注射用復(fù)方氨芐西林鈉的家兔體外抗菌實(shí)驗(yàn)

摘 要：目的：考察注射用復(fù)方氨芐西林鈉的家兔體外抗菌特征。方法：體外抗菌考察單次和多次給家兔注射復(fù)方氨芐西林鈉后，采集的家兔血漿對(duì)培養(yǎng)的金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抗菌作用。結(jié)果：與注射用氨芐西林鈉組相比，注射用復(fù)方氨芐西林鈉大、中、小劑量組增強(qiáng)了氨芐西林鈉對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑菌作用(p<0.05或p<0.01)。結(jié)論：與注射用氨芐西林鈉組相比，注射用復(fù)方氨芐西林鈉可增強(qiáng)氨芐西林鈉的抗菌作用。

關(guān)鍵詞：注射用復(fù)方氨芐西林鈉；注射用氨芐西林鈉；抗菌作用

中圖分類號(hào)：R978.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1673-2197(2007)10-052-03

氨芐青霉素為半合成類抗生素，在臨床上被廣泛使用，但其口服給藥生物利用率低，約50%被胃酸破壞，半衰期短(0.5～1h)，每日須多次給藥，影響了氨芐青霉素的臨床應(yīng)用。氨芐青霉素類藥物經(jīng)腎小管分泌排泄，丙磺舒亦從腎小管分泌排泄，兩者合用時(shí)，丙磺舒可競(jìng)爭(zhēng)性抑制腎小管對(duì)氨芐青霉素的轉(zhuǎn)運(yùn)，使其滯留并再分布^[1]，從而增大氨芐青霉素的血藥濃度，延長(zhǎng)了半衰期?；谏鲜鰴C(jī)理，美國(guó)已經(jīng)開(kāi)發(fā)了復(fù)方氨芐青霉素/丙磺舒膠囊，并載入了美國(guó)藥典，目前，國(guó)內(nèi)已有同類產(chǎn)品(商品名：恩普洛)。但口服復(fù)方氨芐青霉素/丙磺舒膠囊時(shí)，氨芐青霉素仍易被胃酸破壞，生物利用率低，我室將該制劑改為注射制劑，希望避免此弊端，并與注射用氨芐青霉素鈉作對(duì)照，考察了家兔體外法復(fù)方制劑的抗菌特征。

1 材料

1.1 工作檢定菌

金黃色葡萄球菌[CMCC(B)26 003]，大腸桿菌[CMCC(B)44 103]，均由陜西省藥品檢驗(yàn)所提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

家兔2.5～3.0kg，雌雄兼用，合格證號(hào)陜動(dòng)證字第08-018號(hào)，由西安交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物飼養(yǎng)條件：室溫26±3℃，相對(duì)濕度45%～55%。按性別分籠飼養(yǎng)，自由飲水，顆粒飼料和蔬菜搭配喂養(yǎng)。

1.3 試劑和試液

營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，批號(hào)0204122，北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司；抗生素檢定培養(yǎng)基VI，批號(hào)030705，北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司；抗生素檢定培養(yǎng)基II，批號(hào)030526，北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司。

1.4 儀器

ZY-300IV多功能微生物自動(dòng)測(cè)量分析儀，北京先驅(qū)威鋒技術(shù)開(kāi)發(fā)公司；DK-型電子控溫電熱器；陽(yáng)性菌培養(yǎng)室；K-01X隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱，長(zhǎng)沙醫(yī)療器械廠；HH.B.500電熱恒溫培養(yǎng)箱；KT-1000W超聲波清洗機(jī)，濟(jì)寧科特超聲電子有限責(zé)任公司；YXQ-WY21.600IIR電熱臥式消毒鍋，上海醫(yī)用核子儀器廠。

1.5 藥物

注射用復(fù)方氨芐西林鈉，自制；注射用氨芐西林鈉，哈爾濱制藥二廠生產(chǎn)。

2 方法和結(jié)果

2.1 分組與給藥

取家兔2.5~3.0kg，隨機(jī)分為6組，每組5只：①注射用復(fù)方氨芐西林鈉300mg·kg^-1組；②注射用氨芐西林鈉300mg·kg^-1組；③注射用復(fù)方氨芐西林鈉120mg·kg^-1組；④注射用氨芐西林鈉120mg·kg^-1組；⑤注射用復(fù)方氨芐西林鈉50mg·kg^-1組；⑥注射用氨芐西林50mg·kg^-1組。麻醉，分離頸總動(dòng)脈，插管，取血0.5ml后①、②、⑤、⑥組給藥，每h取血1次，共5次，③、④組間隔6h連續(xù)給藥5次，首次給藥和末次給藥后每h取血1次，共5次。血液3000rpm離心10min，取上清液，置于-20℃冰箱，備用。

2.2 培養(yǎng)基和菌懸液的制備

普通培養(yǎng)基和兩種細(xì)菌懸液等制備均按照抗生素微生物測(cè)定法進(jìn)行：菌種復(fù)壯，釣取菌于瓊脂斜面?zhèn)饕淮?，移種于5ml肉湯培養(yǎng)管種孵育18h，試驗(yàn)前經(jīng)預(yù)試測(cè)定加入培養(yǎng)基(每500ml菌懸液培養(yǎng)基中加入大腸桿菌0.5ml；每500ml加入金黃色葡萄球菌5ml)。

2.3 雙碟的制備

取平底雙碟，注入加熱的培養(yǎng)基。另取培養(yǎng)基加熱溶化，放冷至48℃～50℃，加入金黃色葡萄球菌和大腸桿菌懸浮液5.5ml，放置水平臺(tái)上冷卻后，在每雙碟中均勻安置4個(gè)牛津小杯，備用。

2.4 測(cè)定抑菌面積

用ZY-300IV多功能微生物自動(dòng)測(cè)量分析儀測(cè)定經(jīng)37℃溫箱中培養(yǎng)8～12h后的培養(yǎng)基的抑菌圈，結(jié)果見(jiàn)表1～6。

表1顯示注射用復(fù)方氨芐西林鈉300mg·kg^-1和注射用氨芐西林鈉相比，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)培養(yǎng)的金黃色葡萄球菌的抑菌作用增強(qiáng)(P<0.05或P<0.01)。

表2顯示注射用復(fù)方氨芐西林鈉120mg·kg^-1多次家兔給藥與注射用氨芐西林鈉120mg·kg^-1多次給藥相比，藥后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)采集的血漿對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用增強(qiáng)(P<0.01)。

表3顯示注射用復(fù)方氨芐西林鈉50mg·kg^-1與注射用氨芐西林鈉50mg·kg^-1相比，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)培養(yǎng)的金黃色葡萄球菌的抑制作用均有顯著性的差異(P<0.05或P<0.01)，復(fù)方氨芐西林鈉或氨芐西林鈉均在采血4h后檢測(cè)不到對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用。

表4顯示與注射用氨芐西林鈉300mg·kg^-1組相比，注射用復(fù)方氨芐西林鈉組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的抑菌圈均高于注射用氨芐西林鈉組的抑菌圈(P<0.01)。注射用氨芐西林鈉300mg·kg^-1組在3h后檢測(cè)不到其抑菌作用，而注射用復(fù)方氨芐西林鈉300mg·kg^-1組仍可檢測(cè)到抑菌作用。

表5顯示與注射用氨芐西林鈉組相比，注射用復(fù)方氨芐西林鈉120mg·kg^-1各個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)大腸桿菌的抑制作用均有顯著性差異(P<0.01)。

表6顯示，注射用復(fù)方氨芐西林鈉50mg·kg^-1與注射用氨芐西林鈉均單次家兔給藥，后者沒(méi)有檢測(cè)到對(duì)大腸桿菌抑菌作用。

3 結(jié)論與討論

抗生素濃度越大，抑菌圈面積越大，濃度和抑菌面積正相關(guān)。我們?cè)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)以120mg·kg^-1注射用復(fù)方氨芐西林鈉連續(xù)5次給藥，間隔6h，末次取血，得血漿，采用管碟法測(cè)量，并對(duì)比注射用復(fù)方氨芐西林鈉和注射用氨芐西林鈉兩個(gè)組分別對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑菌作用，以抑菌圈的面積作監(jiān)測(cè)指標(biāo)，考察含有氨芐西林鈉的血漿對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的作用。復(fù)方氨芐西林鈉和氨芐西林鈉組相比，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的抑菌作用均有顯著性差異(P<0.01)，使得氨芐西林鈉抑菌曲線右移；注射用氨芐西林鈉120mg·kg^-1多次靜脈給藥與注射用復(fù)方氨芐西林鈉120mg·kg^-1單次靜脈給藥相比，相同時(shí)間點(diǎn)采集的血漿對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌抑菌作用相當(dāng)(P>0.05)；注射用復(fù)方氨芐西林鈉120mg·kg^-1單次靜脈給藥與注射用復(fù)方氨芐西林鈉120mg·kg^-1多次靜脈給藥相比，相同時(shí)間點(diǎn)采集的血漿對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑菌作用有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)，如末次注射用氨芐西林鈉120mg·kg^-1和注射用復(fù)方氨芐西林鈉120mg·kg^-1第1h取血漿的抑菌面積從1.5±0.1cm2增大到3.3±0.3cm2，P<0.01。可見(jiàn)注射用氨芐西林鈉連續(xù)給藥在家兔體內(nèi)蓄積不顯著，而注射用復(fù)方氨芐西林鈉連續(xù)給藥后蓄積明顯。

參考文獻(xiàn)：

[1] Kampann J. Effect of probenecid on the excretion of ampi-

cillin in human bile[J]. Br J Pharmacol，1973(47)：782-792.

[2] Whyatt PL . Bioavailability of 17 ampicilllin products [J]. J pharm Sci，1976(65)：652-659.

[3] 孔小東，蔡玉珉.丙磺舒對(duì)氨芐青霉素藥物動(dòng)力學(xué)影響[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，1987，7(1)：3-6.

Anti-infection effect of Compound Ampicillin Sodium for Injection in rabbits

He Lize1，2，Wang Peixian1，2

(1.Guangzhou Anjian Industry Development Co. Ltd，Guangdong，510420；

2.Pharmacy college of Xian Jiaotong University ，Xian ，Shannxi，710061)

Abstract：Objective：Test the antibiotics effect of Compound Ampicillin Sodium for Injection in rabbits. Methods：In vito，investigated Compound Ampicillin Sodium for Injection on antibiotics effect of staphylococcus and Escherichia coli after single and multiple dose administration with method of cup-plate method. Results：Compared with Ampicillin Sodium for Injection，Compound Ampicillin Sodium for Injection 300 mg·kg^-1、120 mg·kg^-1 and 50 mg kg^-1 could significantly increase the concentration of ampicillin sodium in plasma of rabbits (p<0.05 or p<0.01) and increase the effect of bactericide action on staphylococcus and Escherichia coli. Conclusion：Compared with Ampicillin Sodium for Injection，Compound Ampicillin Sodium for Injection could increase the anti-infection effect of ampicillin sodium.

Key words：Compound ampicillin sodium；Ampicillin sodium for injection；Anti-infection effect