腺瘤性息肉病大腸桿菌基因APC在早期子宮內(nèi)膜癌變及治療中的作用

【摘要】 子宮內(nèi)膜癌（EC）是一種常見的婦科惡性腫瘤，預(yù)后相對(duì)較好，但其表觀遺傳致癌機(jī)制和治療方案的進(jìn)展仍有待探索。近年來(lái)越來(lái)越多的研究顯示，腺瘤性息肉病大腸桿菌（APC）基因可作為有前景的診斷和治療生物標(biāo)志物。APC是典型的染色質(zhì)重塑相關(guān)抑癌基因，其突變和功能異常已被報(bào)道與多種EC的發(fā)生與治療耐藥性有關(guān)。EC的發(fā)病機(jī)制可能涉及Wnt通路（生物體內(nèi)一種調(diào)節(jié)器官發(fā)生、胚胎發(fā)育、組織穩(wěn)態(tài)和腫瘤發(fā)生的細(xì)胞信號(hào)通路）異常、環(huán)境因素、遺傳異常、高雌激素水平、異常錯(cuò)配修復(fù)以及DNA和微RNA的異常表達(dá)，基于其致癌機(jī)制選擇相應(yīng)的治療策略可能有助于提高EC治療的效果，文章主要綜述了APC在早期EC癌變中的作用，并總結(jié)了其在EC治療中的意義，為相關(guān)研究提供新的視角。

【關(guān)鍵詞】 APC基因；子宮內(nèi)膜癌；Wnt通路；癌變機(jī)制

The role of adenomatous polyposis coli gene in carcinogenesis and treatment of early-stage

endometrial cancer

WU Qiang1， LI Wenle2

（1.The First Clinical School of Guangdong Medical University， Zhanjiang 524000， China； 2. Department of Obstetrics and Gynecology， Guangdong Medical University Affiliated Hospital， Zhanjiang 524000， China）

Corresponding author： LI Wenle， E-mail： safety11@foxmail.com

【Abstract】 Endometrial cancer （EC） is a common gynecological malignant tumor with relatively good prognosis. However， the progress in its epigenetic carcinogenic mechanisms and treatment regimens remains to be explored. In recent years， more and more studies have shown that the adenomatous polyposis coli （APC） gene can serve as a promising diagnostic and therapeutic biomarker. APC is a typical tumor-suppressor gene related to chromatin remodeling. Its mutations and functional abnormalities have been reported to be associated with the occurrence and therapeutic drug resistance of various types of EC. The carcinogenic mechanisms of EC may involve abnormalities in the Wnt pathway （a cell signaling pathway in organisms that regulates organogenesis， embryonic development， tissue homeostasis， and tumorigenesis）， environmental factors， genetic abnormalities， high estrogen levels， abnormal mismatch repair， and abnormal expression of DNA and microRNAs. Selecting corresponding treatment strategies based on its carcinogenic mechanisms may help improve the efficacy of EC treatment. In this article， the role of APC in the carcinogenesis of early-stage EC was mainly reviewed and its significance in EC treatment was summarized， providing novel perspective for relevant research.

【Key words】 APC gene； Endometrial cancer； Wnt pathway； Carcinogenic mechanism

子宮內(nèi)膜癌（endometrial cancer，EC）是女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性癌，近年來(lái)發(fā)病率已超過宮頸癌及卵巢癌，居女性三大婦科惡性腫瘤的首位。隨著生活水平的提高，肥胖患病率不斷增加，與肥胖相關(guān)的EC發(fā)病率也隨之上升［1］。其治療一直是婦科腫瘤學(xué)的重大挑戰(zhàn)，雖然大多數(shù)患者表現(xiàn)為分化良好的低級(jí)別早期病變，但意外復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的案例仍時(shí)有發(fā)生，研究者對(duì)于預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)以及治療敏感性的EC分子特征和相關(guān)基因改變的致癌機(jī)制仍知之甚少。因此，識(shí)別新的分子生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)勢(shì)在必行。EC分為子宮內(nèi)膜樣癌和非子宮內(nèi)膜樣癌，后者以漿液性癌為代表，已有研究顯示，p53突變發(fā)生在90%的病例中，并可能參與早期癌變［2-3］；相比之下，子宮內(nèi)膜樣癌異質(zhì)性更強(qiáng)，腺瘤性息肉病大腸桿菌（adenomatous polyposis coli，APC）/β-catenin信號(hào)通路被激活在特定情況下可以導(dǎo)致其發(fā)生，但還需要其他途徑參與，現(xiàn)仍缺乏足夠一致的分子改變來(lái)解釋大多數(shù)病例［4］。然而，一些遺傳缺陷和表觀遺傳變化已被發(fā)現(xiàn)在早期EC癌變中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，尤其是抑癌基因APC，作為Wnt信號(hào)通路的組成部分，其失活在EC的發(fā)生、發(fā)展和治療中具有顯著影響。本文介紹APC在EC的發(fā)生、發(fā)展和治療中的作用，旨在為EC靶向治療開發(fā)更有效的治療策略提供理論基礎(chǔ)。

1 APC與Wnt信號(hào)通路

1991年Groden等［5］首次報(bào)道APC基因與家族性腺瘤性息肉病相關(guān)，并確定了其位于染色體5q21，后續(xù)研究顯示APC基因可能是結(jié)直腸癌的驅(qū)動(dòng)突變基因［6］，其突變往往導(dǎo)致截短蛋白產(chǎn)生和剩余蛋白重要區(qū)域丟失，與各種惡性癌、神經(jīng)系統(tǒng)疾病以及智力障礙有關(guān)［2］。APC基因由跨越21個(gè)外顯子的8 535個(gè)堿基對(duì)組成，內(nèi)含5個(gè)啟動(dòng)子區(qū)域：1A和1B。啟動(dòng)子1A高甲基化存在于人體正常胃黏膜及多種惡性腫瘤中，啟動(dòng)子1B甲基化的研究報(bào)道較少［3， 7-8］。APC基因產(chǎn)物是一種相對(duì)分子量為312 kDa的多結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)，根據(jù)N端區(qū)域重復(fù)序列位置的不同，APC蛋白可以分為2種：APC和APC2［9］。前者在大多數(shù)胎兒組織和成人體上皮細(xì)胞中表達(dá)較多，參與Wnt信號(hào)通路等多種細(xì)胞生理過程，與包括β-catenin、Axin、C端結(jié)合蛋白（C-terminal binding protein，CtBP）、Asefs、含IQ

標(biāo)記的GTPase激活蛋白1（IQ-motif-containing GTPase activation protein 1，IQGAP1）、EB1和微管中的各種蛋白質(zhì)結(jié)合進(jìn)行復(fù)雜的相互作用［9-10］。同時(shí)，通過與微管、肌動(dòng)蛋白絲和中間絲3者相互作用實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞骨架的調(diào)節(jié)，在細(xì)胞遷移、黏附、極性、mRNA和細(xì)胞器運(yùn)輸、分裂和形態(tài)發(fā)生等各個(gè)方面發(fā)揮重要作用［11-12］。此外，在細(xì)胞核的非細(xì)胞骨架活動(dòng)中，APC也能與DNA相互作用，對(duì)有絲分裂和核糖體RNA的合成進(jìn)行調(diào)節(jié)［13］；APC失活會(huì)導(dǎo)致有絲分裂中紡錘體功能的喪失以及基因組和染色體的不穩(wěn)定，降低細(xì)胞周期蛋白（cyclin-dependent kinase，CDK）復(fù)合物的活性，阻止細(xì)胞周期從G0/G1到S期［14］。APC2主要在大腦中高水平表達(dá)，通過促進(jìn)微管動(dòng)力學(xué)來(lái)控制樹突發(fā)育，在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中發(fā)揮重要作用，其異常表達(dá)與各種神經(jīng)系統(tǒng)疾病和智力障礙有關(guān)［4， 15-16］。兩者在Wnt信號(hào)傳導(dǎo)中的作用相似，但EC中的基因改變僅在前者常見［17］。目前，APC基因突變已在多種惡性腫瘤中被發(fā)現(xiàn)，與EC相關(guān)的APC突變約60%發(fā)生在突變簇區(qū)域，并導(dǎo)致蛋白質(zhì)C末端截短，與β-catenin和微管結(jié)合所需的結(jié)構(gòu)域丟失，從而導(dǎo)致不受控制的細(xì)胞遷移、染色體不穩(wěn)定和細(xì)胞黏附喪失［9， 18］。由此可見，APC基因可通過包括Wnt信號(hào)通路等多種多樣的途徑調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖和相互作用，并影響早期EC的發(fā)生、發(fā)展。

Wnt基因于1992年由Nusse等［19］首次證實(shí)在腫瘤發(fā)生和胚胎發(fā)育中發(fā)揮關(guān)鍵作用；Wnt家族由至少19種分泌型糖蛋白組成，具有保守的22～24個(gè)半胱氨酸殘基，其中包括Wnt10a和Wnt10b蛋白，它們與特異性Wnt受體結(jié)合調(diào)節(jié)器官發(fā)生、胚胎發(fā)育、組織穩(wěn)態(tài)和癌發(fā)生，在腸道、皮膚、免疫系統(tǒng)、骨骼中均較活躍［20-22］。在經(jīng)典Wnt信號(hào)通路中，APC可與支架蛋白Axin、絲氨酸/蘇氨酸激酶GSK3b和CK1以及β-catenin一起形成軸蛋白復(fù)合物，磷酸化β-catenin，并促進(jìn)其泛素化和降解［2］；當(dāng)APC失活導(dǎo)致該通路過度激活時(shí)，水解β-catenin的軸蛋白復(fù)合物無(wú)法形成，導(dǎo)致其核積累并與轉(zhuǎn)錄因子相互作用，激活Wnt靶基因的TCF依賴性轉(zhuǎn)錄，包括細(xì)胞周期蛋白D1和MYC等基因的轉(zhuǎn)錄，使其他細(xì)胞功能異常化，如細(xì)胞遷移、黏附、增殖和凋亡等，從而導(dǎo)致細(xì)胞的異常增殖與癌變［23-24］。除此之外，在正常Wnt通路中，APC還可通過3種機(jī)制抑制β-catenin的核轉(zhuǎn)移：第一，APC促使β-catenin從細(xì)胞核輸出，并降低β-catenin轉(zhuǎn)錄活性［25］；第二，APC通過與β-catenin結(jié)合阻斷與TCF的相互作用［26］；第三，APC可與MYC增強(qiáng)子處的TrCP結(jié)合促進(jìn)轉(zhuǎn)錄抑制子CtBP介導(dǎo)的Wnt靶基因抑制［27-28］。除了對(duì)Wnt通路的影響，APC功能缺陷還會(huì)加速EC相關(guān)基因PTEN的喪失，后者與Wnt信號(hào)傳導(dǎo)之間存在協(xié)同效應(yīng)［29］。總之，APC基因作為抑癌因子在多種細(xì)胞通路中發(fā)揮著不可或缺的作用，對(duì)組織穩(wěn)態(tài)的維持非常重要，是EC發(fā)生的理想突變靶點(diǎn)。

2 EC與Wnt信號(hào)通路

迄今為止，尚無(wú)報(bào)告表明Wnt信號(hào)失調(diào)會(huì)導(dǎo)致EC，但Wnt信號(hào)通路通過多種途徑參與了EC細(xì)胞的增殖，其在組織穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)中的核心作用已在EC中得到廣泛研究。研究者發(fā)現(xiàn)Wnt通路異常主要與子宮內(nèi)膜樣癌相關(guān)，如Palacios等［30］研究了40例EC中β-和γ-catenin的免疫組織化學(xué)表達(dá)模式，發(fā)現(xiàn)β-catenin核積聚占25%，γ-catenin核積聚占7%，均與子宮內(nèi)膜樣癌表型相關(guān)，但未觀察到其與微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（microsatellite instability，MSI）之間的相關(guān)性。Fukuchi等［31］報(bào)道76例EC中有38%存在β-catenin核積聚，也與子宮內(nèi)膜樣表型相關(guān)。Chen等［32］對(duì)EC組織中Wnt10a和Wnt10b基因的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)EC組織特別是子宮內(nèi)膜樣癌中Wnt10b的表達(dá)高于增生和正常樣本，且Wnt10b過表達(dá)增強(qiáng)了β-catenin和c-myc的表達(dá)，并降低了APC的表達(dá)，從而導(dǎo)致細(xì)胞增殖。Ismail等［33］分析了13例多囊卵巢綜合征患者卵母細(xì)胞樣本中Wnt通路基因，發(fā)現(xiàn)APC和β-catenin在患者和對(duì)照組的卵母細(xì)胞中的表達(dá)水平相似，但Wnt1和GSK3β基因在PCOS患者的卵母細(xì)胞中的表達(dá)均升高，因此，Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路控制著女性生殖系統(tǒng)及卵巢顆粒細(xì)胞中的激素活性，EC與多囊卵巢綜合征等卵巢功能失調(diào)有關(guān)，Wnt通路也可能通過影響卵巢的功能從而間接導(dǎo)致EC的癌變。

研究者發(fā)現(xiàn)，雌激素通過激活Wnt信號(hào)通路促進(jìn)子宮內(nèi)膜增殖，黃體酮?jiǎng)t相反，這可能是EC癌變的理論機(jī)制之一［34］。研究發(fā)現(xiàn)，雌激素可上調(diào)CyclinD3表達(dá)并參與EC發(fā)生、發(fā)展［35］，但王茂彩等［36］的研究發(fā)現(xiàn)，CyclinD3的陽(yáng)性表達(dá)與ER、PR表達(dá)無(wú)關(guān)。因此，雌激素可能通過Wnt信號(hào)通路引起的非受體改變來(lái)促進(jìn)子宮內(nèi)膜的增殖。Nei等［37］觀察到在人子宮內(nèi)膜中，β-catenin的核積累在月經(jīng)周期增殖期明顯增強(qiáng)，而在分泌期主要分布在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜上；當(dāng)使用腺病毒SFRP2抑制Wnt信號(hào)通路后，雌二醇誘導(dǎo)的增殖被抑制［38］。在另外2項(xiàng)研究中，通過在小鼠飲用水中施用鋰會(huì)導(dǎo)致GSK3b活性抑制，從而激活Wnt信號(hào)傳導(dǎo)，β-catenin表達(dá)減少，子宮內(nèi)膜明顯增殖［39-40］。但單純Wnt信號(hào)通路的激活可能在早期子宮內(nèi)膜增生中發(fā)揮重要作用，但不一定導(dǎo)致惡性轉(zhuǎn)化，而雌激素持續(xù)刺激產(chǎn)生的下游效應(yīng)協(xié)同Wnt通路成員體細(xì)胞突變導(dǎo)致的聯(lián)合作用，可能是引發(fā)子宮內(nèi)膜全面惡性轉(zhuǎn)化所必需的［41］。約85%分化良好的I型EC病例檢測(cè)出經(jīng)典Wnt通路成員的體細(xì)胞突變及核β-catenin染色，且這些突變有可能以劑量和環(huán)境依賴的方式引發(fā)EC［42］。Jeong等［43］利用Pgr-Cre驅(qū)動(dòng)子宮內(nèi)膜及肌層中β-catenin和典型Wnt信號(hào)傳導(dǎo)的致癌激活，觀察到腺上皮細(xì)胞增殖增強(qiáng)、6周齡子宮內(nèi)膜增生以及雌激素信號(hào)傳導(dǎo)缺陷，但不會(huì)導(dǎo)致EC。因此，單一因素可能并不足以致癌，來(lái)自體內(nèi)外的過量雌激素也只有在特定條件下才可能會(huì)導(dǎo)致EC的發(fā)生，這也與細(xì)胞內(nèi)Wnt信號(hào)通路的異常激活密切相關(guān)，兩者共同作用導(dǎo)致子宮內(nèi)膜過度增生并向惡性轉(zhuǎn)化。

3 APC基因與早期EC癌變

APC基因在Wnt信號(hào)通路的功能喪失和獲得突變已在EC中得以證實(shí)，其中APC基因突變、雜合性缺失或啟動(dòng)子甲基化最可能導(dǎo)致Wnt通路的異常激活、靶基因轉(zhuǎn)錄異常和癌變發(fā)生。DNA甲基化中表觀突變的積累是生物衰老和惡性腫瘤發(fā)展中共有的分子現(xiàn)象，APC基因異常甲基化已在約22%～77.4%的EC中得到證實(shí)，與MSI相關(guān)，而在正常的子宮內(nèi)膜中暫未發(fā)現(xiàn)［44-45］。Nimura等［46］對(duì)10例早期無(wú)癥狀EC進(jìn)行遺傳分析，1例檢測(cè)到WNT信號(hào)通路的APC調(diào)節(jié)因子存在致病變異。為了進(jìn)一步研究其在EC發(fā)生中的作用，Ignatov等［47］對(duì)43例正常子宮內(nèi)膜、21例單純性增生、17例非典型增生和86例EC的研究進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)APC基因甲基化發(fā)生在非典型增生和EC中，發(fā)生率從不典型增生到EC逐漸增加，在早期EC（FIGOⅠ和Ⅱ）中達(dá)到最高水平（77.4%），且早期EC中APC甲基化水平與Ki-67表達(dá)之間存在顯著正相關(guān)，在晚期EC（FIGOⅢ和Ⅳ）則逐步下降至24.2%。這說(shuō)明APC甲基化主要出現(xiàn)在EC癌變?cè)缙冢赡苡欣谠鰪?qiáng)細(xì)胞的潛在增殖活性，在子宮內(nèi)膜從不典型增生到癌變的轉(zhuǎn)變期間賦予其生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)；而在子宮內(nèi)膜不典型增生和癌中未檢測(cè)到APC蛋白表達(dá)水平的降低，提示APC異常甲基化不一定導(dǎo)致APC基因失活，可能通過獨(dú)立的機(jī)制促進(jìn)EC的發(fā)生，還需要未來(lái)的研究進(jìn)一步證實(shí)。綜上所述，目前的研究支持APC基因在早期EC癌變中具有重要意義，其異常甲基化導(dǎo)致的功能改變可能并不依賴APC基因的表達(dá)產(chǎn)物APC蛋白，但可引起子宮內(nèi)膜細(xì)胞增殖活性過強(qiáng)，從而促進(jìn)惡性腫瘤的激活增殖和無(wú)限復(fù)制。

微RNA（microRNA，miRNA）失調(diào)所導(dǎo)致的抑癌基因失活正在成為EC發(fā)展中一種新型表觀遺傳沉默模式，據(jù)報(bào)道，在EC中過度表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子YinYang1（YY1）可通過與Eeste同源增強(qiáng)子2相互作用，介導(dǎo)組蛋白H3K27me3的甲基化，隨后募集于APC啟動(dòng)子1A區(qū)導(dǎo)致其基因沉默，從而激活Wnt通路導(dǎo)致細(xì)胞增殖和癌變［48］。此外，miR-191也可通過下調(diào)易位蛋白TET1的表達(dá)引起APC的啟動(dòng)子區(qū)域過度甲基化而失活［49］。APC基因雜合性丟失僅存在于少數(shù)EC中，F(xiàn)ujino等［50］在22例EC中只觀察到1例APC位點(diǎn)的雜合性缺失，而Jones等［51］在7種癌中未發(fā)現(xiàn)雜合性缺失。綜上所述，越來(lái)越多的轉(zhuǎn)錄因子被發(fā)現(xiàn)在EC中過度表達(dá)，并通過影響APC啟動(dòng)子區(qū)域?qū)е禄蚴Щ睿瑥亩せ頦nt信號(hào)通路引發(fā)細(xì)胞過度增殖，APC基因雜合性丟失也可能影響APC蛋白表達(dá)或功能改變，但在EC中的研究仍較少，未來(lái)還需要足夠樣本量的高質(zhì)量研究。

目前仍尚不明確APC基因突變?nèi)绾未龠M(jìn)EC的發(fā)展。Moreno-Bueno等［45］報(bào)道了95例子宮內(nèi)膜樣EC的APC突變分析數(shù)據(jù)，未發(fā)現(xiàn)APC基因突變；Song等［52］對(duì)99例EC中520個(gè)EC相關(guān)基因和來(lái)自TCGA的DNA序列數(shù)據(jù)進(jìn)行了綜合分析，在99例標(biāo)本中僅檢測(cè)出APC突變18例，其中錯(cuò)義突變9例，截短突變4例，錯(cuò)義突變和混合突變5例，在TCGA隊(duì)列的526個(gè)樣本中檢測(cè)到APC突變，其中包含42例錯(cuò)義突變、13例截短突變、22例兩種突變混合、9例其他突變類型，免疫組化進(jìn)一步證實(shí)了EC組織中APC表達(dá)降低。研究者發(fā)現(xiàn)，對(duì)于癌肉瘤，早發(fā)性EC患者出現(xiàn)APC非沉默突變的概率增加，尤其是非西班牙裔白人中，早發(fā)性EC患者出現(xiàn)非沉默APC突變的概率增加了2.68倍［53］。為了進(jìn)一步了解APC突變對(duì)EC的作用，Arango等［54］通過在小鼠子宮肌層中誘導(dǎo)APC突變，觀察到明顯的子宮肌纖維損失。同樣，使用Pgr-Cre來(lái)驅(qū)動(dòng)子宮內(nèi)膜和肌層細(xì)胞中APC失活后，肌層缺陷也很明顯，還觀察到了子宮內(nèi)膜增生和早期EC［55］。Tanwar等［56］在小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞中條件表達(dá)了APC的突變體等位基因（APCcKO），使其表達(dá)一種缺失β-catenin結(jié)合域的截?cái)嘈问紸PC，APC活性的缺失導(dǎo)致基質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為肌成纖維細(xì)胞表型，雌激素受體α表達(dá)的減少，最終顯示出內(nèi)膜非典型增生和腺癌，這提示基質(zhì)和上皮細(xì)胞的相互作用也在EC變中發(fā)揮著重要作用，僅內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞中的APC缺失就足以導(dǎo)致EC發(fā)生；而在小鼠子宮間充質(zhì)干細(xì)胞中表達(dá)β-catenin卻未觀察到癌變。APC突變與PTEN等位基因高突變率相關(guān)，PTEN等位基因突變?cè)诹夹浴o(wú)活性子宮內(nèi)膜腺體中最低（0.7%），在腺癌中最高（36.9%），在黃體酮治療后顯著降低［57］。在APC表達(dá)缺失的EC中，β-catenin表達(dá)因此在細(xì)胞核中積累，而在APC染色呈陽(yáng)性的EC中，β-catenin染色為膜陽(yáng)性或細(xì)胞核陽(yáng)性，這也表明APC截短突變可能并非調(diào)節(jié)EC中β-catenin核表達(dá)的唯一因素［58］。事實(shí)上，β-catenin的核表達(dá)與APC基因突變、雜合性缺失和啟動(dòng)子甲基化均無(wú)明顯相關(guān)性［59］。關(guān)于APC在各種細(xì)胞系統(tǒng)中的亞細(xì)胞定位提示細(xì)胞頂膜中不成比例的APC以及APC的60S部分可能并不參與Wnt通路中β-catenin的降解，即使是剩余的20S部分也與Disheveled蛋白沒有顯著混合［60］。因此，APC導(dǎo)致EC癌變的機(jī)制可能還涉及非β-catenin相關(guān)功能的喪失，APC基因突變，尤其是錯(cuò)義突變，在早期EC中更為常見，通過影響表達(dá)產(chǎn)物或其他基因突變?cè)谠缙贓C的發(fā)生發(fā)展中起著一定作用，早期EC的致癌過程除了涉及Wnt信號(hào)介導(dǎo)的子宮上皮-間質(zhì)相互作用，可能還有其他未知機(jī)制參與，APC在各種細(xì)胞系統(tǒng)中的作用錯(cuò)綜復(fù)雜，這需要未來(lái)更進(jìn)一步的研究證實(shí)。

4 APC與EC治療

APC通過影響EC的免疫微環(huán)境，在增強(qiáng)EC治療反應(yīng)方面發(fā)揮重要作用。研究表明，APC作為新的治療標(biāo)志物可以輔助識(shí)別可能受益于免疫治療的MSI型EC患者，APC突變與MSI引起的細(xì)胞內(nèi)突變均可通過提高癌細(xì)胞突變負(fù)荷、程序性死亡配體1（programmed cell death-ligand 1，PD-L1）的表達(dá)和淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)介導(dǎo)了患者對(duì)PD1/PD-L1等免疫治療的敏感性，攜帶APC突變尤其是錯(cuò)義突變的患者可能對(duì)免疫治療更敏感，預(yù)后生存期也更長(zhǎng)［52， 61-62］。因此，APC在EC各類新型免疫治療方式的選擇中起著重要作用，EC術(shù)后應(yīng)進(jìn)一步檢測(cè)病理標(biāo)本中APC基因突變情況，為更有效的免疫治療奠定基礎(chǔ)。

Wnt信號(hào)通路被激活可能導(dǎo)致EC，但目前關(guān)于Wnt通路抑制劑在EC中的研究較少。由于表觀遺傳變化可能破壞癌細(xì)胞的免疫原性和免疫識(shí)別機(jī)制，影響抗原的加工和呈遞，因此有助于找出治療的重要分子靶點(diǎn)，在預(yù)測(cè)抗癌藥物反應(yīng)性及提高化學(xué)治療效果等方面意義重大［63-66］。目前，許多甲基化抑制劑已被用作EC抗癌藥物嘗試，例如，Yanokura等［67］在50例EC標(biāo)本中檢測(cè)到12.0% CHFR異常高甲基化，并表明異常高甲基化在低分化（G3）腺癌中更為常見，這些異常的高甲基化和CHFR表達(dá)減少的EC細(xì)胞對(duì)紫杉烷類藥物具有高度敏感性，但在去甲基化后變得耐藥。近年Yang等［68］發(fā)現(xiàn)，使用DNA甲基化抑制劑和PD-L1免疫檢查點(diǎn)抑制劑的聯(lián)合療法比單獨(dú)阻斷任一途徑更有效地提高結(jié)直腸癌小鼠的生存率。因此，APC甲基化抑制劑可能是未來(lái)靶向治療的潛在研究方向。DNA低甲基化以組織特異性的方式影響腫瘤的發(fā)生，在特定情況下既可以促進(jìn)腫瘤的發(fā)生，也可以抑制腫瘤的發(fā)生，適度的DNA低甲基化并不影響Apc基因雜合性缺失或Wnt通路，而通過與激活的Wnt通路協(xié)同作用促進(jìn)細(xì)胞凋亡，這為基于DNA甲基化抑制劑的惡性腫瘤治療提供了新的思路［69］。Liu等［70］通過甲基化特異性PCR法檢測(cè)APC的甲基化狀態(tài)，并證明APC的啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)與DNA甲基化抑制劑5-aza-2c-脫氧胞苷治療后細(xì)胞生長(zhǎng)下降有關(guān)，腫瘤明顯縮小。Li等［71］的研究也表明，5-aza-2c-脫氧胞苷可被用作APC基因甲基化的抑制劑，APC的甲基化促進(jìn)了結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖和侵襲能力，應(yīng)用去甲基化藥物抑制APC基因的甲基化有助于結(jié)腸癌的治療。然而，甲基化抑制劑的缺點(diǎn)是它不具有序列特異性，可能會(huì)導(dǎo)致正常基因去甲基化和甲基化沉默的癌基因重新激活，因此，利用轉(zhuǎn)錄因子開發(fā)序列特異性去甲基化劑是未來(lái)重要的研究方向［72］。基于成簇規(guī)律間隔短回文重復(fù)（clustered regulatory interspaced short palindromic repeat，CRISPR）的表觀基因組修飾劑可有效使靶向DNA去甲基化，并通過多次細(xì)胞分裂維持表觀遺傳記憶［73］。使用CRISPR-dCas9對(duì)印記基因進(jìn)行靶向去甲基化，可導(dǎo)致穩(wěn)定、長(zhǎng)期的母體小核核糖核蛋白多肽N（small nuclear ribonucleoprotein polypeptide N，SNRPN）基因表達(dá)，從而有利于治療基因相關(guān)疾病。Yang等［68］利用dCas9-SunTagTET1（一種靶向去甲基化融合蛋白）進(jìn)行靶向p16啟動(dòng)子去甲基化。Sun等［74］利用TRED-I（一種基于CRISPR/Cas9的基因特異性系統(tǒng)）靶向NLRC5啟動(dòng)子的去甲基化，成功驅(qū)動(dòng)主要組織相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex，MHC）Ⅰ類抗原呈遞增加并加速CD8+ T細(xì)胞激活，提高了抗PD1抗體檢查點(diǎn)阻斷的療效。Albrecht等［75］使用dCas9-SunTag和TET1的催化結(jié)構(gòu)域成功對(duì)擬南芥ROP蛋白結(jié)合活性因子（interactor of constitutive active ROPs 1，ICR1）基因進(jìn)行靶向去甲基化，并觀察到了特異且穩(wěn)定的效果。dCas9-TET1CD可以使人卵巢腺癌BG1細(xì)胞中的肝細(xì)胞核因子（hepatocyte nuclear factor，HNF）1A和β-1，4-甘露糖基糖蛋白4-β-N-乙酰葡糖氨基轉(zhuǎn)移酶［mannosyl（β-1，4-）-glycoprotein β-1，4-N-acetylglucosaminyltransferase 3，MGAT3］基因去甲基化，并使人宮頸癌HeLa和人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤T98G細(xì)胞系中含端粒重復(fù)序列的RNA（telomeric repeat-containing RNA，TERRA）去甲基化［76-77］。此外，使用dCas9TET1CD靶向R-脊椎蛋白3（R-spondin 3，RSPO3）啟動(dòng)子DNA去甲基化被證實(shí)可抑制膽管癌的致瘤性［78］；使用dCas13b-FTO對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）m6A進(jìn)行靶向特異性去甲基化，可增強(qiáng)Smad2信號(hào)通路活性，并促進(jìn)骨骼肌細(xì)胞增殖［79］；體外和體內(nèi)研究均證明，dCas9-multiGCN4/scFv-TET1CD-sgZNF334載體系統(tǒng)對(duì)ZNF334靶向去甲基化是一種對(duì)結(jié)直腸癌的精確有效治療［80］。總之，表觀遺傳數(shù)據(jù)有助于找出治療的重要分子靶點(diǎn)，在預(yù)測(cè)抗癌藥物反應(yīng)性及提高化學(xué)治療效果等方面意義重大，靶向去甲基化在多種惡性腫瘤治療中效果良好，但目前仍缺少在EC的報(bào)道。

生活方式的調(diào)節(jié)也是一種防治EC的重要方法，研究發(fā)現(xiàn)終身和近期體力活動(dòng)均與非惡性乳腺組織中APC基因啟動(dòng)子高甲基化呈負(fù)相關(guān)，表明體力活動(dòng)對(duì)子宮內(nèi)膜的保護(hù)作用可能與包括APC甲基化在內(nèi)的表觀遺傳變化有關(guān)［77］。因此，高危EC患者進(jìn)行適當(dāng)?shù)倪\(yùn)動(dòng)對(duì)預(yù)防和治療可能是有益的。

5 結(jié)語(yǔ)和展望

EC癌變絕非單一因素作用的簡(jiǎn)單過程，而是眾多復(fù)雜因素交織、共同驅(qū)動(dòng)的結(jié)果。在這一復(fù)雜進(jìn)程里，APC正逐漸展現(xiàn)出其關(guān)鍵價(jià)值，全方位參與EC的病因解析與治療實(shí)踐中 。

從核心機(jī)制看，APC在經(jīng)典的Wnt信號(hào)通路中扮演“剎車”角色，可有效抑制通路過度激活，維持細(xì)胞增殖與分化的平衡；在細(xì)胞層面，它深度參與細(xì)胞間黏附，助力細(xì)胞維持有序排列與正常組織形態(tài)，同時(shí)對(duì)細(xì)胞骨架穩(wěn)定起著重要作用，保障細(xì)胞生理活動(dòng)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。不僅如此，其在細(xì)胞周期調(diào)控與細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)方面的潛在功能，也在被逐步挖掘——精準(zhǔn)調(diào)控細(xì)胞周期進(jìn)程，及時(shí)清除異常細(xì)胞，從源頭遏制癌變。

這些不斷涌現(xiàn)的新認(rèn)知，為EC診療預(yù)防打開全新視野。在診斷上，監(jiān)測(cè)APC相關(guān)分子標(biāo)志物，能更早捕捉癌變信號(hào)；治療中，依據(jù)APC功能狀態(tài)，可針對(duì)性選擇干預(yù)策略，比如恢復(fù)APC正常功能以重塑抗癌免疫微環(huán)境，或結(jié)合其對(duì)細(xì)胞周期的影響設(shè)計(jì)靶向療法；預(yù)防領(lǐng)域，理解APC與生活方式、環(huán)境因素的交互作用，有望制定更精準(zhǔn)的防癌方案。

不過，當(dāng)前對(duì)APC的認(rèn)知仍有諸多空白。比如，APC失活的表觀遺傳學(xué)（表觀遺傳）調(diào)控網(wǎng)絡(luò)如何精準(zhǔn)運(yùn)作，不同EC亞型中APC作用是否存在差異，以及APC與其他致癌通路的協(xié)同或拮抗關(guān)系怎樣，這些都亟待深入探索。只有持續(xù)解碼APC在EC癌變與治療中的奧秘，才能真正將其潛力轉(zhuǎn)化為臨床獲益，推動(dòng)EC診療邁向精準(zhǔn)化、個(gè)體化新高度，為患者帶來(lái)更多生存希望。

利益沖突聲明：本研究未受到企業(yè)、公司等第三方資助，不存在潛在利益沖突。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］ SIEGEL R L， MILLER K D， WAGLE N S， et al. Cancer statistics， 2023［J］. CA A Cancer J Clin， 2023， 73（1）： 17-48. DOI： 10.3322/caac.21763.

［2］ FANG X， SVITKINA T M. Adenomatous polyposis coli （APC） in cell migration［J］. Eur J Cell Biol， 2022， 101（3）： 151228. DOI： 10.1016/j.ejcb.2022.151228.

［3］ LAMBERTZ S， BALLHAUSEN W G. Identification of an alternative 5’ untranslated region of the adenomatous polyposis coli gene［J］. Hum Genet， 1993， 90（6）： 650-652. DOI： 10.1007/BF00202484.

［4］ GONZALEZ L， ALVAREZ J， WEINSTEIN E， et al. Familial adenomatous polyposis in an adolescent with coexisting schizophrenia： treatment strategies and implications［J］. Mol Genet Genomic Med， 2015， 3（5）： 391-395. DOI： 10.1002/mgg3.114.

［5］ GRODEN J， THLIVERIS A， SAMOWITZ W， et al. Identification and characterization of the familial adenomatous polyposis coli gene［J］. Cell， 1991， 66（3）： 589-600. DOI： 10.1016/0092-8674（81）90021-0.

［6］ BANNO K， YANOKURA M， SUSUMU N， et al. Relationship of the aberrant DNA hypermethylation of cancer-related genes with carcinogenesis of endometrial cancer［J］. Oncol Rep， 2006，

16（6）： 1189-1196.

［7］ THLIVERIS A， ALBERTSEN H， TUOHY T， et al. Long-range physical map and deletion characterization of the 1100-kb NotI restriction fragment harboring the APC gene［J］. Genomics， 1996， 34（2）： 268-270. DOI： 10.1006/geno.1996.0285.

［8］ TSUCHIYA T， TAMURA G， SATO K， et al. Distinct methylation patterns of two APC gene promoters in normal and cancerous gastric epithelia［J］. Oncogene， 2000， 19（32）： 3642-3646. DOI： 10.1038/sj.onc.1203704.

［9］ AOKI K， TAKETO M M. Adenomatous polyposis coli （APC）： a multi-functional tumor suppressor gene［J］. J Cell Sci， 2007， 120（Pt 19）： 3327-3335. DOI： 10.1242/jcs.03485.

［10］ MIDGLEY C A， WHITE S， HOWITT R， et al. APC expression in normal human tissues［J］. J Pathol， 1997， 181（4）： 426-433. DOI： 10.1002/（SICI）1096-9896（199704）181： 4lt;426： ： AID-PATH768gt;3.0.CO； 2-T.

［11］ DOGTEROM M， KOENDERINK G H. Actin-microtubule crosstalk in cell biology［J］. Nat Rev Mol Cell Biol， 2019，

20（1）： 38-54. DOI： 10.1038/s41580-018-0067-1.

［12］ NELSON S， N?THKE I S. Interactions and functions of the adenomatous polyposis coli （APC） protein at a glance［J］. J Cell Sci， 2013， 126（Pt 4）： 873-877. DOI： 10.1242/jcs.100479.

［13］ NEUFELD K L， WHITE R L. Nuclear and cytoplasmic localizations of the adenomatous polyposis coli protein［J］. Proc Natl Acad Sci USA， 1997， 94（7）： 3034-3039. DOI： 10.1073/pnas.94.7.3034.

［14］ BAEG G H， MATSUMINE A， KURODA T， et al. The tumour suppressor gene product APC blocks cell cycle progression from G0/G1 to S phase［J］. EMBO J， 1995， 14（22）： 5618-5625. DOI： 10.1002/j.1460-2075.1995.tb00249.x.

［15］ VAN ES J H， KIRKPATRICK C， VAN DE WETERING M， et al. Identification of APC2， a homologue of the adenomatous polyposis coli tumour suppressor［J］. Curr Biol， 1999， 9（2）： 105-108. DOI： 10.1016/s0960-9822（99）80024-4.

［16］ KAHN O I， SCH?TZLE P， VAN DE WILLIGE D， et al. APC2 controls dendrite development by promoting microtubule dynamics［J］. Nat Commun， 2018， 9（1）： 2773. DOI： 10.1038/s41467-018-05124-5.

［17］ ABBOTT J， N?THKE I S. The adenomatous polyposis coli protein 30 years on［J］. Semin Cell Dev Biol， 2023， 150/151： 28-34. DOI： 10.1016/j.semcdb.2023.04.004.

［18］ BéROUD C， SOUSSI T. APC gene： database of germline and somatic mutations in human tumors and cell lines［J］. Nucleic Acids Res， 1996， 24（1）： 121-124. DOI： 10.1093/nar/24.1.121.

［19］ NUSSE R. The Wnt gene family in tumorigenesis and in normal development［J］. J Steroid Biochem Mol Biol， 1992， 43（1/2/3）： 9-12. DOI： 10.1016/0960-0760（92）90181-h.

［20］ KATOH M. WNT and FGF gene clusters （review）［J］. Int J Oncol， 2002， 21（6）： 1269-1273.

［21］ WEND P， WEND K， KRUM S A， et al. The role of WNT10B in physiology and disease［J］. Acta Physiol （Oxf）， 2012， 204（1）： 34-51. DOI： 10.1111/j.1748-1716.2011.02296.x.

［22］ SCHAEFER K N， PEIFER M. Wnt/beta-catenin signaling regulation and a role for biomolecular condensates［J］. Dev Cell， 2019， 48（4）： 429-444. DOI： 10.1016/j.devcel.2019.01.025.

［23］ TETSU O， MCCORMICK F. Beta-catenin regulates expression of cyclin D1 in colon carcinoma cells［J］. Nature， 1999， 398（6726）： 422-426. DOI： 10.1038/18884.

［24］ HE T C， SPARKS A B， RAGO C， et al. Identification of c-MYC as a target of the APC pathway［J］. Science， 1998， 281（5382）： 1509-1512. DOI： 10.1126/science.281.5382.1509.

［25］ ROSIN-ARBESFELD R， CLIFFE A， BRABLETZ T， et al. Nuclear export of the APC tumour suppressor controls beta-catenin function in transcription［J］. EMBO J， 2003， 22（5）： 1101-1113. DOI： 10.1093/emboj/cdg105.

［26］ NEUFELD K L， ZHANG F， CULLEN B R， et al. APC-mediated downregulation of beta-catenin activity involves nuclear sequestration and nuclear export［J］. EMBO Rep， 2000， 1（6）： 519-523. DOI： 10.1093/embo-reports/kvd117.

［27］ BIENZ M， HAMADA F. Adenomatous polyposis coli proteins and cell adhesion［J］. Curr Opin Cell Biol， 2004， 16（5）： 528-535. DOI： 10.1016/j.ceb.2004.08.001.

［28］ MARKOWSKA A， PAWA?OWSKA M， LUBIN J， et al. Signalling pathways in endometrial cancer［J］. Contemp Oncol （Pozn）， 2014， 18（3）： 143-148. DOI： 10.5114/wo.2014.

43154.

［29］ VAN DER ZEE M， JIA Y， WANG Y， et al. Alterations in Wnt-β-catenin and Pten signalling play distinct roles in endometrial cancer initiation and progression［J］. J Pathol， 2013， 230（1）： 48-58. DOI： 10.1002/path.4160.

［30］ PALACIOS J， CATASúS L， MORENO-BUENO G， et al. β- And γ-catenin expression in endometrial carcinoma. Relationship with clinicopathological features and microsatellite instability［J］. Virchows Arch， 2001， 438（5）： 464-469. DOI： 10.1007/s004280000371.

［31］ FUKUCHI T， SAKAMOTO M， TSUDA H， et al. Beta-catenin mutation in carcinoma of the uterine endometrium［J］. Cancer Res， 1998， 58（16）： 3526-3528.

［32］ CHEN H， WANG Y， XUE F. Expression and the clinical significance of Wnt10a and Wnt10b in endometrial cancer are associated with the Wnt/β-catenin pathway［J］. Oncol Rep， 2013， 29（2）： 507-514. DOI： 10.3892/or.2012.2126.

［33］ ISMAIL A B， NAJI M’S， NEBIH ?， et al. The expression profile of WNT/β-catanin signalling genes in human oocytes obtained from polycystic ovarian syndrome （PCOS） patients［J］. Zygote， 2022， 30（4）： 536-542. DOI： 10.1017/S0967199422000028.

［34］ WANG Y， VAN DER ZEE M， FODDE R， et al. Wnt/Β-catenin and sex hormone signaling in endometrial homeostasis and cancer［J］. Oncotarget， 2010， 1（7）： 674-684. DOI： 10.18632/oncotarget.201.

［35］ 袁丹， 劉蒙蒙， 周正平， 等. 雌激素對(duì)人子宮內(nèi)膜樣癌Ishikawa細(xì)胞中p57kip2、Cyclin D1、CDK4表達(dá)及形態(tài)變化影響的研究［J］. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展， 2018， 27（4）： 249-254. DOI： 10.13283/j.cnki.xdfckjz.2018.04.002.

YUAN D， LIU M M， ZHOU Z P， et al. Effects of estrogen on the expressions of p57kip2， Cyclin D1， CDK4 and morphological changes in Ishikawa cells in human endometrial carcinoma［J］. Prog Obstet Gynecol， 2018， 27（4）： 249-254. DOI： 10.13283/j.cnki.xdfckjz.2018.04.002.

［36］ 王茂彩， 李驍， 王敏儀， 等. Cyclin D3在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及其意義［J］. 新醫(yī)學(xué)， 2020， 51（11）： 877-880. DOI： 10.3969/j.issn.0253-9802.2020.11.014.

WANG M C， LI X， WANG M Y， et al. Expression and significance of cyclin D3 in the endometrial carcinoma［J］. J New Med， 2020， 51（11）： 877-880. DOI： 10.3969/j.issn.0253-9802.2020.11.014.

［37］ NEI H， SAITO T， YAMASAKI H， et al. Nuclear localization of beta-catenin in normal and carcinogenic endometrium［J］. Mol Carcinog， 1999， 25（3）： 207-218.

［38］ HOU Y F， YUAN S T， LI H C， et al. ERbeta exerts multiple stimulative effects on human breast carcinoma cells［J］. Oncogene， 2004， 23（34）： 5799-5806. DOI： 10.1038/sj.onc.1207765.

［39］ GUNIN A G， EMELIANOV V U， MIRONKIN I U， et al. Lithium treatment enhances estradiol-induced proliferation and hyperplasia formation in the uterus of mice［J］. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol， 2004， 114（1）： 83-91. DOI： 10.1016/j.ejogrb.2003.09.023.

［40］ POLOTSKY A J， ZHU L， SANTORO N， et al. Lithium chloride treatment induces epithelial cell proliferation in xenografted human endometrium［J］. Hum Reprod， 2009， 24（8）： 1960-1967. DOI： 10.1093/humrep/dep115.

［41］ SCHLOSSHAUER P W， PIROG E C， LEVINE R L， et al. Mutational analysis of the CTNNB1 and APC genes in uterine endometrioid carcinoma［J］. Mod Pathol， 2000， 13（10）： 1066-1071. DOI： 10.1038/modpathol.3880196.

［42］ SAEGUSA M， OKAYASU I. Frequent nuclear beta-catenin accumulation and associated mutations in endometrioid-type endometrial and ovarian carcinomas with squamous differentiation［J］. J Pathol， 2001， 194（1）： 59-67. DOI： 10.1002/path.856.

［43］ JEONG J W， LEE H S， FRANCO H L， et al. Beta-catenin mediates glandular formation and dysregulation of beta-catenin induces hyperplasia formation in the murine uterus［J］. Oncogene， 2009， 28（1）： 31-40. DOI： 10.1038/onc.2008.363.

［44］ ZYSMAN M， SAKA A， MILLAR A， et al. Methylation of adenomatous polyposis coli in endometrial cancer occurs more frequently in tumors with microsatellite instability phenotype［J］. Cancer Res， 2002， 62（13）： 3663-3666.

［45］ MORENO-BUENO G， HARDISSON D， SáNCHEZ C， et al. Abnormalities of the APC/beta-catenin pathway in endometrial cancer［J］. Oncogene， 2002， 21（52）： 7981-7990. DOI： 10.1038/sj.onc.1205924.

［46］ NIMURA R， KONDO E， YOSHIDA K， et al. Cancer-associated gene analysis of cervical cytology samples and liquid-based cytology significantly improve endometrial cancer diagnosis sensitivity［J］. Oncol Lett， 2022， 24（4）： 376. DOI： 10.3892/ol.2022.13496.

［47］ IGNATOV A， BISCHOFF J， IGNATOV T， et al. APC promoter hypermethylation is an early event in endometrial tumorigenesis［J］. Cancer Sci， 2010， 101（2）： 321-327. DOI： 10.1111/j.1349-7006.2009.01397.x.

［48］ YANG Y， ZHOU L， LU L， et al. A novel miR-193a-5p-YY1-APC regulatory axis in human endometrioid endometrial adenocarcinoma［J］. Oncogene， 2013， 32（29）： 3432-3442. DOI： 10.1038/onc.2012.360.

［49］ YANG C， OTA-KUROGI N， IKEDA K， et al. microRNA-191 regulates endometrial cancer cell growth via TET1-mediated epigenetic modulation of APC［J］. J Biochem， 2020， 168（1）： 7-14. DOI： 10.1093/jb/mvaa014.

［50］ FUJINO T， RISINGER J I， COLLINS N K， et al. Allelotype of endometrial carcinoma［J］. Cancer Res， 1994， 54（16）： 4294-4298.

［51］ JONES M H， NAKAMURA Y， KOI S， et al. Allelotype of uterine cancer by analysis of RFLP and microsatellite polymorphisms： frequent loss of heterozygosity on chromosome arms 3p， 9q， 10q， and 17p［J］. Genes Chromosom Cancer， 1994， 9（2）： 119-123. DOI： 10.1002/gcc.2870090207.

［52］ SONG Y， HUANG J， WANG K， et al. To identify adenomatous polyposis coli gene mutation as a predictive marker of endometrial cancer immunotherapy［J］. Front Cell Dev Biol， 2022， 10： 935650. DOI： 10.3389/fcell.2022.935650.

［53］ CHOI J， HOLOWATYJ A N， DU M， et al. Distinct genomic landscapes in early-onset and late-onset endometrial cancer［J］.

JCO Precis Oncol， 2022， 6： e2100401. DOI： 10.1200/PO.

21.00401.

［54］ ARANGO N A， KOBAYASHI A， WANG Y， et al. A mesenchymal perspective of Müllerian duct differentiation and regression in Amhr2-lacZ mice［J］. Mol Reprod Dev， 2008， 75（7）： 1154-1162. DOI： 10.1002/mrd.20858.

［55］ BHOWMICK N A， NEILSON E G， MOSES H L. Stromal fibroblasts in cancer initiation and progression［J］. Nature， 2004， 432（7015）： 332-337. DOI： 10.1038/nature03096.

［56］ TANWAR P S， LEE H J， ZHANG L， et al. Constitutive activation of Beta-catenin in uterine stroma and smooth muscle leads to the development of mesenchymal tumors in mice［J］. Biol Reprod， 2009， 81（3）： 545-552. DOI： 10.1095/biolreprod.108.075648.

［57］ REID K， CAMACHO-VANEGAS O， PANDYA D， et al. Deep molecular tracking over the 12-yr development of endometrial cancer from hyperplasia in a single patient［J］. Cold Spring Harb Mol Case Stud， 2023， 9（4）： a006311. DOI： 10.1101/mcs.a006311.

［58］ KARIOLA R， ABDEL-RAHMAN W M， OLLIKAINEN M， et al. APC and beta-catenin protein expression patterns in HNPCC-related endometrial and colorectal cancers［J］. Fam Cancer， 2005， 4（2）： 187-190. DOI： 10.1007/s10689-004-6130-4.

［59］ PIJNENBORG J A， KISTERS N， VAN ENGELAND M， et al.

APC， beta-catenin， and E-cadherin and the development of recurrent endometrial carcinoma［J］. Int J Gynecol Cancer， 2004， 14（5）： 947-956. DOI： 10.1111/j.1048-891X.2004.

014534.x.

［60］ REINACHER-SCHICK A， GUMBINER B M. Apical membrane localization of the adenomatous polyposis coli tumor suppressor protein and subcellular distribution of the beta-catenin destruction complex in polarized epithelial cells［J］. J Cell Biol， 2001， 152（3）： 491-502. DOI： 10.1083/jcb.152.3.491.

［61］ LEFOL C， SOHIER E， BAUDET C， et al. Acquired somatic MMR deficiency is a major cause of MSI tumor in patients suspected for “Lynch-like syndrome” including young patients［J］.

Eur J Hum Genet， 2021， 29（3）： 482-488. DOI： 10.1038/s41431-020-00778-6.

［62］ ARORA E， MASAB M， MITTAR P， et al. Role of immune checkpoint inhibitors in advanced or recurrent endometrial cancer［J］. Cureus， 2018， 10（4）： e2521. DOI： 10.7759/cureus.2521.

［63］ MCDERMOTT D， LEBBé C， HODI F S， et al. Durable benefit and the potential for long-term survival with immunotherapy in advanced melanoma［J］. Cancer Treat Rev， 2014， 40（9）： 1056-1064. DOI： 10.1016/j.ctrv.2014.06.012.

［64］ MAIO M， GROB J J， AAMDAL S， et al. Five-year survival rates for treatment-naive patients with advanced melanoma who received ipilimumab plus dacarbazine in a phase III trial［J］. J Clin Oncol， 2015， 33（10）： 1191-1196. DOI： 10.1200/JCO.2014.56.6018.

［65］ WU X， CHEN H， XU H. The genomic landscape of human immune-mediated diseases［J］. J Hum Genet， 2015， 60（11）： 675-681. DOI： 10.1038/jhg.2015.99.

［66］ SIGALOTTI L， FRATTA E， CORAL S， et al. Epigenetic drugs as immunomodulators for combination therapies in solid tumors［J］. Pharmacol Ther， 2014， 142（3）： 339-350. DOI： 10.1016/j.pharmthera.2013.12.015.

［67］ YANOKURA M， BANNO K， KAWAGUCHI M， et al. Relationship of aberrant DNA hypermethylation of CHFR with sensitivity to taxanes in endometrial cancer［J］. Oncol Rep， 2007， 17（1）： 41-48.

［68］ YANG L， CHEN X， LEE C， et al. Functional characterization of age-dependent p16 epimutation reveals biological drivers and therapeutic targets for colorectal cancer［J］. J Exp Clin Cancer Res， 2023， 42（1）： 113. DOI： 10.1186/s13046-023-02689-y.

［69］ DUAN X， HUANG Y， CHEN X， et al. Moderate DNA hypomethylation suppresses intestinal tumorigenesis by promoting

caspase-3 expression and apoptosis［J］. Oncogenesis， 2021，

10（5）： 38. DOI： 10.1038/s41389-021-00328-9.

［70］ LIU B， SONG J， LUAN J， et al. Promoter methylation status of tumor suppressor genes and inhibition of expression of DNA methyltransferase 1 in non-small cell lung cancer［J］. Exp Biol Med （Maywood）， 2016， 241（14）： 1531-1539. DOI： 10.1177/1535370216645211.

［71］ LI B Q， LIU P P， ZHANG C H. Correlation between the methylation of APC gene promoter and colon cancer［J］. Oncol Lett， 2017， 14（2）： 2315-2319. DOI： 10.3892/ol.2017.6455.

［72］ MURAKI Y， BANNO K， YANOKURA M， et al. Epigenetic DNA hypermethylation： clinical applications in endometrial cancer（review）［J］. Oncol Rep， 2009， 22（5）： 967-972. DOI： 10.3892/or_00000523.

［73］ YAHSI B， PALAZ F， DINCER P. Applications of CRISPR epigenome editors in tumor immunology and autoimmunity［J］. ACS Synth Biol， 2024， 13（2）： 413-427. DOI： 10.1021/acssynbio.3c00524.

［74］ SUN X， WATANABE T， ODA Y， et al. Targeted demethylation and activation of NLRC5 augment cancer immunogenicity through MHC class I［J］. Proc Natl Acad Sci USA， 2024， 121（6）：

e2310821121. DOI： 10.1073/pnas.2310821121.

［75］ ALBRECHT C， RAJARAM N， BROCHE J， et al. Locus-specific and stable DNA demethylation at the H19/IGF2 ICR1 by epigenome editing using a dCas9-SunTag system and the catalytic domain of TET1［J］. Genes （Basel）， 2024， 15（1）： 80. DOI： 10.3390/genes15010080.

［76］ JOSIPOVI? G， TADI? V， KLASI? M， et al. Antagonistic and synergistic epigenetic modulation using orthologous CRISPR/dCas9-based modular system［J］. Nucleic Acids Res， 2019，

47（18）： 9637-9657. DOI： 10.1093/nar/gkz709.

［77］ LE BERRE G， HOSSARD V， RIOU J F， et al. Repression of TERRA expression by subtelomeric DNA methylation is dependent on NRF1 binding［J］. Int J Mol Sci， 2019， 20（11）： 2791. DOI： 10.3390/ijms20112791.

［78］ WU G， WANG D， XIONG F， et al. Upregulation of RSPO3 via targeted promoter DNA demethylation inhibits the progression of cholangiocarcinoma［J］. Clin Epigenetics， 2023， 15（1）： 177. DOI： 10.1186/s13148-023-01592-9.

［79］ DENG K， LIU Z， LI X， et al. Targeted demethylation of the TGFβ1 mRNA promotes myoblast proliferation via activating the SMAD2 signaling pathway［J］. Cells， 2023， 12（7）： 1005. DOI： 10.3390/cells12071005.

［80］ YANG B， TANG H， WANG N， et al. Targeted DNA demethylation of the ZNF334 promoter inhibits colorectal cancer growth［J］. Cell Death Dis， 2023， 14（3）： 210. DOI： 10.1038/

s41419-023-05743-x.

（責(zé)任編輯：林燕薇）