健兒口服液質量標準研究

摘要：目的：制定健兒口服液質量標準。方法：采用薄層色譜法鑒別陳皮、黃芪，高效液相色譜法測定橙皮苷的含量。結果：TIC色譜能明顯檢出陳皮、黃芪，含量測定線性關系良好，橙皮苷的平均回收率為97.53％，RSD＝1.31％。結論：本方法簡便，準確，重現性好，可供本品質量控制。

關鍵詞：健兒口服液；橙皮苷；HPLC；TLC

中圖分類號：R927.2

文獻標識碼：A

文章編號：1007－2349(2007)07－0040－02

健兒口服液由陳皮、山楂、黃芪、麥芽等11味中藥組成，具有益氣健脾，調和營衛之作用，對小兒脾虛兼痰，食欲不振，厭食，反復感冒咳喘，病后體虛等有較好療效。為控制產品質量，確保臨床療效，本文建立了陳皮、黃芪的薄層色譜鑒別，并采用高效液相色譜法對主要藥味陳皮的主要成分橙皮苷的含量進行含量測定。

1 儀器、試劑與樣品

1．1儀器島津LC－10AT高效液相色譜儀，SPD－10Avp紫外檢測器，SCL－10Avp色譜工作站。Meter AF240電子天平。

1．2試藥硅膠G，青島海洋化工廠，甲醇為色譜純，其他均為分析純。黃芪甲苷(中國藥品生物制品檢定所，批號：0781—200210，供鑒別用)、橙皮苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號：110721—200512，供含量測定用)。健兒口服液為本院生產，批號：061128、061122、061125。

2 薄層色譜鑒別

2．1陳皮的鑒別取本品5ml，水浴蒸干，殘渣加甲醇10ml，超聲40rain，放冷，濾過，濃縮至約1ml，作為供試品溶液。另取橙皮苷對照品，加甲醇制成每iml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。按處方要求制成缺陳皮的陰性供試品，同供試品溶液的制備方法，制成陰性對照溶液。吸取上述供試品及對照品溶液，及陰性對照溶液各2μ1，分別點于同一用0.5％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯：甲醇：水(100:17:13)為展開劑，展開至3cm，取出，晾干，再以甲苯：乙酸乙酯：甲酸：水(20:10:1:1)的上層溶液為展開劑，展開至8cm，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照液則無，見圖l。

2. 2黃芪的鑒別取本品20ml，水浴蒸干，加甲醇30ml，超聲提取lh，濾過，濾液加于已處理好的中性氧化鋁柱(100～120目，5g，內徑10～15mm)，用40％甲醇lOOml洗脫，收集洗脫液，水浴蒸干，殘渣加水30ml，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗滌2次，每次20ml，棄去水液，正丁醇蒸干，殘渣加甲醇0.5ml溶解，作為供試品溶液。取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含1rng的溶液。取缺黃芪的陰性供試品，同供試品溶液的制備方法，制成陰性對照溶液。吸取上述3種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿：乙酸乙酯：甲醇：水(20:40:22:10)10℃以下放置后的下層溶液為展開劑展開，取出，晾干。噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。在日光下檢視，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點，陰性對照液則無。見圖2。

2．3橙皮苷的含量測定

2．3．1對照品的制備精密稱取橙皮苷對照品10.5mg，置25ml棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，制成每1ml含42gg的溶液，即得。

2．3．2供試品溶液的制備精密量取樣品10ml置50ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，離心，精密量取5ml，置50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2．3．3色譜條件色譜柱：大連依利特Hypersl0DS2(150mmX4.6mm，5μm)；流動相：甲醇：冰醋酸：水(32:4:64)；流速：1ml／min柱溫：30℃；檢測波長：283nm；理論塔板數按橙皮苷計算應不低于2000。

2．3．4線性關系考察分別精密吸取對照品溶液3，5，7，10，12μl，按上述色譜條件進樣測定，以峰面積積分值Y為縱坐標，對照品量X(μg)為橫坐標，作線性回歸，得回歸方程Y=1988666.9X－5062.9，r=0.9999，結果表明橙皮苷在0.126μg～0.504gg范圍內線性關系良好。

2．3．5精密度試驗精密吸取對照品溶液10μl，連續進樣5次，按上述色譜條件測定，橙皮苷峰面積積分值的平均值為834943.6，相對標準偏差RSD=0.24％。

2．3．6重復性試驗取同一批號樣品(061128)5份，分別按樣品測定方法測定。結果：橙皮苷平均含量為0.81mg／ml，RSD＝1.20％．

2，3．7空白試驗取缺陳皮的陰性對照溶液，按供試品溶液制備方法制備，進樣，測定，結果表明處方中其他藥味無干擾。見圖3。

2．3．8穩定性試驗取供試品溶液，分別在0，1，6，12，24h進樣(10tμl)，共進樣5次，按上述色譜條件分別測定，峰面積積分值RSD＝1.31％，表明供試品溶液在24h內基本穩定。

2．2．9加樣回收率試驗取已知含量的供試品(批號：061128)2ml，精密加入一定量橙皮苷對照品，按供試品溶液制備方法制備，依法測定，計算回收率，結果見表1。

2．3．10樣品測定分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定，以外標法計算含量，結果見表2，色譜圖見圖3。

3 討論

橙皮苷的含量測定試驗參考文獻陳皮項下橙皮苷的含量測定方法，采用流動相甲醇：冰醋酸：水(32:4:64)，流動相甲醇：冰醋酸：水(30:4:66)，甲醇：0.5％醋酸(39:61)，結果橙皮苷采用流動相甲醇：冰醋酸：水(32:4:64)可以基線分離不受其他組分干擾，分離效果好，準確度高。