石韋多糖降血糖作用的實驗研究

摘 要：對從石韋(Pyrrosia petiolosa (Christ) Ching)中分離提取的多糖進行了降血糖活性研究。實驗表明，石韋多糖對正常空腹小鼠無降低血糖作用。對四氧嘧啶造成的動物糖尿病模型，可使糖尿病動物血糖、血清及胰腺組織過氧化脂質(zhì)水平明顯降低，能明顯提高糖尿病小鼠對糖的耐受能力。

關(guān)鍵詞：石韋；多糖；降血糖

中圖分類號： 文獻標識碼：A 文章編號：1673-2197(2008)07-000-00

石韋為水龍骨科(Polypodiaceae)石韋屬(Pyrrosia)植物的地上部分，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。石韋味苦、甘、性微寒，歸肺、膀胱經(jīng)。具有利尿通淋、清熱止血的功效。臨床上用于熱淋、血淋、石淋、小便不通、淋瀝澀痛，主治肺炎水腫、膀胱炎、泌尿系結(jié)石、肺性氣管炎、吐血、尿血、崩漏、肺熱咳喘等多種疾病。

多糖在自然界中分布很廣，多糖具有增強免疫功能、抗幅射、抑制腫瘤生長、抗炎、降血糖等廣泛的生物學(xué)活性^[1]，近年來越來越受到人們的普遍關(guān)注。石韋多糖是從有柄石韋(Pyrrosia petiolosa (Christ) Ching)中提取分離得到的多糖。有關(guān)石韋生藥學(xué)、化學(xué)成份等的研究已有一些報道^[2，3]，但對石韋多糖還未見有關(guān)報道。本文對石韋多糖進行了降血糖作用實驗研究。

1 實驗材料

1.1 動物與瘤株

NIH 純系小白鼠，體重20g，雌雄兼用，由廣東省衛(wèi)生廳醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供。

1.2 藥品與試劑

四氧嘧啶，Sigma公司產(chǎn)品。血糖測定試劑盒，北京化工廠產(chǎn)品。MDA測定試劑盒，南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。

2 實驗方法

2.1 石韋多糖(PCP)的提取

參照文獻^[4]。石韋干品粉碎，堿水提取二次，上清液以Sevage法去蛋白，透析，透析液以三倍乙醇沉淀，以P₂O5真空干燥沉淀物，即得石韋多糖(PCP)。臨用時以生理鹽水配至所需濃度。

2.2 PCP對正常小鼠血糖的影響

取小鼠40只，雌雄各半，隨機分為4組，即空白對照組和三個劑量組，以PCP連續(xù)ip10d，空白對照組在同樣條件下ip生理鹽水，連續(xù)10d，末次給藥后禁食10h，眼眶取血，采用血糖測定試劑盒，葡萄糖氧化酶法測定動物空腹血糖濃度，結(jié)果見表1。

2.3 PCP對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖及糖耐量的影響

取小鼠50只，雌雄各半，隨機取10只為正常對照組。其余小鼠禁食12h(自由飲水)，尾靜脈注射四氧嘧啶100mg/kg造成糖尿病模型，注射后72h眼眶取血測血糖，取造成糖尿病模型(禁食12h血糖大于11mmol/L)者，隨機分為4組，即模型對照組及三個實驗治療組。實驗治療組以PCP連續(xù)ip10d，空白對照組在同樣條件下ip生理鹽水，連續(xù)10d，末次給藥后禁食10h，眼眶取血，測定動物空腹血糖濃度，結(jié)果見表2。然后ip葡萄糖2g/kg，于注射后30及120min再分別測血糖，結(jié)果見表3。

2.4 PCP對四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺組織過氧化脂質(zhì)含量的影響

取小鼠50只，雌雄各半，隨機取10只為正常對照組。其余小鼠禁食12h(自由飲水)，尾靜脈注射四氧嘧啶100mg/kg造成糖尿病模型，注射后72h眼眶取血測血糖，取造成糖尿病模型(禁食12h血糖大于11mmol/L)者，隨機分為4 組，即模型對照組及三個實驗治療組，實驗治療組以PCP連續(xù)ip10d，空白對照組在同樣條件下ip生理鹽水，連續(xù)10d，末次給藥后禁食10h，次日動物眼球取血，斷頭處死，取出胰腺組織，用冰冷生理鹽水洗去浮血，在冰浴上剪成碎塊，用生理鹽水超聲處理成10%(W/V)組織勻漿，采用MDA試劑盒，硫代巴比妥酸比色法分別測定血液、胰腺組織勻漿中MDA水平。結(jié)果如表4所示。

3 實驗結(jié)果

3.1 PCP對正常小鼠血糖的影響

結(jié)果如表1所示。給藥10d后，PCP對正常動物空腹血糖稍有降低，但與空白對照組對比無顯著性差異。

3.2 PCP對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖及糖耐量的影響

結(jié)果如表2所示。PCP對四氧嘧啶糖尿病小鼠有明顯的降血糖作用，其中中劑量組與模型對照組比較，差異有顯著意義(P<0.05)，高劑量組與模型對照組相比，差異有極顯著意義(P<0.01)。

3.3 PCP對四氧嘧啶糖尿病小鼠糖耐量的影響

結(jié)果如表3所示。給予葡萄糖30 min后，糖尿病小鼠的血糖值，各劑量組均低于模型對照組。中劑量和高劑量組與模型對照組比較，差異極顯著(P<0.01)；給予葡萄糖120min后，高劑量組與模型對照組比較，差異有極顯著意義(P<0.01)。表明PCP能增強糖尿病小鼠的負荷糖耐量。

3.4 PCP對四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺組織過氧化脂質(zhì)含量的影響

結(jié)果如表4所示。四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺組織中MDA含量較正常對照組明顯高(P<0.01)，PCP明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺組織中MDA含量。

4 討論

糖尿病是一種常見病、多發(fā)病，嚴重危害人們的身體健康。因此開展糖尿病治療藥物的研究具有重要意義。本文實驗結(jié)果表明，PCP對四氧嘧啶糖尿病小鼠有明顯的降血糖作用，能增強糖尿病小鼠的負荷糖耐量，提示PCP具有明顯的降血糖活性。

實驗結(jié)果還顯示，糖尿病小鼠血液及胰腺中過氧化脂質(zhì)含量明顯較正常組高。自由基與細胞膜不飽和脂肪酸作用，產(chǎn)生過氧化脂質(zhì)，從而破壞細胞膜和亞細胞膜的結(jié)構(gòu)，損傷膜上受體和膜運輸功能。而脂質(zhì)過氧化物的分解產(chǎn)物，如丙二醛可引起蛋白質(zhì)分子內(nèi)和分子間交聯(lián)并導(dǎo)致DNA斷裂，染色體畸變。有研究表明，自由基在胰島(細胞的殺傷中起重要作用。PCP能明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血液及胰腺組織中過高的MDA含量，表明其降血糖作用與其抗氧化損傷胰島細胞有密切關(guān)系。

PCP對正常小鼠的血糖水平無明顯影響，說明石韋多糖的降血糖作用不是通過刺激胰島素分泌實現(xiàn)的，其具體的作用機制有待于進一步的研究。

參考文獻：

[1] 劉美正，郭忠武，惠永正.多糖研究新進展[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，1997，9(2)：81~86.

[2] 石建功，馬辰，楊永春，等.中藥石韋的生藥學(xué)研究[J].世界科學(xué)技術(shù)——中藥現(xiàn)代化，2002：36~39.

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[4] 高向東，盛海林，潘秋文，等.均勻設(shè)計和球面對稱設(shè)計在多糖最佳工藝研究中的應(yīng)用比較[J].中國藥科大學(xué)學(xué)報，1997，28(3)：173~177.

(責(zé)任編輯：陳涌濤)