīng)的增強(qiáng)，大量納米粒子會(huì)吸附在腸道表皮上，在病灶處集中的發(fā)揮藥效，減少了副作用。免疫細(xì)胞的增加會(huì)使納米粒子被免疫細(xì)胞攝取的數(shù)量顯著增加，從而提高其調(diào)節(jié)腸道內(nèi)免疫環(huán)境的作用[16]。由于納米粒藥物獨(dú)特的物理特性和尺寸，其可以穿過粘液層將藥物直接運(yùn)輸?shù)侥c道細(xì)胞，避免和減少口服納米粒藥物運(yùn)輸過程中藥物的降解，提高藥效[17-18] O

3.2納米粒載體材料的選擇 為進(jìn)一步提高納米粒藥物治療UC的效果并結(jié)合“藥輔合一”理念，納米載體選擇了同樣具有治療UC效果的殼聚糖。殼聚糖是一種天然堿多糖，相關(guān)研究[19]表明其在胃腸管腔降解較少并具有滲透能力和粘附性，可增加納米粒載體吸附在腸道上的作用時(shí)間，提高藥物的生物利用度。將殼聚糖制成納米粒子后，因其獨(dú)特的尺寸，可保留其優(yōu)良性質(zhì)[10]，因此，本研究采用以殼聚糖為載體制備負(fù)載肉豆蔻揮發(fā)油的納米粒，期望為口服肉豆蔻揮發(fā)油納米粒用于治療炎癥性腸病提供可行的依據(jù)。

3.3殼聚糖納米粒制備方法本研究采用離子交聯(lián)法聯(lián)合高壓均質(zhì)技術(shù)制備負(fù)載肉豆蔻揮發(fā)油的殼聚糖納米粒。其中離子交聯(lián)法是制備殼聚糖納米粒的一種常用方法，該法用時(shí)短，操作簡(jiǎn)單，其原理為：溶解在稀酸溶液中的殼聚糖分子鏈上的氨基被質(zhì)子化為 NH₃⁺ 陽離子，向殼聚糖溶液中加入含有大量帶負(fù)電荷 PO^- 基團(tuán)的TPP 溶液，NH₃⁺ 與 PO^- 會(huì)自發(fā)結(jié)合形成納米粒。另外，高壓均質(zhì)機(jī)主要利用壓力將水包油乳液里的殼聚糖基團(tuán)分解成尺寸均勻的顆粒，殼聚糖分子鏈上的NH₃⁺ 與TPP溶液中的 PO^- 接觸更充分均勻，有利于形成粒徑更小的納米粒[20]。且高壓均質(zhì)機(jī)通過沖擊、空化、湍流或剪切等過程，使最終得到的肉豆蔻揮發(fā)油納米粒得粒徑尺寸更小更均勻，穩(wěn)定性也更強(qiáng)。

工藝驗(yàn)證中所制備的三批納米粒的各項(xiàng)指標(biāo)與預(yù)測(cè)值較為接近，說明實(shí)測(cè)值與模型理論預(yù)測(cè)值相近，預(yù)測(cè)模型方程具有較高的可靠性，能夠?yàn)槿舛罐]發(fā)油殼聚糖納米粒制備工藝及處方研究提供參考。在最佳工藝條件下制備的納米粒溶液久置未發(fā)生變色與沉淀現(xiàn)象，說明溶液穩(wěn)定性良好，期望后續(xù)制成適合口服的劑型，在治療炎癥性腸病的領(lǐng)域發(fā)揮作用。在離子交聯(lián)法制備負(fù)載肉豆蔻揮發(fā)油的殼聚糖納米粒實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室溫度等環(huán)境因素也對(duì)實(shí)驗(yàn)有一定影響，今后可以進(jìn)一步研究探討實(shí)驗(yàn)環(huán)境等因素對(duì)納米粒制備的影響，以期得到各項(xiàng)指標(biāo)更優(yōu)的納米粒。

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（收稿日期：2024-09-19編輯：陶希睿）