吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄中的膳食風險評估

中圖分類號：S663.1 文獻標志碼：A 文章編號：1008-1038（2025）07-0008-06

DOI：10.19590/j.cnki.1008-1038.2025.07.002

Dietary Risk Assessment ofPyraclostrobin and Boscalid in Grapes

WANGFeixiang1，FENGYizhi2，YU Miao，LIANGLin2，LI Xiangyang？ （1.Feixian Agricultural Technology Extension Center， Linyi 2734Oo， China; 2.Shandong Academy of Pesticide Sciences， Jinan 25oo33， China; 3.Institute for the Control of Agrochemicals， Shandong Province， Jinan 25O1Oo， China）

Abstract： To evaluate theriskof disipation，residue anddietary intakeof pyraclostrobinandboscalid in grapes under field conditions，the residue analysis of pyraclostrobin and boscalid in grape samples was carried out by thefield experiment combined with themass spectrometry method with QuEChERS as the pretreatment method，andthe dietary safety was evaluated in combination with the dietary data in China.Under field conditions，the half-lives of pyraclostrobin and boscalid in grapes were3.5-9.6 dand2.9-8.8d，respectively.

The maximum residue of pyraclostrobin and boscalid in grape samples at 7d and 10d after the last application was 1.7mg/kg and 3.8mg/kg ，respectively，which were lower than the maximum residue limit standard in China.The long-term dietary risk quotients （RQc） of pyraclostrobin and boscalid to Chinese adults were 97.9 % （204 and 70.0% ，respectively，which were lower than 100% ．At this test dose，the residues of pyraclostrobin and boscalid in grapes would not have an impact on the health of Chinese adults.

Keywords：Pyraclostrobin; boscalid; grape; dissipation; risk assessment

灰霉病是葡萄生產中的主要病害，嚴重影響葡萄果實的品質和產量1-2。近年來，葡萄灰霉病日趨嚴重，為害葡萄造成的年均損失約占其產量的 30% 3]。目前，實際生產中灰霉病的防治仍以化學防治為主，然而藥劑的重復使用，會導致抗藥性的產生，最終導致防效降低4。

吡唑醚菌酯（pyraclostrobin）是一種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，通過組織細胞色素bc1復合體的電子傳遞而抑制線粒體呼吸作用達到殺菌效果5。啶酰菌胺（boscalid）屬于琥珀酸脫氫酶抑制劑類殺菌劑，已廣泛用于防治蔬菜、果樹等作物的灰霉病。研究表明，吡唑醚菌酯與啶酰菌胺按不同比例混配后均對葡萄灰霉病的病原菌灰葡萄孢霉表現出良好的毒力增效作用。隨著這兩種農藥的普及，其在農產品中的安全性也受到了人們的關注。目前，同時使用兩種藥劑對農產品安全性的研究尚未見報道。本研究建立了QuEChERS（Quick，Easy，Cheap，Effective，Rugged，andSafe）前處理方法結合高效液相串聯質譜法同時檢測葡萄中吡唑醚菌酯與啶酰菌胺殘留，并對我國10個葡萄主產區田間樣品進行分析，同時結合我國居民的膳食水平，對我國成年居民的膳食風險進行了評估，為兩種藥劑在葡萄上的科學合理使用提供依據。

1材料與方法

1.1 材料與試劑

吡唑醚菌酯和啶酰菌胺標準品，德國Dr.EhrenstorferGmbH; 38% 唑醚·啶酰菌懸浮劑（吡唑醚菌酯 12.8% 、啶酰菌胺 25.2%） ，山東東泰農化有限公司；氯化鈉（分析純）、無水硫酸鎂（分析純）、甲酸（色譜純）、乙腈（分析純、色譜純），國藥集團化學試劑有限公司；N-丙基乙二胺（PSA） （40～60μm） ，天津博納艾杰爾科技有限公司；有機濾器 （0.22μm） ，天津天羽嘉瀾科技有限公司。

1.2 田間試驗

按照《農作物中農藥殘留試驗準則》8和《農藥登記殘留試驗區域指南》要求設計試驗： 38% 唑醚·啶酰菌懸浮劑在葡萄上防治灰霉病的試驗劑量為1000倍液，于灰霉病發病前或發病初期噴霧施藥3次，施藥間隔 7d 。在我國10個葡萄主產區作為試驗地點，其中在吉林省、寧夏回族自治區、河南省、上海市、湖北省和廣西壯族自治區開展最終殘留試驗，河北省、山東省、安徽省和云南省開展消解試驗，具體試驗信息見表1。每個試驗點直線距離大于 200km 。最終殘留和消解試驗均設置1個處理小區和1個對照小區，每小區至少8株或面積至少 50m² 。

在試驗小區中用隨機方法在葡萄架的上、中、下、左、右不同部位采樣，每個樣品的采樣點至少采集12串生長正常、無病害、成熟的葡萄果實。將葡萄田間樣本除去果柄，充分混勻后用四分法分取 150g 樣品，放于 -18°C 以下的冰柜中，待測。

1.3樣品處理

采用改進的QuEChERS方法對葡萄樣品進行處理[0]。用食品料理儀將冰凍狀態的葡萄搗碎，準確稱取10.0g 至 50mL 具塞塑料離心管內，加入 20mL 乙腈，置于自動渦旋儀上 2500r/min 渦旋提取 5min ，之后加入 4g 氯化鈉，劇烈振蕩 1min 后轉入離心機，以 4000r/min 離心 5min ，取上清液 1mL 至加有 40mgN- 丙基乙二胺（PSA）的 2mL 離心管中，渦旋凈化 1min ，過 0.22μm 有機濾器待測。

1.4儀器與設備

高效液相色譜串聯質譜儀（1200-6460，Agilent）配Poroshell 120EC-C18（100mm×4.6mm，2.7μm） 色譜柱，采用 0.1% 甲酸水溶液和乙腈 （20/80，V/V） 為流動相，對目標化合物進行分離，流速為 0.8mL/min; 進樣體積 2μL 多管漩渦混合儀，MTV-100，杭州奧盛儀器有限公司；電

表1葡萄試驗地信息匯總

Table1 Grape test site informationsummary

注：“BBCH*”是植物各個生長階段表現型編碼系統。

表2吡唑醚菌酯與啶酰菌胺儀器條件

Table2 Instrumentconditionsof pyraclostrobinand boscalid

注：1）為定量離子，2）為定性離子。

子天平，AL204，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；高速組織搗碎機，JYL-C020E，九陽股份有限公司；離心機，FC5706，美國奧豪斯公司。

吡唑醚菌酯與啶酰菌胺儀器采集條件見表2。

1.5 計算公式

按照公式（1）（2）計算每日攝入量和長期膳食攝入風險商。

式中，NEDI為國家估算每日攝入量， mg/kg ；FI為某類食物攝入量， kg;STMR 為良好試驗殘留中值， mg/kg bw為成年居民的平均體質量， 63kg;RQc 為長期膳食攝入風險商， % ；ADI為藥劑每日允許攝入量， 其中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺分別為 0.03mg/kgbw 和 0.04mg/ 若風險值大于100，則表明風險不可接受]。

通過計算基質匹配標準溶液峰面積的斜率與溶劑標準溶液的峰面積斜率評估基質效應（公式3），超過 10% 則認為有明顯的基質效應[3]。

式中，ME為基質效應， %：a_I 為標樣斜率； a₂ 為溶劑斜率。

2結果與分析

2.1 方法驗證

在空白葡萄樣品中按照 0.02，0.2，2mg/kg 水平添加吡唑醚菌酯標準溶液，按照 0.02，0.2，5mg/kg 水平添加啶酰菌胺標準溶液，每個濃度5次平行試驗。在 0.01～

2.5mg/L 范圍內，吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在乙腈和空白葡萄基質中均有較好的線性 _{（rgt;0.9917）} 。添加回收結果見表3，吡唑醚菌酯和啶酰菌胺的平均回收率分別為93%～96% 和 95%～108% ；相對標準偏差（RSD）分別為3%～6% 和 2%～7% 。基質效應表明，兩種藥劑在葡萄中均基質增強，為消除基質效應對檢測結果的影響，兩種藥劑均采用基質標樣進行校準。以最低添加濃度為最低檢測濃度，兩種藥劑定量限為 0.02mg/kg_° 方法參數均符合《農作物中農藥殘留試驗準則》8。

2.2 消解試驗

為明確吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄中的消解動態，在河北、山東、安徽和云南四地開展試驗。如表4所示，吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在四地葡萄中的半衰期差異較大，分別為 3.5～9.6d 和 2.9～8.8d° 其中，山東費縣葡萄中兩個藥劑的半衰期明顯快于其余三地，這主要與山東試驗期間降雨較多有關，雨水的沖刷加快了藥劑在葡萄中的降解。陳勇達等[4研究表明，吡唑醚菌酯在葡萄中半衰期為 14.1～24.9d ，明顯長于本研究。張玉婷等[研究表明，啶酰菌胺在葡萄中半衰期為 9.9～12.0d ，與本研究結果類似。也有研究表明[16-18]，吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在農作物中半衰期與作物種類有關，一般在蘋果、葡萄等生長較慢的作物中半衰期較長，而在黃瓜、草莓等生長較快的作物中半衰期較短，說明生長稀釋作用對藥劑半衰期影響巨大。另外，本研究發現，不同地區間葡萄中藥劑的原始沉積量也有一定的差異，這可能與不同地區種植模式和各地施藥習慣有關。目前，葡萄田間用藥為稀釋倍數用藥，葡萄中藥劑殘留量直接與藥劑噴液量有關，而田間條件下作物生長狀態（大小、密度等）能直接影響噴液量，所以導致各地間的原始沉積量存在差異。

2.3最終殘留試驗

通過開展 38% 唑醚·啶酰菌懸浮劑在葡萄上防治灰霉病的10地田間試驗，研究兩種藥劑在葡萄中的殘留情況。 38% 唑醚·啶酰菌懸浮劑以1000倍液噴霧施藥3次，施藥間隔7d，末次施藥后7d和10d的最終殘留量檢測結果見圖1。采收間隔7d的葡萄樣品中吡唑醚菌酯的殘留量在 0.096～1.700mg/kg 之間，啶酰菌胺殘留量在 0.36～3.80mg/kg 之間。采收間隔10d樣品中吡唑醚菌酯的殘留量在 0.068～0.790mg/kg 之間，啶酰菌胺殘留量在 0.32～2.60mg/kg 之間。隨著采收時間的延長，葡萄樣品中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺殘留量逐漸減低。兩個不同采收間隔的葡萄樣品中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺最大殘留量均低于我國食品安全國家標準（GB2763—2021）中規定的葡萄中吡唑醚菌酯 （2mg/kg） 和啶酰菌胺（5mg/kg） 最大殘留限量。

表3吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄中的添加回收試驗參數

Table3Test parameters for recoveryof pyraclostrobinand boscalidin grapes

表4吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄的半衰期及原始沉積量

Table 4 Half-life and original deposition of pyraclostrobinand boscalid in grapes

圖1吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄不同采收間隔的殘留量Fig.1Residuesof pyraclostrobinand boscalid at differentharvestintervalsofgrapes

2.4膳食風險評估

目前，我國對藥劑進行膳食風險評估時，同時考慮此藥劑在我國所有的登記作物種類，并根據登記作物進行膳食分類，然后使用此類別中殘留最大值（限量或中值）進行評估。吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在我國分別登記了77種和20種作物（截至2024年12月）。分別對應水果等12個和5個膳食分類。按照本研究中距末次施藥后7d，葡萄中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺的規范殘留試驗中值分別為 0.79，1.6mg/kg° 結合我國食品安全國家標準中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺的ADI分別為 0.03mg/kg bw 和0.04mg/kgbw^[11]s 按照1.5中公式（1）和（2）計算（表5），吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在所有登記作物中風險商數RQc值為97.9% 和 70.0% ，均低于 100% 。因此，吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄中的殘留量對我國一般人群健康的長期膳食攝入影響在可接受的風險水平。

3討論與結論

在田間試驗條件下吡唑醚菌酯和啶酰菌胺在葡萄中的殘留消解符合一級動力學方程，半衰期分別為 3.5～ 9.6d和 2.9～8.8d， ，不同地區間差異明顯。農藥在環境中的降解是一個復雜的過程，除受物理化學因素如降雨、光照、濕度等影響外，作物狀態、栽培方式等也是影響其降解的關鍵因素[19-20]。通過不同試驗地了解藥劑消解情況，對于藥劑安全使用具有至關重要的作用。

表5吡唑醚菌酯和啶酰菌胺長期膳食攝入風險評估

Table5Risk assessment of long-term dietary intake of pyraclostrobin and boscalid

注：“—”表示此類未登記。

38% 唑醚·啶酰菌懸浮劑按照1000倍液噴霧施藥3次，施藥間隔7d，末次施藥后7d和10d葡萄樣品中吡唑醚菌酯和啶酰菌胺殘留量均低于我國制定的限量標準。吡唑醚菌酯和啶酰菌胺的長期膳食風險對成年人健康是可接受的。目前，我國膳食風險評估時采用的膳食數據為2002年制定，而當前居民膳食結構已發生了巨大變化。我國應盡快完善居民膳食數據調查，以便進行更加科學的膳食攝入風險評估。

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