疏血通注射液治療系膜增生性腎炎大鼠的實驗研究

李懷平陳威

710032陜西西安第四軍醫大學西京醫院腎內科

摘 要 目的：探討疏血通注射液對實驗性系膜增生性腎炎大鼠的治療效果。方法：復制大鼠系膜增生性腎炎模型，治療組予疏血通注射液治療，觀察其對模型大鼠蛋白尿、腎功能及血漿蛋白的影響以及對腎臟病理的改善。同時設立苯那普利治療為對照組。結果：疏血通注射液可明顯降低尿蛋白，改善功能，減輕腎小球損傷，減少腎小球系膜細胞增生，其改善作用優于對照組。結論：疏血通對大鼠具有保護腎功能，它能減少腎小球系膜細胞增生，減少細胞外基質增多的治療作用。

材料與方法

動物：選用sD純種大白鼠，雌性，體重180±10g，12周齡，第四軍醫大學動物實驗中心提供。動物經普通飼料適應性喂養1周后，試紙法尿蛋白定性檢查、尿沉渣鏡檢均呈陰性。隨機分為模型組、苯那普利組、疏血通注射液組、正常對照組4組，每組各10只。系膜增殖性腎炎大鼠模型的建立參照劉震等^［1］的實驗方法，實驗在第四軍醫大學動物實驗中心進行。

實驗用藥：疏血通注射液是由牡丹江友博藥業有限責任公司提供，每支2ml。實驗動物隨機分組，治療組自造模第1天開始給藥，大鼠給藥劑量按藥理學實驗動物給藥方法計算，均給以成人劑量每千克體重的5倍灌胃；對照苯那普利治療組配成生理鹽水溶液給以4mg/kg每天灌胃；正常組給相同比例的生理鹽水。

檢測指標：①24小時尿蛋白定量：雙縮脲法。②血漿白蛋白：肌酐、尿素氮自動生化儀檢查。③病理光鏡：組織固定脫水，將組織切成1.5pm厚切片，用HE、PAS、PASM-Masson染色，觀察腎組織的形態學變化。鏡檢，陽性為紅色，分布腎小球系膜區和細胞外基質中。病理電鏡0.1mmol/L磷酸鹽緩沖液沖洗，1%鋨酸固定2小時，丙酮脫水后，環氧樹脂618包埋，半薄切片定位，超薄切片經鈾、鉛雙重染色。在電鏡下觀察。

統計學處理：采用SPSS統計軟件包，所有數據均用（ ±S）表示，組間差異采用t檢驗。

結果

24小時尿蛋白定量測定：造模后第12周測定各組大鼠尿蛋白定量，正常組12.55±1.25mg/24小時，模型組*90.03±1.59mg/24小時，依那普利組*#55±12.24mg/24小時，疏血通組*#▲42±11.35mg/24小時。

腎功能(SCr、BUN)、血清白蛋白(hlb)測定：正常組SCR46.8±9.26mmol/L，BUN5.88±0.71μmmol/L，ALB16.21±1.28g/L；模型組SCR*79.2±9.32mmol/L，BUN*12.03±1.35μmmol/L，ALB*10.82±1.32g/L；依那普利組SCR*#58.9±12.27mmol/L，BUN*#8.10±0.62μmmol/L，ALB*#▲12.92±1.12g/L；疏血通組SCR*#52.8±11.26mmol/L，BUN#7.42±0.77μmmol/L，ALB*#▲12.99±1.13g/L。

注：與正常組比較，*P

腎臟組織病理形態學觀察：①光鏡組織學變化：正常組腎小球結構正常；模型組病理改變以重度系膜細胞增多、系膜基質增生，腎小球腫脹，體明顯增大，腎小球內細胞數增多，腎小球直徑和最大系膜區細胞數明顯大于正常組。此外，部分切片中還可見蛋白管型。苯那普利組病理呈中度的系膜細胞增多和基質增生改變，腎小球腫脹，細胞數增多；而疏血通組系膜細胞增多及基質增生較輕腎小球腫脹輕，細胞數相對較少，腎小球直徑和最大系膜區細胞數明顯小于模型組。②電鏡模型組可見腎小球系膜區系膜細胞增生，系膜基質增多，上皮細胞可見節段性足突融合或絨毛變，系膜區可見云霧狀電子致密物沉積。與模型組相比，疏血通組未見明顯系膜細胞增生及系膜基質增多現象。苯那普利組可見系膜區系膜細胞輕度增生，系膜基質增多不明顯，系膜區可見少量電子致密物沉積，上皮細胞足突輕度融合。免疫熒光正常組腎小球系膜區無IgG沉積，模型組表現為彌漫性系膜區IgG沉積，呈散在顆粒狀，個別區域為團塊狀。疏血通組與苯那普利組表達較弱。

討論

我們通過大鼠模型觀察疏血通對系膜增生性腎炎的療效^［2］，并與目前全世界公認的治療腎小球腎炎藥物苯那普利進行對照^［3］，發現疏血通注射液對系膜增生性腎炎的治療效果優于苯那普利。

疏血通注射液是由水蛭、地龍組成，水蛭、地龍有破血、逐瘀、通絡，并有“利水道”、“滲濕行水”的功能，是祖國醫學中治療腎病的良藥。本實驗結果表明疏血通注射液活血化瘀能減少血小板聚集，增強纖溶活性，改善微循環和高凝狀態，抑制細胞凋亡，改善內皮細胞功能，有助于免疫復合物的清除和腎組織病變的修復^［4］。疏血通治療大鼠MsPGN的結果表明該藥能明顯減輕MsPGN大鼠的蛋白尿，減輕腎功能損害，改善蛋白質代謝。光鏡、電鏡及免疫熒光檢查結果表明疏血通有促進腎小球病理改變恢復的作用，能減輕系膜區免疫復合物的沉積，改善腎小球局部血液循環，其機理可能與疏血通調節機體免疫功能，抑制系膜細胞增生和系膜基質擴張有關，進一步的的作用機制擬采用基因芯片技術研究其對腎小球系膜細胞基因表達的調控。

參考文獻

1 劉震，周樹易，譚建三.大鼠系膜增生性腎炎模型的改進.華西醫科大學學報，1996，27（2）：182.

2 Kawachi H，Orikasa M，Matsui K，et a1.Epitope-specific induction of mesangial lesions with proteinuria by a MoAb against mesangial cell surface antigen．Clin Exp Immunol，1992，88(3)：399-404.

3 陳香美.血管緊張素轉化酶抑制劑減輕腎小球硬化機制的探討.中華腎臟病雜志，1998，14(3)：139.

4 沈慶法，何立群.腎臟病的中醫藥研究新進展.上海：上海中醫藥大學出版社，2004：101.