通冠膠囊對高脂大鼠血脂水平和血漿炎癥因子的影響

摘要：目的 探討通冠膠囊對高脂飼料飼養(yǎng)大鼠血脂水平和炎癥因子的影響。方法 雄性SD大鼠，先進行預實驗，初步總結出建立高脂血癥大鼠模型和維持高脂血癥大鼠模型的方法；照此方法。正式建立高脂血癥大鼠模型；然后把40只大鼠隨機分為4組，空白對照組、高脂對照組、通冠膠囊組和立普妥組。空白對照組予生理鹽水灌胃，高脂對照組予生理鹽水和脂肪乳劑灌胃，通冠膠囊組予通冠膠囊和脂肪乳劑灌胃，立普妥組予立普妥和脂肪乳刑灌胃，連續(xù)灌胃12周。干預后對大鼠取材，了解血脂和血漿炎癥因子的變化。結果 通冠膠囊組與高脂對照組比較血清總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL－C)水平升高和高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)下降(P＜0.01)；立普妥降低總膽固醇作用較通冠膠囊明顯(P＜0.05)，但通冠膠囊升高HDL－C作用比立普妥明顯(P＜0.05)。高脂血癥模型造成后，其血漿炎癥因子濃度明顯增高(P＜0.01)；通冠膠囊降低血漿C－反應蛋白(CRP)和腫瘤壞死因子－α(TNF－α)濃度。結論 高脂血癥模型造成后，大鼠體內血脂和血漿炎癥因子明顯增高，通冠膠囊具有降低血脂和炎癥因子濃度的作用。

關鍵詞：通冠膠囊；高血脂；大鼠；炎癥因子

中圖分類號：R589.2 R285.6 文獻標識碼：A 文章編號：1672－1349(2007)10－0951－02

動脈粥樣斑塊形成是冠心病的發(fā)病基礎，其發(fā)生和發(fā)展有眾多因素參與，目前對冠心病的病理生理學有了成熟的認識，其內科治療也有了飛速的發(fā)展，經皮冠狀動脈成形術(PTCA)以及藥物支架的使用，連續(xù)開創(chuàng)了心臟病學治療史上的新紀元。血脂增高是形成動脈粥樣硬化的主要因素，血脂增高時動脈粥樣硬化形成的慢性過程其實就是大量炎癥因子對內皮細胞的侵蝕過程，從而造成內皮細胞的破壞，中層平滑肌細胞的大量增生，即形成動脈粥樣硬化斑塊。近年來藥物支架的使用，使支架術后再狹窄發(fā)生率明顯減少，為支架時代帶來了新的曙光。支架藥物(雷帕霉素、紫杉醇等)主要作用在支架植入的中遠期抑制炎癥因子的過度表達，從而達到預防再狹窄的目的。由此可知無論是在冠心病形成的初期還是介入干預后的再狹窄，炎癥因子都扮演了重要的角色。

1 材料與方法

1．1 實驗動物和藥物 動物：二級SD大鼠40只，(180～220)g，雄性，由廣州中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，合格證號：衛(wèi)動宇第220010016號。藥物與試劑：通冠膠囊和立普妥，由廣東省中醫(yī)院中心藥房提供；膽固醇，廣州器化醫(yī)療設備有限公司，進口分裝，批號：041118；脫氧膽酸鈉，中國醫(yī)藥集團上海化學試劑公司，進口分裝，批號：F20030714；丙基硫氧嘧啶片，廣東華南藥業(yè)有限公司，批號：040902；吐溫80，廣州器化醫(yī)療設備有限公司，進口分裝，批號：050112；1－2丙二醇，廣州化學試劑廠，批號：200402013；豬油，自制。

1．2 動物分組及給藥方法

1．2．1 預試驗分組 20只大鼠隨機被分為正常組(10只)和實驗組(10只)。正常組：生理鹽水灌胃1 mL/100 g，予正常飼料喂養(yǎng)；實驗組：灌脂肪乳劑1 mL/100 g，每周進行1次稱重。

1．2．2 正式造模 經預實驗后，引進大鼠40只，對大鼠進行標記，編號，稱重。隨機抽取10只作為空白對照組，余30只進行高脂造模，按1 mL/100 g進行灌胃，要求脂肪乳為即用即配，規(guī)定每天16:00行灌胃，預定時間為2周后檢測血脂。

1．2．3 藥物分組 高脂對照組：上午生理鹽水灌胃和下午行脂肪乳灌胃1 mL/100g通冠膠囊組(水提液)：上午行屈冠膠囊灌胃0.72 g/100 g=0.72 mL/100 g，下午行脂肪乳灌胃1 mL/100 g；立普妥組：上午行立普妥灌胃0.3 mg/100 g＝1.5 mL/100 g，下午行脂肪乳灌胃1 mL/100 g。

1．3 觀察指標及測定方法 血脂包括總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL－C)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)；炎癥因子：C反應蛋白(CRP)、腫瘤壞死因子－α(TNF－α)、白細胞介素－6(IL－6)。在實驗過程中每天觀察大鼠進食、飲水、活動等情況并做記錄，每周稱體重1次。中藥干預3個月后對大鼠進行最后取材，在實驗結束前24 h下午開始禁食，實驗結束時心臟取血處死大鼠。取材時器材有：20 mL注射器100支，剪刀2把，鑷子4把，10％水合氯醛100 mL，裝有10％甲醛溶液的容器若干，肝素管和干燥管各100支，EP管若干。由動物試驗中心專門人員進行心臟采血，如血量過少，可再行腹主動脈采血，取大鼠最大血量；測定方法：TC，TG，HDL－C，LDL－C按Friedewald公式計算法計算；炎癥因子采用酶聯免疫吸附法。

1．4 統(tǒng)計學處理 建立數據庫，采用SPSS 11.0軟件進行數據處理，采用多個樣本兩兩比較的秩和檢驗(Mann－Whitney U法)。

2 結 果

2．1 對高脂血癥大鼠血脂的影響 經脂肪乳劑灌胃后，高脂對照組膽固醇和低密度脂蛋白明顯升高，提示用長期脂肪乳劑灌胃可成功建立高脂血癥動物模型；通冠膠囊組和高脂對照組比較，通冠膠囊能夠明顯降低TC，LDL－C；立普妥組和通冠膠囊組比較，立普妥降低總膽固醇作用較通冠膠囊明顯，但通冠膠囊升高HDL－C作用比立普妥明顯。詳見表1。

2．2 對高脂血癥大鼠炎癥因子濃度的影響．高脂對照組的血漿炎癥由子濃度均比空白對照組高(P＜0.05或P＜0.01)。通冠膠囊組和高脂對照組比較，通冠膠囊明顯降低血漿CRP和TNF－α濃度，但TL－6沒有變化；通冠膠囊組和立普妥組比較，兩者在降低CRP和TNF－α濃度上無明顯差異(P＞0.05)；立普妥在降低IL－6濃度方面比通冠膠囊作用強(P＜0.01)。詳見表2。

3 討 論

冠心病即冠狀動脈粥樣硬化性疾病，動脈硬化、內皮損傷、平滑肌細胞增生，最終導致了冠狀動脈管腔的狹窄。動脈粥樣硬化是冠心病和多種心血管疾病的病理基礎，而高脂血癥又是動脈粥樣硬化形成的重要高危因素之一。血清TC和TG升高是高脂血癥的重要指標，血清膽固醇水平是冠心病危險的重要決定因素。

實驗室及臨床資料顯示，動脈粥樣硬化不僅是一種脂肪沉積疾病，機體炎癥在粥樣血栓的形吃及發(fā)展中起關鍵作用。單核細胞、巨噬細胞、T淋巴細胞在動脈壁的粥樣斑塊中聚集，有大量炎癥細胞浸潤的斑塊肩部是急性冠脈綜合征(ACS)時最易發(fā)生破裂的部位。TNF－α具有抗腫瘤、抗病毒、抗菌和抗寄生蟲作用，并且也參與介導一些嚴重的病理生理過程。新近研究表明，TNF－α參與冠心病、動脈粥樣硬化，心肌炎、高血壓、心力衰竭的發(fā)生和發(fā)展過程。IL－6是重要的炎癥細胞因子，有研究表明：IL－6誘導肝臟產生急性期快速反應蛋白，可促進心肌細胞表達細胞間黏附分子－1(ICAM－1)，增強中性粒細胞和心肌細胞的黏附作用，促進中性粒細胞釋放氧自由基，加重心肌細胞損傷。CRP是一種急性期反應蛋白，當機體有急性炎癥、創(chuàng)傷和冠心病時，此蛋白會明顯升高。越來越多的證據支持局部或全身炎癥在動脈粥樣硬化及其并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展中起到重要作用。國外已有不少學者進行了多角度、前瞻性的研究，一致認為CRP是冠心病形成的獨立危險因子之一。

許多研究表明，中藥可以調節(jié)紊亂的細胞免疫功能，控制炎癥的發(fā)展，調節(jié)免疫應答中細胞因子(如TNF－α，IL－6)的雙重作用，有助于免疫功能的恢復。導師張敏州教授結合多年臨床經驗研制了通冠膠囊作為冠心病治療的常用藥物，該膠囊由北芪、丹參、水蛭等組成，其中北芪益氣以助血行，為主藥；丹參、水蛭活血破瘀通絡為輔藥；諸藥合參，具有益氣活血、破瘀通絡的功效，在臨床中體現了明顯的治療效果。目前對通冠膠囊的研究正逐漸深入，已有的研究體現在通冠膠囊對冠狀動脈介入術后血小板功能、血液流變學、血脂、血瘀證積分的研究、凝血纖溶系統(tǒng)以及心功能和改善病人術后生命質量的研究。通過本研究，可以得出通冠膠囊具有調節(jié)血脂和炎癥因子水平的作用，這為臨床的廣泛應用奠定了理論基礎。

本文編輯 郭懷印