天舒膠囊對(duì)小鼠軟腦膜微循環(huán)影響的研究

摘要：目的 探討天舒膠囊對(duì)小鼠軟腦膜微循環(huán)的影響。方法 采用XTW－CTV微循環(huán)彩色電視顯微鏡觀察小鼠顱骨開(kāi)窗后軟腦膜微循環(huán)在外來(lái)去甲腎上腺素作用下的變化情況。結(jié)果 不同劑量天舒膠囊與陽(yáng)性對(duì)照藥物雙氫麥角堿(喜得鎮(zhèn))連續(xù)灌胃7d后均可使小鼠軟腦膜微動(dòng)脈對(duì)去甲腎上腺素的反應(yīng)性增強(qiáng)。結(jié)論 天舒膠囊能改善小鼠軟腦膜微循環(huán)。

關(guān)鍵詞：天舒膠囊；去甲腎上腺素；軟腦膜微循環(huán)

中圖分類號(hào)：R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1672－1349(2007)10－0967－03

中草藥對(duì)血管性癡呆(VD)模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力有良好的改善作用，單味的天麻、川芎等對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大腦微循環(huán)具有改善作用。本研究用含有天麻、川芎等的天舒膠囊給小鼠灌胃，采取顱骨開(kāi)窗法直接觀察喂飼7d后小鼠腦膜微循環(huán)的變化，旨在于探討天舒膠囊治療血管性癡呆的療效及機(jī)制。

1 材料與方法

1．1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠60只，體重18 g～22 g，鼠齡45 d～50 d，雌雄各半。由瀘州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科提供，合格證號(hào)為：川醫(yī)動(dòng)字第2401115。隨機(jī)分為天舒膠囊大劑量組(CLH組)、天舒膠囊中劑量組(CLM組)、天舒膠囊小劑量組(CLL組)雙氫麥角堿(喜得鎮(zhèn))陽(yáng)性藥物對(duì)照組(XDZ組)、空白對(duì)照組(NS組)，每組12只。

1．2 藥品與試劑 天舒膠囊：由天麻、川芎等組方而成，由江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，每粒0.34 g。喜得鎮(zhèn)為陽(yáng)性對(duì)照藥，由天津化津制藥廠與北京諾華制藥廠合作生產(chǎn)，批號(hào)：031057。重酒石酸去甲腎上腺素為上海禾豐制藥有限公司產(chǎn)品，批號(hào)：0360602。牙托粉由瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院口腔科提供。

1．3 儀器 XTW－CTV微循環(huán)彩色電視顯微鏡，北京泰克儀器有限公司生產(chǎn)。

1．4 實(shí)驗(yàn)條件 在瀘州醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，室溫控制在26℃。

1．5 給藥方法 給藥時(shí)間為7d。天舒膠囊配成0.02 g/mL，0.04 g/mL和0.08 g/mL 3種濃度的溶液，陽(yáng)性對(duì)照藥物喜得鎮(zhèn)配成0.04 mg/mL的溶液。CLH組按0.8 g/kg灌胃0.08 g/mL濃度的藥物；CLM組按0.4 g/kg灌胃0.04 g/mL濃度的藥物；CLL組按0.2 g/kg灌胃0.02 g/mL濃度的藥物；XDZ組按4×10^-4 g／kg灌胃0.04 mg/mL濃度的喜得鎮(zhèn)溶液；NS組灌胃生理鹽水，給藥容積為1 mL/100 g。

1．6 動(dòng)物顱窗制備 小鼠用1％戊巴比妥鈉(3 mL/kg)麻醉后，腹臥位頭部固定，顱頂正中皮膚“T”型切口，以矢狀縫外3thin，冠狀縫下3 mm為中心，用手術(shù)刀片掀開(kāi)顱骨，暴露軟腦膜，形成一個(gè)直徑約5 mm的顱窗，用牙托粉在周圍形成圍堤，加入人工腦脊液20 μL，術(shù)后穩(wěn)定30 min后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。整個(gè)過(guò)程保持動(dòng)物體溫37℃，室溫26℃。

1．7 微循環(huán)觀察 將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于微循環(huán)顯微鏡下，選擇直徑為30 μm～50 μm微動(dòng)脈血管，穩(wěn)定30 min后，測(cè)得并記錄管徑大小，再滴加0.1％去甲腎上腺素10 μL至顱窗中，借助于JS接目測(cè)微計(jì)連續(xù)觀察加0.1％去甲腎上腺素后3 min，9 min時(shí)微動(dòng)脈管徑大小的變化。同時(shí)觀察正常軟腦膜及滴加0.1％去甲腎上腺素后微動(dòng)脈循環(huán)的血色、流態(tài)、每視野交織網(wǎng)點(diǎn)數(shù)目。

1．8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，進(jìn)行單因素方差分析；組間兩兩比較，方差齊時(shí)用SNK法，方差不齊時(shí)用Dunnett，St分析，由SPSS 11.0版軟件完成。檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)α＝0.05。

2 結(jié) 果

2．1 天舒膠囊對(duì)小鼠軟腦膜微動(dòng)脈血管管徑的影響 天舒膠囊各劑量組與XDZ組均能明顯擴(kuò)張小鼠軟腦膜微動(dòng)脈，與NS組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。詳見(jiàn)表1。

2．2 天舒膠囊對(duì)小鼠軟腦膜微血管交織網(wǎng)點(diǎn)數(shù)的影響 天舒膠囊各劑量組與XDZ組小鼠腦膜微血管交織網(wǎng)點(diǎn)數(shù)均明顯增加，與NS組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。詳見(jiàn)表2。

2．3 天舒膠囊對(duì)小鼠軟腦膜微血管血瘀模型流態(tài)及血色的影響 天舒膠囊各劑量組與XDZ組對(duì)小鼠軟腦膜血液流態(tài)有改善作用，能使血色變紅，與NS組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)。詳見(jiàn)表3、表4。

3 討 論

就血管性癡呆產(chǎn)生的病理生理而言，目前普遍認(rèn)為，病人癡呆的程度與諸多因素(包括腦缺血的部位與容積、腦萎縮的程度，以及血流動(dòng)力學(xué)改變、血中一氧化氮和氧自由基的濃度等)有關(guān)，但腦循環(huán)障礙是導(dǎo)致本病的癥結(jié)所在仍然是人們最主要的共識(shí)。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為，血管性癡呆的發(fā)生與大腦皮質(zhì)的多發(fā)性病變，尤其是左側(cè)大腦皮質(zhì)及丘腦、海馬的缺血缺氧性損傷密切相關(guān)。Nagata等觀測(cè)了VD病人癡呆發(fā)生及其程度與皮質(zhì)腦血流、腦氧代謝的關(guān)系。研究結(jié)果表明，病人癡呆程度與兩者呈正相關(guān)。Scheel等經(jīng)單光亍發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層掃描對(duì)VD病人的腦血流研究發(fā)現(xiàn)，其基底核及額葉的腦血流量較SD病人顯著降低，且病人的額葉、顳葉，尤其是丘腦、基底核等部位的腦血流及糖代謝率較其他部位顯著下降。有效地糾正或改善腦循環(huán)障礙、進(jìn)而恢復(fù)腦細(xì)胞的能量代謝是促進(jìn)VD病人康復(fù)的重要途徑。軟腦膜血管網(wǎng)作為腦血管床反映的重要部分，能夠基本反應(yīng)腦組織的供血情況，可通過(guò)對(duì)活體動(dòng)物軟腦膜的觀察來(lái)研究腦微循環(huán)的動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)而觀察藥物對(duì)腦循環(huán)的影響與改善作用。中藥天麻、川芎等對(duì)腦血管疾病治療的臨床實(shí)驗(yàn)及動(dòng)物研究多有報(bào)道，而作為諸藥的復(fù)方制劑的相關(guān)研究尚無(wú)報(bào)道。去甲腎上腺素作為一種血管活性物質(zhì)，能引起腦血管包括軟腦膜微血管的收縮。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明天舒膠囊各劑量組均可改善由去甲腎上腺素所致的小鼠軟腦膜局部微循環(huán)障礙，可使微血管擴(kuò)張，血流增快，每視野交織網(wǎng)點(diǎn)數(shù)增多，同時(shí)對(duì)血流流態(tài)也有一定的改善作用，使血色明顯變紅。可見(jiàn)，天舒膠囊能擴(kuò)張腦血管，增加腦血流量，改善小鼠軟腦膜微循環(huán)，從而發(fā)揮其對(duì)血管性癡呆的治療作用。

本文編輯 王雅潔