人LXR-LBD原核表達載體的構建及其在E.Coli中的表達

鞏　艷　葉治家　曹廷兵　彭家和　江　渝

摘要：從正常中國人的肝臟組織分離總RNA，采用RT-PCR獲得人的LXR-LBD cDNA，然后克隆至原核表達載體pET28a，構建高效原核表達質粒pET28a-LXR-LBD，序列分析表明正常中國人的LXR-LBD cDNA序列與Gene Bank報道的序列一致。把構建的pET28a-LXR-LBD質粒轉化大腸桿菌BL21（DE3），IPTG進行誘導表達，Western blot檢測表達產物，在相對分子質量35kD處有特異的蛋白表達條帶，表達蛋白以可溶性和包涵體方式存在。在N末端融合6×His純化標簽的表達產物用Ni²⁺-NTA離子交換樹脂進行純化，純化蛋白進行DSD-PAGE純度分析大于90％以上。

關鍵詞：LXR；LXR-LBD；克隆；表達

中圖分類號：Q786

文獻標識碼：A

文章編號：1007-7847(2005)01-0033-05