趙悅
130021吉林省中醫院
摘 要 目的:觀察心血通膠囊對家兔血小板聚集性的影響。方法:采用正常家兔富含血小板的血漿,以5’-腺苷二磷酸二鈉鹽(ADP)為促凝劑,通過血小板聚集儀觀測血小板聚集曲線,以血小板凝集1分鐘(PAG1)、5分鐘(PAG5)和最大峰值(PAGM)為觀測指標,比較給藥各組與空白對照組(生理鹽水)血小板聚集率。結果:與對照組比較,心血通膠囊體外120mg/ml和60mg/ml在1min、3min、5min測試點上血小板聚集率明顯小于對照組。結論:心血通膠囊體外給藥對ADP所致的血小板聚集有明顯的抑制作用。
關鍵詞 心血通膠囊 血小板聚集率
資料與方法
動物:Wistar大鼠,雌雄兼用,體重250~270g。由長春高新醫學動物實驗研究中心提供。
藥品與試劑:心血通膠囊,長春中醫學院附屬醫院新藥中心提供,規格0.3g/粒,含生藥7.5g,批號050410。冠心丹參膠囊,規格0.3g/粒,長春海王生物制藥有限責任公司,批號050820。戊巴比妥鈉,上?;瘜W試劑分裝廠,批號20030612。肝素,上海衛輝試劑廠,批號20021010。
儀器:TYXN-96多功能血液凝集儀(上海通用機電技術研究所)。
富含血小板血漿(PRP)的制備:實驗時取家兔動脈血,以3.8%枸緣酸鈉抗凝(9∶1),混勻。分裝于試管中,自動平衡離心機,1000轉/分離心5~8分鐘(20~25℃條件下),用取樣器,小心吸取上層液,即富含血小板血漿(PRP),室溫下放置備用。
受試藥品的準備:心血通膠囊:分別配制成12%的混懸液,超聲震蕩充分溶解,用雙層濾紙過濾。濾液再用0.45μm微孔濾膜抽濾,備用。
血小板促凝劑的準備:用1/10000天秤精確稱取ADP5mg,用PH 7.4的0.2M磷酸鹽緩沖液溶解,最終配制成濃度為2uM。
測試步驟:TYXN-96多功能血液凝集儀開機后預熱。用移液器取富含血小板血漿(PRP)液200μl,注入測試杯中(杯中預先放置攪拌珠)。將測試杯放入預熱孔中預熱。用微量注射器抽取ADP11μl備用。將測試杯放入檢測孔內,啟動檢測鍵,同時加入ADP。自動記錄血小板凝集曲線。
各組樣品的測試:實驗共分5組,每組測試10例。試驗時每測試管中加入過濾液10μl(分別含心血通膠囊120mg/ml、60mg/ml、30mg/ml),加樣體積均為10μl, 對照組加入同體積生理鹽水。
觀察指標及統計學處理:觀察1分鐘血小板聚集性(PAG-1),5分鐘血小板聚集性(PAG-5)和血小板聚集性最大峰值(PAG-M)。分別統計各組樣本1分鐘血小板聚集性(PAG-1),5分鐘血小板聚集性(PAG-5)和血小板聚集性最大峰值(PAG-M)。組間差異的顯著性檢驗用t檢驗。
結果
與對照組比較,心血通膠囊體外120mg/ml和60mg/ml在1分鐘、3分鐘、5分鐘測試點上血小板聚集率明顯小于對照組,提示心血通膠囊體外給藥對ADP所致的血小板聚集均有明顯的抑制作用。
討論
本實驗采用正常家兔富含血小板的血漿,以5’-腺苷二磷酸二鈉鹽(ADP)為促凝劑,通過血小板聚集儀觀測血小板聚集曲線,以血小板凝集1分鐘(PAG1)、5分鐘(PAG5)和最大峰值(PAGM)為觀測指標,比較給藥各組與空白對照組(生理鹽水)血小板聚集率。結果與對照組比較,心血通膠囊體外120mg/ml和60mg/ml在1分鐘、3分鐘、5分鐘測試點上血小板聚集率明顯小于對照組。提示心血通膠囊體外給藥對ADP所致的血小板聚集有明顯的抑制作用。
參考文獻
1 陳奇.中藥藥理研究方法學.北京:人民衛生出版社,1993:581.