復(fù)方黃芪\\黃精\\黨參提取液抗衰老的實(shí)驗(yàn)研究

【摘要】 目的 研究復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液的抗衰老作用。方法 采用頸背部皮下注射5%D半乳糖0.5 ml/d建立衰老模型，用自制的復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液以4 g#8226;kg-1#8226;d-1和8 g#8226;kg-1#8226;d-1連續(xù)給小鼠灌胃30 d，并用生理鹽水灌胃做正常對照組。結(jié)果 復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液能顯著提高D半乳糖致衰老小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性(P<0.01)，顯著降低丙二醛(MDA)的活性(P<0.01)，并能提高谷胱甘肽(PSHPX)的活性。結(jié)論 復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液對D半乳糖致衰老的小鼠具有較好延緩衰老作用。

【關(guān)鍵詞】 黃芪;黃精;黨參;抗衰老;SOD;MDA;GSHPX

文章編號:1003-1383(2009)05-0530-02

中圖分類號:R 285.5文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A

doi:10.3969/j.issn.1003-1383.2009.05.008

黃芪是豆科植物，膜夾黃芪(Radix Astragali Seu Hedysari，RASH)，是一種常用的補(bǔ)益中藥，具有補(bǔ)氣表固，益氣活血，排毒等增強(qiáng)機(jī)體抵抗力的作用[1，2]。黃精始載于《明醫(yī)別錄》，為百合科黃精屬(Liliaceae)多年生草本植物，性味甘平，具有抗衰老、降血脂、降血糖、免疫調(diào)節(jié)等作用，也是常用的補(bǔ)氣養(yǎng)陰藥[2]。黨參為桔梗科植物(Radix codcnopsitls pilosulas)，具有調(diào)節(jié)血糖、促進(jìn)造血機(jī)能、降壓、抗缺氧、耐疲勞、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等作用，是常用的補(bǔ)中益氣藥[2，3]。祖國醫(yī)學(xué)家將以上三味藥列為滋補(bǔ)上品，對它們給予高度評價。正因如此，本文筆者以D半乳糖致衰老小鼠為實(shí)驗(yàn)動物模型，研究復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液對抗衰老的作用，為祖國醫(yī)藥的開發(fā)和研究中草藥對抗衰老作用提供參考。

材料與方法

1.藥品與試劑 復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液自制，用蒸餾水配成所需濃度。置于4℃?zhèn)溆茫琒OD、MDA、GSHPX試劑盒由南京生物制品研究所提供;D半乳糖由上海試劑二廠提供。

2.實(shí)驗(yàn)儀器 722分光分度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司);HH2恒溫數(shù)顯水浴鍋(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司);800型離心沉淀器(上海手術(shù)器械廠);H1微型混勻器(上海康和光電儀器有限公司)。

3.實(shí)驗(yàn)動物 昆明種小白鼠60只，體重18~22 g，由右江民族醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)中心[許可證號:SCXK(桂)2003-0001]提供。

4.實(shí)驗(yàn)方法

(1)復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液:取黃芪80 g、黃精80 g、黨參80 g加自來水1500 ml煎熬2個小時，4層紗布過濾，藥渣用1000 ml自來水煎熬2個小時，合并濾液水浴濃縮到500 ml，相當(dāng)于每毫升提取液中含原生藥0.48 g，4℃保存?zhèn)溆谩Ｒ陨先端幘徸杂医褡遽t(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院中心藥房。

(2)動物分組及處理:將60只小鼠隨機(jī)分成4組，每組15只，即空白對照組、衰老模型組、低濃度治療組、高濃度治療組。低濃度治療組和高濃度治療組分別以4 g#8226;kg-1#8226;d-1和8 g#8226;kg-1#8226;d-1提取液灌胃給藥，1次∕日。衰老模型組和正常對照組每日灌胃等量生理鹽水，與小鼠造模后第11天開始用藥，共用藥30天。

(3)動物造模方法:衰老模型組、低濃度治療組和高濃度治療組小鼠每日頸背部皮下注射5%D半乳糖0.5 ml，空白對照組則每日頸背部皮下注射生理鹽水0.5 ml，共用藥40天。

(4)血清中SOD、MDA、GSHPX的測定:于最后一天灌胃和注射D半乳糖2 h后，經(jīng)眼眶取血，肝素抗凝(4℃保存)用于血清中SOD、MDA、GSHPX的測定，參照南京建成生物工程公司試劑盒說明書的方法步驟測定。最后斷頭處死小鼠。

5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-±s)表示，采用方差分析處理數(shù)據(jù)，使用上海科學(xué)技術(shù)出版社出版《醫(yī)用統(tǒng)計(jì)程序集》版本2.0。

結(jié)果

復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液能顯著提高D半乳糖致衰老小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性(P<0.01)，顯著降低丙二醛(MDA)的活性(P<0.01)，并能提高谷胱甘肽(PSHPX)的活性。見表1。

討論

自由基學(xué)說認(rèn)為自由基能引起細(xì)胞發(fā)生不可逆的損壞，從而增加有機(jī)體病變和死亡的可能性。因此，可以通過抑制或減少有機(jī)體組織中自由基的濃度而延長有機(jī)體的壽命。文獻(xiàn)報道[4]，隨著年齡的增長，SOD和GSHPX的活性下降，MDA的含量增加。大量實(shí)驗(yàn)研究表明由D半乳糖致衰老小鼠是較理想的動物衰老模型之一，能使小鼠血清中SOD和GSHPX的活性下降，MDA的含量增加。SOD是有機(jī)體內(nèi)唯一能直接清除代謝過程中產(chǎn)生的自由基的酶，GSHPX是有機(jī)體內(nèi)另一個能夠幫助清除自由基的酶，而MDA是脂質(zhì)氧化分解的產(chǎn)物。因此，可將SOD活性的大小作為有機(jī)體抗衰老能力的一項(xiàng)重要指標(biāo)。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，實(shí)驗(yàn)組小鼠血清中SOD的活性與模型組小鼠血清中SOD的活性相比較差異具有顯著性(P<0.01)。說明復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液具有提高小鼠血清中SOD活性的作用。低濃度治療組小鼠血清中SOD的活性與正常對照組比較差異具有顯著性(P<0.01)。而MDA是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的產(chǎn)物，其生成的多少可以間接地反映組織損傷程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還顯示，實(shí)驗(yàn)組小鼠血清中MDA的含量與模型組比較差異具有顯著性(P<0.01)。說明復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液具有提高小鼠血清中SOD活性的作用，通過提高有機(jī)體自由基清除劑的活性，抑制自由基的產(chǎn)生，減少脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，保護(hù)組織免受氧化劑和自由基的攻擊，從而發(fā)揮其抗衰老作用。GSHPX是存在有機(jī)體中另一個能夠幫助清除自由基的重要酶，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液能夠不同程度的提高D半乳糖致衰老實(shí)驗(yàn)小鼠血清中的GSHPX的活性，但與模型組小鼠血清中GSHPX的活性相比較差異無顯著性(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還提示，低濃度組小鼠血清中SOD的活性與MDA的含量和高濃度組小鼠血清中SOD的活性與MDA的含量相比較差異無顯著性(P>0.05)，且高濃度組小鼠血清中SOD的活性與MDA的含量和正常對照組小鼠血清中SOD的活性與MDA的含量相比較差異也無顯著性(P>0.05)，因此復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液的劑量與抗衰老的效果之間的關(guān)系尚有待進(jìn)一步研究，而且是否與實(shí)驗(yàn)時間長短，小鼠種系有關(guān)，也有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，復(fù)方黃芪、黃精、黨參提取液具有抗衰老作用，由于實(shí)驗(yàn)條件的限制，本實(shí)驗(yàn)僅對其進(jìn)行初步研究，對于其確切的作用機(jī)理仍需進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

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[4]陳紅紅，李助樂，章 健.山核桃葉總黃酮抗衰老作用的研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2008，20:892 - 895.

(收稿日期:2009-03-24 修回日期:2009-09-25)

(編輯:潘明志)