血壓平對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血管重塑的作用

摘要：目的 觀察復(fù)方中藥血壓平對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)血壓、血清一氧化氮(NO)含量及動(dòng)脈血管重塑的影響，井探討其作用機(jī)制。方法 將SHR30只隨機(jī)分為5組，每組6只，分別為SHR對(duì)照組、血壓平低劑量組、血壓平中劑量組、血壓平高劑量組、達(dá)爽對(duì)照組，另隨機(jī)選6只WKY大鼠作為對(duì)照組。測(cè)定血壓及血清中NO含量，解剖分離其主動(dòng)脈，觀察其形態(tài)，測(cè)定動(dòng)脈管壁與腔徑之比。結(jié)果 血壓平可降低SHR血壓，升高血清NO含量，與SHR對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，且與藥物劑量相關(guān)：血壓平高劑量組優(yōu)于達(dá)爽對(duì)照組(P＜0.05)。結(jié)論 血壓平有降壓及逆轉(zhuǎn)高血壓大鼠血管重塑的作用。

關(guān)鍵詞：血壓平；自發(fā)性高血壓；一氧化氮；血管重塑

中圖分類(lèi)號(hào)：R544.1 R285.6 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672－1349(2007)10－0955－04

高血壓血管重塑(vaSCular remondeling，VR)是近幾年隨著基礎(chǔ)心血管病學(xué)研究發(fā)展提出的高血壓靶器官損害中的一種新機(jī)制，它既是高血壓的重要病理變化，又是高血壓維持、惡化的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。為此，高血壓病的臨床治療目標(biāo)已從僅限于控制血壓水平，提高到了逆轉(zhuǎn)血管重塑的高度。血壓平是具有降壓作用的中藥復(fù)方制劑，前期研究提示對(duì)高血壓心臟重塑有作用，本研究即觀察血壓平對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)血壓、血清一氧化氮(NO)含量、主動(dòng)脈血管重塑的影響，并探討其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1．1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與藥品 SHR 30只，WKY大鼠6只，雄性，7周齡，由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供。血壓平由鉤藤、漢防己、川牛膝、桑寄生、夜交藤、澤瀉、生地7味中藥組成的復(fù)方制劑，由湖北省中醫(yī)院藥劑科提供，批號(hào)：20050111，每毫升含復(fù)方生藥1.512 g。鹽酸咪達(dá)普利片(達(dá)爽)，由天津田邊制藥有限公司提供，批號(hào)：041008)。將達(dá)爽藥片碾成細(xì)粉，加少量蒸餾水超聲溶解后配制成濃度為30 mg％的藥液。

1．2 主要儀器及試劑 NO試劑盒(南京建成生物工程研究所提供)，戊巴比妥鈉由中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上海化學(xué)試劑公司提供(進(jìn)口分裝)，5417R－低溫高速離心機(jī)(德國(guó)EPPENIX)RF公司產(chǎn)品)，722－分光光度計(jì)(上海第三分析儀器廠)，LMS－2B型二導(dǎo)生理記錄儀(成都儀器廠)，微型動(dòng)物血壓儀(湖南醫(yī)科大學(xué)心血管生理研究室)。

1．3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥方法 30只SHR隨機(jī)分為5組，每組6只，分別為SHR對(duì)照組、血壓平低劑量組、血壓平中劑量組、血壓平高劑量組、達(dá)爽對(duì)照組。WKY大鼠6只為正常對(duì)照組。

WKY對(duì)照組與SHR對(duì)照組分別予蒸餾水10 mL/kg灌胃；血壓平低劑量組予濃度為37.8％血壓平10 mL/kg灌胃，按3.78 g/kg劑量；血壓平中劑量組予濃度為75.6％中藥10 nd/kg灌胃，按7.56 g/kg劑量；血壓平高劑量組予濃度為151.2％中藥10 mL/kg灌胃，按15.12 g/kg劑量；達(dá)爽對(duì)照組予濃度為30％的達(dá)爽藥液10 mL/kg灌胃。所有大鼠均每天灌胃1次，連續(xù)3個(gè)月。

1．4 標(biāo)本的處理 給藥3個(gè)月后，大鼠測(cè)量血壓，準(zhǔn)確稱(chēng)重后眼眶放血2 mL，大鼠以戊巴比妥鈉(30 mg/kg)腹腔注射麻醉，迅速解剖，分離切取腸動(dòng)脈、主動(dòng)脈，10％甲醛溶液固定，乙醇梯度脫水，浸蠟包埋，置冰箱冷藏備用。

1．5 觀察指標(biāo) 大鼠血壓，血清NO含量測(cè)定，血漿中血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)，腹主動(dòng)脈光鏡下形態(tài)觀察，腸動(dòng)脈中膜厚度與管腔直徑之比。

1．6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，采用SPSS 12.0版統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因數(shù)方差分析，并行多個(gè)樣本均數(shù)的兩兩比較，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2．1 動(dòng)物一般情況 至實(shí)驗(yàn)絡(luò)束，動(dòng)物無(wú)一例死亡。其中，達(dá)爽對(duì)照組有兩只大鼠在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始第1周出現(xiàn)輕微咳嗽，未予特殊處理，后逐漸耐受。SHR對(duì)照組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中常較其他幾組大鼠煩躁，并時(shí)常出現(xiàn)頭部豎毛現(xiàn)象。

2．2 血壓平對(duì)大鼠收縮壓的影響 用藥3個(gè)月后，測(cè)量各組收縮壓值結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與WKY對(duì)照組比較，SHR對(duì)照組及血壓平低、中劑量組血壓均高(P＜0.01)，而血壓平高劑量組與達(dá)爽對(duì)照組經(jīng)治療后血壓水平與WKY對(duì)照組相當(dāng)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與SHR對(duì)照組比較，藥物治療各組收縮壓均降低，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；血壓平中、高劑量組、達(dá)爽對(duì)照組與血壓平低劑量組比較血壓降低效果更明顯(P＜0.01)，高劑量組、達(dá)爽對(duì)照組與中劑量組比較，血壓降低(P＜0.01)，血壓平高劑量組與達(dá)爽組比較，降壓效果相當(dāng)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。血壓平低劑量、中劑量與高劑量組血壓隨中藥劑量增高而降低幅度更大，各組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。各藥物治療的降壓效果由高到低依次是達(dá)爽＞血壓平高劑量＞血壓平中劑量＞血壓平低劑量。詳見(jiàn)表1。

2．3 血壓平對(duì)大鼠血清NO含量的影響 SHR對(duì)照組與WKY對(duì)照組比較，NO含量降低；各藥物治療組NO含量較SHR對(duì)照組比較，均有所升高，血壓平高劑量組、達(dá)爽組與中劑量組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，血壓平高劑量組較達(dá)爽組大大提高了NO含量；NO含量值隨血壓平劑量增大而升高幅度更大，且低劑量即能顯現(xiàn)出與達(dá)爽相當(dāng)?shù)男Ч魉幬镏委熒逳O含量的效果由高到低依次為血壓平高劑量＞血壓平中劑量＞血壓平低劑量＞達(dá)爽。詳見(jiàn)表2。

2．4 血壓平對(duì)大鼠血漿AngⅡ的影響(見(jiàn)表3)

2．5 血壓平對(duì)高血壓大鼠腸動(dòng)脈組織形態(tài)的影響 光鏡下見(jiàn)WKY對(duì)照組壁厚薄均勻，內(nèi)膜完整無(wú)增厚；SHR對(duì)照組中膜厚度增加，管腔變窄；血壓平低、中劑量組中膜厚度亦增加，管腔也變窄，但程度明顯較SHR對(duì)照組要輕；血壓平高劑量組與達(dá)爽對(duì)照組中膜無(wú)明顯增厚，管腔亦無(wú)明顯狹窄，兩者與WKY對(duì)照組比較無(wú)明顯差異。各組管壁厚度遞增順序依次為WKY對(duì)照組、血壓平高劑量組、達(dá)爽對(duì)照組＜血壓平中劑量組＜血壓平低劑量組＜SHR對(duì)照組。

2．6 冬組腸動(dòng)脈中膜厚盧與管腔直徑 各組與WKY對(duì)昭組比較，SHR對(duì)照組、血壓平低、中劑量組中膜厚度(Media，M)與管腔之比(Lumen，L)均增大(P＜0.01)，而高劑量組與達(dá)爽組和WKY組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；各藥物治療組M／L的比值較SHR組均有所改善(P＜0.01)，血壓平各治療組隨劑量增大M／L比值降低越顯著，各劑量組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；血壓平高劑量組與達(dá)爽對(duì)照組比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳見(jiàn)表4。

3 討 論

SHR是人類(lèi)培育成功的遺傳性高血壓大鼠，其高血壓及動(dòng)脈粥樣硬化的斑塊特征好似人類(lèi)的原發(fā)性高血壓病，是研究高血壓與動(dòng)脈粥樣硬化的良好動(dòng)物模型。

中醫(yī)沒(méi)有高血壓之病名，根據(jù)高血壓的臨床主要癥狀、病程及轉(zhuǎn)歸，目前比較一致的看法，認(rèn)為其應(yīng)屬中醫(yī)頭痛、眩暈、心悸、中風(fēng)、不寐范疇。而頭脹、頭暈、失眠、頸強(qiáng)、肢麻、口眼歪斜和半身不遂等癥狀，都可以是高血壓的表現(xiàn)。胡有志等研究高血壓病1038例，歸類(lèi)出17個(gè)證候，其中肝陽(yáng)上亢、陰虛陽(yáng)亢、肝腎陰虛以及肝風(fēng)上擾是高血壓病的主要證候，痰濁中阻和瘀血阻絡(luò)是高血壓病與體重和并發(fā)癥密切相關(guān)的常見(jiàn)證候或相兼證候。肝陽(yáng)上亢是高血壓病各期及不同病程中構(gòu)成比最高的證候。因而，平肝潛陽(yáng)是高血壓病治療中最主要的治法。

血壓平是由鉤藤、漢防己、川牛膝、桑寄生、夜交藤、澤瀉、生地7味中藥組成的復(fù)方制劑，其組方中鉤藤性甘微寒，入肝經(jīng)，清熱平肝，熄風(fēng)止痙，為君藥；漢防己能瀉心，堅(jiān)腎，專(zhuān)功行水決瀆，以達(dá)于下；川牛膝入肝腎二經(jīng)，補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、活血通經(jīng)，引血(火)下行，兼有利尿的作用，與防己共為臣藥；桑寄生具養(yǎng)血、益肝腎之功；夜交藤人心肝二經(jīng)，可養(yǎng)心安神，祛風(fēng)通絡(luò)；澤瀉性甘、淡、寒，可瀉腎火，利水滲濕；生地具清熱涼血，養(yǎng)陰生津之功。總之，該方重在治肝，兼顧心、腎，共奏平肝潛陽(yáng)、利水祛風(fēng)、滋陰益腎之效。

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示：血壓平能夠升高高血壓大鼠血管舒張因子NO含量，而且低劑量血壓平即能達(dá)到與西藥達(dá)爽相當(dāng)?shù)男ЧS劑量增大，NO升高越明顯。NO作為信使分子，在心血管系統(tǒng)中具有重要的生理和病理生理意義，NO在維持血管張力的恒定和調(diào)節(jié)血壓的穩(wěn)定中起重要作用，能夠抑制血小板的黏附和趨化作用，抑制平滑肌細(xì)胞增殖。它能降低全身動(dòng)脈壓，控制全身各種血管床的靜息張力，增加局部血流。內(nèi)源性NO和NO合成酶及其抑制劑是一個(gè)調(diào)節(jié)血壓的獨(dú)立體系。NO是一種維持血壓穩(wěn)定的生理性血壓緩沖劑，其缺乏可能是高血壓發(fā)病的重要環(huán)節(jié)之一。血壓平可以升高高血壓大鼠NO含量，這可能是其降壓機(jī)制之一。

血壓平可降低SHR血漿中AngⅡ的含量，雖效果不如西藥達(dá)爽，但其效果仍是非常顯著的。AngⅡ能直接使小動(dòng)脈平滑肌收縮：外周阻力增加，使交感神經(jīng)沖動(dòng)發(fā)放增加，使醛固酮分泌增加，導(dǎo)致水鈉潴留，引起血壓升高。它還能刺激血管平滑肌增生和肥大，抑制交感神經(jīng)末梢對(duì)去甲腎上腺素的重?cái)z取，促進(jìn)核酸的合成，誘發(fā)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)基因C－fos和C－myc的表達(dá)，引起血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)的增生，增加VSMC蛋白質(zhì)的合成，使血管壁增厚血壓平降低AngⅡ的含量，亦可能是其降壓改善血管重塑的機(jī)制之一。

由各組光鏡結(jié)果可以得出：血壓平能夠改善SHR腸系膜動(dòng)脈的病理?yè)p害，降低SHR動(dòng)脈中膜厚度/管腔內(nèi)徑的比值，延緩高血壓血管的不良重塑，并且其作用與藥物劑量有關(guān)，隨劑量增大其對(duì)動(dòng)脈的病理改變愈明顯，高劑量組幾乎可達(dá)到達(dá)爽相當(dāng)?shù)男ЧＴ诟哐獕哼^(guò)程中，血管為適應(yīng)血壓長(zhǎng)期升高而出現(xiàn)的重塑性變化涉及彈性動(dòng)脈和肌性動(dòng)脈，主要病理變化為管壁平滑肌細(xì)胞增生肥大及膠原等非收縮成分增加，平滑肌彈力膜等收縮成分相對(duì)減少，管壁增厚，管腔縮小，壁/腔比值增加，阻力血管變稀減少，較大的動(dòng)脈中膜膠原含量增加，管腔和橫截面積增大，在一定程度上緩解了大動(dòng)脈的壓力血流關(guān)系；但管壁肥厚仍導(dǎo)致動(dòng)脈僵硬、順應(yīng)性下降、血流阻抗增加、外周阻力增高。正是由于血管損害，又導(dǎo)致心腦腎等靶器官受累，成為致殘和死亡的重要誘因。血壓平可逆轉(zhuǎn)高血壓引起的不良血管重塑，從而對(duì)其靶器官的損害起到一定防治作用。

復(fù)方中藥血壓平具有逆轉(zhuǎn)高血壓大鼠血管重塑的作用，其降低血壓，升高血清NO含量，改善SHR血管的病理?yè)p害，可能是其逆轉(zhuǎn)高血壓大鼠血管重塑的部分機(jī)制。

中藥復(fù)方治療高血壓的優(yōu)勢(shì)有：起效緩，降壓作用平穩(wěn)，不至于因突然降壓致使機(jī)體尤其是重要器官的供血受到影響，且副反應(yīng)少，綜合調(diào)整作用優(yōu)，藥效成分多樣，可能是多種降壓機(jī)制的組合，對(duì)于延緩靶器官的損害有不可低估的作用。其不足之處即急性降壓療效欠佳。血壓平作為一種長(zhǎng)效降壓藥，作用平穩(wěn)，并可有效防治靶器官損害，值得臨床上推廣應(yīng)用。

本文編輯 王雅潔