摘 要:目的:觀察清平糖漿的抗菌作用。方法:采用二倍稀釋法測定清熱飲標準菌株金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、乙型溶血性鏈球菌及肺炎球菌的MIC(最低抑菌濃度)與MBC(最低殺菌濃度)。結(jié)果:清平糖漿對四種菌株均有一定的抗菌作用。
關(guān)鍵詞:清平糖漿;抗菌作用;MIC;MBC
中圖分類號:R914文獻標識碼:A文章編號:1673-2197(2008)02-040-02
清平糖漿是預(yù)開發(fā)的新制劑,具有清熱解毒的功效,擬用于溫病發(fā)熱、流行性感冒等疾患。本實驗對其抗菌作用進行了研究。
1 材料
清平糖漿浸膏,每1mL浸膏相當于生藥6.5g;金黃色葡萄球菌CMCC26003、肺炎球菌CMCC31001、肺炎克雷伯菌CMCC46114、乙型溶血性鏈球菌CMCC32210;MH瓊脂基、MH肉湯基、血瓊脂基礎(chǔ)基、小牛血清、兔血、營養(yǎng)肉湯;高壓蒸汽滅菌鍋、普通培養(yǎng)箱、厭氧培養(yǎng)箱、N2、CO2、菌落記數(shù)儀、溴氧離子發(fā)生器。
2 操作步驟
參照《衛(wèi)生部藥政局新藥臨床前研究報導(dǎo)原則》中“抗菌藥體外抗菌試驗原則”及《藥品微生物學(xué)檢驗手冊》中的“藥物抗菌作用試驗方法”,采用二倍法測定MIC與MBC。
2.1 制備菌液

2.1.1 金黃色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌液的制備
取金黃色葡萄球菌新鮮斜面接種于10ml肉湯中,取肺炎克雷伯菌凍干菌種經(jīng)開封后接種于10mlMH肉湯,經(jīng)36℃培養(yǎng)48h后,用10倍法稀釋至10-7,并用平板法進行記數(shù)。
2.1.2 肺炎球菌、乙型溶血性鏈球菌液的制備
取肺炎球菌、乙型溶血性鏈球菌凍干菌經(jīng)開封接種于5%小牛血清MH肉湯基中,35℃48h厭氧培養(yǎng)后染色鏡檢確定無污染,用10倍法稀釋至10-7,同時用血清平板經(jīng)厭氧培養(yǎng)48h后記數(shù)。
2.2 供試液制備
取清平糖漿2ml于試管中,加入待測菌的雙倍基2ml混勻作為1/2供試液。取12支滅菌試管,每管各加待測菌培養(yǎng)基2ml,從1/2供試液中按二倍法稀釋為不同的供試液濃度(測試管),將第12管中多余的2ml吸入另一支試管中作為陰性對照,并對測試菌進行陽性對照試驗。
2.3 MIC試驗
2.3.1 金黃色葡萄球菌MIC的測定
取金黃色葡萄球菌菌液10-6與肺炎克雷伯菌10-6菌液各0.1ml分別加入供試液的測試管中,置冰箱4℃ 12h后于36℃中培養(yǎng)48h,以最低濃度生長菌前一澄清無菌生長管為最低抑菌濃度試驗管,陰性對照管應(yīng)無菌生長,陽性對照管應(yīng)有菌生長。
2.3.2 肺炎克雷伯菌菌與乙型溶血性鏈球菌MIC
的測定
取肺炎克雷伯菌菌液10-5與乙型溶血性鏈球菌10-5菌液各0.1ml,同上法操作。
2.4 MBC試驗
2.4.1 金黃色葡萄球菌MBC的測定
經(jīng)36℃ 48h培養(yǎng)的金黃色葡萄球菌及肺炎克雷伯菌的各最低濃度抑菌管及前兩個濃度管,每管各加兩個含5%小牛血清的MH瓊脂平板,每平板各加該測試液0.1ml,用L棒推勻,經(jīng)36℃下24~48h觀察記數(shù),每兩平板菌數(shù)即為該管含菌量。以菌落數(shù)在5個以下測試管為最低殺菌濃度。
2.4.2 肺炎克雷伯菌菌與乙型溶血性鏈球菌MBC
的測定
取經(jīng)35℃48h厭氧培養(yǎng)的肺炎球菌及乙型溶血性鏈球菌的各最低濃度抑菌管及前2個濃度管,每管各加2個血平板,每平板各加該測試液0.1ml,同上法操作。
3 實驗結(jié)果(見表1)
4 討論
流感是一種常見多發(fā)的呼吸道疾病,與風(fēng)熱感冒初期相似,有發(fā)病急、傳染快的特點,呈流行性,屬于中醫(yī)學(xué)中的“溫病”范疇,治則為驅(qū)邪或驅(qū)邪兼扶正。清平糖漿由金銀花、金錢草、夏枯草等組成,通過抗菌及促進機體免疫功能等藥理作用而達到治療流感病的目的[1]。本研究結(jié)果提示,清平糖漿對四種常見的流感細菌具有抗菌作用,其中對金黃色葡萄球菌敏感度最高,對乙型溶血性鏈球菌和肺炎球菌的作用相當。
參考文獻:
[1] 張為民,楊增岐,卿素珠.抗流感病毒的中草藥研究進展[J].動物醫(yī)學(xué)進展,2001(4):41-43.
(責(zé)任編輯:杜 靖)
Studies on Antibacterial Effect of Qingping Syrup
Huang Weijing, Lu Guoming, Zhang Wenji, Zhang Zhifeng
(Guangzhou Anjian Industry Development Co. Ltd, Guangzhou 510420, China)
Abstract:Objective:To observe the Qingping syrup antibacterial effect. Methods: Test the MIC (minimal inhibitory concentration) and MBC (minimal inhibitory concentration) of Staphylococcus aureus, Klebsiella Pneumoniae, beta-hemolytic streptococci and pneumococcus by two-fold dilution. Results: Qingping syrup could inhibit the growth of four bacteria.
Key words: Qingping syrup; Antibacterial effect;MIC; MBC