缺氧誘導因子－１與腦缺血缺氧性損傷研究進展

摘 要：缺氧誘導因子-1(hypoxia-inducible factor-1，HIF-1)是目前發現的最重要的缺氧感受因子。它作為一種轉錄調節因子，在腦缺血缺氧狀態下，可激活100多種缺氧反應性基因表達，對腦缺血缺氧后微血管的再生、神經元的能量代謝、神經干細胞的增殖、分化的調控起到重要作用。但最近又發現，HIF-1是介導腦缺血缺氧后炎癥損傷的關鍵因子，同時參與腦缺血缺氧后神經元的遲發性死亡。對近5年來國內外HIF-1與腦缺血缺氧性損傷的相關研究成果進行綜述。

關鍵詞：缺氧誘導因子-1；腦缺氧缺血性損傷；缺氧反應性基因

中圖分類號：R743文獻標識碼：A文章編號：1673-2197（2008）02-023-05

1 HIF-1的結構特征及基因定位

HIF-1于1992年由Semenza在缺氧誘導的Hep3B細胞核提取物中發現［1］。它包括120kD的 亞基和91-94kD的β亞基，主要以異源二聚體形式存在，二者均屬堿性螺旋-環-螺旋-Per-ARNT-Sim(bHLH-PAS)超家族成員， β亞基為組成型表達。HIF-1 的N 端具有bHLH和PAS區域， bHLH 區和DNA 結合， PAS 區則與HIF-1 形成二聚體，共同構成HIF-1 的DNA 結合結構域(DNA-binding domain， DBD)。HIF-1 C端的2個轉錄激活區域， 分別稱為氨基端反式激活區(trans-activation domain-N， TAD-N) 和羧基端反式激活區(trans-activation domain-C，TAD-C)。TAD-C具有募集p300 /CBP形成轉錄起始復合物的作用， 從而激活靶基因的轉錄。在常氧狀態下，該區天門冬酰胺803的羥基化抑制其轉錄活性，2個轉錄激活區域之間為抑制結構域， 能降低HIF-1的轉錄活性［4-6］。HIF-l 基因定位于人的14號染色體q21-24區，鼠的12號染色體上，而HIF-1β基因定位于人的1號染色體q21區，鼠的3號染色體上。

2 HIF-1轉錄活性的調節

在生理狀態下，FIH-1（factor inhibiting HIF-1）可以使 TAD-C的天門冬酰胺803羥基化，該過程可以阻止HIF-1 與轉錄共活化因子的結合，但并不影響HIF-1α的穩定性。FIH-1是O²依賴性羥化酶，低氧、鐵螯合劑可以降低它的活性，但它的轉錄不受氧濃度的影響［7］。研究表明，HIF-1 相關位點氨基酸殘基的磷酸化也可以調節轉錄活性，MAPK通路、PI3K信號通路在這一過程中起明顯作用。有文獻報道ERK、P38激酶在體外可以磷酸化HIF-1 /HIF-2，使用ERK、p38激酶的抑制劑可以降低HIF-1 的轉錄活性，這一過程可能是由于磷酸化的HIF-1 與HIF-1 具有更高的親和性［8］；細胞因子（ platelet-derived growth factor， PDGF、tumor Necrosis Factor， TNF、insulin-like growth factor-1/2， IGF-1/2）介導的磷酸化級聯反應也可以影響HIF-1 的轉錄活性［9］。小分子泛素樣修飾物（Small Ubiquitin-like MOdifier，SUMO）可以同時作用于HIF-1 與HIF-1， 降低HIF-1的轉錄活性。在缺氧狀態下一氧化氮（NO）可以維持PDHs（prolyl hydroxylase domains）的穩定性，加強HIF-1 的PDHs依賴性降解途徑，也有研究表明，NO亞硝基化HIF-1 半胱氨酸800可以提高HIF-1 與轉錄共激活因子的結合能力［10］。

HIF-1轉錄活性的調節涉及以下幾個過程:①FIH-1羥基化天門冬酰胺803，阻止HIF-1 與轉錄共激活因子的結合，金屬離子及離子螯合劑可以調節這一過程；②HIF-1 相關蛋白位點磷酸化后可以增加與HIF-1 的親和力，增強轉錄活性；③小分子泛素樣修飾物可以修飾HIF-1，抑制轉錄活性；④NO可以加速HIF-1的降解或增強轉錄活性。

3 HIF-1與靶基因

缺氧對機體產生嚴重影響，這一過程涉及到HIFs激活細胞內多種缺氧反應性基因的表達，其中HIF-1起主要作用 ［11］。在缺氧狀態下，HIF-1 降解受抑制，與靶基因的缺氧反應應答元件(hypoxia response element， HRE)結合促進轉錄。它的靶基因主要有：①通過擴血管效應和新的血管網的構建來調節局部組織的氧供的基因，如：誘導型一氧化氮合酶（iNOS）、內皮素1（ET1）、血管內皮生成因子及其受體（Vascular endothelial growth factor，VEGF、VEGFR）等。②增強細胞對葡萄糖的攝取能力和無氧酵解能力的基因，如：葡萄糖轉運體-1/3（glucose transporter-1/3， GLU1/3）、乳酸脫氫酶A（Lactate dehydrogenase-A，LDHA）、丙酮酸激酶M（Pyruvate kinase M， PKM)。③促進紅細胞增殖，提高血液攜氧量的基因，如：促紅細胞生成素（ erythropoietin，EPO）、轉鐵血紅蛋白及其受體等。研究發現，神經系統也存在促紅細胞生成素（erythropoietin， EPO），并且EPO 通過與受體結合引起的一系列信號轉導，對腦發育［12］、缺血、缺氧性腦病及帕金森病等疾病起到保護作用［13-15］，其作用機制主要涉及降低氧化損傷、緩解血管痙攣、及調節神經遞質等過程［16-17］。

4 HIF-1與腦缺血

4.1 HIF-1與血管再生

腦組織內微血管再生對缺血缺氧腦組織的存活有重要作用。血管再生是一個復雜的過程，涉及到多種細胞產生的生物活性因子。Sun等［18］發現，通過大鼠腦室內預先注射VEGF，可以促進齒狀回和室管區（SVZ）神經元再生，以及紋狀體半暗帶區域的血管再生，VEGF的表達受到HIF-1的特異性調控。Chavez等［19］將大鼠暴露在低氧環境中，發現缺氧后4h~14d， HIF-1 持續高表達，同時VEGF、GLU-3的mRNA水平也升高，到21d時恢復到原來水平，但將缺氧后21d的大鼠暴露在更低的氧環境中時，HIF-1 的水平又升高，可見在HIF-1的作用下，血管的重塑和能量代謝的改變對腦組織適應長時間的缺氧有重要意義。EPO在缺氧缺血狀態下可以與內皮細胞表面的受體結合，通過JAK2信號通路促進血管內皮細胞的增殖，它也可以通過VEGF/VEGFR途徑間接促進血管再生［20］。Konstantin等［21］發現，暴露于低氧環境中180min和300min的大鼠與對照組相比，MCAo(middle cerebral artery occlusion)后腦梗死體積分別降低了75%和54%，HIF-1與DNA的結合能力明顯增強，EPO的mRNA水平上升了7倍，表明HIF-1 /EPO途徑可以影響大鼠的腦缺血耐受能力。

4.2 HIF-1與神經元再生 

腦缺血缺氧狀態下，神經干細胞可以通過增生分化來部分修復受損組織的功能，Arvidsson等［22］對大鼠實施MCAo后發現，室管區有大量干細胞增生，并移行到受損的紋狀體區分化為成熟的神經元，許多因素如腦源性EPO、VEGF、IGF-1、干細胞生長因子等氧依賴性基因影響這一過程，而它們受到HIF-1的調控［18、23］。Nakatomi等［24］發現，干細胞生長因子可以促進短暫性缺血狀態下的大鼠海馬區錐體細胞的再生。Bernaudin 等［25］通過向MCAo大鼠腦室內注射EPO，發現神經干細胞的增殖和分化明顯，梗死體積明顯減少。除Tomita等［26］發現，神經元內HIF-1 基因特異性敲除的成年大鼠出現明顯的神經元變性、腦水腫和空間感知障礙，HIF-1 基因敲除的大鼠胚胎出現明顯的脈管發育障礙，且端腦有大量神經元凋亡。Javorina等［27］發現，HIF-1 基因敲除的成年大鼠腦組織內VEGF mRNA水平明顯下降，在黑質區多巴胺標記分子酪氨酸羥化酶（tyrosine hydroxylase，TH)、醛脫氫酶（aldehyde dehydrogenase）分別降低了41%和61%，BCL2降低了58%，而caspase-3被激活。由此可見，HIF-1可能通過靶基因促進神經元再生和分化。 

4.3 HIF-1與神經元凋亡

腦缺血缺氧時，神經元線粒體源性ATP減少，細胞色素C被釋放到胞漿中，Bax與Bak活化，激活Apaf-1， 使Caspase9激活Caspase3/7，誘導凋亡，這一過程可以被抗凋亡蛋白2（IAP-2）抑制。由于線粒體膜受損，產生大量活性氧，可以直接使Caspase 9激活Caspase 3/7，誘導凋亡［28］。HIF-1可以通過兩條途徑誘導神經元凋亡：HIF-1可以與p53泛素連接酶（mdm2）結合，增強P53的穩定性，而p53可以通過調節Bax與p21，誘導凋亡；在缺氧狀態下，HIF-1的穩定性和轉錄活性增強，使Bcl-2結合蛋白BNIP3和NIX表達增多，抑制Bcl-2的抗凋亡作用［29］。但是HIF-1除了具有誘導凋亡的作用外，還有通過提高抗凋亡蛋白IAP-2表達起到抗凋亡的作用［30］。Helton［31］等將 HIF-1α基因敲除的成年大鼠暴露在低氧的環境中4.5h后，發現其海馬區和皮質區細胞凋亡數量明顯少于野生型，誘導凋亡的蛋白Tial1(cytotoxic granule-associated RNA binding protein-like 1)、 Tia1(cytotoxic granule-associated RNA binding protein-1) 、Sfrs7（ splicing factor， arginine/ serine-rich 7 ）明顯減少，可見在急性腦缺血早期HIF-1誘導了缺氧神經元的凋亡。Althaus［32］等發現大鼠MCAO²4h后，皮質和紋狀體神經元細胞核內有大量的BNIP3表達，直接參與了神經元的遲發性死亡。但Ueno［33］等發現，在HIF-1基因敲除的大鼠胚胎中，ROS-TNF-caspase-2和Glucose deprivation-C-Myc-caspase-3途徑可以誘導皮質神經元凋亡。Baranova［34］ 對HIF-1基因敲除大鼠實施MCAo后， 發現誘導凋亡蛋白BNIP3在缺血24h內升高，后降低，與基因敲除組對比凋亡神經元明顯減少。可見，在缺血缺氧腦損傷的發生發展過程中，HIF-1發揮了誘導神經元凋亡和抗凋亡的雙重作用。

4.4 HIF-1與腦缺血后的炎癥反應

腦缺血后的炎癥反應是以腦微血管內白細胞聚集并穿過血管壁、浸潤腦組織，同時伴有微血管功能紊亂及局部腦組織中液體及蛋白質積聚為標志的炎癥過程， 其與腦缺血后的繼發性腦損傷密切相關。活化的白細胞可釋放多種毒性物質，損傷局部血管， 造成組織水腫。釋放的毒性物質還可激活腦內的膠質細胞，激活的膠質細胞通過釋放神經毒物質又會吸引更多的白細胞進入腦組織。Cramer等［35］發現，HIF-1是白細胞介導炎癥反應的必需因子。Ockaili等［36］對HIF-1介導炎癥反應的機制研究時，發現HIF-1在缺氧狀態下可以通過血紅素氧化酶-1（Heme Oxygenase-1）促進血管內皮細胞內趨化因子IL-8的表達。Mojsilovic-Petrovic等［37］研究結果表明，在腦缺血狀態下，HIF-1可以提高星形膠質細胞炎癥活化因子MCP-1/-5的表達，參與啟動腦缺血缺氧后的炎癥反應。Makino等［38］發現，HIF-1-腎上腺髓質素（AM）通路對激活T淋巴細胞的長期存活起到重要的調控作用，直接加重了腦缺血缺氧后的炎癥損傷。Zhang等［39］發現，HIF-1可以提高培養的星形膠質細胞中IL-1的表達，而IL-1 又可以通過PI3-kinase-Akt-mTOR-NF-κB信號轉導途徑作用于COX-2基因，增強HIF-1的表達。Frede等［40］研究發現，在常氧狀態下，細菌脂多糖LPS可以通過ERK和NF-κB來提高分化和未分化的單核細胞中HIF-1 mRNA的水平和蛋白含量。Nakamura等［41］研究表明，外周T淋巴細胞在低氧環境中可以通過TCR-PI3K通路提高HIF-1基因的表達?？梢奌IF-1作為炎癥反應重要的始動因子，參與了腦缺血缺氧后炎癥損傷的發生、發展過程，同時大量炎癥介質的釋放又增加了HIF-1基因的表達和轉錄活性，從而形成一個惡性循環的過程， 加重了腦損傷。

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5 益氣活血中藥與HIF-1

季秋虹等［42］利用刺五加皂甙研究氯化鈷誘導化學缺氧的PC12細胞活性的影響，實驗表明刺五加皂甙誘導了缺氧損傷的PC12細胞表達HIF-1，發揮了抗神經元缺氧損傷的作用。朱永林等［43］利用復方丹參片灌喂永久性雙側頸總動脈（2VO）結扎的慢性腦缺血大鼠的研究表明， 腦缺血8w后，海馬CA1 區、皮質錐體細胞均有大量HIF-1免疫陽性神經元分布，其中以海馬錐體為主要核表達， 胞漿也有部分表達。部分小血管和毛細血管管壁也可看到免疫陽性細胞， 提示內皮細胞也有部分HIF-1表達?？梢姡瑥头降⑵娠@著增加2VO 大鼠腦內HIF-1 表達， 促進慢性腦缺血的代償修復。朱俐等［44］用銀杏內酯(Gin)處理原代培養神經元的結果顯示，在培養的皮層神經元中，HIF-1mRNA 有一定的基礎表達， Gin 處理24 h 可明顯提高HIF-1mRNA水平，表明Gin對缺氧神經元的保護作用可能與HIF-1之間存在密切關系。近年來，臨床研究表明黃芪、當歸對缺血、缺氧性腦血管疾病有顯著療效［45-48］，動物實驗也表明黃芪、當歸在腦缺氧缺血狀態下，可以影響VEGF以及血清型EPO的表達［49］，但是否對腦源性EPO、HIF-1有影響還不清楚。

6 展望

缺血缺氧性腦血管疾病是人類致死、致殘的重要原因，其發病率逐年升高，嚴重威脅著人類的健康。目前認為，HIF-1作為最關鍵的缺氧感受因子，對維持細胞內氧平衡起著至關重要的作用。HIF-1在腦組織內廣泛分布，參與腦缺血缺氧過程，在構建新的微血管、促進神經干細胞分化的同時也介導了炎癥損傷和遲發性神經元死亡。它也有可能是一些對缺血缺氧性腦損傷具有保護作用的中藥的重要靶點。

參考文獻：

［1］ Semenza GL， Wang GL. A nuclear factor induced by hypoxia via denovo protein synthesis binds to the human erythropoietin gene enhancer at a site required for transcriptional activation［Ｊ］. Mol Cell Biol， 1992， 12(12): 5447-5454.

［2］ Wang GL， Jiang BH， Rue EA. Hypoxia-inducible factor 1 is basic-helix-loop-helix-PAS heterodimer regulated by cellular 02 tension［Ｊ］. Proc Natl Acad Sci， 1995（92）: 5510-5514.

［3］ Ke QD， Costa M. Hypoxia-Inducible Factor-1(HIF-1) ［Ｊ］. Mol Pharmacol， 2006（70）: 1469-1480.

［4］ Maxwell P H. Hypoxia-inducible factor as a physiological regulator［Ｊ］. Exp Physiol， 2005（90）: 791-797.

［5］ Tan C， Rita G. de Noronha， Roecker AJ. Identification of a novel small-molecule inhibitor of the hypoxia-inducible factor 1 pathway［Ｊ］. Cancer Res， 2005， 65(2): 605-612.

［6］ Manalo DJ， Rowan A， Tera L. Transcriptional regulation of vascular endothelial cell responses to hypoxia by HIF-1. Blood， 2005， 105(2): 659-669.

［7］ Metzen E， Berchner-Pfannschmidt U， Stengel P. Intracellular localisation of human HIF-1 alpha hydroxylases: implications for oxygen sensing［Ｊ］. J Cell Sci， 2003（116）: 1319-1326.

［8］ Suzuki H， Tomida A， Tsuruo T. Dephosphorylated hypoxia-inducible factor 1 alpha as a mediator of p53-dependent apoptosis during hypoxia［Ｊ］. Oncogene， 2001（20）: 5779-5788.

［9］ Li J， Davidson G， Huang Y. Nickel compounds act through phosphatidylinositol-3-kinase/Akt-dependent， p70(S6k)-independent pathway to induce hypoxia inducible factor transactivation and Cap43 expression in mouse epidermal Cl41 cells［Ｊ］. Cancer Res， 2004（64）:94-101.

［10］ Brahimi-Horn C， Mazure N， Pouyssegur J. Signalling via the hypoxia inducible factor-1 alpha requires multiple posttranslational modifications［Ｊ］. Cell Signal， 2005（17）: 1-9.

［11］ Till A， Helmut A. Cellular oxygen sensing need in CNS function: physiological and pathological implications［Ｊ］. J Exp Biolo， 2004（207）: 3171-3188.

［12］ Iwai M， Cao G， Yin W. Erythropoietin promotes neuronal replacement through revascularization and neurogenesis after neonatal hypoxia/ischemia in rats［Ｊ］. Stroke， 2007(16):1412-1420.

［13］ Kumral A， Baskin H， Yesilirmak DC. Erythropoietin attenuates lipopolysaccharide-induced white matter injury in the neonatal rat brain［Ｊ］. Neonatology， 2007（92）:269-278.

［14］ Yang J， Huang Y， Yu X. Erythropoietin preconditioning suppresses neuronal death following status epilepticus in rats［Ｊ］. Acta Neurobiol EXP， 2007， 67(2):141-148.

［15］ Viviani B， Baartesaghi S， Corsini E. Erythropoietin protects primary hippocampal neurons increasing the expression of brain-derived neurotrophic factor［Ｊ］. J Neuroche， 2005， 93(2):412-421.

［16］ Costanza S， Rosetta P， Fulvio B. Delayed administration of erythropoietin and its non-erythropoietic derivatives ameliorates chronic murine autoimmune encephalomyelitis［Ｊ］. J Neuroimmunol， 2006（172）: 27-37.

［17］ Mitsionis GI， Sakellariou E， Beris AE. The role of erythropoietin in central and peripheral nerve injury［Ｊ］. Clin Neurol Neurosurg， 2007， 109(8):639-644.

［18］ Sun YJ， Jin K， Xie L.VEGF-induced neuroprotection， neurogenesis， andAngiogenesis afterfocal cerebral ischema［Ｊ］. J Clin Invest， 2003（111）: 1843-1851.

［19］ Chavez JC， Agani F， Pichiule P. Expression of hypoxia-inducible factor-1 in the brain of rats during chronic hypoxia［Ｊ］. J Appl Physiol， 2000（89）: 1937-1942.

［20］ Marti HH， Myriam B， Petit E. Neuroprotection and Angiogenesis: Dual role of erythropoietin in brain ischemia［Ｊ］. News Physicol Sci， 2000， 15(5):225-229.

［21］ Konstantin P， Scharff A， Karsten R. Hypoxia-induced stroke tolerance in the mouse is mediated by erythropoietin［Ｊ］. Stroke， 2003（34）: 1981-1986.

［22］ Arvidsson A， Collin T， Kirik D. Neuronal replacement from endogenous precursors in the adult brain after stroke［Ｊ］. Nat Med， 2002（8）: 963-970.

［23］ Doetsch F. The glial identity of neural stem cells［Ｊ］. Nat Neurosci， 2003（6）:1127-1134.

［24］ Nakatomi H， Kuriu T， Okabe S. Regeneration of hippocampal pyramidal neurons after ischemic brain injury by recruitment of endogenous neural progenitors［Ｊ］. Cell， 2002（110）:429-441.

［25］ Bernaudin M， Marti HH， Roussel S A potential role for erythropoietin in focal permanent cerebral ischemia in mice［Ｊ］. J Cereb Blood Flow Meta， 1999（19）:643-651.

［26］ Tomita S， Ueno M， Sakamoto M. Defective brain development in mice lacking the HIF-1aiapha gene in neural cells［Ｊ］.Mol Cell Biol， 2003（23）:6739-6749.

［27］ Javorina M， Maisel M， Wegner F. Lack of HIF-1 alpha impairs midbrain neural precursor cells involving vascular endothelial growth factor signaling［Ｊ］. J Neurosci， 2007， 27(2): 412-421.

［28］ Greijer A E， E van der Wall.The role of hypoxia inducible factor 1(HIF-1) in hypoxia induced apoptosis［Ｊ］. J Clin Pathol， 2004（57）:1009-1014.

［29］ Kothari S， Cizeau J， McMillan-Ward E.BNIP3 plays a role in hypoxic cell death in human epithelial cells that is inhibited by growth factors EGF and IGF［Ｊ］. Oncogene， 2003（22）: 47 34-44.

［30］ Piret JP， Mottet D， Raes M. Is HIF-1 alpha a pro-or an anti-apoptotic［Ｊ］.ProteinBiochem Pharmacol， 2002， 64(8): 89-92.

［31］ Helton R，Cui JK， R.Scheel J. Brain-specific knock-out of hypoxia-inducible factor-1 reduces rather than increases hypoxic-ischemic damage［Ｊ］. J Neurosci， 2005， 25(16):4099-4107.

［32］ Althaus J， Bernaudin M， Petit E. Expression of the gene encoding the pro-apoptotic BNIP3 protein and stimulation of hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1) protein following focal cerebral ischemia in rats［Ｊ］. Neurochem Int， 2006， 48(8): 687-695.

［33］ Ueno M， Tomita S， Masaaki U. Two pathways of apoptosis are simultaneously induced in the embryonal brains of neural cell-specific HIF-1-deficient mice［Ｊ］. Histochem Cell Biol， 2006（125）: 535-544.

［34］ Baranova O， F.Miranda L， Pichiule P. Neuron-specific inactivation of the hypoxia inducible factor 1α increases brain injury in a mouse model of transient focal cerebral ischemia［Ｊ］. J Neurosci， 2007， 27(23): 6320-6332.

［35］ Cramer T， Yamanishi Y， Clausen B. HIF-1is essential for myeloid cell-mediated inflammation［Ｊ］. Cell， 2003（112）: 645-657.

［36］ Ockaili R， Natarajan R， Salloum F. HIF-1 activation attenuates post-ischemic myocardial injury: Role for heme oxygenase-1 in modulatingmicrovascular chemokine generation［Ｊ］. J Appl Physiol， 2007（102）: 1927-1935.

［37］ Mojsilovic-Petrovic J， Callaghan D， Cui H. Hypoxia-Inducible-Factor-1(HIF-1) is involved in the regulation of hypoxia-stimulated expression of monocyte chemoattractant protein-1(MCP-1/CCL2) and MCP-5(Ccl12) in astrocytes［Ｊ］. J Neuroimmunol， 2007（4）:12.

［38］ Makino YC， Nakamura H， Ikeda E. Hypoxia-Inducible Factor regulates survival of antigen receptor-driven T Cells［Ｊ］. J Immunol， 2003（171）: 6534-6540.

［39］ Zhang WD， Petrovic JM， Callaghan D. Evidence that hypoxia-inducible factor-1(HIF-1) mediates transcriptional activation of interleukin-1(IL-1β) in astrocyte cultures［Ｊ］. J Neuroimmunol， 2006（174）: 63-73.

［40］ Frede S， Stockmann C， Freitag P. Bacterial lipopolysaccharide induces HIF-1 activation in human monocytes via p44/42 MAPK and NF-κB［Ｊ］. Biochem J， 2006（396）: 517-527.

［41］ Nakamura H， Makino Y， Okamoto K. TCR engagement increases Hypoxia-inducible-factor-1α protein synthesis via rapamycin-sensitive pathway under hypoxic conditions in human peripheral T Cells［Ｊ］. J Immunol， 2005（174）: 7592-7599.

［42］ 季秋虹， 顧永健， 朱俐. 刺五加皂甙保護PC12 細胞活性與缺氧誘導因子1 的表達［J］. 中國臨床康復， 2006， 10(43): 92-95.

［43］ 朱永林， 劉其強， 楊偉琴. 復方丹參片對慢性腦缺血大鼠腦內HIF-1 表達的影響［J］. 實用神經病， 2005， 118(15): 18-19.

［44］ 朱俐， 吳小梅， 李建成. 銀杏內酯對原代培養神經元缺氧誘導因子-1 基因表達的影響［Ｊ］. 中國應用生理學， 2004， 20(4): 354-357.

［45］ 張京. 大劑量黃芪注射液治療缺血性腦卒中臨床分析［Ｊ］. 中西醫結合心腦血管病， 2004， 2(4): 205-207.

［46］ 竇常勝，周名雄，張士發. 黃芪注治療新生兒缺氧缺血性腦病的臨床與機理研究 ［J］.皖南醫學院學報， 2004， 23(4): 258-260.

［47］ 周萍. 葛根素黃芪注射液治療椎－基底動脈供血不足［J］. 醫藥論壇， 2004， 25(22):17-18.

［48］ 劉景峰， 曲雅文. 當歸注射液刺激神經干治療腦梗塞后遺癥的臨床觀察［J］. 中醫藥學刊， 2006（24）:1495-1496.

［49］ 苗明三， 方曉艷. 當歸補血湯多糖對大鼠血虛模型血清IL22， IL26，EPO水平的影響［J］. 中國現代應用藥學， 2004， 21(3): 179-181.

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(責任編輯：杜 靖)