“葉綠體色素提取和分離”實驗的有效改進

“葉綠體色素的提取和分離”實驗利用葉綠體色素能溶于有機溶劑的特性將菠菜等綠葉中的色素提取出來，然后用紙層析法將其一一分離。但在實際操作過程中往往存在以下問題影響實驗效果：

(1)學生難以準確把握實驗中需加入的CaCO和Si的量，因而使得到的濾液中混有CaCO和SiO使收集得到的濾液渾濁，從而影響熒光現象的觀察。

(2)用毛細吸管劃出的濾液細線粗，且線條不均勻，影響層析效果。

(3)用毛細吸管劃出的濾液細線淡，色素含量少，影響層析效果。

(4)有些學校不一定具備自制毛細吸管的條件。

針對以上問題，我在實踐中不斷探索、不斷進取，對“葉綠體色素的提取和分離”實驗進行了有效的改進，并收到了顯著的效果。現將具體做法介紹如下。

1．實驗的改進

1.1過濾方法的改進

采用重復過濾的方法可提高葉綠體色素提取液中色素的純度和濃度。具體做法如下：

(1)取2個干凈試管置于試管架上，將起過濾作用的漏斗置于其中1個試管上；

(2)將研磨好的葉泥全部倒入漏斗中，用少量無水乙醇清洗研缽，并將清洗液一起倒入漏斗內；

(3)將漏斗移到另一干凈的試管上，將第一次過濾后得到的濾液倒入盛有葉泥的漏斗內再次進行過濾；

(4)這樣反復多次過濾后，漏斗內的葉泥殘渣由綠逐漸轉白，這說明葉泥中的色素已被充分提取出來，最終將得到澄清的濃綠色的色素提取液。

1.2劃線方法的改進

采用色素涂片的方法劃濾液細線，省時、省料且實驗效果明顯，具體做法如下：

(1)取2塊干凈的載玻片，在其中一塊載玻片上滴2滴色素提取液；

(2)取另一塊載玻片像制作血涂片那樣將2滴色素提取液推平，制成一張葉綠體色素涂片；

(3)略等片刻(約30左右)，取一張濾紙條在距末端1.5cm處對折，得到一對折線；

(4)用對折后的濾紙小心將載玻片上的色素全部擦干凈(操作時始終使對折線與載玻片相垂直)；

(5)當載玻片上的色素被濾紙擦干凈后，將對折線反折后拉平，即可看到在距濾紙條下端1.5cm處有一條深綠色的濾液細線

2．實驗改進后的優點

(1)采用多次重復過濾的方法，有利于將葉泥中色素充分提取出來，可提高色素提取液中色素的濃度，和純度。

(2)利用涂片法劃濾液細線，無需拉制毛細吸管，無需重復劃線，只需將濾紙折線在涂片上來回一擦即可完成“劃線”，省料、省工、省時。

(3)利用涂片法得到的濾液細線均勻細直。

實踐證明利用涂片法得到的濾液細線中色素含量高，顏色深，紙層析效果十分明顯。

3．涂片法劃線的原理

由于葉綠體色素具有不溶于水而溶于有機溶劑的特性，因此將2滴色素提取液制成涂片后，由于涂片上的無水乙醇很容易揮發，而溶于其中的色素卻均勻地殘留在載玻片上，又因提取液中含有的極少量水分(來自細胞液)，保證了涂片上色素的濕度，所以載玻片上的色素不會因為無水乙醇的揮發而干燥，這樣在略等片刻之后，即可將載玻片上的色素全部擦在濾紙折線上，既保證了色素的含量又保證了濾液細線的均勻細直，再進行層析實驗，效果非常理想。