多種檢測模式在血液抗－ＨＩＶ篩查應用中的探討

胡曉靜

【摘要】 目的探討不同檢測方法、不同檢測試劑對人類免疫缺陷病毒抗體(抗2HIV) 檢測結果的影響。方法 雙抗原夾心EL ISA一步法和二步法、快速膠體硒法等檢測模式來診斷H IV并進行比較分析。結果 雙抗原夾心EL ISA一步法和二步法與快速膠體硒法比較，快速膠體硒法靈敏度100%,陽性預告值95.24%; EL ISA 法靈敏度95.34%,陽性預告值100%。結論 多種檢測模式在血液抗-HIV篩查應用是必要的。

【關鍵詞】 檢測模式;血液;抗-H IV; EL ISA快速膠體硒法

作者單位：455000河南省安陽市中心血站

當前我國艾滋病流行處于快速上升階段,如果不盡早采取有效對策,將很可能出現艾滋病大流行。艾滋病檢測是艾滋病防治工作的重要組成部分。對于采供血機構而言,獻血員人類免疫缺陷病毒抗體(抗2HIV) 篩查尤為重要。用酶聯免疫吸附方法( EL ISA) 對疑似患者的血液實施的血液篩查有利于保障血液安全。選擇合適的檢測試劑進行抗2HIV 檢測尤其重要,目前采用國產試劑和進口試劑進行兩次篩查檢測。雙抗原夾心EL ISA一步法和二步法試劑、快速膠體硒法進行21例疑似病例比較,現報告如下。

1 資料與方法

1.1 標本來源 疑似病例標本21份,進行血液抗-HIV篩查。

1.2 儀器試劑 EL ISA雙抗原夾心法抗-H IV ( 1 + 2)試劑,由英科新創(廈門)科技有限公司、上海實業科華生物技術有限公司提供。膠體硒試紙條采用美國DETERMINHIV/ 1 + 2膠體硒法試劑。手工加樣器(金花QYQ 北京) ,恒溫酶標儀,酶標儀 ,洗板機等儀器。

1.3 方法 雙抗原夾心EL ISA一步法和二步法試劑對每份疑似病例血液進行抗-H IV的初、復檢,所有操作嚴格按儀器和試劑盒要求操作,儀器配套軟件判定結果。將采集的獻血者血樣經室溫離心,加樣儀自動加樣,使用FAME 全自動酶聯免疫分析儀進行2 次免疫檢測,根據確認實驗室反饋的結果,計算每種試劑的檢測結果中所包含的真陽性、假陽性、真陰性、假陰性數,進一步分析單一試劑與雙重試劑檢測的靈敏度和特異性。

2 結果

21份標本最后確診8例，現用雙抗原夾心EL ISA一步法和二步法試劑平衡檢測抗-HIV結果一步法初篩陽性7例,二步法初篩陽性1例,(一步法+二步法)雙試劑檢測初篩陽性8例，復檢與初檢一致。快速膠體硒法檢測初篩陽性為8例。復篩為1例。靈敏度100%,陽性預告值95.24%;ELISA法靈敏度95.34%,陽性預告值100%,初檢快速膠體硒法假陽性率高于ELISA法;ELISA法的陽性預告值高于快速膠體硒法。

3 討論

近年來我國所發現的HIV感染者和AIDS 患者逐年增加,個別地區已經開始進入HIV 感染的快速增長期,形勢嚴峻。根據WHO 的統計,全球HIV 感染者約5%~10%為經血液傳播而感染 ,而當前我國血液傳播率更高,盡管通過無償獻血,血液的安全性得到了很大的提高,但無償捐血者當中也存在HIV感染的情況。近年來在我國的可疑病例中不斷發現HIV感染者,本研究也發現8例被HIV感染的患者,因此,血液安全的形勢非常嚴峻,對血液進行抗-HIV的篩查,對預防經輸血途徑傳播HIV有積極的意義。由于篩查實驗使用的EL ISA 試劑靈敏度比較高,這雖然可以很大程度地防止血液篩查中出現“漏檢”,但卻不可避免地會出現較多假陽性標本。同時在HIV初篩檢測的結果判斷過程中,擴大了陽性判斷的范圍,在cut2off值上加20%為灰區。對灰區內有反應的標本均以陽性標本對待。再者,初次檢測和再次檢測的結果判讀中有明顯顯色但未達到灰區的標本,經再次檢測仍然有明顯顯色者,以陽性標本對待。應用于EL ISA 法的試劑較多,進口試劑穩定性好、特異性高,但成本較高,國產試劑成本較低,靈敏度較高。快速膠體硒法與EL ISA 比較,兩者的靈敏度均較高,但特異度和準確度以前者為佳, 國際通用的血液篩查原則為以一種試劑進行檢測,初篩陽性的標本,進行雙孔復測 。由于酶聯免疫診斷試劑是一種生物制品,具有生物活性,易受溫度、孵育時間、洗滌等諸多因素影響。提高診斷試劑的靈敏性、特異性及改進血液篩查手段作為提高血液篩查安全性的首要途徑。現在醫療機構選用一種國產、一種進口試劑,甚至兩種都用進口試劑的檢測模式,增加了檢測成本。但隨著國家對檢測試劑的管理規范,國產試劑的質量逐年提高,目前已達到國際上先進試劑的水平。因此,通過選用進口試劑來達到提高檢測質量的意義有限。血清學技術經過多年的發展,敏感性特異性有了很大的提高,目前歐美等國已開始在血清學檢測的基礎上采用混合法應用核酸技術進行復檢,我國經過一段時間的整頓,也已確定開放結核分枝桿菌,沙眼衣原體、乙型肝炎病毒及丙型肝炎病毒等的分子生物學檢測。隨著試劑商品化,操作自動化的發展,分子生物學技術必將成為病毒學檢測的首選方法。盡快將核酸檢測(NAT試驗) 或ELISA 抗原檢測納入常規血液篩查,而不是增加ELISA 檢測次數或選用進口試劑。

大力做好社會宣傳工作，更好的讓社會關注與重視H IV的傳播途徑，加強血液的管理力度。盡量以多種模式檢測血液抗-HIV，使血液及HIV患者得到全社會的重視。

參考文獻

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