馬齒莧乳膏對變應(yīng)性接觸性皮炎小鼠皮膚瘙癢及皮膚屏障功能的影響研究

中圖分類號 R965；R285.5 文獻標志碼 A 文章編號 00-0408（2025）-52-06

DOI 0.609/j.issn.00-0408.2025..

ABSTRACT OBJECTIVE To study the effects and mechanism of Portulaca oleracea cream on skin pruritus and barrier function in allergic contact dermatitis （ACD） mice. METHODS Low-concentration and high-concentration P. oleracea creams were prepared，with the P. oleracea extract solution（ （1g/mL ，calculated by crude drug）concentrations of 10% and 20% . Sixty BALB/c mice were randomly allocated into blank group，model group，Mometasone furoate cream group（positive control），blank matrix cream group，P. oleracea low-concentration and high-concentration cream groups. Except for blank group，ACD model was induced in each group using 2，4-dinitrochlorobenzene solution. The blank group and model groups received normal saline，while the remaining groups were treated with their respective creams，once a day，at a dose of approximately 0.5g per application， continuously for 14 days. At 24h post-final administration，skin lesions of mice were observed and scored；pathological changes of skin tissue were observed；serum levels of immunoglobulin E （IgE） and tumor necrosis factor- α （TNF- α ） were quantified. mRNA expression of MAS-related G protein-coupled receptors （including MrgprA3，MrgprC11，and MrgprD）in dorsal root ganglion （DRG） was assessed；while protein expressions of skin barrier function-related proteins Claudin-1 and Occludin in skin tissues were determined. RESULTS Compared with blank group，mice in the model group exhibited severe skin damage，characterized by loss of epidermal architecture，hyperkeratosis of the skin tissue，and the infiltration of a large number of inflammatory cells. The skin injury scores，as well as the serum levels of IgE and TNF- α ，and the mRNA expression levels of MrgprA3，MrgprC11，and MrgprD in DRG，were all significantly elevated compared to the blank group（ ΔPlt;0.05 or Plt;0.01 ）；in contrast，the protein expression levels of Claudin-1 and Occludin in the skin tissue were markedly reduced （ ?lt;0.05 ）. Compared with model group，mice in P. oleracea low-concentration and highconcentration cream groups demonstrated significant alleviation of skin damage，as evidenced by reduced epidermal hyperplasia， mitigated spongiosis in the dermis，and decreased infiltration of inflammatory cells；these quantitative indicators were almost significantly reversed （ Plt;0.05 or Plt;0.01 ）. No significant differences were observed in the aforementioned skin injuries， pathological alterations，or quantitative indicators between the blank matrix cream group and the model group. CONCLUSIONS P. . oleracea may ameliorate skin lesions and restore skin barrier function of ACD mice，the mechanism of which may be associated with downregulating mRNA expressions of MrgprA3，MrgprC11 and MrgprD in DRG，and up-regulating the protein expressions of Claudin-1 and Occludin in skin tissue.

KEYWORDS Portulaca oleracea；cream；allergic contact dermatitis；pruritus；skin barrier；inflammation

變 應(yīng) 性 接 觸 性 皮 炎（allergic contact dermatitis，ACD）是一種皮膚接觸過敏原引發(fā)免疫反應(yīng)所導(dǎo)致的炎癥性皮膚病[]，臨床可見皮膚出現(xiàn)紅斑、水腫、丘疹以及苔蘚樣病變，并伴隨劇烈的皮膚瘙癢[2]。流行病學(xué)顯示，ACD的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)約為 15%～20% ，且呈逐年上升趨勢[3]。ACD的病變部位常暴露于外，加之瘙癢帶來的強烈不適，給患者帶來極大的身心負擔(dān)。因此進一步探索ACD的發(fā)病機制，尋找有效的防治藥物，具有重要的臨床意義與社會價值。

目前研究報道，皮膚屏障受損是導(dǎo)致ACD發(fā)生、發(fā)展的重要因素[4]。皮膚屏障包括物理、化學(xué)、生物屏障，物理屏障由角質(zhì)形成細胞、細胞間脂質(zhì)和緊密連接（tight junctions，TJs）構(gòu)成。TJs 是相鄰細胞間跨膜蛋白所構(gòu)成的復(fù)雜結(jié)構(gòu)，其中，跨膜蛋白主要包括Claudins蛋白和Occludin蛋白；當TJs蛋白表達異常時，細胞連接松散、屏障通透性強，過敏反應(yīng)易發(fā)[5]。皮膚瘙癢是ACD重要的臨床表現(xiàn)之一，也是導(dǎo)致患者抓撓、加重ACD炎癥反應(yīng)和破壞皮膚屏障的重要因素[6]。研究表明，ACD中確定的瘙癢傳遞受體有組胺受體、蛋白酶激活受體、MAS 相 關(guān) G 蛋 白 偶 聯(lián) 受 體（MAS-related G proteincoupled receptors，Mrgprs）等[7]。在瘙癢傳遞中已被證實起重要作用的 Mrgprs 有 MrgprA、MrgprC、MrgprD 等[8]。上述受體通過協(xié)同作用促進瘙癢的發(fā)生發(fā)展。

馬齒莧，首載于《蜀本草》，其味酸、性寒，具有清熱解毒、祛濕消腫的功效，可消除因濕熱毒邪浸淫而引起的瘙癢。由此可知，馬齒莧對皮膚瘙癢具有一定改善作用，但其是否對ACD具有改善作用尚不明確。基于此，本研究制備馬齒莧乳膏，并通過構(gòu)建ACD小鼠模型，探討馬齒莧乳膏對ACD小鼠皮膚瘙癢和皮膚屏障功能的影響作用及機制，以期為ACD 臨床治療用藥開發(fā)提供實驗依據(jù)。

1 材料

1.1 主要儀器

BA210Digital型數(shù)碼三目攝像顯微鏡購自麥克奧迪實業(yè)集團有限公司；JXSTPRP-24L型組織研磨機購自上海凈信實業(yè)發(fā)展有限公司；HI-16KR型臺式高速冷凍離心機購自湖南可成儀器設(shè)備有限公司；DYY-7C 型電泳儀、WD-9413B 型凝膠成像分析儀購自北京久儀科技股份有限公司；ViiA-7 型實時熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)（qRT-PCR）儀購自美國ABI公司；Chemi DocTM型免疫蛋白質(zhì)印跡系統(tǒng)購自成都百樂科技有限公司。

1.2 藥物與試劑

馬齒莧藥材（批號20160125）購自北京本草方源藥業(yè)科技有限公司，經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院孫慶文教授鑒定為馬齒莧科植物馬齒莧 Portulaca oleracea L. 的干燥地上部分。丙酮溶液（批號20100701，純度 gt;99.5% ）購自重慶川東化工有限公司；2，4-二硝基氯苯（DNCB；純度 99% ，批號97-007）購自成都西亞化工股份有限公司；橄欖油（批號RH349091）購自上海易恩化學(xué)技術(shù)有限公司；糠酸莫米松乳膏（批號H20074090）購自華潤三九醫(yī)藥股份有限公司；蘇木素染液（批號CR22002071）購自武漢塞維爾生物科技有限公司；伊紅染液（批號YE2080）購自合肥博美生物科技有限責(zé)任公司；小鼠免疫球蛋白 E（immunoglobulin E，IgE）、腫瘤壞死因子 ∝ （tumor necrosis factor- α ，TNF- α ）酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）試 劑 盒（批 號 分 別 為 JM-02339M1、JM-02415M1）均購自江蘇晶美生物科技有限公司；高保真Ⅱ型Q選擇逆轉(zhuǎn)錄酶、PCR預(yù)混液（批號均為R233）均購自南京諾唯贊生物科技股份有限公司；鼠源Occludin、Claudin-1 ，β. -actin 單克隆抗體（批號分別為 27260-1-AP、27260-1-AP、20536-1-AP）均購自武漢三鷹生物技術(shù)有限公司；辣根過氧化物酶標記的山羊抗兔IgG二抗（批號BS13278）購自南京巴傲得生物科技有限公司。

1.3 實驗動物

本研究所用動物為SPF 級BALB/c 雄性小鼠，共60只，體重約 20g，7 周齡，購自北京華阜康生物科技股份有限公司，動物生產(chǎn)許可證號為SCXK（京）2019-0008。小鼠分籠給予標準飼料適應(yīng)性室溫喂養(yǎng)1周，自由飲水進食。本動物實驗方案經(jīng)過貴州中醫(yī)藥大學(xué)動物倫理委員會審批（倫理號為20220121）。

2 方法

2.1 馬齒莧乳膏的制備

將馬齒莧藥材粉碎，加入8 倍量純水， 90^°C 提取2h，過濾，藥液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至 1g/mL （以生藥量計），備用。參考文獻[9]方法制備馬齒莧乳膏，具體原料/用量見表1。具體制備方法：稱量油相原料置于 95^°C 水浴鍋中加熱融化，另稱量水相原料置于 95^°C 水浴鍋中加熱，然后用玻璃棒邊攪拌邊將水相加入油相中，并加入促滲劑、防腐劑，即可得到馬齒莧提取液含量為10%.20% 的乳膏[10]。空白基質(zhì)乳膏不加入馬齒莧提取液，其余同法制作而得。

表1 馬齒莧乳膏制備原料和用量表

2.2 造模、分組與給藥

將小鼠隨機分成空白組、模型組、糠酸莫米松乳膏組（陽性對照）、空白基質(zhì)乳膏組和馬齒莧低、高濃度乳膏組（馬齒莧提取液含量為 10%.20%） ），每組10 只。小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，于實驗前一天用剃毛器剃去頸背部約為 2cm×3cm 的毛發(fā)，依據(jù)文獻[11]方法建立ACD模型：實驗開始第1天，除空白組外，其他各組小鼠用25μL 7% DNCB溶液[以丙酮-橄欖油溶液 （4：1，V/V） 配制]涂抹于小鼠背部剃毛處以致敏，第2天重復(fù)同樣操作，第5 天以同樣方法在小鼠背部剃毛處涂抹 20μL1% DNCB 溶液進一步激發(fā)，第8、11 天重復(fù)第5 天操作；空白組小鼠同法涂抹等量不含DNCB 的丙酮-橄欖油溶液。根據(jù)中藥外用藥理實驗技術(shù)規(guī)范[12]，各給藥組及空白基質(zhì)乳膏組小鼠從實驗第1天開始涂抹相應(yīng)藥物或空白基質(zhì)，模型組和空白組小鼠涂抹等量生理鹽水，每天1次，每次約 0.5g ，連續(xù) 14d 。

2.3 小鼠背部皮膚損傷情況觀察

末次激發(fā) 24h 后，肉眼觀察各組小鼠背部皮膚損傷情況并拍照記錄，然后對皮膚損傷部位進行評分，具體評分標準[13]見表2。

表2 皮膚損傷評分標準

2.4 樣本采集

末次給藥 2n 后，各組小鼠吸入乙醚氣體麻醉，眼球取血后頸椎脫臼處死小鼠。血樣靜置1 h 后，于 4°C 條件下以 3000r/min 離心 20min ，取上清液置于－ 80^°C 冰箱凍存?zhèn)溆谩Ｈ⌒∈蟊巢科つw，刮去多余脂肪，將皮膚切成 0.5cm² 大小的圓片，置于 -80^°C 冰箱凍存?zhèn)溆谩Ｈ⊥瓯巢科つw后，取出小鼠背部皮膚下肌肉軟骨中的脊髓，在體式顯微鏡下，逐個摘取背根神經(jīng)節(jié)（dorsal rootganglia，DRG），置于－80 ℃冰箱凍存?zhèn)溆谩?/p>

2.5 小鼠皮膚組織病理學(xué)變化觀察

取“2.4”項下皮膚組織適量，于 4% 多聚甲醛中固定，經(jīng)梯度乙醇脫水、石蠟包埋、切片、脫蠟后，進行蘇木素-伊紅（HE）染色，采用顯微鏡觀察小鼠皮膚組織病理學(xué)形態(tài)變化。

2.6 小鼠血清中TNF- ??α∝?σα?ug?α 水平檢測

取“2.4”項下血清樣品（每組隨機選擇6只小鼠），按照ELISA試劑盒說明書進行檢測，采用酶標儀在 450nm 波長處檢測吸光度，并根據(jù)標準曲線計算樣品中TNF- σ?α∝ 、IgE水平。

2.7 小鼠DRG中MrgprA3、MrgprD、MrgprC11 mRNA表達水平檢測

采用qRT-PCR 法檢測。取“2.4”項下DRG 適量（每組隨機選擇3 只小鼠），加入Trizol 試劑研磨成漿，提取總RNA，然后將RNA 逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，以cDNA 為模板進行PCR。反應(yīng)條件為： 95^°C 預(yù)變性； 95^°C 變性 15s ，60^°C 退火延伸 60s ，循環(huán)40次。采用 2^-ΔΔCt 法，以 β. -actin為內(nèi)參基因計算目的基因表達水平。各基因引物由武漢華研生物科技有限公司合成，引物序列及擴增產(chǎn)物長度見表3。

2.8 小鼠皮膚組織中 Occludin、Claudin-1 蛋白表達水平檢測

采用Western blot法檢測。取“2.4”項下皮膚組織適量（每組隨機選擇3 只小鼠），剪碎，加入RIPA 裂解液低溫研磨，于 4°C 條件下以 12000r/min 離心 15min ，吸取上清液進行蛋白定量。蛋白變性處理后，進行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳，經(jīng)轉(zhuǎn)膜處理后，以脫脂奶粉封閉 1.5h ；加入 Occludin、Claudin-1 一抗（稀釋度分別為 1：1000，1：5000? ）， 4°C 孵育過夜；以TBST 充分洗滌，以辣根過氧化物酶標記的山羊抗兔IgG二抗（稀釋度為 1：1 000? ）孵育1 h，洗去二抗；滴加ECL發(fā)光顯影液顯色曝光，采用免疫蛋白質(zhì)印跡系統(tǒng)成像，采用Image J軟件分析蛋白條帶灰度值，以目的蛋白與內(nèi)參蛋白的灰度值比值，表示目的蛋白的表達水平。

表3 引物序列及擴增產(chǎn)物長度

2.9 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 26.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以 s 表示，多組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用LSD-t 檢驗（方差齊性時）或Dunnett T3 檢驗（方差不齊時）。檢驗水準 α=0.05 。

3 結(jié)果

3.1 馬齒莧對ACD小鼠背部皮膚損傷的影響

空白組大鼠無抓撓行為，皮膚無損傷。與空白組[皮膚損傷評分為（ （0.10±0.32） 分]相比，模型組小鼠抓撓行為增多，皮膚出現(xiàn)紅斑、腫脹、結(jié)痂等情況，組織損傷嚴重，皮膚損傷評分 （8.40±1.07） 分]顯著升高（ Plt; 0.01），提示造模成功。與模型組相比，糠酸莫米松乳膏組和馬齒莧低、高濃度乳膏組小鼠抓撓行為減少，皮膚損傷明顯減輕，皮膚損傷評分[分別為 （5.40±1.07） 、（5.50±1.58） ）、（ 4.70±1.42） ）分]均顯著降低（ （Plt;0.01） ；空白基質(zhì)乳膏組小鼠皮膚仍存在損傷，皮膚損傷評分（7.60±1.17） ）分]差異無統(tǒng)計學(xué)意義（ （Pgt;0.05） ）。與空白基質(zhì)乳膏組相比，馬齒莧低、高濃度乳膏組小鼠皮膚損傷評分均顯著降低（ ?Plt;0.05 ）。與糠酸莫米松乳膏組相比，馬齒莧低、高濃度乳膏組小鼠皮膚損傷評分差異均無統(tǒng)計學(xué)意義 ?Pgt;0.05 ）。結(jié)果見圖1。

圖1 各組小鼠皮膚損傷情況的觀察結(jié)果

A：空白組；B：模型組；C：糠酸莫米松乳膏組；D：空白基質(zhì)乳膏組；E：馬齒莧低濃度乳膏組；F：馬齒莧高濃度乳膏組。

3.2 馬齒莧對ACD小鼠皮膚病理學(xué)形態(tài)的影響

與空白組相比，模型組小鼠表皮結(jié)構(gòu)缺失，皮膚組織角化過度，真皮層出現(xiàn)海綿狀變性，皮下脂肪層內(nèi)可見大量炎癥細胞浸潤。與模型組相比，糠酸莫米松乳膏組和馬齒莧低、高濃度乳膏組小鼠表皮增厚及真皮層海綿樣變性緩解，炎癥細胞浸潤減輕，且馬齒莧高濃度乳膏組效果最佳；空白基質(zhì)乳膏組小鼠皮膚損傷情況無明顯緩解。結(jié)果見圖2。

紅色箭頭：皮膚各層結(jié)構(gòu)紊亂、缺失；藍色箭頭：皮膚組織肥厚角化，表皮突向下延伸呈杵狀；黑色箭頭：炎癥細胞浸潤。

圖2 各組小鼠皮膚病理學(xué)形態(tài)的觀察結(jié)果（HE染色）

3.3 馬齒莧對 ACD 小鼠血清中 IgE、TNF- α_αα_α 水平的影響

與空白組相比，模型組小鼠血清中IgE、TNF- α_?∝ 水平顯著升高（ Plt;0.05 ）。與模型組相比，糠酸莫米松乳膏組和馬齒莧低、高濃度乳膏組小鼠血清中IgE、TNF- α 水平均顯著降低 ?lt;0.05） ），空白基質(zhì)乳膏組小鼠血清中IgE、TNF- α 水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義 ?gt;0.05） ）。與空白基質(zhì)乳膏組相比，馬齒莧低、高濃度乳膏組小鼠血清中IgE，馬齒莧高濃度乳膏組小鼠血清中TNF- α 水平均顯著降低 （Plt;0.05） ）。與糠酸莫米松乳膏組相比，馬齒莧低、高濃度乳膏組小鼠血清中IgE、TNF- α 水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義 ?Pgt;0.05） ）。結(jié)果見表4。

表4 各組小鼠血清中IgE、TNF- α_αα_α 水平比較 6，pg/mL） ）

a：與空白組相比， Plt;0.05 ；b：與模型組相比， Plt;0.05 ；c：與空白基質(zhì)乳膏組相比， Plt;0.05， 。

3.4 馬齒莧對ACD小鼠DRG中MrgprA3、MrgprC11、MrgprD mRNA表達的影響

與空白組相比，模型組小鼠 DRG 中 MrgprA3、MrgprC11、MrgprD mRNA 表達水平均顯著升高（ Plt; 0.05）。與模型組相比，糠酸莫米松乳膏組和馬齒莧低、高濃度乳膏組小鼠DRG中上述指標表達水平均顯著降低（ （Plt;0.05） ，空白基質(zhì)乳膏組小鼠上述指標表達水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義 （Pgt;0.05） ）。與空白基質(zhì)乳膏組相比，馬齒莧低、高濃度乳膏組小鼠DRG中上述指標表達水平均顯著降低（ （Plt;0.05） ）。與糠酸莫米松乳膏組相比，馬齒莧低濃度乳膏組小鼠DRG 中上述指標表達水平均顯著升高（ （Plt;0.05） ，馬齒莧高濃度乳膏組小鼠DRG 中上述指標表達水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（ ??Pgt; 0.05）。結(jié)果見表5。

表5 各組小鼠DRG 中MrgprA3、MrgprC11、MrgprDmRNA表達水平比較 ）

a：與空白組相比， Plt;0.05 ；b：與模型組相比， Plt;0.05 ；c：與空白基質(zhì)乳膏組相比， Plt;0.05 ；d：與糠酸莫米松乳膏組相比， Plt;0.05 。

3.5 馬齒莧對ACD 小鼠皮膚組織中Claudin-1、Occlu‐din蛋白表達的影響

與空白組相比，模型組小鼠皮膚組織中Claudin-1、Occludin 蛋白表達水平均顯著降低（ （Plt;0.05） ）。與模型組相比，糠酸莫米松乳膏組和馬齒莧低、高濃度乳膏組小鼠皮膚組織中Claudin-1、Occludin蛋白表達水平均顯著升高 （Plt;0.05） ），空白基質(zhì)乳膏組小鼠皮膚組織中Claudin-1、Occludin 蛋白表達水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（ （Pgt;0.05） ）。與空白基質(zhì)乳膏組相比，馬齒莧低濃度乳膏組小鼠皮膚組織中Occludin 蛋白表達水平顯著升高（ ?Plt;0.05? ），馬齒莧高濃度乳膏組小鼠皮膚組織中Claudin-1、Occludin 蛋 白 表 達 水 平 均 顯 著 升 高（ Plt; 0.05）。與糠酸莫米松乳膏組相比，馬齒莧低濃度乳膏組小鼠皮膚組織中Claudin-1、Occludin蛋白表達水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義 （Pgt;0.05） ）；馬齒莧高濃度乳膏組小鼠皮膚組織中Claudin-1 蛋白表達水平顯著升高 （Plt;0.05） ），Occludin 蛋白表達水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義 （Pgt;0.05） ）。結(jié)果見圖3、表6。

圖3 各組小鼠皮膚組織中Claudin-1、Occludin蛋白表達的電泳圖

A：空白組；B：模型組；C：糠酸莫米松乳膏組；D：空白基質(zhì)乳膏組；E：馬齒莧低濃度乳膏組；F：馬齒莧高濃度乳膏組。

表6 各組小鼠皮膚組織中Claudin-1、Occludin蛋白表達水平比較 ）

a：與空白組相比， Plt;0.05：0： ：與模型組相比， Plt;0.05 ；c：與空白基質(zhì)乳膏組相比， Plt;0.05 ；d：與糠酸莫米松乳膏組相比， Plt;0.05 。

4 討論

瘙癢作為ACD 常見臨床癥狀之一，不僅為患者日常工作和生活帶來極大不便，也是加重慢性炎癥和皮膚屏障破壞的重要因素，并可導(dǎo)致ACD 進一步發(fā)展為嚴重的皮膚病[14]。目前，臨床上常用于治療ACD 的藥物，如糖皮質(zhì)激素類藥物、類固醇以及免疫抑制劑等雖有一定療效，但長期使用可能導(dǎo)致糖尿病、骨壞死、肥胖及皮膚萎縮等副作用[ ]，因此，尋找高效、安全的抗敏止癢藥物對ACD的防治具有重要意義。

馬齒莧作為中醫(yī)臨床實踐中常見的外用藥物，其化學(xué)成分多樣，包含黃酮類、萜類、甾體類、生物堿類等。這些化學(xué)成分具有抗炎、調(diào)節(jié)免疫、抗過敏及神經(jīng)保護等作用[16]。研究表明，馬齒莧能夠下調(diào)瘙癢因子白細胞介素 31（interleukin-31，IL-31）表達，從而抑制 IL-31 引發(fā)的瞬時受體電位香草酸亞型1及瞬時受體電位錨蛋白1激活，進而阻斷 Ca²⁺ 內(nèi)流而引起的癢覺信號傳遞[17]。臨床研究也表明，添加馬齒莧提取物的潤膚劑能明顯減輕兒童面部皮炎發(fā)生時產(chǎn)生的瘙癢[18]。以上研究提示，馬齒莧可能對ACD具有一定的療效。

研究發(fā)現(xiàn)，血清中IgE 的表達水平可作為過敏性患者臨床診斷的指標之一[19]。此外，IgE 作為瘙癢過程中的關(guān)鍵介質(zhì)，也是導(dǎo)致皮膚瘙癢發(fā)生的重要因素[20]。作為最常見的促炎細胞因子之一，TNF- α_?∝ 是炎癥反應(yīng)的啟動者或介質(zhì)，可以促進廣泛的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致皮膚增厚、水腫、瘙癢、發(fā)紅和發(fā)熱[21]。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)低、高濃度馬齒莧乳膏干預(yù)后，大鼠皮膚損傷減輕，血清中IgE、TNF- σ?α?α?α?α 水平降低，提示馬齒莧乳膏對ACD小鼠皮膚損傷及炎癥反應(yīng)具有明顯的改善作用。

Mrgprs 大部分表達于DRG 中，是與瘙癢有關(guān)的G蛋 白 偶 聯(lián) 受 體 之 一[22]。 Mrgprs 包 括 MrgprA ～G ，但MrgprA3、MrgprC11、MrgprD 這 3 個特殊的感覺神經(jīng)元群編碼與瘙癢相關(guān)[23]。本研究結(jié)果顯示，低、高濃度的馬齒莧乳膏可下調(diào)DRG中MrgprA3、MrgprC11、MrgprDmRNA表達水平，且空白基質(zhì)乳膏對上述基因的表達無影響，提示馬齒莧乳膏對ACD 小鼠瘙癢癥狀的改善作用，可能與抑制Mrgprs家族基因表達有關(guān)。

皮膚屏障是皮膚抵御外界刺激進入人體并防止內(nèi)部有益物質(zhì)流失的基礎(chǔ)保障，當其功能受損時往往會致使角質(zhì)層結(jié)構(gòu)缺失，細胞間脂質(zhì)成分紊亂，從而為外界刺激物及過敏原進入皮膚創(chuàng)造了有利條件[24]。TJs蛋白作為防止水分從表皮流失的屏障顆粒層中的TJs 復(fù)合體，主要由Claudins、Occludins 和連接黏附分子組成，其通過調(diào)節(jié)細胞連接通透性，發(fā)揮抵御外界刺激的作用[25]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ACD 小鼠皮膚組織中Claudin-1、Occludin蛋白表達明顯低于正常小鼠，表明ACD小鼠皮膚屏障功能受到破壞。而經(jīng)低、高濃度的馬齒莧乳膏干預(yù)后，小鼠皮膚組織中 Claudin-1、Occludin 蛋白表達明顯升高，且空白基質(zhì)乳膏對上述蛋白的表達無影響，提示馬齒莧乳膏對ACD 小鼠皮膚屏障功能的修復(fù)作用，與上調(diào)皮膚組織中TJs蛋白表達相關(guān)。

綜上所述，馬齒莧能夠改善ACD小鼠皮膚瘙癢，并修復(fù)皮膚屏障功能，其作用機制可能與下調(diào)小鼠DRG中 MrgprA3、MrgprC11、MrgprD mRNA 的表達，上調(diào)皮膚組織中Claudin-1、Occludin蛋白表達相關(guān)。

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